血常規(guī)分析中的誤差因素及血涂片復(fù)檢規(guī)則

關(guān)于血常規(guī)分析中的誤差因素及血涂片復(fù)檢規(guī)則第1頁，講稿共45頁，2023年5月2日，星期三第2頁，講稿共45頁，2023年5月2日，星期三第3頁，講稿共45頁，2023年5月2日，星期三多種病理?xiàng)l件對(duì)血常規(guī)檢測(cè)的干擾假性血小板減少或增多假性紅細(xì)胞減少或增多假性白細(xì)胞減少或增多第4頁，講稿共45頁，2023年5月2日，星期三假性血小板減少或增多的干擾因素假性血小板減少樣品采集環(huán)節(jié)中的血小板聚集EDTA誘導(dǎo)的血小板聚集血小板衛(wèi)星現(xiàn)象巨大血小板假性血小板增多紅、白細(xì)胞碎片小紅細(xì)胞第5頁，講稿共45頁，2023年5月2日，星期三WBCLYM%MXD%NEUT%PLTPDWMPVP-LCR6.30.1310.0580.8115812.09.60.232×109/L×109/LfLfLWL*WL*WL*WL*AGEDTA誘導(dǎo)的血小板聚集第6頁，講稿共45頁，2023年5月2日，星期三第7頁，講稿共45頁，2023年5月2日，星期三EDTA誘導(dǎo)血小板聚集發(fā)病率0.07%~0.11%誘因健康人自身免疫病、慢性炎癥、病毒或細(xì)菌感染腫瘤潛在的誤診風(fēng)險(xiǎn)高預(yù)防性血小板輸血的醫(yī)學(xué)決定水平血小板計(jì)數(shù)為20×109/L誤診為ITP或TTP第8頁，講稿共45頁，2023年5月2日，星期三EDTA誘導(dǎo)血小板聚集的發(fā)病機(jī)制血小板糖膜改變，血小板膜內(nèi)隱匿性抗原暴露血漿中自身抗體與隱匿性抗原形成復(fù)合物激活細(xì)胞膜中的磷酯酶血小板膜水解并釋放血小板活性物質(zhì)AA、ADP、5-TH、膠原、凝血酶原等血小板纖維蛋白原受體被活化血小板與纖維蛋白原受體結(jié)合后聚集成團(tuán)出現(xiàn)血小板假性減少第9頁，講稿共45頁，2023年5月2日，星期三EDTA誘導(dǎo)血小板聚集的處理方法光學(xué)顯微鏡鏡檢采用血小板稀釋液進(jìn)行稀釋瑞氏染色更換抗凝劑重新抽血檢測(cè)枸櫞酸鈉肝素鈉第10頁，講稿共45頁，2023年5月2日，星期三血小板衛(wèi)星現(xiàn)象自身抗體引起的一種免疫反應(yīng)IgG型抗體識(shí)別中性粒細(xì)胞和血小板上共同抗原結(jié)構(gòu)血小板的GPIIb-IIIa中性粒細(xì)胞上的FcγRIII片斷處理方法形態(tài)學(xué)鏡檢第11頁，講稿共45頁，2023年5月2日，星期三巨大血小板PLT-I32[10^9/L](x1000)PLT-O65[10^9/L]第12頁，講稿共45頁，2023年5月2日，星期三紅、白細(xì)胞碎片的干擾紅細(xì)胞碎片的產(chǎn)生彌散性血管內(nèi)凝血微血管病性溶血性貧血心源性溶血性貧血其它化學(xué)中毒、腎功能衰竭、血栓性血小板減少性紫癜和化療白細(xì)胞碎片的產(chǎn)生AML、淋巴瘤、嚴(yán)重感染、化療第13頁，講稿共45頁，2023年5月2日，星期三排除紅、白細(xì)胞碎片對(duì)血小板干擾第14頁，講稿共45頁，2023年5月2日，星期三假性紅細(xì)胞減少或增多的干擾因素紅細(xì)胞冷凝集所致假性紅細(xì)胞減少巨大血小板所致假性紅細(xì)胞增多第15頁，講稿共45頁，2023年5月2日，星期三紅細(xì)胞凝集所致干擾及處理RBCHGBHCTMCVMCHMCHCRDW2.231440.249111.764.65780.254×1012/Lg/LfLpgg/LRU*RU*RU*RU*RU**處理方法加溫到37OC后再測(cè)定第16頁，講稿共45頁，2023年5月2日，星期三紅細(xì)胞冷凝集所致假性紅細(xì)胞減少冷凝集素綜合癥在31℃以下自身紅細(xì)胞抗原發(fā)生可逆性凝集病因白血病、惡性淋巴瘤或全身性紅斑狼瘡肺炎支原體屬感染傳染性單核細(xì)胞增多癥血吸蟲病、絲蟲病、瘧疾肝硬化、非典型性肺炎第17頁，講稿共45頁，2023年5月2日，星期三假性白細(xì)胞減少或增多的干擾因素白細(xì)胞聚集所致假性白細(xì)胞減少紅細(xì)胞溶血不良所致假性白細(xì)胞增多有核紅細(xì)胞所致假性白細(xì)胞增多第18頁，講稿共45頁，2023年5月2日，星期三溶血?jiǎng)┑蜗潞笳Ｈ薘BC肝硬化病人RBC紅細(xì)胞溶血不良第19頁，講稿共45頁，2023年5月2日，星期三因脂類代謝異常所致紅細(xì)胞膜表面與外周血脂類結(jié)合形成脂質(zhì)顆粒保護(hù)膜，或紅細(xì)胞膜表面結(jié)構(gòu)異常，正常濃度的溶血素?zé)o法破壞紅細(xì)胞膜表面常見于以下疾病肝功能低下(肝硬化、肝癌晚期、膽道堵塞)高脂血癥高膽固醇制劑輸液治療過程中異常血紅蛋白癥(Hgb-S癥、Hgb-C癥)紅細(xì)胞溶血不良的原因第20頁，講稿共45頁，2023年5月2日，星期三紅細(xì)胞溶血不良處理辦法：人工顯微鏡形態(tài)學(xué)鏡檢淋巴細(xì)胞峰左邊上翹顯示碎片明顯涂片顯示大血小板、棘形紅細(xì)胞WBC6.9×109/LLYM%34.3%MXD%19.4%NEUT%46.3%第21頁，講稿共45頁，2023年5月2日，星期三有核紅細(xì)胞的存在血液學(xué)疾?。杭毙运杓?xì)胞白血病急性紅白血病急性淋巴細(xì)胞白血病慢性粒細(xì)胞白血病慢性淋巴細(xì)胞白血病多發(fā)性骨髓瘤骨髓增生異常綜合征惡性淋巴瘤骨髓轉(zhuǎn)移癌骨髓纖維化原發(fā)性血小板增多癥血液非腫瘤性疾病缺鐵性貧血巨幼細(xì)胞貧血溶血性貧血增生性貧血再生障礙性貧血原發(fā)性血小板減少性紫癜感染性疾病原發(fā)性脾亢脾

第22頁，講稿共45頁，2023年5月2日，星期三有核紅細(xì)胞對(duì)白細(xì)胞檢測(cè)的干擾<WBC直方圖>WBC56.1X109/L外周血中紅細(xì)胞的數(shù)量是白細(xì)胞的三次方數(shù)量級(jí)第23頁，講稿共45頁，2023年5月2日，星期三排除NRBC對(duì)白細(xì)胞檢測(cè)的干擾形態(tài)學(xué)鏡檢高端儀器WBC6.90Х109/LNRBC0.34Х109/L第24頁，講稿共45頁，2023年5月2日，星期三A(blood)smearcampaignBlood,1April2003,101(7),2453-2453

臨檢是實(shí)驗(yàn)室風(fēng)險(xiǎn)最大的部門第25頁，講稿共45頁，2023年5月2日，星期三ISO對(duì)血常規(guī)形態(tài)學(xué)的相關(guān)要求5.5檢驗(yàn)程序b）血液學(xué)檢查部門需制定如下標(biāo)準(zhǔn)/程序并形成文件（不僅限于如下標(biāo)準(zhǔn)/程序）：血細(xì)胞分析的顯微鏡復(fù)檢標(biāo)準(zhǔn)（檢測(cè)結(jié)果出現(xiàn)異常計(jì)數(shù)、警示標(biāo)志、異常散點(diǎn)圖等情況時(shí)結(jié)果的確認(rèn)方法和程序）；血涂片制備和檢驗(yàn)的書面程序/過程；對(duì)患者血液檢查和凝固試驗(yàn)的標(biāo)本進(jìn)行重復(fù)檢驗(yàn)的標(biāo)準(zhǔn)及程序。c）血液計(jì)數(shù)結(jié)果超出儀器線性范圍時(shí)宜規(guī)定識(shí)別和解決方法（如對(duì)血樣進(jìn)行適當(dāng)稀釋和重復(fù)檢驗(yàn)）；對(duì)于檢測(cè)樣本存在一些影響因素（如有核紅細(xì)胞、紅細(xì)胞凝集、小紅細(xì)胞、紅細(xì)胞有內(nèi)容物或瘧原蟲、血小板凝塊、巨型血小板等）時(shí)，對(duì)儀器檢測(cè)結(jié)果可靠性的判定和糾正措施需有書面規(guī)定。第26頁，講稿共45頁，2023年5月2日，星期三CAP對(duì)血常規(guī)形態(tài)學(xué)的相關(guān)要求HEM.34200Hasthelaboratoryestablishedcriteriaforcheckingandreviewingleukocytedifferentialcounterdata,histograms,and/orbloodfilmsforclinicallyimportantresultsflaggedbytheautomateddifferentialcounter?HEM.34300Isthequalityofbloodfilmssatisfactory(properlystained,freeofprecipitate,goodcelldistribution)?HEM.34350Areslidesuniquelyidentified?NOTE:Slidesorcoverslipsmustbeuniquelyidentifiedbyelement(s)suchasspecimenoraccessionnumber,orpatientnameand/ornumber.HEM.34450Arebloodfilmsretainedforatleastoneweekforpossiblereviewand/orreference?NOTE:Itmaybedesirabletoretainoutpatientfilmsforalongerperiodandsignificantlyabnormalfilmsindefinitelyforteachingpurposes.第27頁，講稿共45頁，2023年5月2日，星期三國(guó)內(nèi)常用血細(xì)胞分析儀復(fù)檢規(guī)則的制定SysmexXE-2100BeckmanCoulter系列SiemensBayerAdvia120/2120第28頁，講稿共45頁，2023年5月2日，星期三協(xié)和醫(yī)院血常規(guī)檢查儀器配置北京協(xié)和醫(yī)院檢驗(yàn)科協(xié)和醫(yī)院東院區(qū)檢驗(yàn)科協(xié)和醫(yī)院西院區(qū)檢驗(yàn)科門診HST-XE-302ADVIA2120病房ADVIA2120XS-800i國(guó)際醫(yī)療部/特需ADVIA2120急診XT-1800XS-800i病房/門診XE-2100XE-2100急診XT-180011臺(tái)第29頁，講稿共45頁，2023年5月2日，星期三涂片復(fù)檢規(guī)則設(shè)置流程確定實(shí)驗(yàn)方法及目標(biāo)儀器校準(zhǔn)/比對(duì)確定鏡檢陽性標(biāo)準(zhǔn)雙盲法分別進(jìn)行儀器檢測(cè)和鏡檢設(shè)定/調(diào)整復(fù)檢規(guī)則滿足預(yù)設(shè)定目標(biāo)？驗(yàn)證實(shí)驗(yàn)NY磨刀不誤砍柴工參考發(fā)表數(shù)據(jù)并調(diào)整記錄完整數(shù)據(jù)Datamining推片率≈30%,假陰性<5%血液病患者不能漏診第30頁，講稿共45頁，2023年5月2日，星期三鏡檢陽性判斷標(biāo)準(zhǔn)存在異常紅細(xì)胞可見NRBC白細(xì)胞計(jì)數(shù)異常Dohle小體粒細(xì)胞顯見中毒顆粒粒細(xì)胞顯見空泡變性粒細(xì)胞顯見原始和幼稚細(xì)胞≥1%早、中幼粒細(xì)胞≥1%晚幼粒細(xì)胞>2%異型淋巴細(xì)胞>5%存在巨大血小板存在血小板聚集第31頁，講稿共45頁，2023年5月2日，星期三第32頁，講稿共45頁，2023年5月2日，星期三鏡下形態(tài)異常樣品分類1223例血常規(guī)樣本來自體檢者、門診及住院患者其中陰性標(biāo)本37.4%、陽性標(biāo)本62.3%，陽性標(biāo)本包括細(xì)胞數(shù)量異常、白細(xì)胞分類異常和細(xì)胞形態(tài)異常鏡下形態(tài)異常樣品203例（16.6%）第33頁，講稿共45頁，2023年5月2日，星期三對(duì)國(guó)際復(fù)檢規(guī)則進(jìn)行評(píng)估采用相同涂片復(fù)檢標(biāo)準(zhǔn)，不同型號(hào)儀器的篩選性能大致相同，略有差異雖然假陰性率符合目標(biāo)，但XE/XT漏掉2例AL病例，XS漏掉其中1例。

2例AL都未觸發(fā)41條規(guī)則，但鏡下發(fā)現(xiàn)白細(xì)胞分類異常并有異常紅細(xì)胞推片率過高陽性率假陽性率陰性率假陰性率符合率推片率XE-210014.23%23.71%59.61%2.45%73.83%37.94%XT-1800i14.06%21.50%61.98%2.45%76.04%35.56%XS-800i13.90%19.54%63.86%2.70%77.76%33.44%ADVIA212014.64%23.30%60.16%1.88%74.82%37.94%N=1223第34頁，講稿共45頁，2023年5月2日，星期三對(duì)加強(qiáng)的國(guó)際復(fù)檢規(guī)則進(jìn)行評(píng)估血液科標(biāo)本全推，以避免漏掉嚴(yán)重的血液病病人假陰性率下降但推片率過高，工作中實(shí)現(xiàn)難度增大我們確定的推片復(fù)檢規(guī)則以此為基礎(chǔ)，從降低假陽性入手陽性率假陽性率陰性率假陰性率符合率推片率XE-210014.39%24.94%58.38%2.29%72.77%39.32%XT-1800i14.23%22.40%61.08%2.29%75.31%36.63%XS-800i13.98%20.77%62.63%2.62%76.61%34.75%N=1223第35頁，講稿共45頁，2023年5月2日，星期三導(dǎo)致假陽性的主要觸發(fā)規(guī)則WBC(x10^9/L)

<4或>30PLT(x10^9/L)

<100或

>1000不成熟粒細(xì)胞原始細(xì)胞核左移異型淋巴細(xì)胞WBC(x10^9/L)

<4或>30PLT(x10^9/L)

<100或

>1000不成熟粒細(xì)胞有核紅細(xì)胞異常紅細(xì)胞血小板聚集WBC(x10^9/L)

<4或>30PLT(x10^9/L)

<100或

>1000不成熟粒細(xì)胞血液科全推WBC(x10^9/L)

<4或>30PLT(x10^9/L)

<100或

>1000不成熟粒細(xì)胞小細(xì)胞(+/++/+++)大細(xì)胞(+/++/+++)細(xì)胞大小不等

(+/++/+++)XE-2100XT-1800i

XS-800iADVIA-2120第36頁，講稿共45頁，2023年5月2日，星期三導(dǎo)致假陽性的主要觸發(fā)規(guī)則XE-2100WBC(x10^9/L)

<3或>30PLT(x10^9/L)

<

80或

>1000不成熟粒細(xì)胞原始細(xì)胞核左移異型淋巴細(xì)胞XT-1800iWBC(x10^9/L)

<3或>30PLT(x10^9/L)

<

85或

>1000不成熟粒細(xì)胞有核紅細(xì)胞異常紅細(xì)胞血小板聚集XS-800iWBC(x10^9/L)

<3或>30PLT(x10^9/L)

<

80或

>1000不成熟粒細(xì)胞血液科全推ADVIA-2120WBC(x10^9/L)

<3或>30PLT(x10^9/L)

<

80或

>1000不成熟粒細(xì)胞小細(xì)胞(+)大細(xì)胞(+)細(xì)胞大小不等(+)降低假陽性同時(shí)必須使真陽性率改變不大第37頁，講稿共45頁，2023年5月2日，星期三4種型號(hào)血細(xì)胞分析儀復(fù)檢規(guī)則的分析結(jié)果N=1223陽性率假陽性率陰性率假陰性率符合率推片率XE-210013.57%16.43%67.13%2.86%80.70%30.00%XT-1800i13.33%16.68%66.89%3.11%80.21%30.01%XS-800i13.74%16.35%67.05%2.78%80.87%30.09%ADVIA212013.57%17.50%65.99%2.94%79.56%31.07%第38頁，講稿共45頁，2023年5月2日，星期三4種型號(hào)血細(xì)胞分析儀涂片復(fù)檢規(guī)則(一)序號(hào)相關(guān)參數(shù)復(fù)檢界定標(biāo)準(zhǔn)1WBC<3.0χ109/L

或>30.0χ109/L2Hb<70

g/L或>180

g/L3MCV<75fl或>105fl4RDW>22%5DC無分類6Neut#<1.0χ109/L

或>20.0χ109/L7Lym#>5.0χ109/L8Mono#>1.5χ109/L9Eos#>2χ109/L10Baso#>0.5χ109/L11血液科標(biāo)本全推12RBCIPMessageRBC聚集或RBC碎片或RBC溶血不良或雙形性紅細(xì)胞等13WBCIPMessage原始細(xì)胞14WBCIPMessage未成熟粒細(xì)胞15WBCIPMessage有核紅細(xì)胞第39頁，講稿共45頁，2023年5月2日，星期三SysmexXE-210016PLT<80χ109/L或>1000χ109/L17PLTIPMessagePLT異常分布或PLT聚集18RBCIPMessage不均一性紅細(xì)胞SysmexXT-1800i16PLT<85χ109/L或>1000χ109/L17WBCIPMessageWBC異常散點(diǎn)圖18WBCIPMessage不典型和/或變異Lym19WBCIPMessage核左移SysmexXS-800i16PLT<80χ109/L或>1000χ109/L17WBCIPMessage核左移18WBCIPMessage不典型和/或變異Lym19PLTIPMessagePLT異常分布或PLT聚集20RBCIPMessage不均一性紅細(xì)胞4種型號(hào)血細(xì)胞分析儀涂片復(fù)檢規(guī)則(二)第40頁，講稿共45頁，2023年5月2日，星期三SiemensAdiva212016PLT<80χ109/L或>1000χ109/L17LUC%>618LeftshiftFlag++orFlag+++19Atypical/variantlymphocytesFlag+orFlag++orFlag+++20PLTclump

Flag21LargePlateletFlag+orFlag+++22Micro-RBCFlag++orFlag+++23Macro-RBCFlag++