遺傳實(shí)驗(yàn)課總結(jié)培訓(xùn)課件

遺傳實(shí)驗(yàn)課總結(jié)2）預(yù)處理：a：目的：為了有利于對(duì)有絲分裂中染色體的觀察和計(jì)數(shù)，在固定之前應(yīng)用理化因素進(jìn)行預(yù)處理，這樣可以改變細(xì)胞質(zhì)的粘度，抑制或破壞紡錘絲的形成，促使染色體縮短和分散等。b：預(yù)處理方法：低溫預(yù)處理：剪取黑麥根尖放入盛有蒸餾水的指形管中，再將指形管置于冰水共存的冰瓶中，將冰瓶置0-3度冰箱處理24小時(shí)。染色體數(shù)較多的材料可適當(dāng)延長(zhǎng)處理時(shí)間。2遺傳實(shí)驗(yàn)課總結(jié)３）固定：a:目的：采用各種滲透力強(qiáng)的固定液將植物的組織、細(xì)胞迅速殺死，使蛋白質(zhì)沉淀并盡量保持其原有狀態(tài)。b:固定液的配制：Carnoy’s固定液:冰醋酸：純酒精＝1:3固定時(shí)間：24hr3遺傳實(shí)驗(yàn)課總結(jié)4）解離、染色解離：酸解法；用清水沖洗根尖幾次，將根放入1mol/L鹽酸溶液中。解離是為了使胞間連絲離解掉，使細(xì)胞分散，便于壓片。染色：染液：醋酸洋紅將根取出后，用清水沖洗幾次，沖掉殘留在組織間地酸。用醋酸洋紅染色。

5）制片取一條根置于載玻片上，切取根尖分生組織約0.5mm，大小2-3段—加一滴醋酸洋紅—蓋上蓋玻片—用挑針尖輕敲根尖材料成霧狀—用拇指輕壓材料—鏡檢4遺傳實(shí)驗(yàn)課總結(jié)減數(shù)分裂偶線期：同源染色體相互縱向靠攏配對(duì)，稱為聯(lián)會(huì)。這樣聯(lián)會(huì)的一對(duì)同源染色體，稱為二價(jià)體。偶線期所表現(xiàn)的這一特征時(shí)間很短，一般較難觀察到。粗線期：配對(duì)后的染色體逐漸縮短變粗，含有兩條姐妹染色單體，這樣一個(gè)二價(jià)體中就包含了四條染色單體，故又稱為四合體。在此期間各同源染色體的非姐妹染色單體間可能發(fā)生片段交換。5遺傳實(shí)驗(yàn)課總結(jié)中期Ⅰ：核仁和核膜消失，所有二價(jià)體排列在赤道板兩側(cè)，細(xì)胞質(zhì)里出現(xiàn)紡錘體，每個(gè)二價(jià)體的兩條染色體的著絲點(diǎn)分別趨向紡錘體的兩極，此時(shí)最適于計(jì)數(shù)染色體的數(shù)目和觀察各染色體的形態(tài)特征。第一次減數(shù)分裂后期完成染色體數(shù)目的減半。6遺傳實(shí)驗(yàn)課總結(jié)二分體：減數(shù)分裂末期I出現(xiàn)，一個(gè)細(xì)胞分裂形成兩個(gè)染色體數(shù)目減半的子細(xì)胞。四分體：減數(shù)分裂II末期形成，最終形成四個(gè)配子。7遺傳實(shí)驗(yàn)課總結(jié)1.取材及固定：取材的時(shí)間及材料大小必須十分恰當(dāng)，才能獲得更多的花粉母細(xì)胞分裂相，以供觀察。蠶豆：蠶豆現(xiàn)蕾后，于上午8～10時(shí)（視氣溫而定，但必須在上午11時(shí)前）摘取莖頂有效花序，將周圍小葉與苞葉去掉，將花苞放入卡諾固定液中。減數(shù)分裂8遺傳實(shí)驗(yàn)課總結(jié)2.染色制片：取出經(jīng)固定的花苞，至于吸水紙上，吸去保存液或固定液，移至載玻片上，剝出花藥。用解剖針截?cái)嗷ㄋ?。輕輕擠壓，使花粉母細(xì)胞在切口處散出。滴一小滴醋酸洋紅染色液。用鑷子把藥壁夾碎——將細(xì)胞壁殘?jiān)ァo置染色5～10mim——再蓋上蓋玻片——后用挑針背部或鉛筆橡皮頭處輕敲——用拇指壓片——鏡檢9遺傳實(shí)驗(yàn)課總結(jié)10遺傳實(shí)驗(yàn)課總結(jié)11遺傳實(shí)驗(yàn)課總結(jié)12遺傳實(shí)驗(yàn)課總結(jié)果蠅唾腺染色體的觀察

13遺傳實(shí)驗(yàn)課總結(jié)雙翅目昆蟲的幼蟲期都具有很大的唾腺細(xì)胞。因?yàn)檫@些細(xì)胞發(fā)育到一定階段后就不再進(jìn)行有絲分裂，停止在間期。但是染色質(zhì)還是不斷地復(fù)制，形成約1000~4000拷貝的染色質(zhì)絲，比普通的有絲分裂中期的染色體大得多，稱為多線染色體和巨大染色體。14遺傳實(shí)驗(yàn)課總結(jié)巨大，是多線染色體；

正常：間期DNA復(fù)制兩條染色單體著絲點(diǎn)裂開(kāi)子染色體核分裂胞質(zhì)分裂果蠅：有絲分裂停止在分裂間期，DNA不斷自我復(fù)制，著絲點(diǎn)不裂開(kāi)同源染色體緊密配對(duì)：體細(xì)胞聯(lián)會(huì)，所以染色體只呈現(xiàn)單倍數(shù)；形成染色中心，從染色體中心處伸出5條長(zhǎng)臂，1條短臂；染色后，出現(xiàn)一系列寬窄不同、染色深淺不一的橫紋。

這些橫紋的數(shù)目、位置、寬窄及排列順序都具有種的特異性。一旦染色體上發(fā)生了缺失，重復(fù)，倒位，易位等，也可較容易地在唾腺染色體上觀察識(shí)別出來(lái)。可見(jiàn)唾腺染色體技術(shù)是遺傳學(xué)研究中一項(xiàng)基本的技術(shù)。

果蠅唾腺染色體特點(diǎn)：15遺傳實(shí)驗(yàn)課總結(jié)16遺傳實(shí)驗(yàn)課總結(jié)1、幼蟲選取果蠅的三齡幼蟲活體當(dāng)幼蟲爬上瓶壁準(zhǔn)備化蛹前，即為三齡幼蟲。肥大、行動(dòng)遲緩。一齡幼蟲兩齡幼蟲三齡幼蟲17遺傳實(shí)驗(yàn)課總結(jié)取三齡幼蟲，置于載玻片上，并滴加一滴生理鹽水，觀察幼蟲結(jié)構(gòu)：具一鈍尾和帶黑色口器的尖頭端

18遺傳實(shí)驗(yàn)課總結(jié)2、腺體剖?。?/p>

取兩支解剖針，一針壓住幼蟲身體的近頭端1/3處，固定幼蟲，另一針壓住幼蟲頭部，壓點(diǎn)盡可能靠頭部口器處。將解剖針平穩(wěn)前移，使頭部與身體拉開(kāi)，口器部分?jǐn)嚅_(kāi)，體內(nèi)各器官?gòu)那锌跀D出，一對(duì)唾腺也隨之而出。

唾腺脂肪體解剖針解剖針19遺傳實(shí)驗(yàn)課總結(jié)3染色：用1%醋酸洋紅染色10~20min。4

壓片：用鉛筆輕輕敲蓋片幾下，然后用拇指壓片。5鏡檢：先在低倍鏡下找到染色體分散良好的圖像，再在高倍鏡下仔細(xì)觀察唾腺染色體的特征。20遺傳實(shí)驗(yàn)課總結(jié)21遺傳實(shí)驗(yàn)課總結(jié)22遺傳實(shí)驗(yàn)課總結(jié)果蠅的雜交試驗(yàn)果蠅作為遺傳學(xué)研究的材料的優(yōu)點(diǎn)23遺傳實(shí)驗(yàn)課總結(jié)生活史的觀察24遺傳實(shí)驗(yàn)課總結(jié)

圖3-1

果蠅生活史

1．卵

2．一齡幼蟲

3．二齡幼蟲

4．三齡幼蟲

5．蛹

6．成蟲(雄)

7．成蟲(雌)

25遺傳實(shí)驗(yàn)課總結(jié)雌雄果蠅的比較：

1．體型

雌果蠅體型較大，雄果蠅較??；

2．腹部末端

雌性腹部橢圓，末端稍尖，雄性末端鈍圓；

3．腹部背面

雌性有明顯5條黑色條紋，雄性有三條，前兩條細(xì)，后一條寬，延至腹面，肉眼看其腹部末端呈現(xiàn)一明顯黑點(diǎn)。

4．腹部腹面

雌性有較明顯的6個(gè)腹片，雄性有4個(gè)腹片。

5．性梳

雄性第一對(duì)足的跗節(jié)基部外側(cè)有黑色鬃毛狀性梳（圖3-3），雌性則無(wú)。

性梳的有無(wú)，是鑒別雌雄性果蠅的明顯標(biāo)志之一。

26遺傳實(shí)驗(yàn)課總結(jié)左：雄性果蠅的左前足

中：跗節(jié)基部的性梳

右：雌果蠅無(wú)性梳

27遺傳實(shí)驗(yàn)課總結(jié)白眼紅眼眼色性狀28遺傳實(shí)驗(yàn)課總結(jié)翅形性狀長(zhǎng)翅小翅29遺傳實(shí)驗(yàn)課總結(jié)剛毛性狀直剛毛卷剛毛30遺傳實(shí)驗(yàn)課總結(jié)我們實(shí)驗(yàn)課涉及的果蠅類型：黑體：黑體、紅眼、長(zhǎng)翅、直剛毛三隱性：灰體、白眼、小翅、卷剛毛野生型：灰體、紅眼、長(zhǎng)翅、直剛毛31遺傳實(shí)驗(yàn)課總結(jié)處女蠅因?yàn)榇乒壣称鞴儆惺芫?，可保存交配所得的大量的精子，能使大量的卵?xì)胞受精。因此，在做果蠅雜交實(shí)驗(yàn)的時(shí)候，親本雌果蠅必須是處女蠅，保證實(shí)驗(yàn)結(jié)果的可靠性。

雌果蠅自羽化開(kāi)始12小時(shí)之內(nèi)尚未成熟而無(wú)交配能力。選擇處女蠅時(shí)，先把培養(yǎng)瓶中的老果蠅全部除去，收集12小時(shí)之內(nèi)羽化出來(lái)的新果蠅，麻醉后用放大鏡在白瓷板上將果蠅雌雄分開(kāi)，這時(shí)得到的雌果蠅應(yīng)該全部都是處女蠅。

如果要驗(yàn)證選取的處女蠅是否準(zhǔn)確，先不要放入雄蠅，3天后看雌蠅是否產(chǎn)卵，如果產(chǎn)卵就不是處女蠅了。當(dāng)證明確實(shí)是處女蠅的情況下再放入雄蠅，進(jìn)行遺傳雜交實(shí)驗(yàn)。32遺傳實(shí)驗(yàn)課總結(jié)分離規(guī)律一對(duì)等位基因的雜合子中，各自保持其獨(dú)立性，在配子形成時(shí)，彼此分開(kāi)，隨機(jī)進(jìn)入不同的配子，在一般情況下：F1雜合子的配子分離比例為：1:1；F2表型分離比是3:1；F2基因型分離比為1:2:1。自由組合定律支配兩對(duì)（或兩對(duì)以上）不同性狀的等位基因，在雜合狀態(tài)保持其獨(dú)立性。配子形成時(shí)，各等位基因彼此獨(dú)立分離，不同對(duì)的基因自由組合。在一般情況下，F(xiàn)1配子分離比是1:1:1:1；F2基因型分離比：（1:2:1）2,F2表型比為：9:3:3:1。33遺傳實(shí)驗(yàn)課總結(jié)伴性遺傳由性染色體所攜帶的基因在遺傳時(shí)與性別相聯(lián)系的遺傳方式。34遺傳實(shí)驗(yàn)課總結(jié)

正交:♀黑體(eeX+X+)×♂三隱性(EEXWY)F1♀♂灰體紅眼(EeX+XW,EeX+Y)F2(灰紅:灰白:黑紅:黑白)

兩對(duì)性狀的獨(dú)立遺傳實(shí)驗(yàn)35遺傳實(shí)驗(yàn)課總結(jié)反交:♀三隱性(EEXWXW)×♂黑體(eeX+Y)F1:

♀灰體紅眼:♂灰體白眼

(EeX+XW:EeXWY)F2:灰紅:灰白:黑紅:黑白36遺傳實(shí)驗(yàn)課總結(jié)對(duì)于果蠅兩對(duì)性狀的獨(dú)立遺傳實(shí)驗(yàn)：正交組合F2代的性狀表現(xiàn)：灰體紅眼:灰體白眼:黑體紅眼:黑體白眼＝9:3:3:1反交組合F2代的性狀表現(xiàn)：灰體紅眼:灰體白眼:黑體紅眼:黑體白眼＝3:3:1:137遺傳實(shí)驗(yàn)課總結(jié)伴性遺傳正交:黑體(X+X+)×三隱性(XwY)F1X+Xw×X+YF2X+X+X+YX+XwXwY38遺傳實(shí)驗(yàn)課總結(jié)反交：三隱性(XwXw)×黑體(X+Y)XwX+×XwY

XwXwX+YX+XwXwY39遺傳實(shí)驗(yàn)課總結(jié)連鎖遺傳

XwsnmXwsnm（三隱性）×X+++Y（野生型）

F1（三雜合體）XwsnmX+++

，

XwsnmY（三隱性）

配子X(jué)wsnm,

X+++,Xw+m,X+sn+Xwsn+,X++m,X+snm,Xw++

×

Xwsnm

Y

姊妹交

Ft眼色w、剛毛sn、翅形m（三點(diǎn)測(cè)驗(yàn)）

41遺傳實(shí)驗(yàn)課總結(jié)對(duì)于果蠅連鎖遺傳實(shí)驗(yàn)：眼色、剛毛和翅型基因在X染色體上的排列順序以及相互間的遺傳距離可以參考書本98－102頁(yè)。42遺傳實(shí)驗(yàn)課總結(jié)實(shí)驗(yàn)結(jié)果分析相符：不相符合的原因：由于果蠅麻醉過(guò)渡，致使群體數(shù)量有限；雌雄果蠅的發(fā)育不同步，雌果蠅相對(duì)發(fā)育的比較快，而雄果蠅發(fā)育的比較慢；果蠅雌雄識(shí)別以及性狀的鑒別可能有誤。43遺傳實(shí)驗(yàn)課總結(jié)果蠅實(shí)驗(yàn)果蠅的優(yōu)點(diǎn)：果蠅的雌雄識(shí)別：伴性遺傳的特點(diǎn)：自己設(shè)計(jì)實(shí)驗(yàn)驗(yàn)證獨(dú)立分配規(guī)律和伴性遺傳規(guī)律：一定要清楚自己設(shè)計(jì)的實(shí)驗(yàn)中所涉及的性狀位于哪個(gè)染色體上：如控制果蠅眼色（紅眼和白眼）的基因位于性染色體X上，控制果蠅剛毛（直和卷剛毛）的基因位于性染色體X上，控制果蠅翅型（長(zhǎng)和小翅）的基因位于性染色體X上，控制果蠅體色（灰體和黑體）的基因位于常染色體上。注意控制果蠅殘翅的基因位于常染色體上。44遺傳實(shí)驗(yàn)課總結(jié)另外，根據(jù)果蠅的生活史一定要寫出詳細(xì)的實(shí)驗(yàn)步驟以及注意事項(xiàng)。45遺傳實(shí)驗(yàn)課總結(jié)適合度檢驗(yàn)46遺傳實(shí)驗(yàn)課總結(jié)卡方測(cè)驗(yàn)：測(cè)定實(shí)測(cè)值與理論值間符合程度的一種統(tǒng)計(jì)方法。遺傳研究中，雜交后代中各種類型的個(gè)體數(shù)往往與理論預(yù)期有一定的偏差。這種偏差主要是由于兩種原因造成：一是由于群體小而產(chǎn)生的機(jī)會(huì)偏差，另一是由于遺傳原因造成的本質(zhì)差異，若要判定是機(jī)會(huì)誤差還是本質(zhì)差異，就需要進(jìn)行卡方測(cè)驗(yàn)。47遺傳實(shí)驗(yàn)課總結(jié)通常首先建立無(wú)效假說(shuō)，即認(rèn)為觀測(cè)值與理論值的差異是由于隨機(jī)誤差所致；再確定由于隨機(jī)誤差而導(dǎo)致該特定差異的概率；最后根據(jù)該概率作出相應(yīng)的結(jié)論，如該概率大于某特定概率標(biāo)準(zhǔn)（即顯著水準(zhǔn)，生物統(tǒng)計(jì)學(xué)上一般定為0.05），則認(rèn)為無(wú)效假設(shè)成立，即實(shí)測(cè)值與理論值的差異是由于隨機(jī)誤差引起的，進(jìn)而得出實(shí)驗(yàn)值與理論值相符合的結(jié)論。48遺傳實(shí)驗(yàn)課總結(jié)χ2的計(jì)算公式為：

（o-e）2χ2=∑——————e公式中o是實(shí)際觀察值，e為理論預(yù)期值，∑為積加符號(hào)。df自由度，等于類型數(shù)減1。

49遺傳實(shí)驗(yàn)課總結(jié)如自由度（df）等于1，需要矯正：將觀察值與理論值之差的絕對(duì)值應(yīng)減去校正數(shù)0.5，上式可寫為：

（|o-e|-0.5）2χ2=∑——————e50遺傳實(shí)驗(yàn)課總結(jié)

根據(jù)計(jì)算的χ2值，自由度，查χ2表中的概率，所得相應(yīng)概率P>5%，即χ2<χ20.05，即認(rèn)為觀察值與理論值相符，偏差是誤差引起的。如相應(yīng)概率P≤5%，即χ2≥χ20.05，認(rèn)為觀察值與理論值不相符，實(shí)驗(yàn)結(jié)果不符合原有理論預(yù)期值。判斷方