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文檔簡介

植物基因工程中的λ噬菌體載體2013年6月29日載體(vector)是把一個有用的目的DNA片段通過重組DNA技術,送進受體細胞中去進行繁殖和表達的工具。

植物基因工程技術中尤為重要的是載體,不同目的基因需要采用不同的載體。

組成植物基因工程載體系統(tǒng)常見的幾種載體有:

質粒

λ噬菌體

柯斯質粒(cosmid)

m13單鏈噬菌體。噬菌體是感染細菌、真菌、放線菌或螺旋體等微生物的細菌病毒,結構簡單、基因數(shù)少,是分子生物學與基因工程的良好實驗系統(tǒng)。噬菌體有嚴格的宿主特異性,只寄居在易感宿主菌體內。噬菌體具有高效率的感染性和自主復制繁殖性能,使它能高效導入受體細胞,并能使攜帶的外源基因在受體細胞中高效擴增,所以噬菌體被開發(fā)成基因工程的有用載體。噬菌體(bacteriophage,phage)簡介噬刃菌勁體姜分奔類毒駝性非噬移菌獻體榜(閱v吸i偽r北u邪l(fā)予e姓n老t澆p嘆h什a星g延e浙):爺吸牽附暮、霜穿領入言、橫生雄物廈合這成較、罩成紙熟涼、釋決放溫擠和歡噬轎菌寄體切(討t炒e追m子p撥e愁r腎a林t返e藍p怪h封a對g編e辟):嗽轉撤導撕、者溶源性壺轉齡換噬壟菌街體溫鴿和鵝噬邀菌潮體拉可撕有同三法種嶼存木在卷狀類態(tài)勾:柴溶因菌幣周付期吩的愈具堂有沈感寸染碼性睛的忍游棕離寨噬貸菌貨體頑顆漿粒警;課溶暢源累周威期屆的鐵前墾噬楊菌北體體;量宿震主魂菌癥細補胞卻質奇內緣瑞的疤游蹄離暗噬彼菌舊體銜核臨酸討。D捕N宜A濾重械組陸技洋術黃一組般買需幅要λ噬您菌域體灣進乒入拒溶米菌型狀箭態(tài)膜。目奔前魚用牙于闖基駛因植克術隆校的鴿噬看菌卵體央載紛體蹈及隸其驗衍患生翠載活體帖有盾:喘單召鏈燥M鞭1翠3浴噬悉菌裙體等載岡體魄;劍λ偉噬秋菌堪體問載才體口;決P蓄1酷噬鵲菌尿體狀載傷體抓;免噬禾菌姓粒挺載僵體皆;塌等藝等宣。床其什中許使鋼用再最態(tài)多粒的撇是棟入奇噬恥菌乒體復。λ蘿噬易菌不體λ文噬潤菌午體兩是妥溫撿和游噬賊菌智體佳,水屬曉長復尾突噬訊菌他體邪科皇,滋頭溜殼棗為濁直胸徑枝約污5貞0恒n拾m害的嚼二多十孩面辱體怨,猛其頓內狼包偵裹漆一嘉長蜓線城狀舉雙籮鏈浸D敢N澆A狀分頃子冤(爺4紙6飛5劍0刑0姿b太p雀)烏。左臂:從A到J長約20kb,其中的基因編碼構成頭部、尾部、尾絲對組裝完整噬菌體所需要的蛋白質。

中段:從J到N長約20kb,是λDNA整合和切出,溶原生長所需的序列,但非溶菌生長所必需右臂:長約10kb,控制溶菌和溶原生長最重要的調控基因和序列、以及λDNA復制起始均在這區(qū)域內?;鶗砸虼浣M剃長挺約悼5勾0營k注b役,至譽少盛包啟括務6出1恢個淹基凈因把,御除箱少酬數(shù)像例捧外箱,籍大幣多患數(shù)銹編佛碼尚基姿因寨均樹是辨按中功色能綁的抗相勝似足性瀉成蔑簇戚排般列粒。左由右羅臂丹包悔含滅λ匆D頭N禮A言復升制順、鋪噬呈菌激體息結渣構勝蛋勝白析合劑成素、燦組冠裝燃成燈熟公噬助菌挽體玩、裙溶經(jīng)菌桑生對長因所絹需哄全本部話序宏列仔;占對犧溶張菌哀生故長肢來策說堅,榜中禿段俱是細非注必受需弱的喊。在墨λ倡D降N促A綠雙吸鏈醉分乞子煮的至兩皮個絲式5新’讓端貿各節(jié)有腹1匪2個伏核快苷挨酸雀單陶鏈閱的鹽互悶補植粘籃性傘末獨端稅,且富兩武者剃的播核采苷決酸幟序軍列傲互檢補忙,喚當堂λ璃噬喬菌貸體感促染殿宿掉主蠢細掙胞鈔后,贏其誕D鵝N密A性可江迅賓速記通拌過擦粘順性規(guī)末舍端叔配桐對踢而走成貞雙恨鏈賀環(huán)豈狀講D熄N押A蝦分跡子鏈,委這鎮(zhèn)種娃由悟粘飯性爽末程端圖結纏合股形炸成四的停雙天鏈腰區(qū)托域鬼稱據(jù)為壁c疼o幣s班位述點饑。c捕o只s與位獵點(松c活o習h建e足s難i經(jīng)v榆e胃e鑄n獎d售s位i行t權e鍋)如脊果粉將斥左糕右糾臂令和況中拜段凡都棋去救除流,撫僅謹留逝下剝λ冷D勸N飛A活而眨端格包蓄裝羞噬僻菌黃體婆所耗必靈需黃的雄c見o補s密序石列谷,綠再隊加逆上芬質船粒巴的魯復哨制杯序筑列艘、舒標被志說基慣因澤、皮多改克框隆方位棉點揮等女,妹就壟可鏟構農(nóng)成拍c覆o窄s帖質標粒湖或紗稱群為抖粘洗粒雄的短載學體婚。作粘紋粒肉可悉插鍬入數(shù)4懼5熄k所b嗽長翻的各外井源響D坦N仍A半,罩然夕后礙用逃λ犧噬劇菌榮體狡外贏殼呼蛋資白濁包跟裝拘成選噬企菌證體首,死感感染盛大建腸箏桿政菌采后積,率粘刮粒閑的筑D然N配A產(chǎn)能終以纏質跌粒說的亂形煩式疲在副細赤菌端中恢繁出殖淚而鬼被晌克俊隆上。腳所霉以羊粘沖粒單主磚要盡用姑于場D嚼N裹A叨文克庫沖的洞構六建尚。當序噬叔菌島體壯感叛染智宿魄主怎細功胞按后刮,蓬雙只鏈蹲D丈N緊A超分綁子智通財過液c億o茅s否而粗成前環(huán)撤狀放。蠟在摘感耗染府早墾期減,茶環(huán)雕狀邪D難N想A遠分販子厘進師行肝轉桌錄先。其在共此闊期南間張,詠噬沃菌怒體塘有刪兩女條牛復奏制籍途蒙徑灑可蠶供朱選錘擇融:玩一肯是冠裂支解歪生叢長夢??蕲h(huán)鼠狀汪D碎N打A唐分配子如在禽宿振主嘗細秩胞紀里民復鐮制暗若產(chǎn)干箱次蘭,里合概成頃了港大意量辮的脹噬徐菌愉體雕基真因賠產(chǎn)鐮物運,讀形堆成被子捆代淺噬橡菌劑體謙顆跑粒升,稼成匆熟惱后繼使想細拖菌映裂購解末,鳴釋緩放善出兵許戶多昏新蛾的繡有也感情染坊能縣力琴的蝦病泄毒恨顆姑粒披。陳另揉一凡是眼溶凈源撲性綱生督長蛙。草噬啄菌績體親D敘N均A斷整戀合忠進渴宿姓主秤菌燈的類基飲因舍組犯,荷然最后防像倒細夸菌貞染掛色翻體危上配的斗基涂因胡一琴樣播進州行栗復艱制劈燕,秀并克傳笨遞支給云下裕一倉代匙細蠢菌梨。由煎于塔噬把菌哲體野頭碰部恐包姥裝撈容落量磁的叔限悶制揉,印重句組聚λ欄-絡D搶N殖A斤分鏟子愧大受小棵只潔能加在約3啞9亮—存5絹2團k推b強之賠間默。λ禮噬橫菌膨體桿的鼻繁粗殖挺方娛式在莖感誓染瘦的妖細出胞戰(zhàn)內過,噬杜菌面體佛有柄兩輸條傳復詢制艙途砍徑禮:1活、鍬裂訪解甘生在長2菜、窗溶扇源他性狠生曲長D那N近A述重杠組芬技壘術莖一紋般伴需量要項λ短噬柜菌睜體荷進凝入斯溶樸菌駛狀煩態(tài)朋。λ窯噬韻菌非體舟載兔體廁的岔構鴨建構就建脹方針式攜:1鼓、婚插吉入蜂型謀。狐只稼具竊有里一邀個辯限銀制尤酶槍位潤點熄,止可梯便跌于餅外跟源鍬D獨N犯A紛插象入階,飄這攀種攔載瘡體家叫況插偶入甩型榜載船體喪(數(shù)i抹n倚s燭e樣r瀉t刪i光o戀n智v家e誰c療t才o溝r宜s慨)魄。2塊、睛置蜜換撕型換。艱含且有可二蝕個鍬限貌制羅酶懷切臣點劇,朱在鑒兩厘個堤位傍點佳之齡間厘的表D捏N礦A肝區(qū)撿段姿可侵以牧被漂外攏源腹D跟N最A乞片山段壓所數(shù)取怎代摸。慢這悅種刪載趙體村叫咳置榨換躁型擇載演體偽(蹈r轉e虜p波l頌a貨c束e價m盾e晝n亡t絨v臂e乏c郊t吼o跨r曲s酬)茄。至況今斥已糊用扔噬絹菌壁體獅開晝發(fā)付出芳許名多喬插抹入筍型詳和塞置釋換狹型屬載街體杜插暢入芒型現(xiàn)載脫體乏:列Z借A犁P慰,隔Z賓A援P戲,精g碧t廊1梢0孔,評g從t功1桐1鈔等瓶置莖換暢型立載探體睛:薯G跪E管M穿-撇1愿1膛,涂G或E狼M隔-腿1渴2刑,徑E貿M采B矛L球3勉,朵E過M荒B院L欺4似等構彈建秘過秧程野保生適型婦λ抄噬攝菌稼體槐D肅N探A汽必噴須趣經(jīng)鐮過固改宣造冒才持能梅成囑為湖理閉想粉的手載搖體成,總其叨構蟲建仙過垃程脖主廳要釋有烤:蔑①攀刪春除餐基肢因脹組渴中瘦非召必臣需稿區(qū)祥,俯建甜立蓬外量源常D扛N錦A稻片岔段緣瑞的枯替廁換且點招,跪增偶加直承購載壘外插源揚D壟N趙A誤片仁段耍的紋容捐量魔。郵②洽在嫌非廉必覽需障區(qū)使內灶插證入候或缺替當換禁選舍擇撲的舉標乎記糧基予因勉和矛目啊的梁基鹽因論。語③言建卵立現(xiàn)重彈組步λ鍋D紛N箱A專分擔子誘的某體鉛外誕包食裝型系仁統(tǒng)淹,增使脆之住有膝效迫地千感撒染栽受別體巧細鍵胞競。棕簡述而睜言賺之逢,包將潛目洋的斧基蜓因曾插濾入典或婆替蹦換羞進沉入剖病大毒球基珠因與組健的絕可判替縱代數(shù)區(qū)純,剩再懇利柔用郵病甲毒金的澆侵技染添性推,棚將沿目戰(zhàn)的待基凱因嶼導量入岸受鉛體翁細己胞際,辛這鉛就書是紀病且毒棒作笨為當“剖分抱子買運宴輸斜車唱”圍的索基循本邀機扮理植。λ伯噬擠菌悶體腥載或體膨的司應系用一紅、突建脈立c辜D貧N乘A鼠文乓?guī)焓赏嶓w獻載欣體引系粱統(tǒng)攪是甲在收e抗D哄N自A望文瞇庫扮構獎建雙中蹄最蕩早窄使荒用陰的算載效體渠系并統(tǒng)筐,填其的主滾要腿優(yōu)途點武是呼插敘入繁片酷段乞的嬌裝擦載采容錯量保大漁,植適宋合閑于五全垮長需的衣e腥D絨N軌A捧克播隆遵,塊不逢僅暖質仔量磁高常、評代披表屢性緞好金,媽而勞且致重斗組肅噬戰(zhàn)菌辛體趕顆襲粒問的搞感枯染濫活硬性宗在標4斜℃工環(huán)甘境慶中繼極怠其井穩(wěn)桶定依,堵非醬常研適交合約于建e旗D政N滔A臘文擾庫招的芒長眨期斥保搞存出。c嚷D歐N平A判與欺載超體捷重掙組張,欲或壇經(jīng)涂體婦外稈包沿裝灣成湊噬旗菌莊體遍顆汗粒主后轉旦導宿弦主膝細職胞記,釀或罵不抱經(jīng)添體五外浴包皂裝國直甘接轉答染宿或主桶細她胞浴,逼但紋轉畫導槍的裳效蜂率真較段高驚。λ掃D魂N粱A莫作潮為厚外氏源勢基尊因海的剖克精隆倉載厚體俯λ莖基拿因殿組辰中進間飲部眉分鄭占曾3庫0早%磁的犬D粥N憂A腥(許包但括可重樹組部和隙溶姑源演化獄基歲因燥)鞭并爪不缸是場噬勝菌傲體川裂鐵解底生室長靜所柿必洋需埋的茫,厲裂際解猴生突長無所趴需客的續(xù)基茫因球都邀在丈基衡因罰組媽的熟左鴿側隊和燦右結側固,奮而遷典席型寧的鄉(xiāng)豐λ旱克腿隆虎載辛體跑在洽部毀分諷或惹全共部圣非潛必樸需將基薦因冶的手兩擠側潔含等有屯限揚制陽酶逝位江點鬧,帳這門就印賦腳予嶼了許λ垮載下體辰克遞隆澤大旨片蜂段挑的幼能棕力啦,占外肆源謎基鮮因提插遼入歸到驅限蛇制禮酶宏位辮點母之桶間欺,句在鄭體悶外暖包冬裝鳳成籃噬蠟菌洪體耳,這雖景然零包概裝蠶效禾率桶僅曠達衫1托0得%線,覽但咳一溜經(jīng)飛包建裝挎,另在帆大尸腸考桿醋菌漿中帥形雖成華噬縣菌基斑浸的務效僚率芹可鎖達怎1紐奉0遠0括%吐。王目殊前混由爽λ恐衍訂生袖的疑許跑多顛載電體膠被恰廣愉泛乳地遼應任用謙于麗基廈因禾克鍛隆枯中怒,績尤元其賞是級在賓構鐮建唇基智因衡文診庫撲中怒的肝應錄用質產(chǎn)晉生潑了誦非帖常腸好缺的不效繪果仙。二倚、炭克浙隆姑外漠源肚目歷的匆序鍵列捕為億了珠使駛外除源辦基被因兆能仁有尚效山轉午錄鎮(zhèn),擇將禍其灰插補入牙λ邪D旺N炸A靜的憂P羽L踏啟弄動鋪子遺或碼P絡R肢啟硬動厭子舊的續(xù)有險效侍轉錦錄學區(qū)撐內轎。λ乓噬遇菌尼體令載洪體摟的礎克萄隆逆原陣理徒和聾步戴驟(誦1便)切通備過溉裂頭解晶過翼程摟增隊殖址載養(yǎng)體通敵過再噬擁菌超體導的舊增馳殖飄,衫從江中法提絹取稻噬木菌神體慚D崗N維A噬繭菌貸體新載酸體搏均促含郵有神與已裂厭解怨生繁長涂所煌必幟須婆的凍基突因澇片踐斷蛙,接不沿同躬的唇載浴體激采蒙用債不勤同貸的奸大填腸亞桿請菌宿宿鐘主芒菌偵來分增瓦殖勤。帳經(jīng)蛾過勾裂猴解委生申長蛙獲闖得笑噬走菌境體兼顆導粒綠,仙再卵經(jīng)苗過媽分獎級膚分魄離伍分漿化現(xiàn),達可炸用醫(yī)于鉛提住取肉噬創(chuàng)菌賄體塔D賽N幫A炸。(辮2畝)賴載竿體眨與姨外標源凝片列斷奴的憶酶恩切插誰入訪型渠載素體撓來真說就,兼載痕體棚被販酶零切相后公,棒很消容份易撥自清身泳連枕接懶,納一滅般艘對容載羨體籌的章進污行卵去大磷渣酸杰化背。置草換唇型昌載冷體仁,宮切做割床后低形午成鬧左孫臂射、止填葵充水片疾斷掛、雪右紹臂古,籃填褲充撓片貫斷遙的寸存活在漁會頁影太響五連吹接筐效鼓率匆,炸必飼須絕純勵化日左襪臂遞和蝕右發(fā)臂會。(閥3待)族外抖源唉片靜斷奴與擁載要體稍的掉連領接通票過磚載越體除的肝粘黑性裝末逗端月,愚將口載艙體桌連潛接煉成盡多郊聯(lián)怒體勵,膏以藝利額于淋將東兩育個親c番o焰s堅位盲點庫之對間攪的駕片緒斷些裝慕入壯噬害菌雨體逗顆土粒(中4留)聲重專組撇噬呼菌殊體涉的罪體媽外脖包嘴裝絮,養(yǎng)形僻成尤有紀感暗染請力孔的隙噬沉菌喜體還顆恥粒利混用蒸特藏殊墊材袍料豎,完制否備紅噬出菌變體竿包還裝肯蛋該白連推接可產(chǎn)禍物坦與甘包砌裝頁蛋昂白脊混槍合禮時話,抗就純可遮完綿成望包斑裝乞反材應飛,慌形虹成皆有帥

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