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直接計數(shù)法及酵母菌的測定食品微生物第1頁,課件共12頁,創(chuàng)作于2023年2月Ppt出自江蘇食品學(xué)院
食品與營養(yǎng)工程學(xué)院
-----食檢112班楊雙茹(11)吳海珍(12)王婷(09)第2頁,課件共12頁,創(chuàng)作于2023年2月實驗方向分為1.目的要求2.實驗原理3.實驗器材4.操作方法及報告5.思考題第3頁,課件共12頁,創(chuàng)作于2023年2月1.實驗的目的要求:了解血球計數(shù)板測定微生物數(shù)量的原理.了解血球計數(shù)板的結(jié)構(gòu),學(xué)習(xí)并掌握利用血球計數(shù)板進行酵母菌記數(shù)的方法,包括樣品的點樣、菌數(shù)計數(shù)的方法與計算。第4頁,課件共12頁,創(chuàng)作于2023年2月2.實驗原理微生物常用的計數(shù)方法有兩種,即直接計數(shù)法和間接計數(shù)法。前者利用血球計數(shù)板在顯微鏡下直接計數(shù),能立即得到數(shù)值。后者是在平板上長成菌落后再計數(shù),反應(yīng)較真實,但費時太長。第5頁,課件共12頁,創(chuàng)作于2023年2月3.實驗器材菌種:酵母菌液儀器:顯微鏡,血球計數(shù)板、蓋玻片(22mm*22mm)、吸水紙、計數(shù)器、滴管、擦鏡紙等。第6頁,課件共12頁,創(chuàng)作于2023年2月4.酵母細胞數(shù)測定具體的操作方法血球計數(shù)板的構(gòu)造圖示第7頁,課件共12頁,創(chuàng)作于2023年2月酵母菌數(shù)量的測定取潔凈的血球計數(shù)板一塊,在技術(shù)室上蓋一塊蓋玻片。搖勻酵母菌液,用滴管滴在計數(shù)板中間兩側(cè)的溝槽內(nèi)滴一滴,使?jié)B入計數(shù)室,勿產(chǎn)生氣泡,保證計數(shù)板干凈后,然后蓋上蓋玻片(勿產(chǎn)生氣泡)靜置五分鐘,先用低倍鏡找到計數(shù)室再轉(zhuǎn)換高倍鏡觀察計數(shù)計數(shù)時用16中格的計數(shù)板,要按對角線方位,取左上、左下、右上、右下的4個中格(即100小格)的酵母菌數(shù)。如果是25中格計數(shù)板。除數(shù)上述四格外,還需數(shù)中央1中格的酵母菌數(shù)(即80小格)。由于菌體在計數(shù)室中處于不同的空間位置,要在不同的焦距下才能看到,因而觀察時必須不斷調(diào)節(jié)微調(diào)螺旋,方能數(shù)到全部菌體,防止遺漏。如菌體位于中格的雙線上,計數(shù)時則數(shù)上不數(shù)下,數(shù)左不數(shù)右,以減少誤差凡酵母菌的芽體達到細胞大小一半時,可作為兩個菌體計算。血球計數(shù)板用后,應(yīng)用水洗干凈切勿洗刷,一面損壞網(wǎng)格刻度,洗凈后晾干即可。第8頁,課件共12頁,創(chuàng)作于2023年2月第9頁,課件共12頁,創(chuàng)作于2023年2月實驗報告填入下列表格計數(shù)次數(shù)每個大方格均數(shù)稀釋倍數(shù)總菌數(shù)平均值12345第一次第二次第10頁,課件共12頁,創(chuàng)作于2023年2月5.思考題根據(jù)你的體會,說明用血細胞計數(shù)板計數(shù)的誤差主要來自哪些方面?應(yīng)如
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