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人教版選修1生物技術(shù)實(shí)踐《分解纖維素的微生物的分離》教學(xué)設(shè)計(jì)一、前言本教學(xué)設(shè)計(jì)是針對(duì)人教版選修1生物技術(shù)實(shí)踐中的《分解纖維素的微生物的分離》設(shè)計(jì)的。本實(shí)驗(yàn)旨在通過實(shí)驗(yàn)證明纖維素是由某些微生物分解產(chǎn)生的,并探究微生物的分離與鑒定方法。二、實(shí)驗(yàn)?zāi)康耐ㄟ^本實(shí)驗(yàn)的學(xué)習(xí),學(xué)生應(yīng)能達(dá)到以下目標(biāo):了解纖維素是如何被微生物分解的。學(xué)會(huì)分離纖維素分解微生物的方法。掌握常用微生物分離培養(yǎng)基的制備方法。學(xué)會(huì)常用微生物鑒定方法的使用。培養(yǎng)學(xué)生對(duì)于實(shí)驗(yàn)操作、數(shù)據(jù)記錄、結(jié)果分析的能力。三、實(shí)驗(yàn)原理纖維素是生物體中普遍存在的一種多糖,但其特殊的結(jié)構(gòu)對(duì)于多數(shù)真核生物來說很難分解。微生物分解纖維素則成為了解決這一問題的有效途徑。在纖維素分解微生物的分離實(shí)驗(yàn)中,我們會(huì)采用的是常見的移相法和移液法。該方法是一種以地基微生物為基礎(chǔ),從環(huán)境中分離目的微生物的方法。移相法指的是將微生物通過對(duì)各種不同培養(yǎng)基滲透壓等性質(zhì)的調(diào)整,實(shí)現(xiàn)從某一培養(yǎng)基向另一種培養(yǎng)基的轉(zhuǎn)移。而移液法指的是先用特定液體中的微生物滴度制備出不同的濃度懸浮液,再用該懸浮液作為移液,在不同培養(yǎng)基中制備出菌落。四、實(shí)驗(yàn)操作步驟1.準(zhǔn)備工作蒸汽消毒好培養(yǎng)皿、玻璃片。熟練掌握操作規(guī)程,提前了解所使用的培養(yǎng)基的性質(zhì)及呈現(xiàn)菌菇的特征。準(zhǔn)備移相和移液所需的培養(yǎng)基和細(xì)菌懸浮液。2.移相法將分離好的環(huán)境樣品水樣,過濾出5mL的過濾液,將過濾液分別加入稀釋液中依次制備出加入1mL、2mL、4mL、8mL、16mL的5個(gè)梯度。攪拌均勻后取每個(gè)梯度制備成5個(gè)培養(yǎng)皿,每個(gè)梯度各5個(gè)培養(yǎng)皿。采用消毒的小刮棒在空氣中消毒,從最稀的液體中取1mL,橫向涂抹在培養(yǎng)皿的底部。將培養(yǎng)皿封閉后翻轉(zhuǎn)好,放置于恒溫箱中進(jìn)行培養(yǎng)。檢查7天后,觀察培養(yǎng)皿中是否出現(xiàn)菌落。3.移液法采用消毒的小刮棒在空氣中消毒,從樣品中采集微生物懸液。采用消毒的吸管將懸液依次加入50mL濃度為10-1、10-2、10^-3、10-4、10-5的液體中并混勻,從中取出0.1mL,分別涂于對(duì)應(yīng)的LBA培養(yǎng)皿上。將涂好菌后的LBA培養(yǎng)皿倒置培養(yǎng),進(jìn)行靜置。五、實(shí)驗(yàn)結(jié)果分析移液法法制備的菌落數(shù)量隨著稀釋倍數(shù)的增加而減少。移相法所制得的菌落較為豐富,可進(jìn)行下一步的單菌發(fā)酵和分離培養(yǎng)。移相法分離纖維素分解微生物的可行性得到了證明,此方法在環(huán)境學(xué)等研究中具有重要的應(yīng)用價(jià)值。六、實(shí)驗(yàn)注意事項(xiàng)操作時(shí)要注意無菌操作,避免細(xì)菌污染。生物毒性實(shí)驗(yàn)時(shí),要認(rèn)真檢查污染且具有潛在毒性的微生物,并采取必要的防護(hù)措施。實(shí)驗(yàn)設(shè)備和工具要經(jīng)常進(jìn)行維護(hù)和消毒。報(bào)廢液、廢物應(yīng)進(jìn)行分類處理并妥善處置。七、實(shí)驗(yàn)作業(yè)請(qǐng)寫一份分離到的纖維素分解菌的鑒定報(bào)告?;仡櫛敬螌?shí)驗(yàn)的步驟,總結(jié)出有哪些錯(cuò)誤未被及時(shí)糾正和解決?如果你需要重新設(shè)計(jì)這個(gè)實(shí)驗(yàn),請(qǐng)?zhí)岢鲋辽?個(gè)有用的建議。八、實(shí)驗(yàn)總結(jié)通過本次實(shí)驗(yàn),學(xué)生掌握了兩種不同的微生物分離方法之一的移相法和移液法,提高了其對(duì)于微生物
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