臨床病原體檢測

臨床病原體檢測第1頁，課件共30頁，創(chuàng)作于2023年2月第一節(jié)標(biāo)本的采集運送、

實驗室評價和檢查方法臨床病原體檢查的基本程序1.醫(yī)生、護(hù)士、病人、檢驗師：正確采集運送標(biāo)本。2.檢驗科：直接鏡檢、免疫學(xué)和分子生物檢測、病原體分離培養(yǎng)鑒定、藥敏實驗——報告結(jié)果。3.醫(yī)生：明確診斷、合理用藥。第2頁，課件共30頁，創(chuàng)作于2023年2月第一節(jié)標(biāo)本的采集運送、

實驗室評價和檢查方法一、標(biāo)本采集和運送標(biāo)本采集的基本原則1.無菌、及時、按照要求、標(biāo)注清晰2.根據(jù)病史與臨床表現(xiàn)確定標(biāo)本采集的類型與部位，盡量采集病變明顯部位標(biāo)本。3.在發(fā)病的早期或急性期采集標(biāo)本，最好在抗生素使用前（如使用過抗生素應(yīng)在申請單上注明）。4.采集標(biāo)本防止污染，并置于無菌容器，加蓋密封、立即送檢。5.標(biāo)本必須貼上標(biāo)簽，與檢驗申請單同時送檢。第3頁，課件共30頁，創(chuàng)作于2023年2月第一節(jié)標(biāo)本的采集運送、

實驗室評價和檢查方法（一）血液1.適應(yīng)癥：疑似菌血癥、敗血癥或膿毒血癥的病人。2.一般在抗生素使用前，于發(fā)熱初期或高峰期采血，已用過抗菌藥物治療者，在下次用藥前采集。3.血液與培養(yǎng)基的比例為1：10，一般成人血量10-20ml，嬰兒1-5ml，最好在床邊接種。第4頁，課件共30頁，創(chuàng)作于2023年2月第一節(jié)標(biāo)本的采集運送、

實驗室評價和檢查方法（二）尿液1.無菌采集中段尿2.如考慮厭氧菌感染，采取膀胱穿刺法采集標(biāo)本、無菌厭氧小瓶運送。

3.排尿困難者考慮導(dǎo)尿采集標(biāo)本。第5頁，課件共30頁，創(chuàng)作于2023年2月第一節(jié)標(biāo)本的采集運送、

實驗室評價和檢查方法（三）糞便1.自然排便，挑取膿、血或粘液部分于清潔容器中送檢。2.排便困難者，采用直腸拭子采集。3.根據(jù)細(xì)菌種類不同選用合適的運送培養(yǎng)液。第6頁，課件共30頁，創(chuàng)作于2023年2月第一節(jié)標(biāo)本的采集運送、

實驗室評價和檢查方法（四）呼吸道標(biāo)本1.類型：鼻咽拭子、痰和經(jīng)氣管采集的標(biāo)本。2.上呼吸道存在正常菌群，在采集標(biāo)本與結(jié)果分析時應(yīng)予考慮。3.痰標(biāo)本：⑴采集時間：晨痰，且在取痰前用清水反復(fù)漱口。⑵方法：①自然咳痰②氣管鏡下采集法③氣管穿刺法第7頁，課件共30頁，創(chuàng)作于2023年2月第一節(jié)標(biāo)本的采集運送、

實驗室評價和檢查方法（五）腦脊液與其它無菌體液1.腦脊液由臨床醫(yī)生采用腰椎穿刺，抽取2-3ml，置于無菌容器中立即保溫送檢或床邊接種。2.胸水、腹水和心包液等標(biāo)本宜采集較大量標(biāo)本送檢，標(biāo)本接種于血培養(yǎng)瓶。第8頁，課件共30頁，創(chuàng)作于2023年2月第一節(jié)標(biāo)本的采集運送、

實驗室評價和檢查方法（六）眼、耳部標(biāo)本用拭子采樣，也可在局部麻醉后取角膜刮屑。第9頁，課件共30頁，創(chuàng)作于2023年2月第一節(jié)標(biāo)本的采集運送、

實驗室評價和檢查方法（七）泌尿生殖道標(biāo)本1.男性：無菌采集尿道口分泌物或前列腺液。2.女性：用無菌棉纖采集陰道或?qū)m頸分泌物。第10頁，課件共30頁，創(chuàng)作于2023年2月第一節(jié)標(biāo)本的采集運送、

實驗室評價和檢查方法（八）創(chuàng)面、組織和膿腫標(biāo)本1.大面積創(chuàng)傷的創(chuàng)面分泌物：首先清除采集部位的污物，以碘酒、酒精消毒皮膚，再用無菌棉纖多點采取膿液或分泌物，置于無菌試管中送檢。2.開放性膿腫及膿性分泌物：用無菌棉纖采取膿液或病灶深部分泌物3.封閉性膿腫：局部消毒后，用注射器抽取，懷疑厭氧菌感染，應(yīng)隔絕空氣采集（九）血清第11頁，課件共30頁，創(chuàng)作于2023年2月第一節(jié)標(biāo)本的采集運送、

實驗室評價和檢查方法三、檢查方法（一）直接顯微鏡檢查（二）病原體特異性抗原的檢測（三）病原體核酸的檢測（四）病原體的分離培養(yǎng)與鑒定（五）血清學(xué)實驗第12頁，課件共30頁，創(chuàng)作于2023年2月第一節(jié)標(biāo)本的采集運送、

實驗室評價和檢查方法革蘭氏陽性球菌革蘭氏陰性桿菌第13頁，課件共30頁，創(chuàng)作于2023年2月第一節(jié)標(biāo)本的采集運送、

實驗室評價和檢查方法墨汁染色找新型隱球菌

抗酸染色第14頁，課件共30頁，創(chuàng)作于2023年2月第一節(jié)標(biāo)本的采集運送、

實驗室評價和檢查方法不染色標(biāo)本：用于觀察病原體的大小、形態(tài)與運動等特性。結(jié)果評價：部分病原體可借此初步診斷，如暗視野顯微鏡下見彈簧狀螺旋體，應(yīng)懷疑梅毒螺旋體的感染。第15頁，課件共30頁，創(chuàng)作于2023年2月第一節(jié)標(biāo)本的采集運送、

實驗室評價和檢查方法明確感染病原體。為臨床提供體外抗微生物藥物敏感試驗結(jié)果。第16頁，課件共30頁，創(chuàng)作于2023年2月第三節(jié)臨床感染常見病原體檢查一、流行病學(xué)和臨床類型（一）流行病學(xué)流行病學(xué)的特點：（1）疾病譜發(fā)生變遷（2）多重耐藥株出現(xiàn)（3）器官移植、抗腫瘤化療和放療的開展

第17頁，課件共30頁，創(chuàng)作于2023年2月第三節(jié)臨床感染常見病原體檢查（二）臨床類型臨床常見病原體為：細(xì)菌、病毒、支原體、衣原體、立克次體、真菌、螺旋體以及寄生蟲等細(xì)菌感染是發(fā)病率較高的感染性疾病，病原體種類以革蘭氏陰性條件致病菌、凝固酶陰性葡萄球菌、耐甲氧西林葡萄球菌和耐藥的白色念珠菌為主。病毒感染是人群發(fā)病率最高的感染類型第18頁，課件共30頁，創(chuàng)作于2023年2月第三節(jié)臨床感染常見病原體檢查二、檢查項目和臨床應(yīng)用（一）細(xì)菌感染：⑴檢測細(xì)菌或其抗原---直接涂片鏡檢、培養(yǎng)、抗原檢測⑵檢測抗體⑶檢測細(xì)菌遺傳物質(zhì)---基因探針技術(shù)、PCR技術(shù)細(xì)菌培養(yǎng)是最重要的確診方法（二）病毒感染：病毒分離與鑒定、病毒核酸與抗原檢測、特異性抗體細(xì)胞培養(yǎng)是最常用的病毒分離方法第19頁，課件共30頁，創(chuàng)作于2023年2月第三節(jié)臨床感染常見病原體檢查（三）真菌感染：直接顯微鏡檢查、分離培養(yǎng)、免疫學(xué)試驗和動物試驗、核酸雜交和PCR技術(shù)形態(tài)學(xué)檢查是真菌檢測的重要手段第20頁，課件共30頁，創(chuàng)作于2023年2月第三節(jié)臨床感染常見病原體檢查（四）寄生蟲病：直接顯微鏡檢查是寄生蟲感染的主要診斷依據(jù)第21頁，課件共30頁，創(chuàng)作于2023年2月第三節(jié)臨床感染常見病原體檢查（五）其它病原體感染1.支原體：分離培養(yǎng)是支原體感染的確診依據(jù)。目前臨床多檢測支原體抗原與核酸，用于早期快速診斷。2.螺旋體：血清學(xué)3.立克次體：血清學(xué)、分離培養(yǎng)、核酸檢測4.衣原體：直接顯微鏡檢查、分離培養(yǎng)、DNA探針技術(shù)和PCR技術(shù)，目前臨床多檢測衣原體抗原與核酸，用于早期快速診斷。5.SARS病毒：免疫學(xué)方法檢測抗體、基因檢測、細(xì)胞培養(yǎng)第22頁，課件共30頁，創(chuàng)作于2023年2月第三節(jié)臨床感染常見病原體檢查（六）實驗結(jié)果分析和臨床應(yīng)用正常人群的無菌體液中檢測到細(xì)菌，應(yīng)考慮細(xì)菌為感染的病原體。存在正常菌群的標(biāo)本檢測到細(xì)菌，應(yīng)結(jié)合細(xì)菌的量考慮是否為致病菌。如臨床表現(xiàn)支持感染，但培養(yǎng)陰性，應(yīng)考慮為標(biāo)本不合格、培養(yǎng)不恰當(dāng)、病原體為難培養(yǎng)菌或已使用抗生素等因素，尤其是直接鏡檢找到病原體，而培養(yǎng)陰性，應(yīng)考慮有L細(xì)菌、厭氧菌或苛氧菌感染。第23頁，課件共30頁，創(chuàng)作于2023年2月第三節(jié)臨床感染常見病原體檢查PCR是檢測病原體微生物最靈敏的方法，但具有一定的假陽性與假陰性。陽性只表明存在某種病原體的核酸，是否正被感染應(yīng)結(jié)合臨床具體分析。血清學(xué)試驗是目前應(yīng)用最廣泛的感染性疾病檢測方法，特異性IgM可作為感染性疾病的早期診斷指標(biāo)，且可區(qū)分原發(fā)與復(fù)發(fā)感染。特異性IgG，尤其雙份血清的滴度呈4倍或4倍以上升高，考慮病原體感染。第24頁，課件共30頁，創(chuàng)作于2023年2月第四節(jié)病毒性肝炎標(biāo)志物檢測

一、甲型肝炎病毒標(biāo)志物檢測（一）甲型肝炎病毒抗原測定【臨床意義】1.HAVAg陽性：見于甲肝患者（二）甲型肝炎病毒抗體測定【臨床意義】IgM陽性是特異性早期診斷指標(biāo)，提示HAV感染期；IgA陽性見于甲肝早期和急性期；IgG陽性出現(xiàn)于恢復(fù)期且持久存在，是獲得免疫力的標(biāo)志，提示既往感染。（三）HAV-RNA測定【臨床意義】HAV-RNA陽性：對早期診斷具有特異性第25頁，課件共30頁，創(chuàng)作于2023年2月第四節(jié)病毒性肝炎標(biāo)志物檢測

二、乙型肝炎病毒標(biāo)志物檢測（一）乙肝六項測定

1.HBsAg【臨床意義】

陽性見于乙型肝炎潛伏期和急性期；發(fā)病后3個月不轉(zhuǎn)陰，易發(fā)展成慢性乙型肝炎或肝硬化；攜帶者HBsAg也呈陽性。

2.抗HBs【臨床意義】是保護(hù)性抗體，提示機(jī)體有一定免疫力。第26頁，課件共30頁，創(chuàng)作于2023年2月第四節(jié)病毒性肝炎標(biāo)志物檢測3.HBeAg【臨床意義】陽性表明乙型肝炎處于活動期，是病毒復(fù)制活躍，傳染性強(qiáng)的指標(biāo)；持續(xù)陽性易轉(zhuǎn)變?yōu)槁愿窝谆蚋斡不?.抗HBe【臨床意義】出現(xiàn)于急性感染的恢復(fù)期，持續(xù)時間較長。意味著HBV部分被清除或抑制，復(fù)制減少，傳染性降低第27頁，課件共30頁，創(chuàng)作于2023年2月第四節(jié)病毒性肝炎標(biāo)志物檢測5.

HBcAg:陽性提示有感染性的HBV存在，含量較多表示復(fù)制活躍，傳染性強(qiáng)，預(yù)后較差6.抗HBc：主要包括IgM、IgG、IgA。

(1).抗HBc總抗體：檢出率比HBsAg更敏感，可作為HBsAg陰性的HBV感染的敏感指標(biāo)

(2).抗HBcIgM：是最早出現(xiàn)的特異性抗體，是診斷急性乙型肝炎和判斷病毒復(fù)制活躍的指標(biāo)，并提示病人的血液有強(qiáng)傳染性。

(3）.抗HBcIgG：是HBV既往感染的指標(biāo)，不是早期診斷指標(biāo)第28頁，課件共30頁，創(chuàng)作于2023年2月第四節(jié)