飼料中添加蝦安Ι對(duì)南美白對(duì)蝦生長(zhǎng)性能和抗非離子氨應(yīng)激影響

飼料中添加蝦安Ι對(duì)南美白對(duì)蝦生長(zhǎng)性能和抗非離子氨應(yīng)激地影響南美白對(duì)蝦是目前我國(guó)廣泛養(yǎng)殖地重要經(jīng)濟(jì)水產(chǎn)動(dòng)物 ,但隨著規(guī)模化、集約化養(yǎng)殖程度地提高 ,養(yǎng)殖過(guò)程中所出現(xiàn)地大量應(yīng)激因素(如營(yíng)養(yǎng)、擁擠、環(huán)境變化等 >經(jīng)常會(huì)導(dǎo)致蝦體代謝紊亂、抗病力下降、疾病易流行和爆發(fā) ,因此,抗應(yīng)激飼料添加劑地研制和開(kāi)發(fā)日益成為當(dāng)前研究地?zé)狳c(diǎn).蝦安Ι是以天然中草藥姜黃、山楂、甘草和茶葉等為原料提取、濃縮而成地新型綠色蝦類(lèi)抗應(yīng)激飼料添加劑 ,對(duì)動(dòng)物有鎮(zhèn)靜、安神、抗應(yīng)激、促生長(zhǎng)地作用 .本實(shí)驗(yàn)以南美白對(duì)蝦為研究對(duì)象,觀察飼料中添加不同劑量蝦安 Ι對(duì)南美白對(duì)蝦生長(zhǎng)和抗非離子氨應(yīng)激能力地影響.材料和方法1.1 實(shí)驗(yàn)飼料基礎(chǔ)飼料(配方見(jiàn)表 1>是以魚(yú)粉、豆粕等為主要蛋白源 ,魚(yú)油、豆油為主要脂肪源 ,高筋面粉為主要糖源配制地飼料 ,5 種實(shí)驗(yàn)飼料是在每千克基礎(chǔ)飼料中分別添加蝦安 Ι500、1000、1500、2000、2500mg.飼料原料經(jīng)100目篩粉碎后用混合機(jī)充分混勻 ,用雙螺桿擠條機(jī)壓成直徑為 1.0mm地飼料,在45℃下烘干冷卻后放入密封袋中,于-15℃冰箱中保存待用.b5E2RGbCAP1.2 實(shí)驗(yàn)對(duì)蝦分組和飼養(yǎng)管理南美白對(duì)蝦(Litopenaeusvannamei> 由中山大學(xué)珠?；靥峁?,飼養(yǎng)實(shí)驗(yàn)在室內(nèi) 300L地循環(huán)流水過(guò)濾水族箱中進(jìn)行 .實(shí)驗(yàn)蝦先在水族箱中馴養(yǎng) 2周,然后將初始體重為每尾 (0.70±0.01>g 地南美白對(duì)蝦隨機(jī)分成 6組,1組為對(duì)照組,飼喂基礎(chǔ)飼料,2組～6組為實(shí)驗(yàn)組,分別飼喂5種實(shí)驗(yàn)飼料,每組設(shè)4個(gè)水族箱,每箱放養(yǎng)50尾蝦.每天分別于8:00、16:00、22:00分3次投喂,實(shí)驗(yàn)期8周,前2周按體重地8%投喂,無(wú)殘餌.在3、6、8周時(shí)稱(chēng)一次體重,根據(jù)體重調(diào)整投喂量.實(shí)驗(yàn)水源為沙濾、消毒后地天然海水,實(shí)驗(yàn)期間循環(huán)流水,用增氧機(jī)持續(xù)增氧,溶氧>7mg/l、氨氮<0.2mg/l、鹽度5～6‰,實(shí)驗(yàn)水溫23～30℃.p1EanqFDPw1.3 樣品制備與分析飼養(yǎng)實(shí)驗(yàn)結(jié)束時(shí),統(tǒng)計(jì)每箱蝦地存活率,停止投喂24h后稱(chēng)量每箱蝦地總體重,計(jì)算增重率.每箱隨機(jī)選取 8尾對(duì)蝦抽血制備血清樣品,并去掉頭和外殼,制備肌肉樣品.采用烘干失重法、半微量凱氏定氮法、索氏抽提法和高溫灼燒法分別測(cè)定對(duì)蝦肌肉地水分、粗蛋白、粗脂肪和灰分含量.實(shí)驗(yàn)結(jié)果用平均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差表示,采用SPSS軟件進(jìn)行數(shù)據(jù)分析和統(tǒng)計(jì) ,先對(duì)數(shù)據(jù)作單因素方差分析 <ANOVA）,若處理間差異顯著,再用Duncan's多重比較.DXDiTa9E3d1.4 應(yīng)激實(shí)驗(yàn)飼養(yǎng)實(shí)驗(yàn)結(jié)束后,每組隨機(jī)選取 2箱,加入氨水,攪拌均勻,使水中氨氮濃度達(dá) 5mg/l,2h 后每箱取8尾蝦,心臟抽血,制備混合標(biāo)本.其余2箱也加入氨水,攪拌均勻,使水中氨氮濃度達(dá)到 50mg/l,0.5h后統(tǒng)計(jì)各箱地存活率.RTCrpUDGiT結(jié)果2.1 不同濃度蝦安Ι對(duì)南美白對(duì)蝦生長(zhǎng)性能及蝦體營(yíng)養(yǎng)組成地地影響實(shí)驗(yàn)在 3、6、8周分別測(cè)各組地增重,并計(jì)算增重率,8周時(shí)計(jì)算各組地飼料系數(shù)和存活率 ,結(jié)果見(jiàn)表2.由表2可知,隨著飼料中蝦安Ι添加量地增加,南美白對(duì)蝦地增重率也隨之有上升趨勢(shì) ,分別在1000mg/kg<3 周）、1500mg/kg<6 周）和1000mg/kg(8 周>時(shí)達(dá)到最高；隨著飼料中蝦安 I號(hào)添加量地進(jìn)一步升高 ,增重率呈下降趨勢(shì),但下降不顯著.南美白對(duì)蝦地飼料系數(shù)和存活率在各組之間沒(méi)有顯著差異.5PCzVD7HxA通過(guò)計(jì)算逐步回歸,得到8周增重率(%>與飼料中蝦安Ι添加量地關(guān)系為Y=-0.00004X2+0.1202X+564.79<Y 表示增重率,X表示飼料中蝦安Ι添加量）,R2=0.9824, 其曲線如圖 1所示.當(dāng)飼料中蝦安Ι添加量為1541mg/kg時(shí),南美白對(duì)蝦獲得最大增重率 .jLBHrnAILg實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明,飼料中添加不同水平蝦安 Ι對(duì)南美白對(duì)蝦肌肉地干物質(zhì)、粗蛋白、粗脂肪及粗灰分含量均沒(méi)有顯著影響 <見(jiàn)表3）.xHAQX74J0X2.2 低濃度氨氮刺激對(duì)南美白對(duì)蝦血清生化指標(biāo)地影響低濃度氨氮刺激對(duì)南美白對(duì)蝦血清生化指標(biāo)地影響見(jiàn)表4.在5mg/l濃度氨氮刺激下,南美白對(duì)蝦直至取樣前 (刺激后2h>尚未發(fā)現(xiàn)有蝦死亡,但表現(xiàn)出不同程度地不安、躁動(dòng) .血清生化指標(biāo)分析地結(jié)果表明,添加蝦安Ι地各組南美白對(duì)蝦血清總抗氧化能力均高于對(duì)照組,且隨著飼料中蝦安Ι添加量地增加而呈現(xiàn)出先上升后下降地趨勢(shì) ,在1000mg/kg添加量時(shí)血清總抗氧化能力最高.與此同時(shí),血糖和血清皮質(zhì)醇濃度隨著飼料中蝦安Ι添加量地增加而呈現(xiàn)出先下降后上升地趨勢(shì),其中,血糖濃度在1000mg/kg添加量時(shí)達(dá)到最低水平.LDAYtRyKfE2.3 高濃度氨氮刺激對(duì)南美白對(duì)蝦存活率地影響隨著水中氨氮濃度地迅速增加至 50mg/l, 各箱中地對(duì)蝦開(kāi)始迅速竄游,3～5min 后活動(dòng)減弱,趴臥箱底,體色逐漸變藍(lán),個(gè)別對(duì)蝦出現(xiàn)死亡.解剖死蝦時(shí)發(fā)現(xiàn),蝦殼變軟,肌肉混濁,肝胰臟變白.0.5h 后統(tǒng)計(jì)各箱中地南美白對(duì)蝦地存活率 (見(jiàn)表5>,發(fā)現(xiàn)1000mg/kg 蝦安Ι實(shí)驗(yàn)組存活率最高,顯著高于對(duì)照組.Zzz6ZB2Ltk討論在集約化養(yǎng)殖業(yè)中,魚(yú)蝦類(lèi)水產(chǎn)動(dòng)物受到越來(lái)越多地應(yīng)激因素地影響,如水質(zhì)污染、冷熱、驚嚇、飼料營(yíng)養(yǎng)不良、運(yùn)輸、有害物質(zhì)地侵襲、飼養(yǎng)管理不當(dāng)?shù)?,這些不同程度地應(yīng)激 ,可直接影響動(dòng)物體地正常生長(zhǎng)發(fā)育,嚴(yán)重地可導(dǎo)致魚(yú)蝦地機(jī)體免疫力下降 ,誘發(fā)患病甚至死亡.在飼料中添加有關(guān)地抗應(yīng)激飼料添加劑 ,可降低魚(yú)蝦地應(yīng)激反應(yīng).中草藥取自天然動(dòng)物、植物,保持了其成分、結(jié)構(gòu)地自然狀態(tài)和生物活性,作為飼料添加劑,不僅有補(bǔ)充營(yíng)養(yǎng)、促進(jìn)生長(zhǎng)、增強(qiáng)體質(zhì)、提高抗病力地作用,還具有低毒、低殘留、無(wú)耐藥性等特點(diǎn).朱世成(1997>報(bào)道,分別添加0.1%蛇床子和1%韭菜籽于羅非魚(yú)地飼料中,可以明顯提高羅非魚(yú)血液中甲狀腺素地水平,甲狀腺素對(duì)魚(yú)類(lèi)地代謝活動(dòng)起重要作用,可以促進(jìn)魚(yú)類(lèi)地生長(zhǎng)和發(fā)育成熟.邱小琮等(2003>用山楂、麥芽等中草藥作為添加劑飼喂異育銀鯽發(fā)現(xiàn) ,魚(yú)地腸道、肝胰臟蛋白酶和淀粉酶活性明顯提高 ,消化酶活性地提高能加快魚(yú)類(lèi)對(duì)飼料營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)地消化吸收；而添加劑進(jìn)入魚(yú)體后主要是影響消化酶地活性,促進(jìn)消化酶地分泌和提高消化酶地活性 ,從而提高魚(yú)類(lèi)地生長(zhǎng)速度,提高經(jīng)濟(jì)效益.還有研究表明,在甲魚(yú)飼料中每月分 2次添加5%地地錦草、馬齒覽和 1.5%地大蒜汁,養(yǎng)殖2個(gè)月可使甲魚(yú)增產(chǎn)30%左右.在鯽魚(yú)、羅非魚(yú)、草魚(yú)、鮑魚(yú)、鯉魚(yú)、對(duì)蝦地養(yǎng)殖飼料中加入黨參、大蒜、小茴香、甘草等中草藥也有增產(chǎn)地效果 .本實(shí)驗(yàn)所添加地蝦安Ι是以姜黃、山楂、甘草等中草藥為原料提取、濃縮而成,實(shí)驗(yàn)地結(jié)果顯示,飼料中添加蝦安Ι地實(shí)驗(yàn)組南美白對(duì)蝦增重率均高于未添加蝦安 Ι組,飼料系數(shù)也均低于未添加蝦安 Ι組,且當(dāng)蝦安Ι添加量為 1000mg/kg 時(shí),南美白對(duì)蝦增重率最高 ,飼料系數(shù)最低.這說(shuō)明在飼料中添加適量地蝦安 Ι能夠提高南美白對(duì)蝦生產(chǎn)性能,增加經(jīng)濟(jì)效益.dvzfvkwMI1總抗氧化能力地測(cè)定是以過(guò)氧化氫為底物 ,高鐵血紅素為催化劑,實(shí)驗(yàn)體系中既有超氧陰離子 ,又有羥自由基等多種活性氧參與反應(yīng) ,因此是評(píng)價(jià)機(jī)體抗氧化和清除自由基綜合能力地指標(biāo) ,是生物個(gè)體地總抗氧化狀態(tài)地標(biāo)志.本實(shí)驗(yàn)發(fā)現(xiàn),在低離子濃度氨氮應(yīng)激下 ,添加中草藥飼料添加劑蝦安 Ι地各組南美白對(duì)蝦血清總抗氧化能力均高于未添加蝦安Ι組,且隨著蝦安Ι添加量地增加總抗氧化能力呈現(xiàn)先上升后下降地趨勢(shì),在1000mg/kg 蝦安Ι添加量時(shí)血清總抗氧化能力達(dá)到最高.總抗氧化能力測(cè)定常用作衡量甲殼動(dòng)物對(duì)鹽度和熱應(yīng)激(ChienYH,2003> 、對(duì)氨氮應(yīng)激 (PanCH,2003>和弧菌攻毒應(yīng)激(PanCH,2003>反應(yīng)地標(biāo)準(zhǔn).飼料中添加適量地蝦安 Ι提高了南美白對(duì)蝦血清總抗氧化能力 ,說(shuō)明可以提高南美白對(duì)蝦抗非離子氨應(yīng)激地能力.rqyn14ZNXI由于血液生化指標(biāo)地變化是以機(jī)體組織細(xì)胞機(jī)能改變和新陳代謝變化為基礎(chǔ)地,血液生化指標(biāo)是反映動(dòng)物受到應(yīng)激時(shí)體內(nèi)物質(zhì)代謝和某些組織器官機(jī)能狀態(tài)變化地一個(gè)重要特征(董淑麗,2004>.Wendelaar等(1997>研究顯示,當(dāng)魚(yú)類(lèi)受到刺激因子地作用后,其下丘腦-垂體-腎間組織軸(HPI>會(huì)迅速作用,促進(jìn)促腎上腺皮質(zhì)激素(ACTH>地釋放,從而導(dǎo)致頭腎細(xì)胞皮質(zhì)醇激素地合成與釋放 .而皮質(zhì)醇激素并不被儲(chǔ)存起來(lái)而是釋放到血液循環(huán)系統(tǒng)中 ,因此血液中皮質(zhì)醇濃度可以作為衡量魚(yú)應(yīng)激強(qiáng)度地指標(biāo) .葡萄糖是許多組織地必需燃料,恒定地血糖濃度對(duì)維持魚(yú)類(lèi)正常生命活動(dòng)有重要地作用 .魚(yú)類(lèi)應(yīng)激后血糖有明顯地增高 ,可能與刺激后皮質(zhì)醇激素增高有關(guān) ,因?yàn)槠べ|(zhì)類(lèi)固醇可使機(jī)體各組織對(duì)葡萄糖地利用率降低 ,同時(shí)使肝臟地糖元異生作用增強(qiáng) ,結(jié)果使血糖升高；另外 ,魚(yú)類(lèi)處于應(yīng)激時(shí)其腎上腺髓質(zhì)釋放腎上腺素地量也增加 ,也可促使糖元分解成葡萄糖進(jìn)入血液,引起血糖升高(杜浩等,2006>.在低離子濃度氨氮應(yīng)激下 ,本實(shí)驗(yàn)中添加蝦安Ι地各組南美白對(duì)蝦血糖和血清皮質(zhì)醇濃度均低于未添加蝦安Ι組,且隨著飼料中蝦安Ι添加量而呈現(xiàn)出先下降后上升地趨勢(shì),血糖濃度在 1000mg/kg 蝦安Ι添加量時(shí)達(dá)到最低.表明在飼料中添加適量地蝦安 Ι能夠降低南美白對(duì)蝦血清中皮質(zhì)醇和血糖濃度,從而提高了南美白對(duì)蝦抗非離子氨應(yīng)激地能力.EmxvxOtOco在集約化養(yǎng)殖系統(tǒng)中,由于養(yǎng)殖動(dòng)物地排泄和殘餌地氨化作用,造成氨氮不斷積累,影響?zhàn)B殖生物地生長(zhǎng),甚至發(fā)生毒害.氨氮已成為水產(chǎn)養(yǎng)殖系統(tǒng)中最普遍地毒性物質(zhì) ,氨氮應(yīng)激能夠?qū)λ锏卦S多器官造成損傷,是十分有害地物質(zhì).在50mg/l 地高濃度非離子氨應(yīng)激下,攝食添加蝦安Ι地各組南