中華米蝦對(duì)高錳酸鉀耐受性的研究獲獎(jiǎng)科研報(bào)告

中華米蝦對(duì)高錳酸鉀耐受性的研究獲獎(jiǎng)科研報(bào)告摘要：水產(chǎn)養(yǎng)殖在中國(guó)非常普遍，水產(chǎn)養(yǎng)殖常用的消毒劑就有高錳酸鉀（Potassiumpermanganate），其溶液具有較強(qiáng)的消毒，殺菌和防腐的作用。既能消毒殺菌又能促進(jìn)植物生長(zhǎng)。因此，高錳酸鉀是一種肥藥兼用的殺菌劑。

據(jù)了解，該藥品各地藥店均有銷售，且價(jià)格便宜，采購(gòu)也比較方便。因此，高錳酸鉀在我們的生活中較為常見。然而，高錳酸鉀使用不當(dāng)也會(huì)給很多水產(chǎn)動(dòng)物造成危害。

本文以中華新米蝦（Neocaridinadenticulatasinensis）為研究對(duì)象，主要探究高錳酸溶液對(duì)中華新米蝦的毒性作用。主要實(shí)驗(yàn)方法是將中華新米蝦成蝦放置在濃度為3mg/L-12mg/L的1L高錳酸鉀溶液中。設(shè)置兩個(gè)平行組，每個(gè)濃度每組里面放置6只中華新米蝦。實(shí)驗(yàn)期間配置好溶液并將中華新米蝦放入容器后，將實(shí)驗(yàn)室窗簾拉上。盡量避免光照對(duì)高錳酸鉀的影響。分別記錄24h、48h、72h以及96h后，不同濃度高錳酸鉀溶液對(duì)蝦的致死個(gè)數(shù)，從而計(jì)算出不同時(shí)間的致死率。然后通過excel工具得到一元方程式。計(jì)算出24h、48h、72h、96h的半致死濃度分別為8.24mg/L、6.76mg/L、5.94mg/L和5.32mg/L。

結(jié)果表明：高錳酸鉀溶液濃度高于5.32mg/L時(shí)會(huì)嚴(yán)重影響中華新米蝦的健康。

關(guān)鍵詞：中華新米蝦；高錳酸鉀；半致死濃度

1緒論

高錳酸鉀（PotassiumPermanganate）又稱錳酸鉀，俗稱灰錳氧、PP粉。分子式KMnO?，分子量158.04.顏色呈深紫色，帶有藍(lán)色的金屬光澤。為棱形的長(zhǎng)條狀結(jié)晶顆粒。高錳酸鉀易溶于水，以及甲醇、丙酮等有機(jī)溶劑。其溶液見光易失效。由于高錳酸鉀價(jià)格低廉，采購(gòu)方便，在殺滅原蟲，單殖吸蟲類等寄生蟲有著顯著的成效，而且副作用極小。因此是一種既經(jīng)濟(jì)又安全的漁藥。

中華新米蝦（Neocaridinadenticulatasinensis）屬甲殼綱、十足目、匙指蝦科、米蝦屬。主要分布于我國(guó)的稻田，溪流、池塘等淡水水域[1]?？墒秤靡部勺鳛轲D料，是一種小型的經(jīng)濟(jì)蝦。其生命力強(qiáng)，繁殖快。由于其分布廣，產(chǎn)量大，是一種很好的實(shí)驗(yàn)動(dòng)物。

2材料與方法

2.1實(shí)驗(yàn)材料

2.1.1受試動(dòng)物及試劑

實(shí)驗(yàn)所用的中華新米蝦購(gòu)自江蘇省徐州市銅山新區(qū)文沃市場(chǎng)。中華新米蝦個(gè)體小，體長(zhǎng)約2.5厘米左右。全身為墨綠色，其背面中央有一道不規(guī)則棕色的斑紋。5對(duì)步足，前2對(duì)步足呈鉗狀，螯的兩指內(nèi)面凹陷，略呈匙狀。中華新米蝦買回來后，立即放在塑料水族箱（50cm×40cm×40cm）中飼養(yǎng)。實(shí)驗(yàn)用水為曝氣24小時(shí)的自來水，每?jī)商鞊Q一次水。所換水也是為曝氣24小時(shí)的自來水。實(shí)驗(yàn)時(shí)均取用個(gè)體大小均勻，健康活潑，反應(yīng)靈敏的個(gè)體。高錳酸鉀溶液取自江蘇師范大學(xué)泉山校區(qū)4號(hào)樓304實(shí)驗(yàn)室。經(jīng)鑒定，所用高錳酸鉀性質(zhì)正常，沒有失效。

2.1.2實(shí)驗(yàn)儀器與條件

主要儀器：電子分析天平，人工培養(yǎng)箱（24cm×13cm×8cm），塑料水族箱（50cm×40cm×40cm），蒸餾水，膠頭滴管，250ml量筒，100ml量筒，大燒杯，1L容量瓶、玻璃棒、放大鏡、捕蝦網(wǎng)等。

實(shí)驗(yàn)條件：實(shí)驗(yàn)在人工培養(yǎng)箱（24cm×13cm×8cm）中進(jìn)行，實(shí)驗(yàn)用水為蒸餾水，首先進(jìn)行預(yù)實(shí)驗(yàn)。實(shí)驗(yàn)過程中保持實(shí)驗(yàn)室窗簾關(guān)閉狀態(tài)。實(shí)驗(yàn)溶液的體積為1L，每個(gè)培養(yǎng)箱內(nèi)放入6只中華新米蝦。每隔24h觀察一次結(jié)果。

母液配制：實(shí)驗(yàn)使用的高錳酸鉀溶液現(xiàn)配現(xiàn)用，不保存，以防止高錳酸鉀失效。實(shí)驗(yàn)時(shí)，稱取50mg高錳酸鉀，溶于1000ml蒸餾水中。充分溶解，搖勻，作為母液待用。

2.2實(shí)驗(yàn)方法

在進(jìn)行正式實(shí)驗(yàn)之前，先進(jìn)行預(yù)實(shí)驗(yàn)，得到高錳酸鉀對(duì)中華新米蝦全部死亡和全部存活的濃度范圍[5]。設(shè)定5個(gè)濃度，分別為1mg/L、5mg/L、10mg/L、15mg/L、20mg/L。根據(jù)預(yù)實(shí)驗(yàn)的結(jié)果，正式實(shí)驗(yàn)的濃度為3mg/L-12mg/L。設(shè)置一個(gè)實(shí)驗(yàn)組和兩個(gè)平行組，在每個(gè)實(shí)驗(yàn)組中放入等數(shù)目的米蝦（6只），分別記錄24h、48h、72h、96h后的死亡個(gè)數(shù)并計(jì)算出死亡率，并以濃度和死亡率分別為X、Y軸繪制出統(tǒng)計(jì)圖。最后可使用excel工具使用線性預(yù)測(cè)做出趨勢(shì)線。并根據(jù)趨勢(shì)線求得一元線性回歸方程，計(jì)算出各個(gè)時(shí)間段所對(duì)應(yīng)的LC50[6]。每一輪實(shí)驗(yàn)結(jié)束后都要將培養(yǎng)箱以及其他實(shí)驗(yàn)器材清洗干凈，培養(yǎng)箱要將其內(nèi)壁的高錳酸鉀清洗干凈才能進(jìn)行下一輪實(shí)驗(yàn)。全部實(shí)驗(yàn)結(jié)束后，要將實(shí)驗(yàn)器材和試劑放回原處。培養(yǎng)箱要擺放整齊，并清理實(shí)驗(yàn)室衛(wèi)生。

2.3計(jì)算方法

預(yù)實(shí)驗(yàn)死亡率：直接根據(jù)實(shí)驗(yàn)結(jié)果計(jì)算米蝦的死亡率。

正式實(shí)驗(yàn)階段：

死亡率：分別計(jì)算出實(shí)驗(yàn)組和平行組的死亡率，然后求其平均值并以此值作為該濃度的致死率。

一元線性回歸方程：在Excel表中繪制好統(tǒng)計(jì)圖后，做出趨勢(shì)線并直接得到回歸方程。

LC50：根據(jù)一元線性回歸方程，將Y=50%帶入求的對(duì)于時(shí)間點(diǎn)的X值即為半數(shù)致死濃度。

判斷其死亡的標(biāo)準(zhǔn)為：多次用玻璃棒碰觸靜置與培養(yǎng)箱箱底的蝦，完全無反應(yīng)即判定為死亡[7]。

3結(jié)果與分析

3.1預(yù)實(shí)驗(yàn)結(jié)果

用50mg/L的母液配制1mg/L、5mg/L、10mg/L、15mg/L、20mg/L，總體積為1L的實(shí)驗(yàn)液，混合均勻后各放入體型大小近似且健康有活力的米蝦3只，24小時(shí)后觀察其死亡數(shù)量分別為0個(gè)、0個(gè)、3個(gè)及3個(gè)。

根據(jù)以上實(shí)驗(yàn)結(jié)果，可初步確定全致死最低濃度在15mg/L以下，縮小濃度范圍，分別為1mg/L、2mg/L、3mg/L、4mg/L、5mg/L、6mg/L、7mg/L、8mg/L、9mg/L、10mg/L，24h后觀察其死亡數(shù)量分別為0個(gè)、0個(gè)、0個(gè)、1個(gè)、1個(gè)、2個(gè)、1個(gè)、2個(gè)、1個(gè)、2個(gè)。根據(jù)實(shí)驗(yàn)結(jié)果，得到24h后全部存活最高濃度為3mg/L。到此，預(yù)實(shí)驗(yàn)結(jié)束，下一步開始正式實(shí)驗(yàn)。

3.2正式實(shí)驗(yàn)結(jié)果

根據(jù)預(yù)實(shí)驗(yàn)的實(shí)驗(yàn)結(jié)果，在全活最高濃度3mg/L和全致死最低濃度15mg/L之間，等間隔設(shè)置13組實(shí)驗(yàn)組并分別設(shè)置2組平行組。配置好實(shí)驗(yàn)液并充分混合搖勻后，每個(gè)實(shí)驗(yàn)箱內(nèi)放入6只活潑，體型大