第五章-血漿脂蛋白-課件

核酸蛋白質(zhì)化學(xué)1ppt課件第五章血漿脂蛋白動(dòng)脈粥樣硬化（atherosclerosis,AS）是危害人類(lèi)健康的常見(jiàn)疾病之一，它以血管平滑肌細(xì)胞增生和血脂在粥樣斑塊沉積為特征動(dòng)脈粥樣硬化與血漿脂蛋白（lipoprotein,LP）代謝密切相關(guān)2ppt課件第一節(jié)脂蛋白的分類(lèi)和功能第二節(jié)載脂蛋白第三節(jié)脂蛋白代謝3ppt課件第一節(jié)脂蛋白的分類(lèi)和功能

血漿中所含脂類(lèi)統(tǒng)稱(chēng)為血脂血脂包括非極性：甘油三脂（TG）、膽固醇脂（CE）極性：游離膽固醇（FC）、磷脂（PL）和脂肪酸（FA）按來(lái)源分可分成外源性（食物消化吸收）和內(nèi)源性（體內(nèi)合成）兩類(lèi)一、脂蛋白的結(jié)構(gòu)和組成4ppt課件血脂不溶于水，在血漿中和載脂蛋白（apoprotein,Apo）組成脂蛋白（lipoprotein,Lp）的形式轉(zhuǎn)運(yùn)成熟血漿脂蛋白呈球狀，其核心組分為甘油三脂和膽固醇脂，表面組分為載脂蛋白、游離膽固醇和磷脂游離膽固醇和磷脂的極性基團(tuán)暴露在顆粒表面，非極性碳鏈則指向核心。因此血漿脂蛋白顆粒能順利在血漿中運(yùn)輸5ppt課件ApoB100膽固醇脂磷脂游離膽固醇血漿脂蛋白顆粒的結(jié)構(gòu)6ppt課件載脂蛋白表面具有特殊的兩性α螺旋結(jié)構(gòu)帶電、親水性氨基酸殘基組成螺旋極性面暴露在外，而不帶電疏水氨基酸殘基組成非極性面與內(nèi)部脂質(zhì)相互作用，起著穩(wěn)定血漿脂蛋白結(jié)構(gòu)的作用帶正電的堿性氨基酸殘基主要分布于極性面交界處，而帶負(fù)電酸性氨基酸集中在極性面中間，從而在溶液中呈特殊的立體兩性離子載脂蛋白兩性α螺旋是血漿脂蛋白能結(jié)合轉(zhuǎn)運(yùn)脂質(zhì)的結(jié)構(gòu)基礎(chǔ)7ppt課件兩性α

螺旋8ppt課件載脂蛋白分子表面的兩性α螺旋9ppt課件二、脂蛋白分類(lèi)1.正常血漿脂蛋白正常血漿脂蛋白分成四大類(lèi)共6

種。由于所含脂類(lèi)及載脂蛋白的不同，其顆粒大小、密度、表面電荷、電泳遷移率及免疫原性均有不同用超速離心法分析，從上到下依次為乳糜微粒（CM）、極低密度脂蛋白（VLDL）、低密度脂蛋白（LDL）和高密度脂蛋白（HDL）10ppt課件11ppt課件中密度脂蛋白（IDL）是VLDL代謝中間產(chǎn)物，其密度及組成均介于VLDL和LDL之間HDL

按其組成和密度不同又可劃分成HDL2

和HDL3CM顆粒最大，密度最小。按VLDL、LDL和HDL順序，顆粒逐步縮小，密度則增加CM和VLDL富含甘油三脂，其中CM含ApoB48,VLDL含ApoB100；LDL富含膽固醇脂，其中95%以上的載脂蛋白是ApoB100；HDL富含磷脂和ApoA12ppt課件各類(lèi)脂蛋白0.951.0061.021.101.101.20204060801000密度(g/ml)直徑(nm)VLDL510IDLVLDL乳糜殘粒HDL3HDL2乳糜微粒LDL13ppt課件富含甘油三酯的脂蛋白(乳糜微粒，VLDL)CHYLOMICRONVLDLTRIGLYCERIDECHOLESTERYLESTERSPHOSPHOLIPIDSFREECHOLESTEROLPROTEINS90~95%50~65%2~4%8~14%2~6%12~16%~1%4~7%1~2%6~10%80~1000nm30~80nm乳糜極低密度脂蛋白甘油三酯膽固醇酯磷脂游離膽固醇蛋白質(zhì)14ppt課件富含膽固醇的脂蛋白（LDL/HDL)LDLHDLTRIGLYCERIDECHOLESTERYLESTERSPHOSPHOLIPIDSFREECHOLESTEROLPROTEINS5~6%22~26%35~45%6~15%22~25%~7%10~20%25%~5%~45%20~25nm8~13nm低密度脂蛋白高密度脂蛋白甘油三酯膽固醇脂磷酯游離膽固醇蛋白質(zhì)15ppt課件2.異常血漿脂蛋白在特殊情況下，血漿也可出現(xiàn)異常脂蛋白，如β-VLDL、HDLc、HDL1和HDL3B等β-VLDL

是高膽固醇飲食引起的一種異常脂蛋白。與正常VLDL相比，其密度相似，但瓊脂糖電泳較慢HDLC和HDL1

是富含ApoE和CE的特大顆粒HDL。由于缺乏血漿脂質(zhì)轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白，導(dǎo)致CE在HDL中大量堆積而形成HDL1。高CE飲食可誘導(dǎo)HDLC生成HDL3B是高TG血癥時(shí)出現(xiàn)的小顆粒異常血漿LP。在高TG時(shí)，HDL-CE與VLDL-TG過(guò)度交換，而HDL-TG大量被肝性脂酶(HL)水解,使HDL的大量核心脂質(zhì)丟失16ppt課件3.脂蛋白（a）脂蛋白(a)[Lp(a)]與AS密切相關(guān)，其結(jié)構(gòu)又與纖溶酶原極其相似，從而受到高度重視Lp(a)的脂質(zhì)組分與LDL極其相似，除了ApoB100外，還含有獨(dú)特的Apo(a)。Lp(a)分子中Apo(a)與Apo100通過(guò)二硫鍵共價(jià)結(jié)合，用還原劑巰基乙醇可還原得到LDL和Apo(a)。有關(guān)其代謝及濃度影響因素還甚少了解17ppt課件4.修飾脂蛋白LDL可以被Cu2+或Fe3+、巨噬細(xì)胞、血管內(nèi)皮細(xì)胞、平滑肌細(xì)胞及血小板修飾，生成?；疞DL

和氧化LDL(ox-LDL)。氧化修飾過(guò)程由氧自由基介導(dǎo)，使脂蛋白結(jié)構(gòu)、組成和生物學(xué)特性發(fā)生明顯變化修飾LDL可通過(guò)清道夫受體被巨噬細(xì)胞吞噬，促進(jìn)巨噬細(xì)胞轉(zhuǎn)變?yōu)榕菽?xì)胞，因而具有強(qiáng)烈致AS作用。HDL被氧化修飾后其抗AS能力顯著下降18ppt課件第二節(jié)載脂蛋白

至今已從人血漿中分離出的載脂蛋白有18種之多，主要有ApoA、B、C、E

四大類(lèi)下表簡(jiǎn)單介紹了常見(jiàn)載脂蛋白的重要生物學(xué)特性一、分類(lèi)19ppt課件Apo分子量血漿濃度合成部位血漿分布主要功能基因定位其他A-Ⅰ28,3311.0~1.2小腸、肝HDL、CM激活LCAT,11號(hào)染色體識(shí)別HDL受體A-Ⅱ8,707×20.3~0.5小腸、肝

HDL、CM抑制LCAT,1號(hào)激活HLA-Ⅳ46,000~0.6小腸HDL、CM激活LCAT11號(hào)糖蛋白B100549,0000.7~1.0肝VLDL、IDL、識(shí)別LDL受體2號(hào)糖蛋白

LDL磷蛋白B48264,000小腸CM轉(zhuǎn)運(yùn)CM

C-Ⅰ6,5500.04~0.06肝

CM、VLDL激活LCAT,19號(hào)

HDL抑制HLC-Ⅱ8,8370.03~0.05肝CM、VLDL激活LPL,19號(hào)

HDL抑制HLC-Ⅲ8,2400.12~0.14肝CM、VLDL抑制LPL,抑制Apo11號(hào)糖蛋白

HDL與E受體結(jié)合D32,500~0.1?d>1.21部分轉(zhuǎn)運(yùn)膽固醇3號(hào)糖蛋白E34,1450.025~0.05肝、CM、VLDL識(shí)別受體19號(hào)糖蛋白巨噬細(xì)胞HDLH50,000~0.2肝VLDL、LDL激活LPL,17號(hào)糖蛋白抑制凝血J75,000~0.1肝及肝外HDL脂質(zhì)轉(zhuǎn)運(yùn)8號(hào)糖蛋白組織補(bǔ)體調(diào)節(jié)(a)500,000不定肝Lp(a)抑制纖溶6號(hào)糖蛋白

20ppt課件二、載脂蛋白的結(jié)構(gòu)和基因ApoA族ApoB

族ApoC族ApoEApo(a)ApoHApoJ21ppt課件1.ApoA族HDL的主要載脂蛋白成熟的人ApoA-I分子量為28.3kDa,其分子為單一的多肽鏈。經(jīng)聚焦雙向電泳發(fā)現(xiàn)Apo-AI有6種分子量大致相等而等電點(diǎn)各異的異構(gòu)體，分別命名為ApoAI1至ApoAI6，其等電點(diǎn)依次為6.50、5.85、5.74、5.64、5.52及5.40人類(lèi)Apo-AI基因位于第11號(hào)染色體長(zhǎng)臂末端區(qū)域內(nèi)(11q-13qter)。人Apo-AI基因由3個(gè)內(nèi)含子和4個(gè)外顯子組成?；蜷L(zhǎng)1863bp,含3個(gè)插入序列①ApoA-I22ppt課件ApoA-I帶子模型ApoA-I與HDL顆粒結(jié)合23ppt課件②ApoA-ⅡApoA-Ⅱ是HDL的第二種主要載脂蛋白人ApoA-Ⅱ由77個(gè)氨基酸組成。血漿ApoA-Ⅱ以二聚體形式存在，兩個(gè)單體分子通過(guò)Cys6以二硫鍵共價(jià)結(jié)合。有5種多態(tài)型，其pI

分別為4.20、4.42、4.68、4.9和5.7，以4.9型最為常見(jiàn)人Apo-AIImRNA長(zhǎng)473個(gè)堿基,它含有一個(gè)58堿基的5’不翻譯區(qū)。人類(lèi)和鼠的ApoAII基因定位于1號(hào)染色體上(1p21-qter)。含有4個(gè)外顯子和3個(gè)內(nèi)含子

24ppt課件③ApoA-ⅣApo-AIV是一種酸性糖蛋白,分子量46kDa。ApoA-Ⅳ的多態(tài)型為ApoA-Ⅳ0和ApoA-Ⅳ1-7共8種，以A-Ⅳ1和A-Ⅳ2為常見(jiàn)AIV至少以3種方式存在:(1)與ApoAI

和少量的ApoE

一起組成HDL;(2)作為單一的載脂蛋白構(gòu)成HDL;(3)與少量的膽固醇和磷脂結(jié)合,以游離狀態(tài)存在于脂蛋白缺乏的血漿中

人ApoAIV

基因與ApoAI

及ApoCIII

基因連鎖,位于第11號(hào)染色體上。ApoAIV

基因由2603個(gè)堿基組成,包括2個(gè)內(nèi)含子和3個(gè)外顯子25ppt課件2.ApoB

族

ApoB

是一類(lèi)在分子量、免疫性和代謝上具有多態(tài)性的蛋白質(zhì),依其分子量及所占百分比可分為B100、B48、B74、B26及少量B50。在正常情況下,以ApoB100和ApoB48較為重要ApoB100是其基因的全序列轉(zhuǎn)錄產(chǎn)物。成熟B100含糖4-9%,分子量約550kDa,是迄今所知最大的哺乳類(lèi)蛋白分子。其氨基酸順序于1986年已闡明,它由4,536個(gè)氨基酸殘基組成的單一多肽鏈。ApoB100具有不在各脂蛋白顆粒間發(fā)生交換的特點(diǎn)。ApoB100基因位于2號(hào)染色體的短臂上(2p23),基因總長(zhǎng)度為43kb,由29個(gè)外顯子和28個(gè)內(nèi)含子構(gòu)成ApoB48

是CM中的主要載脂蛋白，因其分子量是B100的48%而得名26ppt課件3.ApoC族是載脂蛋白中分子量最小的一類(lèi)按其C末端氨基酸不同分成3個(gè)亞類(lèi)：

①ApoC-I②ApoC-Ⅱ③ApoC-Ⅲ27ppt課件①ApoC-I分子最小、堿性最強(qiáng)的載脂蛋白。C-I的cDNA

含430bp，由此推測(cè)其一級(jí)結(jié)構(gòu)為由83個(gè)氨基酸殘基組成的多肽（包括N端信號(hào)肽）。經(jīng)水解切除信號(hào)肽后轉(zhuǎn)變成57肽的成熟ApoC-I位于第19號(hào)染色體，由4個(gè)外顯子和3個(gè)內(nèi)含子組成，全長(zhǎng)4,374bp28ppt課件②ApoC-Ⅱ人Apo-CII為含79個(gè)氨基酸殘基的單鏈多肽,分子量為9.1kDa

ApoCII基因與Apo-CI、ApoE基因成簇排列,位于19號(hào)染色體長(zhǎng)臂q13區(qū)。ApoCII基因長(zhǎng)3,320bp,含4個(gè)外顯子和3個(gè)內(nèi)含子29ppt課件③ApoC-ⅢApoCIII是一種水溶性低分子量蛋白質(zhì),由79個(gè)氨基酸殘基組成,分子量為8.7kDa

ApoCIII基因位于第11號(hào)染色體長(zhǎng)q23區(qū),它與ApoAI、ApoAIV基因緊密連鎖,共同組成一個(gè)基因家族。ApoCIII基因長(zhǎng)3,133bp,含有3個(gè)插入序列,并有4個(gè)外顯子和3個(gè)內(nèi)含子30ppt課件4.ApoEApoE是一個(gè)含有299個(gè)氨基酸結(jié)合有磷脂的糖蛋白。單多肽鏈，含有10-12%的精氨酸?？梢栽诟鞣N組織中合成,但以肝臟為主

ApoE具有多態(tài)性。受一個(gè)基因位點(diǎn)上3個(gè)等位基因控制，ApoE有3種異構(gòu)體（E2、E3

和E4

）和6種表型：3種純合子（E2/2、E3/3、和E4/4）和3種雜合子（E2/3、E2/4、和E3/4）。E2/2

的受體結(jié)合活性為正常的1%以下31ppt課件ApoE的二級(jí)結(jié)構(gòu)中含有較多的α-螺旋。ApoE除具有與LDL受體結(jié)合的能力外,還可以與ApoE受體結(jié)合。ApoE受體只能與ApoE結(jié)合,它只存在于肝臟

ApoE基因定位于19號(hào)染色體上。ApoE基因由3,597個(gè)核苷酸組成,含有4個(gè)外顯子和3個(gè)內(nèi)含子

32ppt課件5.Apo（a）Apo(a)是Lp(a)中特有的載脂蛋白。Lp(a)是一獨(dú)立存在的脂蛋白系統(tǒng),其脂質(zhì)成份和LDL極為相似,而其蛋白質(zhì)部分由ApoB100和富含神經(jīng)氨酸的Apo(a)組成。在完整Lp(a)顆粒中二者以二硫鍵共價(jià)相連,其比例因人而異,可為二比一,一比二或一比一。糖的含量較高,約為ApoB的6倍

Apo(a)的分子量為503kDa,含有27個(gè)Kingle

結(jié)構(gòu),約4,529個(gè)氨基酸。Apo(a)分子由三個(gè)結(jié)構(gòu)域組成:疏水性信號(hào)肽、KringleIV(可以15-37次重復(fù))和kringleV

Apo(a)分子的多態(tài)性受一組位于第6號(hào)染色體上的等位基因(LPf、LPb、LPs1、LPs2、Lps3、LPs4、LPs0)控制

33ppt課件6.ApoHMr

為43,000~5,000，由326個(gè)氨基酸組成，富含脯氨酸和半胱氨酸，含有5個(gè)N連接的寡聚糖側(cè)鏈，含糖量高達(dá)19%，單鏈ApoH在結(jié)構(gòu)上具有獨(dú)特性。其二級(jí)結(jié)構(gòu)主要是β折疊而α螺旋很少。在水溶液中不能自身締合人ApoH第17號(hào)染色體。ApoH多態(tài)性取決于ApoH的4個(gè)等位基因（ApoH

1、ApoH

2、ApoH

3

和ApoH

4）。以常染色體顯性遺傳模式編碼3種純合子（ApoH

1/1、ApoH

2/2

和ApoH

3/3）和4種雜合子（ApoH

1/2

、ApoH

1/3、ApoH

2/3和ApoH

4/2

）34ppt課件7.ApoJ

ApoJ是一種與人血漿HDL和極高密度脂蛋白(VHDL)相結(jié)合的糖蛋白，是Mr

為70,000的二聚體ApoJ與大鼠硫酸化糖蛋白-2(SGP-2)及牛糖蛋白Ⅲ的結(jié)構(gòu)有高度同源性，與人血清蛋白質(zhì)SP4040（人補(bǔ)體細(xì)胞溶解抑制物，CLI）為同一物質(zhì)ApoJ由α、β兩條鏈通過(guò)5對(duì)二硫鍵連接而成。有7個(gè)糖基化位點(diǎn)，含糖量為32%（α鏈）和26%（β鏈）。α和β鏈中各含兩個(gè)富含堿性氨基酸可結(jié)合肝素的片段?；蚨ㄎ辉诘?號(hào)染色體35ppt課件三、載脂蛋白的功能1.維持脂蛋白的結(jié)構(gòu)載脂蛋白作為一種結(jié)構(gòu)蛋白，在組建脂蛋白中起決定作用。載脂蛋白分子中特有的兩性α螺旋結(jié)構(gòu)是與脂質(zhì)相互作用、穩(wěn)定脂蛋白結(jié)構(gòu)的基礎(chǔ)36ppt課件

2.調(diào)節(jié)酶活性脂蛋白酶（LPL）、肝性脂酶（HL）和卵磷脂：膽固醇?；D(zhuǎn)移酶（LCAT）是血漿脂蛋白代謝的三個(gè)關(guān)鍵酶，它們的活性受載脂蛋白的調(diào)節(jié)LPL和LCAT活性分別需要ApoA-Ⅱ和ApoA-Ⅰ的激活，ApoC-Ⅲ則抑制LPL活性。體內(nèi)ApoC-Ⅱ/ApoC-Ⅲ比值可調(diào)節(jié)LPL活性，是控制VLDL和CM脂解的關(guān)鍵因素。ApoC-Ⅳ和ApoC-I也呈現(xiàn)一定的激活LCAT能力，而A-Ⅱ可抑制LCATHL的活性雖不需要載脂蛋白，但ApoA-Ⅱ呈現(xiàn)一定的激活HL能力，而ApoC-I、ApoC-Ⅱ則可抑制HL37ppt課件3.作為配體識(shí)別和結(jié)合各自的脂蛋白受體ApoB100是LDL受體的配體ApoE是LDL受體和LDL受體相關(guān)蛋白（LRP）的配體ApoA-I是HDL受體的配體ApoC-Ⅲ抑制ApoE與受體的結(jié)合38ppt課件4.作為一種“程序劑”調(diào)控脂蛋白代謝脂質(zhì)在血漿中轉(zhuǎn)運(yùn)和代謝受載脂蛋白調(diào)控。脂質(zhì)和載脂蛋白結(jié)合組成脂蛋白，恰如給脂質(zhì)編上了程序。載脂蛋白猶如一種程序劑(programmer)，通過(guò)調(diào)節(jié)酶活性和受體活性而調(diào)控脂蛋白代謝39ppt課件第三節(jié)脂蛋白代謝一、脂蛋白代謝的關(guān)鍵酶二、脂蛋白受體三、脂蛋白代謝的過(guò)程40ppt課件一、脂蛋白代謝的關(guān)鍵酶Mr

為50,000-70,000。廣泛分布于肝外組織：主要有脂肪組織和心肌、乳腺；其次為腎上腺、肌肉和肺等。LPL在實(shí)質(zhì)細(xì)胞內(nèi)合成，定位于毛細(xì)血管內(nèi)皮細(xì)胞表面行使其功能LPL基因位于第8對(duì)染色體，含30kb，有10個(gè)外顯子，9個(gè)內(nèi)含子。由cDNA

測(cè)得人LPL含475個(gè)氨基酸。哺乳動(dòng)物有87%~94%的cDNA

序列相同，說(shuō)明LPL基因在進(jìn)化上較為保守1.脂蛋白脂酶（LPL）41ppt課件LPL活性調(diào)節(jié)①ApoC-Ⅱ激活LPL，ApoC-Ⅲ抑制LPL。ApoC-Ⅱ/ApoC-Ⅲ比值是調(diào)節(jié)LPL活性、控制CM和VLDL脂解速率的最重要因素②凝血酶對(duì)LPL可產(chǎn)生最迅速持久的激活作用，胞外Ca2+是凝血酶激活LPL所必需③胰島素刺激LPL合成、釋放并激活LPL42ppt課件LPL活性調(diào)節(jié)（續(xù)）④TG中脂肪酸種類(lèi)也是調(diào)節(jié)LPL活性的重要因素之一。作為L(zhǎng)PL最適TG底物的脂肪酸順序是：?jiǎn)蝺r(jià)不飽和脂肪酸（18：1）>多價(jià)不飽和脂肪酸（18：2）>飽和脂肪酸（16：0）⑤基因突變可導(dǎo)致LPL缺陷和活性喪失。Gly142、Ala176、Gly188、Ile194、Leu207和Arg243是維持LPL結(jié)構(gòu)完整和催化活性所必需的43ppt課件2.肝性脂酶（HL）由肝實(shí)質(zhì)細(xì)胞合成，Mr53,000，是由476氨酸組成的糖蛋白。定位于肝竇周間隙(Dissespace)內(nèi)皮細(xì)胞表面和竇周間腔面的肝細(xì)胞微絨毛表面，在腎上腺及卵巢中也能檢測(cè)到肝源性HL存在。HL基因位于第15染色體。HL同時(shí)具有甘油三酯脂酶和磷脂酶活性HL有兩個(gè)結(jié)構(gòu)域：N端的催化區(qū)和C端結(jié)合細(xì)胞表面多糖的區(qū)域44ppt課件HL和LPL的相同點(diǎn)和不同點(diǎn)

相同點(diǎn)

不同點(diǎn)①都具有水解TG活性,Ser參與它們的活性中心②都帶正電，通過(guò)靜電作用與細(xì)胞表面帶負(fù)電的硫酸肝素蛋白聚糖（HSPG）相結(jié)合③都具有兩條N連接的糖鏈

HLLPL定位肝臟肝外細(xì)胞毛細(xì)血管壁

ApoC-Ⅱ激活不依賴依賴高鹽（1mol/L）激活抑制及魚(yú)精蛋白作用底物

CM殘粒、

CM、VLDLIDL和HDL二者免疫原性不同此外，性激素是HL活性最重要的的生理調(diào)節(jié)因素45ppt課件

HL在脂蛋白代謝中的功能促進(jìn)肝臟攝取CM和VLDL殘粒。HL作為殘粒結(jié)合部位提高殘粒與肝細(xì)胞受體親和力，促進(jìn)殘粒的受體內(nèi)吞參與肝臟選擇性攝取HDL-CE過(guò)程，促進(jìn)HDL2轉(zhuǎn)化成HDL3參與IDL向LDL代謝轉(zhuǎn)化過(guò)程46ppt課件3.卵磷脂：膽固醇?；D(zhuǎn)移酶（LCAT）LCAT在肝臟合成分泌而存在于血漿中，Mr6,000，由416個(gè)氨基酸組成。血漿濃度4~8mg/l，活性為每小時(shí)70~100μmol/ml可分為幾個(gè)功能區(qū)

①活性中心，由Ser181羥基和2個(gè)游離巰基（Cys31和Cys184）組成。LCAT在還原狀態(tài)下才具有最大活性，其活性至少需要一個(gè)游離巰基

②糖基化部位，4個(gè)（Asn20、84、272和384），含糖量25%

③二硫鍵區(qū)，由Cys50、Cys74和Cys313、Cys356分別形成2個(gè)二硫鍵。二硫鍵在維持LCAT活性中心結(jié)構(gòu)、使Cys31趨近Ser181并參與活性中心中是必需的47ppt課件LCAT催化的反應(yīng)48ppt課件LCAT的活性調(diào)節(jié)ApoC-Ⅰ是LCAT最重要的激活劑。ApoA-Ⅳ、A-Ⅱ、C和E，甚至能形成兩性螺旋的一些人工多肽也能激活LCATHDL脂質(zhì)尤其是表面脂質(zhì)組成對(duì)LCAT活性有很大影響。LCAT活性隨PL/FC比值升高而增大，TG/CE比值升高則抑制LCAT活性49ppt課件LCAT功能LCAT是體內(nèi)膽固醇逆向轉(zhuǎn)運(yùn)的一個(gè)關(guān)鍵部分。代謝動(dòng)力學(xué)研究表明，膽固醇循環(huán)清除速率的數(shù)量級(jí)與LCAT酯化反應(yīng)速率相同。這意味著LCAT可能是血漿膽固醇代謝的限速酶膽固醇逆向轉(zhuǎn)運(yùn)（RCT）：指外周細(xì)胞多余膽固醇通過(guò)血漿轉(zhuǎn)運(yùn)到肝臟進(jìn)行代謝（合成膽汁酸等）的過(guò)程

50ppt課件4.脂質(zhì)轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白（LTP）人LTP定位在第16號(hào)染色體，全長(zhǎng)25kb，含16個(gè)外顯子和15個(gè)內(nèi)含子。LTP是由484個(gè)氨基酸殘基組成的酸性糖蛋白，含4個(gè)N-連接的糖基化部位，Mr74,000LTP-I

具有CE和50%PL轉(zhuǎn)運(yùn)活性，有較好的熱穩(wěn)定性（58℃穩(wěn)定1h）,不能結(jié)合肝素LTP-Ⅱ具有50%PL轉(zhuǎn)運(yùn)活性，但無(wú)CE轉(zhuǎn)運(yùn)活性，熱不穩(wěn)定,能與肝素結(jié)合51ppt課件多種組織細(xì)胞，包括肝、小腸、腎上腺、脾、脂肪組織和巨噬細(xì)胞能合成分泌LTPLTP活性調(diào)節(jié)①血漿中存在的LTP抑制因子（LTIP）②血漿脂蛋白池大小及脂蛋白組成：如HDL中TG/CE比值升高，則CE轉(zhuǎn)運(yùn)到HDL池減少，使HDL正常成熟受阻③LPL、HL和LCAT：LPL和HL通過(guò)脂解改變VLDL和HDL組成而影響LTP活性；LCAT與LTP在HDL表面相互作用，促進(jìn)LTP轉(zhuǎn)運(yùn)活性④其他因素：如LTP-Ⅱ能提高LTP-Ⅰ的活性；ApoA-Ⅰ、ApoE和白蛋白抑制LTP活性52ppt課件二、脂蛋白受體幾乎所有細(xì)胞都能合成LDL受體，以肝臟中的絕對(duì)數(shù)量最多成熟LDL受體含839個(gè)氨基酸殘基，表觀Mr

120,000~160,000。含18個(gè)O-連接糖鏈和2個(gè)N-連接糖鏈LDL受體分子從結(jié)構(gòu)上可分為5個(gè)區(qū)域1.LDL受體53ppt課件LDL受體分子的5個(gè)區(qū)域7個(gè)富Cys區(qū)，每個(gè)40AA，帶負(fù)電35％與EGF前體同源18個(gè)Ser/Thr保守，與Clathrin

作用，便于小窩受體聚集54ppt課件LDL受體配體結(jié)合域第一個(gè)富Cys

區(qū)55ppt課件LDL受體基因位于第19號(hào)染色體，全長(zhǎng)45kb，含18個(gè)外顯子和17個(gè)內(nèi)含子

ⅠⅡⅢⅣⅤⅥⅦABC12671415161718外顯子蛋白域信號(hào)序列配體結(jié)合域EGF前體同源域O-連接糖鏈結(jié)構(gòu)域跨膜域胞質(zhì)域人LDL受體基因圖（內(nèi)含子未標(biāo)記）56ppt課件LDL受體的功能①結(jié)合內(nèi)吞LDL或其他含ApoB100和ApoE的脂蛋白（殘粒），以提供細(xì)胞所需的膽固醇②調(diào)節(jié)血漿LDL濃度。細(xì)胞內(nèi)LDL受體基因表達(dá)受細(xì)胞內(nèi)膽固醇濃度的減量調(diào)節(jié)（downregulation）③調(diào)節(jié)血漿LDL生成④參與血漿脂蛋白殘粒的清除。50%殘粒通過(guò)肝臟LDL受體被清除，另一半通過(guò)肝臟LDL受體相關(guān)蛋白被清除57ppt課件2.ApoE受體和LDL受體相關(guān)蛋白（LRP）mahley首次提出肝細(xì)胞膜上存在著ApoE受體，其特征是與含ApoE的脂蛋白有高親和力并參與它們的代謝清除。但ApoE受體至今仍未分離純化并加以確證。近來(lái)的研究否定了ApoE受體存在，而發(fā)現(xiàn)了LDL受體相關(guān)蛋白（LRP），并證明LRP可能就是以前認(rèn)為的ApoE受體LRP是由4,526個(gè)氨基酸殘基組成、Mr

約600,000的糖蛋白。其氨基酸組成與LDL受體極相似,但數(shù)量比LDL受體多得多58ppt課件LRP與LDL受體不同之處①LDL受體受細(xì)胞內(nèi)膽固醇水平的減量調(diào)節(jié)，而LRP不受影響②LRP受體與ApoE的結(jié)合不依賴Ca2+

存在，與LDL不同③E2/E3

表型與LDL受體結(jié)合僅為正常的1%~2%，而與LRP結(jié)合為40%④兩者無(wú)交叉免疫原性59ppt課件3.HDL受體最近Oram

從牛肺中分離純化到HDL受體，為一表觀Mr110,000的糖蛋白ApoA-I是HDL受體的配基。ApoA-I分子中Tyr

參與受體結(jié)合HDL受體受細(xì)胞內(nèi)膽固醇水平的增量調(diào)節(jié)

(upregulation)肝臟和肝外組織HDL受體在功能上存在差異，前者介導(dǎo)HDL-CE內(nèi)吞，而后者介導(dǎo)細(xì)胞膽固醇外流60ppt課件4.清道夫受體（化學(xué)修飾脂蛋白受體、乙酰LDL受體）Goldstein和Brown在研究巨噬細(xì)胞內(nèi)吞時(shí)發(fā)現(xiàn)乙酰LDL高親和力受體存在。乙酰乙酰LDL、馬來(lái)酰LDL、琥珀酰LDL、丙二醛LDL甚至細(xì)菌脂多糖也可以作為乙酰LDL受體的配體，因而改稱(chēng)為清道夫受體或化學(xué)修飾脂蛋白受體LDL與清道夫受體無(wú)競(jìng)爭(zhēng)結(jié)合作用，且其結(jié)合不依賴Ca2+

存在，也不存在細(xì)胞內(nèi)膽固醇水平的減量調(diào)節(jié)作用61ppt課件除巨噬細(xì)胞可表達(dá)該受體基因外，平滑肌、肝和內(nèi)皮細(xì)胞等也存在清道夫受體。該受體分Ⅰ型和Ⅱ型，均由第8號(hào)染色體上同一基因編碼，因mRNA加工不同而引起。成熟Ⅰ型受體由453個(gè)氨基酸組成，Ⅱ型約349個(gè)氨基酸組成在粗面內(nèi)質(zhì)網(wǎng)合成受體單體分子中Pro/Lys

的羥基化對(duì)維持三聚體螺旋結(jié)構(gòu)及三聚體從內(nèi)質(zhì)網(wǎng)轉(zhuǎn)移到高爾基體進(jìn)行糖基加工是必需的。羥基化后兩個(gè)單體亞基借Cys83形成二硫鍵構(gòu)成二聚體，再與另一個(gè)亞基以非共價(jià)結(jié)合形成三聚體62ppt課件巨噬細(xì)胞Ⅰ型清道夫受體

（富Cys

區(qū)）（Y為L(zhǎng)ysorPro）

（23個(gè)）63ppt課件清道夫受體是糖蛋白，在α螺旋卷曲樣域和間隔域之間有7個(gè)N-連接的糖鍵Ⅱ型清道夫受體沒(méi)有SRCR區(qū)域，而代之以6個(gè)氨基酸。此兩型受體都具備高親和力結(jié)合及介導(dǎo)內(nèi)吞修飾LDL的功能清道夫受體在體內(nèi)確切功能還不清楚。雖然這些?；疞DL可以作為配體被該受體清除，但尚缺乏證據(jù)證實(shí)這些?；疞DL在體內(nèi)存在。近來(lái)研究表明，巨噬細(xì)胞