藥理學(xué)實(shí)驗(yàn)課-課件

藥理學(xué)實(shí)驗(yàn)課

藥理教研室實(shí)驗(yàn)課程簡(jiǎn)介實(shí)驗(yàn)課程安排共18學(xué)時(shí)（1）實(shí)驗(yàn)基本技能（2）嗎啡鎮(zhèn)痛實(shí)驗(yàn)（5）藥物對(duì)家兔尿量的影響（6）傳出神經(jīng)藥物對(duì)家兔血壓的影響（4）藥物對(duì)家兔離體腸平滑肌的作用（3）藥物抗炎實(shí)驗(yàn)2PPT課件實(shí)驗(yàn)課程學(xué)習(xí)要求實(shí)驗(yàn)前實(shí)驗(yàn)中實(shí)驗(yàn)后1.預(yù)習(xí)實(shí)驗(yàn)指導(dǎo)，明確實(shí)驗(yàn)?zāi)康暮鸵?，充分了解?shí)驗(yàn)方法

2.進(jìn)入實(shí)驗(yàn)室，必須穿白大衣.3.檢查實(shí)驗(yàn)器材

1.根據(jù)實(shí)驗(yàn)內(nèi)容進(jìn)行小組內(nèi)分工2.嚴(yán)格、準(zhǔn)確地按照指導(dǎo)中的實(shí)驗(yàn)方法進(jìn)行實(shí)驗(yàn)操作。3.仔細(xì)、真實(shí)的記錄實(shí)驗(yàn)結(jié)果。1.死亡動(dòng)物放在指定地點(diǎn)；存活動(dòng)物放入籠內(nèi)。2.將器材洗凈擦干，放回原處3.每小組輪流負(fù)責(zé)搞好實(shí)驗(yàn)室內(nèi)衛(wèi)生。3PPT課件實(shí)驗(yàn)課程學(xué)習(xí)目的DBCA鞏固藥理學(xué)基本理論學(xué)習(xí)基本的實(shí)驗(yàn)方法培養(yǎng)實(shí)事求是的學(xué)習(xí)作風(fēng)培養(yǎng)動(dòng)手能力、科研能力4PPT課件基本實(shí)驗(yàn)操作不同給藥途徑的藥物對(duì)小鼠睡眠時(shí)間的影響藥理學(xué)實(shí)驗(yàn)一、5PPT課件實(shí)驗(yàn)?zāi)康模?）掌握小鼠給藥的基本方法。2）比較不同給藥途徑藥物起效的時(shí)間快慢。實(shí)驗(yàn)原理：不同的給藥途徑的藥物起效時(shí)間不相同。1實(shí)驗(yàn)?zāi)康募霸?PPT課件實(shí)驗(yàn)動(dòng)物：小鼠實(shí)驗(yàn)藥物：1%戊巴比妥鈉2主要實(shí)驗(yàn)材料7PPT課件3

稱重、分組腹腔給藥皮

下

給

藥灌胃給藥（0.1ml/10g）小鼠翻正反射消失時(shí)翻正反射再次恢復(fù)時(shí)間主要實(shí)驗(yàn)過(guò)程8PPT課件1小鼠基本捉拿、固定方法

2小鼠基本給藥方法實(shí)驗(yàn)基本技能9PPT課件右手提起鼠尾,左手拇指和食指捏住雙耳及頭部皮膚，無(wú)名指、小指和掌心夾其背部皮膚及尾部,便可將小鼠完全固定。如圖-1。單手捉持，用拇指和食指抓住小鼠尾巴，用小指、無(wú)名指和手掌壓住尾根部，再用騰出的拇指、食指及中指抓住鼠雙耳及頭部皮膚而固定。如圖-2。圖1圖2注意事項(xiàng)：小鼠固定方法10PPT課件注意事項(xiàng)：1.取背部及后腿皮下，注射時(shí)用左手拇指及食指輕輕捏起皮膚，右手持注射器將針頭刺入，固定后即進(jìn)行注射。

皮下注射11PPT課件注意事項(xiàng)：

1、針頭刺入部位不宜太接近上腹部或太深，以免刺破內(nèi)臟。針頭與腹腔的角度不宜太小，避免刺入皮下。

2、使用針頭不宜太粗，避免藥液注射后從注射孔流出。注射后可用棉球按一下注射部位。

腹腔注射12PPT課件注意事項(xiàng)：1.用左手拇指和食指抓住鼠兩耳和頭部皮膚，其他三指抓住背部皮膚，將鼠抓持在手掌內(nèi)，固定好動(dòng)物，頭部和頸部保持很平,右手取注射器進(jìn)行灌胃。

2.灌時(shí)針頭沿鼠口角通過(guò)食管進(jìn)入胃內(nèi)。灌時(shí)如很通暢，則表示針頭已進(jìn)入胃內(nèi)；如動(dòng)物有嘔吐動(dòng)物或強(qiáng)烈掙扎，必須拔出后按上述方法重新操作。決不可進(jìn)針不順硬向里插。

灌胃給藥13PPT課件

（1）注意基本給藥途徑的正確操作。（2）注意小鼠翻正反射消失時(shí)間判定（＞1min）。（3）客觀真實(shí)的記錄實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)。4實(shí)驗(yàn)注意事項(xiàng)14PPT課件影響藥物起效的因素有哪些？請(qǐng)分析本次實(shí)驗(yàn)中，那些因素可影響實(shí)驗(yàn)結(jié)果。

？仔細(xì)觀察記錄實(shí)驗(yàn)結(jié)果，結(jié)合藥理學(xué)總論知識(shí)思考，何種給藥途徑起效最快。為什么？問(wèn)題與思考15PPT課件嗎啡鎮(zhèn)痛實(shí)驗(yàn)藥理學(xué)實(shí)驗(yàn)二、16PPT課件實(shí)驗(yàn)?zāi)康模孩僬莆真?zhèn)痛藥的實(shí)驗(yàn)方法。（熱板法、扭體法）②觀察藥物的鎮(zhèn)痛作用。實(shí)驗(yàn)原理：熱刺激或者化學(xué)刺激物使小鼠產(chǎn)生疼痛反應(yīng)，觀察給藥前后小鼠疼痛反應(yīng)的變化。（痛閾值、扭體次數(shù)）1實(shí)驗(yàn)?zāi)康募霸?7PPT課件

實(shí)驗(yàn)動(dòng)物：小鼠（雌性）實(shí)驗(yàn)藥物：0.4%嗎啡

主要儀器：熱板測(cè)痛儀（RB-200智能熱板儀）2主要實(shí)驗(yàn)材料18PPT課件3

設(shè)定儀器溫度（55℃）動(dòng)物初篩給藥組：0.4%嗎啡0.1ml/10g給藥組：生理鹽水0.1ml/10g腹腔注射

給藥后30min、45min、60min再次測(cè)定各組小鼠痛閾值。主要實(shí)驗(yàn)過(guò)程（熱板法）19PPT課件篩選指標(biāo)：小鼠的痛閾值——即小鼠出現(xiàn)疼痛反應(yīng)的時(shí)間。

以小鼠添后足作為出現(xiàn)疼痛觀察指標(biāo)。

測(cè)定2次痛閾值，以痛閾值大于5秒，小于30秒，做為篩選合格動(dòng)物。

小鼠篩選方法：20PPT課件動(dòng)物隨即分組給藥組：0.4%嗎啡0.1ml/10g腹腔注射

30min后各組小鼠均注射0.6%冰醋酸（0.2ml/只）；記錄15min內(nèi)各組小鼠的扭體次數(shù)。對(duì)照組：生理鹽水0.1ml/10g3小鼠扭體反應(yīng)主要實(shí)驗(yàn)過(guò)程（扭體法）21PPT課件熱板儀溫度設(shè)定：55℃±0.5℃。室溫

:以15～20oC為宜。熱板法中動(dòng)物性別的選擇：雌性。痛閾值判定指標(biāo)：添后足。痛閾值時(shí)間：初篩（＞5s、＜30s）。超過(guò)60s動(dòng)物未添足，將動(dòng)物取出，痛閾值以60s計(jì)算。實(shí)驗(yàn)中保持小鼠足底及熱板內(nèi)干燥。冰醋酸現(xiàn)用現(xiàn)配。4實(shí)驗(yàn)注意事項(xiàng)22PPT課件兩種鎮(zhèn)痛模型的區(qū)別？嗎啡藥理學(xué)作用、機(jī)制？

？問(wèn)題與思考23PPT課件藥理學(xué)實(shí)驗(yàn)

抗炎實(shí)驗(yàn)三、24PPT課件1.1實(shí)驗(yàn)?zāi)康模簩W(xué)習(xí)利用化學(xué)藥物或者雞蛋清制急性炎癥動(dòng)物模型方法。觀察糖皮質(zhì)激素的抗炎作用。1.2實(shí)驗(yàn)原理：化學(xué)刺激物或者蛋清，可致動(dòng)物急性炎癥，出現(xiàn)局部腫脹。比較給予藥物前后動(dòng)物局部腫脹程度的變化從而觀察到藥物的抗炎作用。1實(shí)驗(yàn)?zāi)康募霸?5PPT課件

實(shí)驗(yàn)動(dòng)物：小鼠、大鼠（雄性）實(shí)驗(yàn)藥物：氫化可的松主要儀器（PV-200足趾腫脹測(cè)定儀）

2主要實(shí)驗(yàn)材料26PPT課件

動(dòng)物稱重、分組

踝關(guān)節(jié)的突起點(diǎn)標(biāo)記，作為測(cè)量標(biāo)志（見(jiàn)后圖）給藥組：氫化可的松溶液1ml/100g

體重對(duì)照組：生理鹽水1ml/100g

體重腹腔注射

30min，從右后足掌心向掌跖關(guān)節(jié)方向進(jìn)針，皮下注射新鮮蛋清0.1ml。(見(jiàn)后圖)注射蛋清后30min、60min、90min，測(cè)量右后足的體積，3實(shí)驗(yàn)主要步驟（大鼠足腫脹）27PPT課件皮下注射新鮮蛋清大鼠足外踝標(biāo)記實(shí)驗(yàn)照片28PPT課件

小鼠稱重、標(biāo)記、分組給藥組：氫化可的松0.1ml/10g腹腔注射

30min后用二甲苯50μl均勻涂抹每只鼠的右耳

對(duì)照組：生理鹽水0.1ml/10g3

90mim后小鼠脫臼處死，分別用打孔器取相同部位左右耳片，電子天平稱重。主要實(shí)驗(yàn)步驟（小鼠耳腫脹）29PPT課件抗炎實(shí)驗(yàn)中動(dòng)物性別的選擇：雄性。測(cè)定大鼠足體積時(shí)，選定統(tǒng)一測(cè)量位置（大鼠足外踝關(guān)節(jié)突起）。小鼠耳廓滴加二甲苯時(shí)，正反面均勻涂抹。避免滴入耳廓內(nèi)。小鼠左右耳打耳片位置統(tǒng)一（耳廓中間部位）。4實(shí)驗(yàn)注意事項(xiàng)30PPT課件炎癥的表現(xiàn)以及炎癥的類型有哪些？

？本實(shí)驗(yàn)中選擇雄性動(dòng)物的原因？問(wèn)題與思考31PPT課件常見(jiàn)炎癥模型介紹1非特異性炎癥模型：急性大鼠足腫脹小鼠耳腫脹白細(xì)胞游走法2非特異性炎癥模型：慢性棉球植入法大鼠巴豆氣囊法3免疫性炎癥弗氏完全佐劑致炎法32PPT課件藥理學(xué)實(shí)驗(yàn)

藥物對(duì)家兔離體腸平滑肌的作用四、33PPT課件1.1實(shí)驗(yàn)?zāi)康模簩W(xué)習(xí)離體平滑肌器官的實(shí)驗(yàn)方法。觀察擬膽堿藥和抗膽堿藥對(duì)離體家兔腸平滑肌的作用。1.2實(shí)驗(yàn)原理：乙酰膽堿通過(guò)激動(dòng)M受體興奮胃腸平滑?。话⑼衅娇勺钄郙受體；氯化鋇直接興奮胃腸平滑肌。1實(shí)驗(yàn)?zāi)康募霸?4PPT課件2主要實(shí)驗(yàn)材料

實(shí)驗(yàn)動(dòng)物：家兔實(shí)驗(yàn)藥物：乙酰膽堿溶液（1:10萬(wàn)）、0.1%硫酸阿托品溶液、1%氯化鋇溶液主要儀器：離體平滑肌槽、生物機(jī)能系統(tǒng)35PPT課件3①離體腸肌的制備取回腸置冷臺(tái)氏液中制備離體腸肌家兔處死實(shí)驗(yàn)主要步驟136PPT課件3②安裝離體實(shí)驗(yàn)裝置在浴槽（大試管）中，加入臺(tái)氏液至標(biāo)線處，加熱，維持水溫38°C±0.5°C。實(shí)驗(yàn)主要步驟237PPT課件3③安裝離體實(shí)驗(yàn)裝置取回腸，固定于平滑肌槽內(nèi)調(diào)整懸掛絲線松勁程度調(diào)節(jié)通氣閥每秒鐘1-2個(gè)氣泡點(diǎn)擊桌面中BL-420圖標(biāo)，進(jìn)入主菜單實(shí)驗(yàn)主要步驟338PPT課件實(shí)驗(yàn)主要步驟4正常曲線乙酰膽堿阿托品乙酰膽堿1.腸管穩(wěn)定10分鐘，記錄一段正常活動(dòng)曲線。2.加入1:10萬(wàn)乙酰膽堿溶0.2ml，記錄其收縮幅度3.收縮到最高點(diǎn)時(shí)，立即加入0.1%硫酸阿托0.1ml。觀察結(jié)果。4.平滑肌收縮穩(wěn)定后，再加入1:10萬(wàn)乙酰膽堿溶液，相比較，觀察結(jié)果有何不同。3④添加藥液39PPT課件實(shí)驗(yàn)主要步驟5Bacl2乙酰膽堿加入1%氯化鋇溶液1ml待作用至最高點(diǎn)時(shí)，加入0.1%硫酸阿托品溶液0.1ml，再次觀察結(jié)果。3④添加藥液40PPT課件沖洗和分離腸管時(shí)動(dòng)作應(yīng)輕柔，盡量避免牽拉腸管。腸管穿線時(shí)，對(duì)角線穿過(guò)腸壁，只需穿過(guò)一層腸壁。臺(tái)氏液應(yīng)保持在38±0.5°C，換液時(shí)，臺(tái)氏液亦應(yīng)38±0.5°C。加藥時(shí)不要把藥液直接加到回腸上，以免影響結(jié)果。浴溫和腸肌的張力均可影響實(shí)驗(yàn)結(jié)果，應(yīng)注意調(diào)節(jié)。4實(shí)驗(yàn)注意事項(xiàng)41PPT課件阿托品是否對(duì)于乙酰膽堿和氯化鋇均有拮抗作用？？實(shí)驗(yàn)中能影響離體腸肌收縮活性的必要條件有哪些？問(wèn)題與思考42PPT課件藥理學(xué)實(shí)驗(yàn)四、藥物的利尿作用43PPT課件1.1實(shí)驗(yàn)?zāi)康模?/p>

學(xué)習(xí)學(xué)習(xí)利尿的實(shí)驗(yàn)方法.

觀察利尿藥對(duì)尿量的影響。1.2實(shí)驗(yàn)原理：呋噻米屬高效利尿藥，通過(guò)抑制髓袢升枝粗段對(duì)氯化鈉的重吸收而達(dá)到利尿作用。1實(shí)驗(yàn)?zāi)康募霸?4PPT課件2主要實(shí)驗(yàn)材料

實(shí)驗(yàn)動(dòng)物：雄性家兔，體重2—3kg

實(shí)驗(yàn)藥物：3%戊巴比妥鈉、1%呋噻米、主要儀器：燒杯、膀胱漏斗、10ml量筒。

45PPT課件1、取家兔1只，稱重，清水灌胃30ml/kg

3實(shí)驗(yàn)主要步驟146PPT課件2、30min后，用3%戊巴比妥鈉1ml/kg經(jīng)耳緣靜脈注射麻醉實(shí)驗(yàn)主要步驟247PPT課件3、家兔背位固定于兔臺(tái)上。恥骨聯(lián)合前正中切開(kāi)腹部皮膚4～6cm，暴露膀胱。

實(shí)驗(yàn)主要步驟348PPT課件4、分離輸尿管，結(jié)扎尿道內(nèi)口。在膀胱游離部作荷包縫合，然后剪開(kāi)小口插入膀胱漏斗并固定。

實(shí)驗(yàn)主要步驟449PPT課件5、記錄10分鐘正常尿量；耳緣靜脈注入呋噻米0.5ml/kg，觀察并記錄各藥給藥后10min尿液滴數(shù)及尿量。

實(shí)驗(yàn)主要步驟550PPT課件家兔麻醉過(guò)程中，控制麻醉藥推注速度，密切觀察實(shí)驗(yàn)過(guò)程中家兔情況。手術(shù)過(guò)程中，動(dòng)作輕柔，以免損傷膀胱。準(zhǔn)確找到輸尿管，注意輸尿管的生理比鄰位置。4實(shí)驗(yàn)注意事項(xiàng)51PPT課件

？呋塞米強(qiáng)大利尿作用的原因是什么？尿液生成的正常過(guò)程？問(wèn)題與思考52PPT課件藥理學(xué)實(shí)驗(yàn)傳出神經(jīng)系統(tǒng)藥物對(duì)家兔動(dòng)脈血壓的影響五、53PPT課件1.1實(shí)驗(yàn)?zāi)康模簩W(xué)習(xí)麻醉動(dòng)物急性血壓實(shí)驗(yàn)的方法。觀察傳出神經(jīng)藥物對(duì)動(dòng)物血壓的影響。1.2實(shí)驗(yàn)原理：鹽酸腎上腺素溶液、酚妥拉明溶液等藥物能與心肌或者血管平滑肌上的相應(yīng)受體結(jié)合，從而影響家兔的血壓。1實(shí)驗(yàn)?zāi)康募霸?4PPT課件2主要實(shí)驗(yàn)材料1

實(shí)驗(yàn)動(dòng)物：家兔實(shí)驗(yàn)藥物：3%戊巴比妥鈉溶液、0.001%腎上腺素溶液、0.001%去甲腎上腺素溶液、0.001%異丙腎上腺素溶液、酚妥拉明（1%溶液）

、普萘洛爾（0.01%溶液）、乙酰膽堿（0.001%溶液）、阿托品（0.01%溶液）.55PPT課件2主要實(shí)驗(yàn)材料2主要儀器：壓力換能器、BL-420生物機(jī)能實(shí)驗(yàn)系統(tǒng)、手術(shù)刀、手術(shù)剪、止血鉗、氣管插管、動(dòng)脈插管、動(dòng)脈夾、頭皮靜脈注射針頭等。56PPT課件3①麻醉與手術(shù)稱重、麻醉、固定腹腔注射3%戊巴比妥鈉1ml/kg耳緣靜脈，建立靜脈輸液通道頸正中切口，分離氣管；插入氣管插管實(shí)驗(yàn)主要步驟１57PPT課件實(shí)驗(yàn)照片分離氣管氣管插管58PPT課件