細(xì)胞工程5植物細(xì)胞培養(yǎng)與次生產(chǎn)物生產(chǎn)教學(xué)課件

課程初步安排:36學(xué)時第一章緒論4個學(xué)時第二章實(shí)驗(yàn)室配置及基本技術(shù)2個學(xué)時第三章植物細(xì)胞工程的理論基礎(chǔ)4個學(xué)時第四章植物組織器官培養(yǎng)技術(shù)6個學(xué)時第五章植物細(xì)胞培養(yǎng)及次生代謝產(chǎn)物生產(chǎn)3個學(xué)時第六章原生質(zhì)體培養(yǎng)和體細(xì)胞雜交3個學(xué)時第七章人工種子1個學(xué)時第八章植物種質(zhì)資源離體超低溫保存1個學(xué)時第九章動物組織培養(yǎng)3個學(xué)時第十章動物細(xì)胞融合與單克隆抗體4個學(xué)時第十一章動物組織與胚胎工程1個學(xué)時第十二章試管動物與克隆動物2個學(xué)時第五章植物細(xì)胞培養(yǎng)與次生代謝產(chǎn)物生產(chǎn)植物細(xì)胞培養(yǎng)(plantcellculture)指在離體條件下對植物單個細(xì)胞或小的細(xì)胞團(tuán)進(jìn)行培養(yǎng)使其增殖的技術(shù)。根據(jù)培養(yǎng)規(guī)模不同小規(guī)模培養(yǎng)、大批量培養(yǎng)根據(jù)培養(yǎng)方式不同懸浮培養(yǎng)、平板培養(yǎng)、看護(hù)培養(yǎng)等根據(jù)培養(yǎng)的目的不同用于誘變或用于生產(chǎn)次生產(chǎn)物的細(xì)胞培養(yǎng)懸浮培養(yǎng)二單細(xì)胞培養(yǎng)細(xì)胞規(guī)?；囵B(yǎng)四培養(yǎng)細(xì)胞的次生代謝及產(chǎn)物積累懸浮培養(yǎng)(suspensionculture)細(xì)胞懸浮培養(yǎng)是指將單個游離細(xì)胞或小細(xì)胞團(tuán)在液體培養(yǎng)基中進(jìn)行培養(yǎng)增殖的技術(shù)?！鲈谝后w狀態(tài)下便于細(xì)胞和營養(yǎng)物質(zhì)的充分接觸和交換,細(xì)胞狀態(tài)可以保持一致■有利于在細(xì)胞水平上進(jìn)行各種遺傳操作和生理生化活動研究為植物細(xì)胞的大規(guī)模培養(yǎng)提供前期技術(shù)基礎(chǔ)Plants—[Cellsuspension|_→[ArtificialseedsIsolationprotoplastsMutationselectSecondaryproducts以愈傷組織為起始細(xì)胞的懸浮培養(yǎng)技術(shù)其過程:愈傷組織誘導(dǎo)「懸浮系的建立與繼代培養(yǎng)一細(xì)胞生長狀態(tài)的調(diào)控(一)愈傷組織誘導(dǎo)要求松散型好、增殖快、再生能力強(qiáng)。外觀一般是色澤呈鮮艷的乳白或淡黃色,呈細(xì)小顆粒狀,疏松易碎?！鲞x擇適宜的植物外植體材料一-研究表明,胚、胚軸、子葉是最常使用的外植體■選擇適宜的培養(yǎng)基一較高濃度激素如2,4-D,必要的附加物質(zhì)如CH等■愈傷組織培養(yǎng)一進(jìn)行必要的選擇和繼代(二)懸浮細(xì)胞系的建立與繼代培養(yǎng)callus1、取一定量的愈傷組織放入盛有10mlmedium/lg液體培養(yǎng)基的三角瓶中;2、接種后的三角瓶置于120r/min150/250mlflask的搖床上,在室溫下黑暗培養(yǎng);120rpmculture3、培養(yǎng)初期,每隔3d左右更換1次trasfer1time/3d新鮮培養(yǎng)基;4、懸浮細(xì)胞系建立,經(jīng)一段時間centrifugationisolation培養(yǎng),每隔1~2周需繼代一次,可80