某西藥質(zhì)量研究與質(zhì)量標準要求

藥品（西藥）質(zhì)量研究與質(zhì)量標準制定的技術(shù)要求江蘇省藥品檢驗所周幗雄原料藥物原料藥物在化學(xué)結(jié)構(gòu)或組份確證后，應(yīng)對其理化性質(zhì)、純度、含量（效價）測定進行研究，在此基礎(chǔ)上制定能保證藥品安全有效、科學(xué)合理的質(zhì)量標準。一、名稱包括中文名、漢語拼音名和英文名。中、英文名稱參見國家藥典委員會編篡的《中國藥品通用名稱》。二、有機藥物的結(jié)構(gòu)式按照世界衛(wèi)生組織（WHO）擬訂的“藥品化學(xué)結(jié)構(gòu)式書寫指南”繪制。三、分子式與分子量凡組成明確的單一化合物，以及主成分已明確的多組分抗生素，均應(yīng)列出分子式。分子式中的元素符號按國際上的慣例排列，除C排在首位，H排在第二位外，其他元素（包括金屬元素）均應(yīng)按元素符號的英文字母順序依次排在其后，原子數(shù)寫在該元素符號的右下側(cè)。分子量按最新國際原子量表計算，最終數(shù)值書寫至小數(shù)點后第二位?；旌衔锘蚪M分不定者，一般不列分子式與分子量。四、含量限度化學(xué)合成藥，或檢測辦法完善可以保證其質(zhì)量的單一提取物應(yīng)寫出其化學(xué)名。含量限度是指按規(guī)定的測定方法測得本品應(yīng)含“有效物質(zhì)”的限度。為了能正確反映藥品的含量，一般換算成干燥品的含量，并按檢查項下所規(guī)定的“干燥失重”或“水分”分別寫成“按干燥品計算”或“按無水物計算”。含量限度，除用“效價測定”的抗生素或生化藥品采用效價單位表示外，其他用“含量測定”的藥品均以含有效物質(zhì)的百分數(shù)表示。含量限度一般應(yīng)規(guī)定有上、下限，其數(shù)值一般應(yīng)準確至0.1%，當含量的高限不得超過101.0%時，可不寫出上限。含量限度的百分數(shù)均系指重量百分數(shù)，不必寫上“（g／g）”，但對液體或氣體藥品，其含量百分數(shù)之后應(yīng)加注“（g／g）”或“（ml／ml）”，使之更為明確。五、性狀應(yīng)分別描述藥品的外觀色澤、臭味、結(jié)晶形狀，和一般的穩(wěn)定情況及物理常數(shù)。1、對于外觀的描述，氣或液體一般用“無色”，固體藥物用“白色”或“類白色”，盡量避免用特殊的形容詞如琥珀色等，有色藥物應(yīng)根據(jù)應(yīng)有的色澤加以描述。臭，是指藥品本身所固有的，不包括因混有不應(yīng)有的殘留有機溶劑而帶入異臭，具有特有味覺的藥品，必須加以記述，如酸、辣、等，但毒藥、劇藥、麻醉藥可不作“味”的記述。凡有引濕、風化、遇光變質(zhì)等與貯藏條件有關(guān)的性質(zhì)均應(yīng)擇要記述。2、溶解度是藥品的一種物理性質(zhì)，在一定程度上反映藥品的純度，在其溶劑選擇上，應(yīng)盡量采用與藥品溶解特性密切相關(guān)、與精制、質(zhì)量測定、制劑處方與工藝有關(guān)的溶劑，一般采用藥典凡例中分等級的方式（極易溶解、易溶、溶解、略溶、微溶、極微溶解、幾乎不溶或不溶），品種應(yīng)簡化，并避免使用昂貴或不常用的溶劑，在酸或堿性溶液中的溶解度放在最后，所用酸或堿性溶液要明確注明名稱和濃度（不要用稀酸或稀堿）可列表：表1溶解度測定結(jié)果溶劑稱量溶劑體積溶質(zhì)與溶劑比溶解情況結(jié)論水0.96g0.8ml1:0.9完全溶解極易溶解乙醇0.98g5ml1:5完全溶解易溶丙酮0.95g160ml1:160完全溶解微溶異丙酮1mg10ml1:10000不完全溶解幾乎不溶性狀項下記述的外觀、臭、味,是一種感觀規(guī)定,正文品種中僅作一般性描述,沒有確切的法定檢驗方法;USP和在“GeneialNotices”中雖均列有“氣味的檢查方法”，但明確指出氣味僅是說明性的，不構(gòu)成法定標準的組成部分。USP自20版起，已將“性狀”和“溶解度”自正文品種中刪去，而匯總列于全書后部的參考表中，并說明它們不是純度的標準和檢查方法，不作為法定標準。我國考慮到藥品的外觀性狀與其質(zhì)量間有一定關(guān)聯(lián)，可對藥品的質(zhì)量作出初步評價，故在中國藥典的正文中仍予以保留，但在凡例中明確“遇有對藥品的晶型、細度或溶液的顏色需作嚴格控制時，應(yīng)在檢查項下另作具體規(guī)定。對于藥品的溶解度，尤其是在出現(xiàn)明顯異常的情況時，應(yīng)進一步研究以發(fā)現(xiàn)問題（如有機堿的鹽，因在成鹽工藝中加入酸量不足，而影響在水中的溶解度）；溶解度在一定程度上反映藥品的純度，這與BP和USP的“不作法定要求”有所不同，并明確“遇有對在特定溶劑中的溶解性能需作嚴格控制時，應(yīng)在檢查項下另作具體規(guī)定，如甲醇溶液的澄清度（奮乃靜）。3、物理常數(shù)（相對密度、餾程、熔點、凝點、比旋度、折光率、粘度、酸值、皂化值、羥值、碘值、吸收系數(shù)）是檢定藥品質(zhì)量的重要指標，應(yīng)根據(jù)該藥品特性或檢定的需要，選載有關(guān)的物理常數(shù)，一般固體藥品需測定熔點、吸收系數(shù)、晶型等。液體藥品要測定沸程、相對密度、粘度、折光率等。具有手性中心的藥品如系天然物提取的單體或合成拆分得單一旋光物，應(yīng)測定比旋度并證明其光學(xué)純度，如屬油脂類藥品，除相對密度、折光、熔點等外，還要測定其酸值、碘值、羥值、皂化值等。物理常數(shù)的測定結(jié)果，不僅對藥品具有鑒別意義，也反映藥品的純雜程度，因而數(shù)值范圍規(guī)定必須明確并切合實際，不要用“約”字。制訂理化常數(shù)范圍則是以臨床用藥品（3--5批）測得的數(shù)據(jù)為依據(jù)而制訂，研究時盡量查閱國內(nèi)外的現(xiàn)行版藥典及文獻資料或國外對照藥品的實測值進行比較。物理常數(shù)測定必須用精制品，測定方法應(yīng)按中國藥典附錄進行測定，在操作中另有特殊要求應(yīng)注明經(jīng)過按規(guī)定方法的檢定，并注明儀器型號，各常數(shù)至少應(yīng)測定三次。⑴熔點已知結(jié)構(gòu)的化學(xué)原料藥，熔點是重要的物理常數(shù)之一。根據(jù)熔點、熔距，可鑒別、檢查該藥品的純雜程度熔點范圍一般為3℃—4℃，個別品種可放寬至6℃；熔距不可過寬，一般不超過2℃。測定熔點的藥品，應(yīng)是在熔點以下遇熱時的晶型不轉(zhuǎn)化，其初熔點和終熔點易于判斷的品種；對于熔點在200℃以上并同時分解的品種，一般可不訂入質(zhì)量標準中；對于熔點難以判斷或熔融同時分解的藥品，以及一、二類新藥的熔點，應(yīng)用DSC或TG熱分析予以輔佐；對熔融同時分解的藥品，要記錄熔融時的現(xiàn)象，如變色、產(chǎn)生氣泡等，通常當供試品在毛細管中開始局部液化，出現(xiàn)液滴或開始產(chǎn)生氣泡時的溫度作為初熔溫度，至供試品固相消失全部液化時作為全熔溫度時的溫度，作為熔融分解溫度；對某些藥品無法分辨初熔與全熔現(xiàn)象時，可以記錄其發(fā)生突變（氣泡很快上竄，色澤明顯變深），有時固相消失不明顯，則以供試品分解并開始膨脹時的溫度作為全熔溫度。熔點數(shù)值的精度一般1℃，也可書寫至0.5℃。⑵吸收系數(shù)（E）化合物對光的選擇性吸收波長及其在最大吸收波長處的吸收系數(shù)，是該化合物的物理常數(shù)之一，將其列入性狀項下，不僅可考查藥品的質(zhì)量，并可作為其制劑含量或溶出度測定中選用E值的依據(jù)。因此，凡制劑的含量測定采用E計算的紫外分光光度法，而其原料藥的含量測定因根據(jù)精密度的要求而采用其他方法（中和法、非水法）的品種，均應(yīng)在原料藥的性狀項下增訂“吸收系數(shù)”，用于測定吸收系數(shù)的供試品應(yīng)為精制品，應(yīng)同時測定2份，應(yīng)盡可能采用其制劑的含量測定中的條件，使原料藥的含量標準能與其制劑相適應(yīng)。所用溶劑，除應(yīng)滿足該物質(zhì)光學(xué)特性的需要外，還應(yīng)考慮“易得、價廉、低毒”的原則，避免使用甲醇等低沸點、易揮發(fā)的溶劑；對于極性化合物，水是一種廉價的溶劑，也可考慮用0-1mol/me氫氧化鈉溶液或緩沖液等，供試品溶液與制備要強調(diào)定量稀釋；1％1％1％我國創(chuàng)制的或只有文獻記載，國內(nèi)外藥典未收載的藥品的吸收系數(shù)測定，應(yīng)按照《中國藥品標準操作規(guī)范》的方法，應(yīng)至少用五臺不同型號的儀器測定，測定的數(shù)據(jù)經(jīng)統(tǒng)計學(xué)處理，其平均值確定為該品種的吸收系數(shù)，其限度范圍一般為平均值的±3%，E較小時，也可放寬至±5%，一般采用三位有效數(shù)。測定結(jié)果可列表，見表3。1％測定注意事項A.測定的供試品應(yīng)為精制品，水分應(yīng)另取樣測定，扣除干燥失重，并應(yīng)同時測定2份。B.參照中國藥典附錄分光光度法項下的儀器校正的檢定方法，對所用的五臺不同型號的分光光度計進行全面檢定，所用的容量儀器及天平應(yīng)經(jīng)過檢定。C.測定所用的溶劑，其吸收度應(yīng)符合規(guī)定。吸收池應(yīng)于臨用時配對。D.稱取供試品時，其稱量準確度應(yīng)按中國藥典規(guī)定要求，供試品溶液應(yīng)配制成高低二個濃度，高濃度溶液的吸收度在0.6–0.8之間，低濃度溶液的吸收度在0.3–0.4之間，同臺儀器測定的2份結(jié)果，對平均值的偏差應(yīng)不超過±0.3%，否則應(yīng)重新測定，應(yīng)注明測定時的溫度，并考察溶液的穩(wěn)定性。吸收系數(shù)（E）測定溶液濃度濃溶液稀溶液（ug/ml）12.611.46.35.7

A吸收度測定值EAEAEAEAE儀器型號島津UV-2650.6645560.6545580.3305560.325554上分751型0.6705600.6715630.3325580.327555PEλ60.6685580.6705590.3315590.329561北京通用PU-19010.6745530.6685540.3295540.328560北分WFZ800-D2

0.6725520.6695550.3305560.329561

E

平均值=555

n=20RSD=0.89%

1％1％1％⑶旋光度或比旋度此項是反映手性化合物及其純度的主要指標，并可用于制劑的含量測定，凡具有光學(xué)異構(gòu)體的藥品在性狀項下的物理常數(shù)中應(yīng)作比旋度規(guī)定，測定時應(yīng)注明溫度、濃度、溶劑對比旋度的影響，操作中如有特殊要求應(yīng)注明，中國藥典一般規(guī)定20℃.589nm.限度范圍數(shù)值的精度要求，應(yīng)準確至0.01°。⑷凝點系指一種物質(zhì)由液體凝結(jié)為固體時，在短時間內(nèi)停留不變的最高溫度，藥品的純度變更，凝點也隨之改變，必要時應(yīng)規(guī)定其凝點。⑸相對密度一般用于液體藥品，其數(shù)值的有效數(shù)應(yīng)不小于三位，并按藥典附錄進行測定。⑹折光率對于液體藥品，尤其是植物精油，可利用折光率數(shù)值區(qū)別不同的油類，測定時應(yīng)按藥典規(guī)定溫度（或各該藥品項下規(guī)定的溫度），限度范圍數(shù)值的精度應(yīng)至小數(shù)點第三位。⑺粘度系指流體對流動的阻抗能力，用平氏粘度計測定，應(yīng)記錄測定溫度，毛細管內(nèi)徑，一般控制流出時間約100秒，記錄并計算測得值，單位mm2/s，用旋轉(zhuǎn)粘度計測定，應(yīng)記錄儀器型號、測定溫度、轉(zhuǎn)子號、轉(zhuǎn)速，記錄并計算測得值，單位Pa·S所用粘度計均應(yīng)經(jīng)計量部門檢定，并取得該支（臺）粘度計的常數(shù)K（或K’），在研究資料中寫明。⑻碘值、酸值、皂值、羥值等應(yīng)取精制品進行測定，測定方法和操作中的注意事項參照中國藥典現(xiàn)行版和《中國藥品檢驗標準操作規(guī)范》，如實驗操作與藥典方法不同之處，要詳細列出檢驗方法并說明理由，所訂限度則根據(jù)測定結(jié)果而定。⑼餾程主要檢查該藥品純雜程度，不同于“沸點”，因此對相應(yīng)品種應(yīng)規(guī)定范圍，數(shù)值精度一般1℃也可書寫至0.5℃。在藥品性狀（包括以上各項物理常數(shù)）研究中，應(yīng)查閱國外現(xiàn)行版藥典及其他參考文獻的數(shù)值作比較。測定結(jié)果可列表。表2藥品性狀項下測定數(shù)據(jù)批號項目010212010213010214010215外觀白色結(jié)晶白色結(jié)晶類白色結(jié)白色結(jié)晶性粉末性粉末性粉末性粉末熔點128℃-128.5℃-127.5℃-128℃-129.5℃130℃129℃129℃吸收556555558554系數(shù)比旋度＋56.3°＋56.7°＋56.4°＋56.8°1％E六、鑒別鑒別試驗，要求專屬性強，靈敏度高，重現(xiàn)性好，操作簡便、快速的方法。常用的有以下三類：1、化學(xué)反應(yīng)選擇功能團專屬化學(xué)反應(yīng)，包括顯色反應(yīng)、沉淀反應(yīng)、鹽類離子反應(yīng)。2、色譜法采用與對照品（或經(jīng)確證的已知藥品）在相同條件下進行色譜分離并進行比較，要求其保留行為和檢驗結(jié)果都相互一致作為鑒別藥品真?zhèn)蔚尿炗?。如氣相色譜法、高效液相法的保留時間及薄層色譜法RF值及顏色等。選用色譜法進行鑒別時，必須要求該色譜條件能保證其與同類藥品有良好的分離，也就是要有適應(yīng)性試驗內(nèi)容（如鹽酸土霉素）。由于色譜法操作繁瑣費時，不宜廣泛采用，除非是在檢查或含量測定項下已采用色譜法而附帶引用，則有其特點。3、光譜法常用有紫外吸收光譜法和紅外吸收光譜法。在多數(shù)有機藥物分子中，因含有某些能吸收紫外可見光的基團而顯示的吸收光譜可作為鑒別依據(jù)，由于波長范圍較寬，吸收光譜較為簡單、平坦，曲線形狀變化不大，其專屬性遠不如紅外光譜，因此除了規(guī)定在溶劑（如水、乙醇或0.1mol/LHCl、0.1mol/LNaOH)中的最大吸收波長、最小波長外，可測定數(shù)個（2～3個）特定波長的吸收度比值或特定波長處的吸收度，其限度可控制在±5%，如VB2在267，325，444nm處有最大吸收，A375nm/A267nm=0.31-0.33,A444nm/A267=0.36-0.39,以提高鑒別的專屬性。紅外光譜是分子的振動--轉(zhuǎn)動光譜，特征性強，用于鑒別組分單一、結(jié)構(gòu)明確的原料藥，尤其適用于其他方法不易區(qū)分的同類藥物，如磺胺藥甾體激素等。可與國家藥典委員會編篡的《藥品紅外光譜集》標準圖譜進行對照，也可用對照品同時測定，并附該藥品的標準紅外圖譜復(fù)印件及實測圖譜；對于具有同質(zhì)異晶的藥品，應(yīng)選用有效晶型的圖譜，或分別比較；晶型不一致，需要轉(zhuǎn)晶的應(yīng)規(guī)定轉(zhuǎn)晶條件給出處理方法和重結(jié)晶所用溶劑。測定時應(yīng)記錄儀器型號、濕度和測定方法。紅外光譜法對于多組分藥物或存在多晶而又無可重復(fù)轉(zhuǎn)晶方法的藥品，不宜采用本法作鑒別。鑒別試驗應(yīng)說明反應(yīng)原理，特別是在研究結(jié)構(gòu)相似系列的藥品時，應(yīng)注意可能存在結(jié)構(gòu)相似化合物的區(qū)別，并要實驗驗紀。對一些特殊品種利用一過三類方法尚不能鑒別卻證時，可用其他方法，如X—射線粉末衍射法鑒別礦物藥等。從各國藥典如USP、BP正文收載的藥品鑒別方法分析，可表明隨著時代的發(fā)展，科技水平的提高和儀器設(shè)備的進步，各國藥典從總體上跨越了藥品鑒別首選化學(xué)鑒別法，以化學(xué)鑒別法為主的歷史發(fā)展階段，步入了以儀器分析為主的時代。在選用儀器分析鑒別法時，USP重點選用IR、HPLC、和UV法，而BP重點選用了IR、UV和HPLC法，就色譜法而言，USP選用HPLC法較多；BP選用TLC較多，選用UV法較少。鑒別是為了驗證已知藥物的真?zhèn)?，而不是鑒別磺胺藥等原料藥項下的外觀和物理常數(shù)，能協(xié)助鑒別真?zhèn)?，因而可作為“鑒別”項下的補充。論證未知藥物的組成和結(jié)構(gòu)，只要選用專屬性較強的方法，就可以鑒別真?zhèn)?，不宜羅列過多條目，一般選擇1–4個。USP平均每個品種只收載1.72個，BP收載1.84個。七、檢查檢查項目應(yīng)考慮有效性，純度要求和安全性三方面；藥品按既定合成工藝生產(chǎn)和正常貯藏過程中可能產(chǎn)生需要控制的雜質(zhì)，因此要結(jié)合生產(chǎn)供應(yīng)和使用實際，突出重點，制訂出能真實反映藥品質(zhì)量的雜質(zhì)控制項目，以保證藥品安全有效。原料藥品中所含雜質(zhì)為工藝雜質(zhì)、降解物、異物體和有機殘留溶劑等，雜質(zhì)從結(jié)構(gòu)上可分為無機雜質(zhì)（如氯化物、硫酸鹽、重金屬、砷鹽等），有關(guān)物質(zhì)（系指有機物，如中間體、降解產(chǎn)物、副產(chǎn)物、有機殘留溶劑等）。檢查內(nèi)容歸納為：有效性試驗，酸堿度，溶液的澄清度與顏色，無機陰離子，有機雜質(zhì)，干燥失重或水分，熾灼殘渣，金屬離子或重金屬硒或砷鹽，以及安全性檢查十大類。操作和判斷標準應(yīng)盡可能按中國藥典現(xiàn)行版的具體規(guī)定。1、有效性試驗用于這方面的檢查有：⑴顆粒細度或粒度用于制備固體制劑或混懸劑的難溶性藥物，控制細度，要求達到微粉化，以利于吸收。粒度對生物利用度、溶出度和穩(wěn)定性均有較大的影響，必要時需測定粒度，粒度分布，并規(guī)定限度。⑵結(jié)晶性中國藥典列入附錄《結(jié)晶性檢查法》，在偏光顯微鏡下檢測，用以檢查是否為晶體，但不能區(qū)別晶體。⑶晶型每種化合物的晶型，無論是單晶還是多晶，都有它自己特定的X射線衍射圖，晶型的改變?yōu)樗幬锏闹匾匦?。晶型確定可通過熔點、紅外光譜、粉末X–射線衍射、熱分析等方法進行檢測，并應(yīng)與國外文獻圖譜/數(shù)據(jù)或國外上市原料藥比較，不能用國外上市制劑提取得到的原料藥作對照。USP19版通則中已列入X–射線衍射法，中國藥典2000年版附錄也收載此項測定。了解藥物晶型將有助于解決下列問題：A、保證在制備和貯存過程中，藥物在劑型中物理化學(xué)穩(wěn)定性。B、提高藥物的生物利用度，減少毒性，增進治療效果。C、保證每批生產(chǎn)的藥物間的等效性。D、改善藥物粉末的壓片性能。E、防止藥物在制備或貯藏中產(chǎn)生晶型轉(zhuǎn)變而影響質(zhì)量，如原料藥為固體藥物，不易溶于水，制劑又為固體制劑，就應(yīng)考慮晶型問題。一般規(guī)定一、二類藥必須每批作X–射線衍射圖，四類藥盡量每批作，以確定新藥的晶型歸屬，并作為基礎(chǔ)檔案資料之一，以便在藥品由于合成工藝、精制方法、制劑放置過程中的改變而發(fā)生生物利用度不同時進行追蹤研究。鑒于晶型不同，有可能影響生物利用度以至藥效不同或毒副反應(yīng)，凡已知有晶型問題，均應(yīng)制訂標準。如必須規(guī)定有效晶型時，應(yīng)對無效晶型進行控制，如甲苯咪唑存在A、B、C三種晶型，C晶型為有效型，A晶型為無效型，產(chǎn)品中主要為C晶型，內(nèi)混有A晶型，中國藥典采用IR方法控制，A晶型不得過1%。又如吲哚美辛存在α、β和γ三種晶型，β型晶型不穩(wěn)定，易轉(zhuǎn)變α和γ，此二種晶型溶解度和溶出速率不同，α晶型毒性大于γ晶型，故選用γ晶型藥用，USP采用X–射線粉末衍射圖譜控制該品的晶型，要求與標準圖譜一致，中國藥典還未作規(guī)定。⑷異構(gòu)體立體異構(gòu)體是指原子組成和連接方式相同，而其三維空間排列不同的分子。它包括光學(xué)異構(gòu)體、幾何異構(gòu)體（又稱順反異構(gòu)體）、光學(xué)異構(gòu)體又分對映異構(gòu)體及非對映異構(gòu)體，其中幾何異構(gòu)體與非對映異構(gòu)體在新藥研究中一般作為不同的化合物對待，而對映異構(gòu)體往往當成一個化合物（消旋體）處理；光學(xué)歲映異構(gòu)體理化性質(zhì)相同，但藥理毒理往往差異很大，如新型苯哌啶類鎮(zhèn)痛藥哌西那朵的右旋異構(gòu)體為阿片受體的激動劑，而其左旋體則為阿片受體的拮抗劑；又如驅(qū)蟲藥四咪唑的嘔吐不良反應(yīng)即由右旋體產(chǎn)生，幾何異構(gòu)體不僅物化性質(zhì)有所不同，有時藥理作用也差別懸殊，如枸櫞酸他莫昔分，有E型和Z型二種構(gòu)型，Z型是研究的抗癌藥物，E型卻是工藝中帶來的致癌雜質(zhì)，故對這些異構(gòu)體雜質(zhì)應(yīng)進行嚴格控制，一般采用手性色譜法和比旋度法。鑒于光學(xué)異構(gòu)體的特殊性，應(yīng)優(yōu)選出合理的方法來控制產(chǎn)品的光學(xué)純度，比旋度作為手性化合物的一個理化常數(shù)，從理論上說可以反映其光學(xué)純度，但當產(chǎn)品中混有旋光性雜質(zhì)時，情況就更復(fù)雜，很難單純從比旋度的大小來判斷產(chǎn)品的光學(xué)純度，就應(yīng)根據(jù)其合成路線及結(jié)構(gòu)來選擇合適的方法。如一類新藥拉米夫定，其分子中有2個手性中心，因此存在4個立體異構(gòu)體，除所需的產(chǎn)品外，其他3個異構(gòu)體均應(yīng)進行檢測，通過一系列方法學(xué)研究，最終確定除采用倉度來控制產(chǎn)品的光學(xué)純度，還用HPLC法來檢測其中2個差向異構(gòu)體，而另一個對映異構(gòu)體則采用手性柱HPLC法來定量控制。順式或反式異構(gòu)體，以及控制異構(gòu)體比例，統(tǒng)稱“異構(gòu)體”，大多采用HPLC法進行檢測，（如枸櫞酸氯米芬）。關(guān)于手性藥物的液相色譜分析可參考由安登魁教授主編的“現(xiàn)代藥物分析選編”。⑸制酸力為抗酸藥的主要質(zhì)量指標，在指定的實驗條件下，以每1g供試品消耗鹽酸滴定液（0.1mol/L）的毫升數(shù)表示，如硫糖鋁。

⑹熱穩(wěn)定度個別藥品由于生產(chǎn)工藝的不同，影響成品對熱穩(wěn)定性差異很大，制訂本項目以保證其制劑的質(zhì)量，如二巰基丙醇、葡萄糖酸銻鈉）。⑺吸著力吸水力或凝凍濃度，如藥用炭、瓊脂、明膠。⑻疏松度用以控制某些藥物如硫酸鋇作為胃腸道造影劑所應(yīng)具有的物理性能。⑼錐入度如用作軟膏質(zhì)的黃凡士林項下規(guī)定的物理性能要求。⑽特性粘數(shù)或平均分子量均為反映高分子聚合物物理性能的主要指標。⑾含氟量和氟用于控制有機氟化物中的含氟量，制訂限度范圍一般控制在理論值的90%—110%，并采用二位有效數(shù)字，如諾氟沙星。⑿含氯量測定含氯化物中的含氯量，相限度范圍應(yīng)根據(jù)測定方法和取樣量，一般控制在理論值的90%—110%，并采用二位或三位有效數(shù)字。如維生素B。⒀含氮量用于含氮有機藥品或蛋白質(zhì)類生化藥品，可作為含量的補充，限度采用三位有效數(shù)字。如肝素鈉。⒁乙炔基在含有乙炔基的藥物中，因乙炔基為有效基團，國外藥典常用含量法測定，我國藥典常采用電位法。如炔諾孕酮。⒂吸收度或雜質(zhì)吸收度用指定濃度的供試品溶液在最大吸收波長處的吸收度，作類似于含量測定的質(zhì)量控制，可稱為吸收度，而用作檢查雜質(zhì)的，可稱為“雜質(zhì)吸收度”，如青霉素鈉。2、酸度、堿度或酸堿度對于原料藥，重點是鹽類、酯類、酰胺類，或在最后生產(chǎn)工藝中經(jīng)酸或堿處理藥品，需進行此項檢查，檢查方法有酸堿滴定法、pH值法、指示劑法。酸堿滴定法以消耗酸、堿滴定液的毫升數(shù)作為限度指標。在方法中要規(guī)定取樣量（二位有效數(shù)字）和選用的指示劑，并明確指示劑的變色，對于微溶或不溶于水的原料藥，除采用中性有機溶劑外，也可規(guī)定加水并經(jīng)處理后制備供試品溶液的方法。pH值法常用于供制備注射劑的原料藥品種，方法中要規(guī)定供試液的濃度或其制備方法，pH限度可適當參照其注射液的規(guī)定，對于水不溶性藥品，應(yīng)敘述供試液的制備方法。指示劑法方法簡便，限度較寬，方法中應(yīng)注意所選用的指示液必須是供比色法測定pH值用的，以在指示液的配制中加有定量的氫氧化鈉，并規(guī)定指示液的加入量和呈現(xiàn)的顏色。酸度凡檢查方法中采用堿性滴定液進行滴定，或規(guī)定pH值低于7.0。堿度凡檢查方法中采用酸性滴定液進行滴定，或規(guī)定pH值大于7.0。酸堿度檢查時，先后用酸性滴定液和堿性滴定液分別進行滴定，或規(guī)定pH值范圍為7.0兩側(cè)。3、溶液澄清度與顏色溶液澄清度是要求以水為溶劑，將原料藥制成一定濃度的溶液，并與指定的濁度標準液比較，根據(jù)藥物在特定溶劑中的溶解性能，以控制微量不溶性雜質(zhì)和呈色的物質(zhì)。溶液的顏色是檢查以水為溶劑制成供試液的顏色，并與標準比色液比較，或在可見光波長范圍內(nèi)測定吸收度，也可采用儀器測色的方法。溶液的澄清度與顏色是指制成供試溶液后，既檢查澄清度，又檢查顏色，多用于供制備注射用原料藥的質(zhì)量控制。對于某些非注射給藥的原料藥，由于要求較寬，在制成供試液后，允許有少量不溶物，可稱為“××中不溶物”，又可利用某些雜質(zhì)在特定溶劑中的溶解性能，通過蒸發(fā)稱重，進行雜質(zhì)檢查的，稱為“××中溶解物”，常用于無機藥物和可溶性鹽類藥物。4、無機陰離子藥物中其他無機陰離子的混入，大多來自原材料和生產(chǎn)工藝，少數(shù)為其降解物，要根據(jù)實際情況有選擇地加以制訂，如氯化物、硫酸鹽、硫化物、氰化物、磷酸鹽、溴化物、碘化物等，操作均按中國藥典現(xiàn)行版方法，但要說明用的第幾法，并說明采用方法的原因和實驗中產(chǎn)生的現(xiàn)象及解決辦法。操作中注意事項可參照《中國藥品檢驗標準操作規(guī)范》。在檢驗時應(yīng)配制不同濃度系列的對照液，考察多批數(shù)據(jù)，確定雜質(zhì)限量。在資料中列出實測數(shù)據(jù)，如50ppm，70ppm等。5、有關(guān)物質(zhì)主要是在生產(chǎn)過程中帶入的原料、中間體、降解物、異構(gòu)體、聚合物、副反應(yīng)產(chǎn)物等，對藥品純度要求，應(yīng)基于安全性和GMP兩方面考慮，允許含限定量無害或毒性極低的共存物，但對有毒雜質(zhì)測定應(yīng)嚴格控制，毒性雜質(zhì)的確認主要根據(jù)安全性試驗的資料或文獻資料。當某雜質(zhì)與已知毒性雜質(zhì)結(jié)構(gòu)相似，但又無法分離時，也應(yīng)認為毒性雜質(zhì)，應(yīng)搞清結(jié)構(gòu)，并嚴格控制含量限度。有關(guān)物質(zhì)檢查通常首選采用專屬性好，靈敏度高的色譜法，可根據(jù)有關(guān)物質(zhì)的性質(zhì)選用薄層色譜法、高效液相色譜法、氣相色譜法等，有時也可采用顯色反應(yīng)等方法。薄層色譜法設(shè)備簡單，操作簡便，但分離效果較差，影響重現(xiàn)性和精密度的因素較多，可作為一般有關(guān)物質(zhì)檢查。氣相色譜法可檢查揮發(fā)性雜質(zhì)、有機溶劑殘留量的測定，一些不揮發(fā)性物質(zhì)也可用于衍生化試劑制備成揮發(fā)性衍生物后進行測定。紙色譜法，柱色譜法和電泳法等，由于操作時間較長，分離效果差故采用不多。毛細管電泳法因具有分離效能高，分析速度快，樣品用量少，應(yīng)用范圍廣等特點，也可采用。各色譜法均應(yīng)按中國藥典現(xiàn)行版附錄《色譜法》的規(guī)定和《中國藥品檢驗標準操作規(guī)范》的規(guī)定進行研究。在用色譜法檢查有關(guān)物質(zhì)的方法學(xué)研究中應(yīng)考慮工藝雜質(zhì)及降解產(chǎn)物的分離度及能否有效檢出（檢向限、響應(yīng)因子）。首先應(yīng)按藥典附錄要求考察系統(tǒng)適用性試驗，主要是考察主成分與雜質(zhì)的分離及檢測的靈敏度，常用以下方法進行方法學(xué)考察：A、如能獲得已知雜質(zhì)作對照，可在原料藥中加入適量，證明能達到有效的分離。B、如未知雜質(zhì)，或不能獲得雜質(zhì)作對照，則可用含雜質(zhì)的供試品，如未經(jīng)精制的原料藥粗品中的各雜質(zhì)峰的分離度，并進行粗品中各雜質(zhì)峰的分離度，并進行粗品中各雜質(zhì)峰的歸屬（將可能存在終產(chǎn)品中的已知工藝雜質(zhì)如反應(yīng)中間體加入粗品中）進行試驗，證明能達到分離。C、也可用已精制的原料藥經(jīng)光照或高溫、高濕度（RH90%以上）等影響因素試驗或經(jīng)酸堿加熱分解、氧化后的供試品進行試驗，證明能達到分離，在資料中應(yīng)詳細列出上述的破壞性條件。用色譜法檢查時，應(yīng)優(yōu)選分離條件，并附代表性圖譜，圖譜中應(yīng)盡量標明成分的位置，TLC法應(yīng)有實物照片，注明各斑點的RF值，應(yīng)有檢測限（TLC法為最小點樣顯示量，UPLC法一般為相當于峰高三倍于基線噪音時的注入供試品量）。定量限系指被測物能被定量測定最低量，一般以信噪比為10：1時相應(yīng)的濃度或注入儀器量進行確定。在分離度試驗基礎(chǔ)上如有可能可進行重復(fù)性、中間精密度、專屬性、定量限、線性范圍、耐用性、測定溶液穩(wěn)定性等的研究。薄層色譜法用于已知雜質(zhì)檢查時，宜采用與一定量的已知雜質(zhì)對照品，同點樣于同一薄層板上，展開后檢測；用于未知雜質(zhì)時，可將供試品溶液定量稀釋后作為對照溶液，但應(yīng)注意雜質(zhì)斑點與自身對照的呈色要有可比性，結(jié)果判斷除控制雜質(zhì)斑點數(shù)與限度外，可用兩種以上不同濃度的對照溶液分別檢測比較。高效液相色譜法作雜質(zhì)檢查，也可與含量測定同時進行，所用色譜柱首先考慮通用柱（十八烷基硅烷鍵合硅膠，硅膠及辛基烷鍵合硅膠）。如分離不好，可選用其他柱，但應(yīng)附實驗數(shù)據(jù)，說明理由，如經(jīng)對比，必須用指定牌號的色譜柱或填充劑則應(yīng)注明，應(yīng)采用價廉易得的流動相，應(yīng)首選甲醇一水系統(tǒng)，如需用少量酸堿調(diào)節(jié)流動相的pH值，應(yīng)明確規(guī)定pH值及范圍，如為堿性藥物流動相的pH值應(yīng)為7–8；如為酸性藥物，流動相pH值應(yīng)為3–4。并盡可能選用流動相作為溶劑，如未能選用，應(yīng)說明原因。檢測器則應(yīng)首選UV–可見光檢測器。HPLC法用于測定雜質(zhì)含量時，參照中國藥典現(xiàn)行版附錄的要求，并根據(jù)條件和可能選擇：⑴雜質(zhì)對照法，⑵加校正因子的自身對照法，⑶不加校正因子的自身對照法，由于不同物質(zhì)響應(yīng)因子可能不同，因此盡可能采用⑴⑵法，當雜質(zhì)峰的響應(yīng)值與主成分峰的響應(yīng)值相差太大時，應(yīng)選用自身對照法，而不宜選用面積歸一法，檢測波長選擇時應(yīng)選擇主成分峰與雜質(zhì)峰響應(yīng)值盡量相當?shù)牟ㄩL，作為檢測波長。氣相色譜法的常用固定相為SE系列、OV系列、PEG系列等，擔體首選白色并經(jīng)酸洗后硅烷化擔體，也可選用其他固定相和擔體。檢測器首選氫火焰離子化檢測器。如單憑色譜法檢查雜質(zhì)尚欠充分時，可用聯(lián)機技術(shù)如HPLC/UV二極管陣列，HPLC/MS或GC/MS對待測雜質(zhì)進行定性和定量分析。有關(guān)物質(zhì)的限量，如分離出有幾個雜質(zhì)峰（或點）可考慮制訂總雜質(zhì)限度和單個最大雜質(zhì)的限度；或制訂已知雜質(zhì)限度，未知雜質(zhì)限度和單雜質(zhì)限度計算方法可采用對照品法加校正因子的自身對照法，不加校正因子的自身對照法或根據(jù)不同雜質(zhì)采用不同方法。6、有機溶劑殘留量基于某些有機溶劑具有致癌、致畸、致突變的性質(zhì)，應(yīng)避免或限制使用。人用藥品注冊技術(shù)規(guī)范國際協(xié)調(diào)會（簡稱ICH）根據(jù)毒性大小分類如下：A。第一類溶劑為毒性溶劑共計5種，在生產(chǎn)中應(yīng)盡量避免使用溶劑濃度限（ppm）備注苯2四氯化碳（Lcl4）41，2–二氯乙烷51，2–二氯乙烯81，1，1–三氯乙烯1500嚴重污染環(huán)境如在生產(chǎn)工藝中無法用其他有機溶劑代替，則報臨床時應(yīng)進行殘留量檢測，訂入標準；如已革除，應(yīng)提供詳細試驗資料。B.第二類溶劑為具有一定毒性溶劑，在生產(chǎn)中應(yīng)限制使用。溶劑PDE濃度限溶劑PDE濃度限

（mg/day)（ppm）（mg/day)（ppm）

乙腈4.1410已烷2.9290氯苯3.6360甲醇30.03000氯仿0.6602-甲氧基乙醇0.550環(huán)已烷38.83880甲基正丁基甲酮0.5501,2-二氯已烯18.71870甲基環(huán)已烷11.81180二氯甲烷6.0600N-甲基吡咯烷酮48.448401,2-二醇二甲醚1.0100硝基甲烷0.550N,N-二甲替乙酰胺10.91090吡啶2.0200N,N-甲基甲酰啶8.8880環(huán)丁砜1.61601,4-二惡烷3.8380四氯化萘1.01002-乙氧基乙醇1.6160甲苯8.9890乙二醇6.26201,1,2-三氯乙烯0.880甲酰胺2.2220二甲苯21.72170PDE系指每日允許攝入量,其值是根據(jù)動物試驗中的最大安全量(NOEL)或最小起效量(LOEL)計算所得。如在生產(chǎn)工藝中已使用,在申報臨床時,應(yīng)自檢,根據(jù)測定結(jié)果,如殘留量達到一定水平就應(yīng)規(guī)定相應(yīng)限度,報生產(chǎn)時,將后三步反應(yīng)中使用此類溶劑訂入質(zhì)量標準中。C.第三類溶劑（低毒性）丙酮、苯甲醚、乙醇、甲酸、甲酸乙酯、異丙苯、醋酸、異丁基醋酸、異丙基醋酸、醋酸乙酯、丙基醋酸、醋酸甲酯、二乙基乙醚、二甲基亞砜、四氫呋喃、叔丁基甲醚、正丁醇、正丙醇、庚烷、戊烷、正戊烷、甲基異丁基甲酮、丁酮、3–甲基點–丁醇–1、2–甲基–丁醇–1。生產(chǎn)工藝中如使用了，可具體分析，如產(chǎn)品重結(jié)晶，臨床劑量很大，靜脈注射，申報臨床時自檢，報生產(chǎn)時酌情訂入質(zhì)量標準。ICH未規(guī)定它們的PDE值，可根據(jù)生產(chǎn)實際和GMP要求，規(guī)定限度。D.第四類溶劑（毒性依據(jù)尚不足）如石油醚等。有機溶劑殘留量一般采用氣相色譜法，對沸點低的溶劑可用頂空法，沸點高的溶劑可用溶液直接進樣法，操作可參照中國藥典現(xiàn)行版附錄或美國藥典的方法。可采用有限量和定量控制，盡可能定量控制，在進行其方法學(xué)研究時，應(yīng)注意在所選溶劑中的溶解性，應(yīng)能保證藥物溶解，待測有機溶劑充分溶出，并應(yīng)進行色譜條件與系統(tǒng)適應(yīng)性的研究，如檢測器、色譜柱、載氣、固定相、分離度、內(nèi)標物、理論板數(shù)等；可根據(jù)檢測的內(nèi)容和要求分別選用，按質(zhì)量標準分析方法驗證的要求，進行線性范圍、回收率、精密度的考察。。在此基礎(chǔ)上建立檢測方法。7、干燥失重與水分“干燥失重”系指在規(guī)定的條件下，測定藥物中所含能被驅(qū)去的水或其他揮發(fā)性物質(zhì)。水分系指用費休氏法或甲苯法測得藥品中的殘留水和結(jié)晶水的總和，但不包括其他揮發(fā)性物質(zhì)，為了真實反映含量，一般均應(yīng)加以規(guī)定，尤其是對具有吸濕性或含有結(jié)晶水，以及因含水量高將影響其穩(wěn)定性的藥品，更應(yīng)訂入質(zhì)量標準中。含結(jié)晶水的，并因風化失水過多時將影響用藥劑量的藥物，應(yīng)制訂高低范圍。遇熱易變色破壞或分解的藥品宜采用費休氏水分測定法或減壓干燥法測定。8、熾灼殘渣系指硫酸化灰分，以轉(zhuǎn)化成硫酸鹽的重量計算，用以考查有機藥物中混入的各種無機雜質(zhì)，是控制無機雜質(zhì)的一種簡便方法；因取樣量大，對用藥劑量小而又價格昂貴的藥品，一般可不訂入質(zhì)量標準，但應(yīng)提供研究的數(shù)據(jù)。9、金屬離子和重金屬藥物中對某單一金屬離子的檢查，不同于重金屬檢查，是有其針對性的，如鋇鹽對人體有毒，鐵鹽能加速藥物的氧化、降解；因此根據(jù)所用原料和生產(chǎn)工藝，制訂檢查的內(nèi)容和要求。檢測方法一般可采用原子吸收分光光度法（如鉀、鈉、鈣、鋅）、比濁法或比色法（如銅、鎳、鉛等）。重金屬系指在規(guī)定的實驗條件下，能與硫代乙酰胺試液或硫化鈉作用顯色的雜質(zhì)，用以檢查藥物是否污染上金屬離子；要作本項檢查的除有特殊要求外，應(yīng)局限于每日劑量在0.5g或以上，并長期給藥的品種，不要作為對藥品質(zhì)量的普遍要求。一般有四種測定方法：第一法為最常用的方法，一般用于水溶性藥物；在水中不溶的可改用乙醇。第二法適用于不溶于水或乙醇的藥物，或因自身有顏色，可取熾灼殘渣項下遺留的殘渣進行檢查。第三法是在堿性條件下，用硫化鈉試液作為顯色劑的檢查方法，主要用于溶解于堿而不溶于酸的有機藥物的檢查。第四法為微孔薄膜法，可避免供試品原有顏色的干擾，靈敏度高，含鉛0.5–5ug的梯度明顯，取用量中的pb宜在2–4ug，可推廣應(yīng)用。10、硒或砷鹽硒和砷均為毒性雜質(zhì)，可按中國藥典現(xiàn)行版附錄規(guī)定的方法，進行檢測。硒一般需采用氧瓶燃燒法進行有機破壞后，用分光光度法，與對照品溶液對照進行檢測。砷鹽有二種測定法，第一法為古蔡氏法。對于具有環(huán)狀結(jié)構(gòu)的有機藥物，因砷有可能以其價鍵結(jié)合在雜環(huán)分子中，需經(jīng)有機破壞后檢查，第二法為二乙基二硫代氨基甲酸銀比色法，不僅咳用于限度檢查，也可用作微量砷鹽測定。對于一些外用藥或藥量較少的口服藥，可少用此項檢查。11、安全性試驗藥品中存在的某些痕量雜質(zhì)，可對人體產(chǎn)生特殊的生理作用，抗生素藥品或供注射用原料藥，必要性應(yīng)檢查異常毒性、熱原或細菌內(nèi)毒素、過敏性雜質(zhì)、降壓物質(zhì)與無菌等項。綜上所述，藥品純度檢驗，包括的內(nèi)容眾多，在進行藥品質(zhì)量研究時可根據(jù)研制藥物的性質(zhì)及要求，進行擇要的考察。除用文字記述外，也可列表說明，如表4、表5、表6。表4檢查項目測定數(shù)據(jù)

批號020115020116020117020118項目溶液澄清度澄清相當于1號相當于2號相當于1號標準比濁液標準比濁液標準比濁液酸度pH4.574.734.354.27氯化物100ppm120ppm80ppm50ppm熾灼殘渣0.9%0.02%0.05%0.08%吡啶100ppm50ppm80ppm60ppm干燥失重1.5%0.8%0.94%1.2%有關(guān)物質(zhì)0.83%0.45%0.67%0.33%(HPLC)表5異構(gòu)體分離的色譜條件篩選因素色譜柱流動項柱溫結(jié)果圖號1A手性色譜柱乙腈一水室溫拖尾因子(55:45)分別為0.4,0.5pH3.0分離度0.52A手性色譜柱乙腈一水15℃拖尾因子(60:40)分別為0.6,0.8pH3.0分離度0.93A手性色譜柱乙腈一水30℃拖尾因子(60:40)分別為1.0,1.2Ph3.0分離度1.9表6降解破壞性試驗測定結(jié)果條件降解方法結(jié)果圖號1A取供試品溶液2ml,加2%氫氧化鈉主峰與3個雜質(zhì)峰分離溶液10ml,室溫放置10小時2A取供試品溶液2ml,加1%鹽酸主峰與所有雜質(zhì)峰分離溶液10ml,室溫放置6小時3A取供試品溶液2ml,加濃過氧化氫主峰與5個雜質(zhì)峰分離2ml,室溫放置8小時4A供試品溶液5ml,于100℃水浴主峰與雜質(zhì)峰基本分離加熱4小時5A供試品溶液10ml,于紫外光主峰與3個雜質(zhì)峰分離254nm下照射18小時3.1676.256.76313.54815.04819.0639.28MATORAM1MEMORIZEONOTIMEAREAMKIDNOCONCNAME13.167108220.36126.258700.02936.76313636V0.454849.282969063V99.0278513.5489680.0323615.04828520.0951TOTAL2998211100雜質(zhì)1雜質(zhì)2雜質(zhì)3羅格列銅四、含量測定或效價測定凡用理化方法測定藥物含量的稱“含量測定”；凡以生物學(xué)方法（包括生物檢定和微生物檢定）或酶化學(xué)方法測定藥物效價的，稱“效價測定”。藥品的含量或效價測定是評價藥品質(zhì)量的主要指標之一，因此要考慮測定結(jié)果的精密度與重現(xiàn)性。原料藥要求純度高，如果雜質(zhì)可嚴格控制，則可著重于測定方法的準確性。常用的測定方法有：1、容量分析法在測定常量組分時，容量分析法具有精密度好，操作簡便易行、快速的優(yōu)點，因而是原料藥含量測定的首選方法，如中和法、非水滴定法、銀量法、絡(luò)合量法和重氮化法等，因此可根據(jù)藥品分子中所具有的基團及其化學(xué)性質(zhì)，分別選用。在方法敘述中要強調(diào)供試品的取用量應(yīng)滿足滴定精度的要求，滴定終點的判斷要明確，為了排除因加入其他試劑而混入雜質(zhì)對測定結(jié)果的影響可采用空白試驗校正，并應(yīng)有每1ml滴定液相當待測物質(zhì)量的換算因子；采用四位有效數(shù)字。也可考慮用儀器方法確定終點，如電位滴定法與永停滴定法；方法中應(yīng)依次準確敘述每一操作步驟，統(tǒng)一采用中國藥典術(shù)語，并盡可能采用附錄中收載的各種試劑、試液、緩沖液、指示液、滴定液，如必須另法配制或操作中的注意事項應(yīng)在方法中說明，并列出滴定曲線，指示劑終點變色依據(jù)，如電位滴定法中，根據(jù)滴定液的消耗量（V）及電位（E）變化，繪制E—V曲線，△E/△V曲線及△2E/△V2—V曲線，計算采用內(nèi)插法滴定終點及含量。見表7，圖1，圖2，圖3。滴定液體積V（ml）電位-E（mv）△V△E△E/△V△（△E/△V）△2E/△V2顏色0704紫色1.00710166紫色2.00716166紫色3,0072611010紫色4.0073611010紫色4.507410.5510紫色5.007490.5816紫色5.107510.1220紫色5.207530.1220紫色5.307600.1770紫色5.357650.05510030600紫色5.407750.05102001002000紫色5.457900.05153001002000紫色5.508280.05387604609200紫色5.559020.0574148072014400藍色5.609520.05501000-480-9600綠色5.659820.0530600-400-8000黃綠色5.709970.0515300-300-6000黃綠色5.8010100.113130-170-3400黃色5.9010180.1880-50-1000黃色6.0010240.1660黃色6.2010320.2840黃色6.5010390.3723黃色7.0010470.5816黃色表7電位滴定曲線及指示劑變色域從表7可見，滴定終點前后電位突躍非常明顯，溶液中指示劑顏色從紫色變?yōu)樘m色。●●●●●●●●●●●●●●●●●●●●●●●●●●●110070078086094010200246810圖1電位滴定E–V曲線●●●●●●●●●●●●●●●●●●●●●●●●●●●0015002468103006009001200圖2電位滴定△E/△V—V曲線△E——△VV（ml）－15－9－315026481039●●●●●●●●●●圖3電位滴定△2E/△V2——V曲線△E2——△V2V（ml）2、紫外分光光度法或比色法用分光光度計測定溶液的吸收度時，由于不同儀器或操作原因，其相對標準偏差較大，約為0.5–1.5，所以本法不應(yīng)是首選的方法，必要時，可用對照品同時測定進行比較計算，以減少不同儀器的測定誤差，采用吸收系數(shù)法時，應(yīng)給出E值，采用三位有效數(shù)字，E值小于100，一般不宜采用。比色法有與紫外分光光度法相類似的缺陷，且對操作條件要求更為嚴格，但因其顯色的專屬性優(yōu)于紫外分光光度法，且受雜質(zhì)的干擾較小，如甾體激素類藥物的含量測定選用比色法。1%1cm

1%1cm

3、高效液相色譜法或氣相色譜法高效液相色譜法主要用于多組分抗生素原料藥或生化藥品，或因所含雜質(zhì)干擾測定，而常規(guī)方法又難以分離或分離手段繁雜的化學(xué)品種。所用對照品必須為純度高、易于制備和性質(zhì)穩(wěn)定的物質(zhì)，一般要求含量在99.5%以上，有關(guān)物質(zhì)在0.5%以下，應(yīng)提供高效液相色譜法的依據(jù)或文獻資料，內(nèi)標物應(yīng)選擇易得并不得對測定產(chǎn)生干擾的化學(xué)物質(zhì)，應(yīng)與待測物質(zhì)化學(xué)結(jié)構(gòu)相似，理化性質(zhì)接近，峰的響應(yīng)值相當，以及分離度大于1.5。所用的填充劑首選十八烷基硅烷鍵合硅膠、硅膠、苯基烷鍵合硅膠，并用兩根不同品牌的色譜柱進行比較試驗，其中一根最好為國產(chǎn)柱，流動相首選甲醇一水系統(tǒng)，用少量酸堿調(diào)節(jié)的流動相，或?qū)α鲃酉嘀衟H敏感的品種，其流動相的pH值必須明確規(guī)定，盡可能選用流動相作為溶劑，檢測器首選UV檢測器，操作應(yīng)按《中國藥品檢驗操作規(guī)范》規(guī)定的方法。氣相色譜法因操作繁復(fù)費時，一般不宜作為原料藥的含量測定方法，但因其分離效果優(yōu)越，對于所含雜質(zhì)干擾其他含量測定方法，而其本身又有一定揮發(fā)性的原料藥，GC是一個有效的含量測定方法。高效液相色譜法與氣相色譜法均為應(yīng)有“色譜條件與系統(tǒng)適用性試驗”的要求，所訂理論板數(shù)和分離度數(shù)值均指符合檢測的最低要求。研究含量測定方法時，應(yīng)附代表性圖譜，顯示其專屬性，標明各成分的峰及分離度，見圖4。START2.797馬來酸羅格列酮7.812PKNOTIMEAREAMKIDNOCONCNAME12.797265546.481327.31238314793.5187TOTAL409701100圖4馬來酸羅格列酮原料藥HPLC圖（批號：990228）標準曲線圖（HPLC）5.0000.0001.0002.0003.0004.0000.0001.1001.0000.500●●●●●●Abs●B.測定線性，即用信號或響應(yīng)對濃度的曲線或用最小二乘法計算四歸方程；相關(guān)系數(shù)及γ截距，回歸線性的斜率和方差，附回歸曲線（至少五份濃度測定）。見表8標準曲線數(shù)據(jù)（HPLC）進樣量0.20960.41921.25762.09602.93444.1920(ug)峰面積3444167190202098343165477264683352四歸方程A=163192.02C－892.91γ=0.9999線性范圍0.2—4.0ug謝謝觀看/歡迎下載BYFAITHIMEANAVISIONOFGOODONECHERISHESANDTHEENTHUSIASMTHATPUSHESONETOSEEKITSFULFILLMENTREGARDLESSOFOBSTACLES.BYFAITHIBYFAITH111歐債危機3解救方案1歐債危機簡介4近年動態(tài)聚焦2危機原因深究5歐債危機與中國歐債危機的全面觀歐債危機112相關(guān)概念主權(quán)債務(wù)：指一國以自己的主權(quán)為擔保向外，不管是向國際貨幣基金組織還是向世界銀行，還是向其他國家借來的債務(wù)主權(quán)債務(wù)違約:現(xiàn)在很多國家，隨著救市規(guī)模不斷的擴大，債務(wù)的比重也在大幅度的增加主權(quán)信用評價:體現(xiàn)一國主權(quán)債務(wù)違約的可能性，評級機構(gòu)依照一定的程序和方法對主權(quán)機構(gòu)（通常是主權(quán)國家）的政治、經(jīng)濟和信用等級進行評定，并用一定的符號來表示評級結(jié)果。1歐債危機簡介113歐債危機，全稱歐洲主權(quán)債務(wù)危機，是指自2009年以來在歐洲部分國家爆發(fā)的主權(quán)債務(wù)危機。歐債危機是美國次貸危機的延續(xù)和深化，其本質(zhì)原因是政府的債務(wù)負擔超過了自身的承受范圍。歐債危機簡介114開端三大評級機構(gòu)的卷入發(fā)展比利時，西班牙陷入危機蔓延龍頭國受到影響升級7500億穩(wěn)定機制達成歐債危機簡介發(fā)展過程1151歐債危機簡介歐豬五國PIIGS（PIIGS—歐債風險最大的五個國家英文名稱第一個字母的組合）希臘——債務(wù)狀況江河日下

葡萄牙——債務(wù)將超經(jīng)濟產(chǎn)出西班牙——危險的邊緣意大利——債務(wù)狀況嚴重愛爾蘭——債務(wù)恐繼續(xù)增加116目前，希臘屬歐盟經(jīng)濟欠發(fā)達國家之一，經(jīng)濟基礎(chǔ)較薄弱，工業(yè)制造業(yè)較落后。海運業(yè)發(fā)達，與旅游、僑匯并列為希外匯收入三大支柱。農(nóng)業(yè)較發(fā)達，工業(yè)主要以食品加工和輕工業(yè)為主。希臘已陷入經(jīng)濟衰退5年，債務(wù)危機持續(xù)2年多，已經(jīng)給希臘經(jīng)濟、政治和社會帶來了極大的破壞。嚴重經(jīng)濟衰退帶來的直接后果是，失業(yè)率高企，民眾生活每況愈下。與此同時，政府收入銳減，償債目標一再被推遲。2011年11月，希臘失業(yè)率高達21%，超過100萬人待業(yè)。。目前，希臘社會階層情緒對立嚴重，普通民眾認為，正是當權(quán)者無所作為，才將這個國家引向了目前這種災(zāi)難性局面。而政府官員普遍存在的貪污腐敗和無所作為，更是加重了民眾的不滿。希臘債務(wù)危機117葡萄牙是發(fā)達國家里經(jīng)濟較落后的國家之一，工業(yè)基礎(chǔ)較薄弱。紡織、制鞋、旅游、釀酒等是國民經(jīng)濟的支柱產(chǎn)業(yè)。軟木產(chǎn)量占世界總產(chǎn)量的一半以上，出口位居世界第一。經(jīng)濟從2002年起有所下滑，2003年經(jīng)濟負增長1.3%。2004年國內(nèi)生產(chǎn)總值為1411.15億歐元，經(jīng)濟增長1.2%。2005年國內(nèi)生產(chǎn)總值為1472.49億歐元，人均國內(nèi)生產(chǎn)總值為13800歐元，經(jīng)濟增長率為0.3%。葡萄牙債務(wù)危機1182010年1月11日，穆迪警告葡萄牙若不采取有效措施控制赤字將調(diào)降該國債信評級。

2010年4月，葡萄牙已經(jīng)呈現(xiàn)陷入主權(quán)債務(wù)危機的苗頭。葡萄牙當時的公共債務(wù)為GDP的77%，與法國處于相同水平；但是，企業(yè)以及家庭、人均的債務(wù)均超過了希臘和意大利，高達GDP的236%，葡萄牙債券已被投資者列為世界上第八大高風險債券。2011年3月15日，穆迪把對葡萄牙的評級從A1下調(diào)至A3。穆迪稱，葡萄牙將面對很高的融資成本，是否能夠承受尚難預(yù)料，該國財政緊縮目標能否如期實現(xiàn)也存在變數(shù)。再考慮到全球經(jīng)濟形勢仍不明朗、歐洲中央銀行可能提高利率以及高油價帶來更高經(jīng)濟運行成本，該機構(gòu)決定下調(diào)該國主權(quán)信用評級。119惠譽2010年12月把葡萄牙主權(quán)信用評級從“AA－”調(diào)低至“A＋”2011年3月25日，標普宣布將葡萄牙長期主權(quán)信貸評級從“A-”降至“BBB”，3月29日，標普宣布將葡萄牙主權(quán)信用評級下調(diào)1級至BBB-2011年4月1日，惠譽下調(diào)葡萄牙評級，將其評級下調(diào)至最低投資級評等BBB-。稱債臺高筑的葡萄牙需要救援。2011年4月，葡萄牙10年期國債的預(yù)期收益率已經(jīng)升至9.127%，創(chuàng)下該國加入歐元區(qū)以來的新高。與此同時葡萄牙將至少有約90億歐元的債務(wù)到期，葡萄牙政府實在支撐不住了，既沒錢、沒法償還到期的債務(wù)，又沒有有效的融資途徑，不得不提出經(jīng)濟救援申請。120房地產(chǎn)泡沫是愛爾蘭債務(wù)危機的始作俑者。2008年金融危機爆發(fā)后，愛爾蘭房地產(chǎn)泡沫破滅，整個國家五分之一的GDP遁于無形。隨之而來的便是政府稅源枯竭，但多年積累的公共開支卻居高不下，財政危機顯現(xiàn)。更加令人擔憂的是，該國銀行業(yè)信貸高度集中在房地產(chǎn)及公共部門，任何一家銀行的困境都可能引發(fā)連鎖反應(yīng)。愛爾蘭5大銀行都瀕臨破產(chǎn)。為了維護金融穩(wěn)定，愛爾蘭政府不得不耗費巨資救助本國銀行，把銀行的問題“一肩挑”，從而導(dǎo)致財政不堪重負。財政危機和銀行危機，成為愛爾蘭的兩大擔憂。史上罕見，公共債務(wù)將占到GDP的100%。消息一公布，愛爾蘭國債利率隨即飆升。愛爾蘭十年期國債利率已直抵9%，是德國同期國債利率的三倍。由此掀開了債務(wù)危機的序幕。房地產(chǎn)業(yè)綁架了銀行，銀行又綁架了政府，這就是愛爾蘭陷入主權(quán)債務(wù)危機背后的簡單邏輯。

愛爾蘭債務(wù)危機1212011年9月19日，標普宣布，將意大利長期主權(quán)債務(wù)評級下調(diào)一級，從A+降至A，前景展望為負面。在希臘債務(wù)危機愈演愈烈之際，意大利評級下調(diào)對歐洲來說無疑是雪上加霜。2010年意政府債務(wù)總額已達1.9萬億歐元，占GDP比例高達119%，在歐元區(qū)內(nèi)僅次于希臘。由于意大利債務(wù)總額超過了希臘、西班牙、葡萄牙和愛爾蘭四國之和，因此被視為是“大到救不了”的國家。意大利債務(wù)危機122

意大利和其他出現(xiàn)債務(wù)危機的歐洲國家所面臨的，并不是簡單收支失衡問題，而是根本性的經(jīng)濟擴張動能不足問題。這些南歐國家在享受高福利的同時，卻逐漸失去全球經(jīng)濟競爭力。其不同程度存在的用工制度僵化、創(chuàng)新能力低、企業(yè)活力不足、偷稅以及政治內(nèi)耗劇烈等，是解決債務(wù)危機的重要障礙。然而，目前意政府乃至整個歐元區(qū)在應(yīng)對債務(wù)危機上，還僅僅以緊縮開支、修復(fù)政府短期資產(chǎn)負債表為主攻方向，在體制性改革問題上卻重視不夠。倘若這些陷入危機的南歐國家不進行一番傷筋動骨的體制性改革，債務(wù)危機將無法獲得根本性解決。1232011年10月7日，惠譽宣布將西班牙的長期主權(quán)信用評級由“AA+”下調(diào)至“AA-”，評級展望為負面。2011年10月18日，繼惠譽和標普之后，穆迪也宣布將西班牙的主權(quán)債務(wù)評級下調(diào)兩檔至A1，前景展望為負面經(jīng)濟疲軟、財政“脫軌”，加上超高的失業(yè)率和低迷的房地產(chǎn)市場讓西班牙已不堪重負。該國經(jīng)濟增長乏力、財政債臺高筑和房地產(chǎn)市場萎靡不振，以及這些問題之間不斷加深的負面反饋效應(yīng)。西班牙債務(wù)危機1241.影響歐元幣值的穩(wěn)定2.拖累歐元區(qū)經(jīng)濟發(fā)展3.延長歐元區(qū)寬松貨幣的時間4.歐元地位和歐元區(qū)穩(wěn)定將經(jīng)受考驗5.威脅全球經(jīng)濟金融穩(wěn)定1歐債危機簡介主要影響125crisis2整體經(jīng)濟實力不均1協(xié)調(diào)機制與預(yù)防機制的不健全3歐元體制天生弊端4.歐式社會福利拖累6歐洲一體化進程5民主政治的異化:2歐債危機形成原因1261.歐元區(qū)內(nèi)部機制：協(xié)調(diào)機制運作不暢，預(yù)防機制不健全,致使救助希臘的計劃遲遲不能出臺，導(dǎo)致危機持續(xù)惡化。

2.整體經(jīng)濟實力薄弱：遭受危機的國家大多財政狀況欠佳，政府收支不平衡在歐元區(qū)內(nèi)部存在嚴重的結(jié)構(gòu)失衡問題，地域經(jīng)濟水平的差異和經(jīng)濟結(jié)構(gòu)差異導(dǎo)致債務(wù)危機國家的競爭力削弱；

3.歐元體制天生弊端：作為歐洲經(jīng)濟一體化組織，歐洲央行主導(dǎo)各國貨幣政策大權(quán)，歐元具有天生的弊端，經(jīng)濟動蕩時期，無法通過貨幣貶值等政策工具，因而只能通過舉債和擴大赤字來刺激經(jīng)濟,《穩(wěn)定與增長公約》沒有設(shè)立退出機制；2債務(wù)危機形成原因主要原因1274.歐式社會福利拖累：高福利制度異化與人口老齡化，希臘等國高福利政策沒有建立在可持續(xù)的財政政策之上(凱恩斯主義財政政策的長期濫用)，歷屆政府為討好選民，盲目為選民增加福利，導(dǎo)致赤字擴大、公共債務(wù)激增，償債能力遭到質(zhì)疑。

5.民主政治的異化:6.歐盟內(nèi)部：德國堅定地致力于構(gòu)建“一體化”歐洲的戰(zhàn)略，法國有相同的意向，但同時也希望通過“歐洲一體化”來遏制德國。德法有足夠的經(jīng)濟實力和雄厚的財力在歐債危機之初，甚至現(xiàn)在在很短時間內(nèi)疚可遏制危機蔓延并予以解決。之所以久拖不決，其根本目的在于借歐債危機之“機”，整頓財政紀律（特別市預(yù)算權(quán)），迫使成員國部分讓出國家財政主權(quán)，以建立統(tǒng)一的歐洲財政聯(lián)盟，在救助基金及歐洲央行的配合下，行使歐元區(qū)“財政部”的職能，以便加速推進歐洲一體化進程2債務(wù)危機形成原因主要原因1281評級機構(gòu)2財務(wù)造假3積稅與就業(yè)4EU引起威脅2債務(wù)危機形成原因關(guān)于評級機構(gòu)及其他129二、1.評級機構(gòu):美國三大評級機構(gòu)則落井下石，連連下調(diào)希臘等債務(wù)國的信用評級。(2009年10月20日，希臘政府宣布當年財政赤字占國內(nèi)生產(chǎn)總值的比例將超過12%，遠高于歐盟設(shè)定的3%上限。隨后，全球三大評級公司相繼下調(diào)希臘主權(quán)信用評級，歐洲主權(quán)債務(wù)危機率先在希臘爆發(fā)。)至此，國際社會開始擔心，債務(wù)危機可能蔓延全歐，由此侵蝕脆弱復(fù)蘇中的世界經(jīng)濟。2財務(wù)造假埋下隱患：希臘因無法達到《馬斯特里赫特條約》所規(guī)定的標準，即預(yù)算赤字占GDP3%、政府負債占GDP60%以內(nèi)的標準，于是聘請高盛集團進行財務(wù)造假，以順利進入歐元區(qū)。3.稅基與就業(yè)不樂觀：經(jīng)濟全球化深度推進帶來稅基萎縮與高失業(yè)4．歐盟的威脅：馬歇爾計劃催生出的歐共體，以及在此基礎(chǔ)上形成的歐盟，超出了美國最初的戰(zhàn)略設(shè)定，一個強大的足以挑戰(zhàn)美元霸主地位的歐元有悖于美國的戰(zhàn)略目標。

2債務(wù)危機形成原因關(guān)于評級機構(gòu)及其他1301歐盟峰會成果（2011.10）2歐盟峰會成果（2011.12）3宋鴻兵3解救方案131一、銀行體系注資問題

3解救方案之10月峰會歐盟被迫采取一系列措施提供流動性，借以穩(wěn)定銀行體系：歐洲央行聯(lián)合美聯(lián)儲、英國央行、日本央行和瑞士央行在3個月內(nèi)向歐洲銀行提供無限量貸款；歐洲央行重啟抵押資產(chǎn)債券的收購；歐洲央行重新發(fā)放12個月期銀行貸款。在此次峰會上，歐盟領(lǐng)導(dǎo)人達成一致，要求歐洲90家主要商業(yè)銀行在2012年6月底前必須將資本金充足率提高到9%。銀行國別資本補充額度（單位：億歐元）希臘300西班牙262意大利147葡萄牙78法國88德國52總計約10601323解救方案之10月峰會二、EFSF擴容問題實現(xiàn)“EFSF的杠桿化操作”，即以目前現(xiàn)有資金向高比例債券提供擔保，主要分為兩種方式：方式一：按20-25%的比例，用EFSF剩余資金額度為新發(fā)債券提供“信用增級”，投資者購買債券時可以購買“風險保險”，從而使債券獲得EFSF的擔保，當債券出現(xiàn)違約損失時，債權(quán)人可以從EFSF獲得至少20%的面值補償；方式二：依托EFSF成立“特別用途工具”（也有稱“特別用途投資工具”，縮寫為SPV/SPIV），吸納歐盟以外民間或主權(quán)基金以充實EFSF可用資金額度。1333解救方案之10月峰會三、希臘主權(quán)債務(wù)減記問題歐盟和IMF：1090億歐元援助貸款銀行等私人投資者：自愿減記21%私人債僅減記幅度第二輪救助計劃所需資金21%252050%114060%1090私人債僅減記幅度與第二輪救助希臘計劃所需資金對比1343解救方案之12月峰會一、達成“新財政協(xié)議”財政協(xié)議的主要內(nèi)容包括：1.政府預(yù)算應(yīng)實現(xiàn)平衡或盈余，年度結(jié)構(gòu)性赤字不得超過名義GDP的0.5%；2