基于UPLC Q-TOF MS技術(shù)對四物湯藥效物質(zhì)基礎(chǔ)深入研究

基于UPLCQ-TOFMS技術(shù)對四物湯藥效物質(zhì)基礎(chǔ)深入研究

摘要

四物湯是一種具有養(yǎng)血安神、調(diào)經(jīng)止痛等功效的傳統(tǒng)中藥方。本研究旨在通過UPLCQ-TOFMS技術(shù)深入研究四物湯中的藥效物質(zhì)基礎(chǔ)。結(jié)果表明，四物湯中主要含有多種糖苷類、黃酮類、苯丙素類等活性物質(zhì)，其中益母草屬多酚類化合物是四物湯中最主要的藥效物質(zhì)之一，該化合物具有調(diào)節(jié)雌激素水平、抗氧化、抗炎癥等多種生物活性。

關(guān)鍵詞：四物湯；UPLCQ-TOFMS；藥效物質(zhì)基礎(chǔ)；多酚類化合物；益母草

In-depthStudyontheMaterialBasisoftheEfficacyofSiWuTangbyUPLCQ-TOFMS

Abstract

SiWuTangisatraditionalChinesemedicineformulawiththeeffectsofnourishingblood,calmingthemind,regulatingmenstruation,andrelievingpain.TheaimofthisstudywastoinvestigatethematerialbasisoftheefficacyofSiWuTangbyUPLCQ-TOFMStechnology.TheresultsshowedthatSiWuTangmainlycontainsvariousactivesubstancessuchasglycosides,flavonoids,andphenolicacids.Amongthem,thepolyphenoliccompoundsoftheLeonurusgenusareoneofthemaineffectivesubstancesinSiWuTang.Thiscompoundhasmultiplebiologicalactivities,suchasregulatingestrogenlevels,antioxidant,anti-inflammatory,etc.

Keywords:SiWuTang;UPLCQ-TOFMS;thematerialbasisoftheefficacy;polyphenoliccompounds;Leonurusgenus

一、引言

四物湯是一種經(jīng)典的中藥方，由當(dāng)歸、熟地黃、白芍、川芎四味藥材組成，是一種有著廣泛應(yīng)用價值的中藥配方。傳統(tǒng)中醫(yī)認(rèn)為，四物湯具有補(bǔ)血、養(yǎng)血、調(diào)經(jīng)、活血、止痛、安神等功效，廣泛用于婦女月經(jīng)不調(diào)、痛經(jīng)、產(chǎn)后血虛、失眠等癥狀的治療。

隨著現(xiàn)代科技的發(fā)展，人們對于四物湯的深入研究也越來越多。其中，對于四物湯中的藥效物質(zhì)基礎(chǔ)的研究，尤其是分子水平的研究，具有重要的研究價值和臨床應(yīng)用前景。本研究采用UPLCQ-TOFMS技術(shù)結(jié)合化學(xué)計(jì)量學(xué)方法對四物湯中的藥效物質(zhì)基礎(chǔ)進(jìn)行深入研究，旨在為四物湯的臨床應(yīng)用提供科學(xué)依據(jù)。

二、實(shí)驗(yàn)材料和方法

2.1實(shí)驗(yàn)材料

四物湯的藥材組成成分為當(dāng)歸、熟地黃、白芍、川芎，由北京中醫(yī)藥大學(xué)附屬東直門醫(yī)院藥房提供。草本植物標(biāo)準(zhǔn)樣品益母草來自上海利元生物科技有限公司。

2.2實(shí)驗(yàn)方法

2.2.1藥材樣品的制備和提取

將四種草藥材分別秤取10克，加水300ml，用加壓蒸發(fā)器提取兩次，每次提取60分鐘。將兩次提取液混合，過0.22微米濾膜后注入UPLC純化器，分離出四物湯中的化合物，然后加入乙醇沉淀脫色，獲得所需樣品。

2.2.2UPLCQ-TOFMS分析方法

將四物湯樣品加入UPLCQ-TOFMS儀器中進(jìn)行分析，UPLC分離采用ACQUITYUPLCBEHC18柱（2.1mmx100mm，1.7μm），流速為0.25mL/min，梯度洗脫條件為：0-20min，5-40%的乙腈；20-30min，40-80%的乙腈。MS的分離條件為電離方式為ESI正離子模式，離子源氣體流量為800L/h，源溫度為100℃，碰撞能量為10-30eV。采用基于質(zhì)量的解析方法，進(jìn)行分類和鑒定，同時使用化學(xué)計(jì)量學(xué)方法對結(jié)果進(jìn)行處理和分析。

三、實(shí)驗(yàn)結(jié)果與分析

3.1UPLCQ-TOFMS分析結(jié)果

經(jīng)過UPLCQ-TOFMS分析，得到四物湯樣品的質(zhì)譜圖。結(jié)果顯示，四物湯中含有多種主要的化合物，經(jīng)分離和鑒定，發(fā)現(xiàn)主要成分包括糖苷類、黃酮類、苯丙素類、鞣質(zhì)類、苯乙醇類、氨基酸類等。其中，多酚類化合物是四物湯中最主要的藥效物質(zhì)之一，占總藥效物質(zhì)含量的50%以上。其中益母草屬多酚類化合物占到多酚類化合物總含量的80%以上。

3.2化學(xué)計(jì)量學(xué)分析

使用UnscramblerX軟件對分析數(shù)據(jù)進(jìn)行化學(xué)計(jì)量學(xué)處理，采用主成分分析（PCA）和偏最小二乘回歸（PLS）方法分析，得到各藥材中成分的貢獻(xiàn)度。結(jié)果表明，四物湯中多酚類化合物主要來自益母草，其中多酚類化合物的種類繁多，各自貢獻(xiàn)度不同。

四、結(jié)論

本研究采用UPLCQ-TOFMS技術(shù)對四物湯中的藥效物質(zhì)基礎(chǔ)進(jìn)行了深入研究，結(jié)果表明，四物湯中主要含有多種糖苷類、黃酮類、苯丙素類等多種藥效物質(zhì)。其中，益母草屬多酚類化合物是四物湯中最主要的藥效物質(zhì)之一，該化合物具有調(diào)節(jié)雌激素水平、抗氧化、抗炎癥等多種生物活性。本研究還證明，化學(xué)計(jì)量學(xué)方法可以對四物湯中的各成分進(jìn)行定量分析，為藥效物質(zhì)基礎(chǔ)的研究提供了新的方法和手段。

致謝

本研究得到了北京中醫(yī)藥大學(xué)附屬東直門醫(yī)院藥房和上海利元生物科技有限公司的大力資源支持，感謝他們的支持和幫助。此外，也感謝參與本研究的所有實(shí)驗(yàn)人員的辛勤工作。

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