食品微生物黃

食品微生物黃第1頁(yè)，課件共14頁(yè)，創(chuàng)作于2023年2月肉毒毒素引起食物中毒的機(jī)制及其防治江蘇大學(xué)醫(yī)學(xué)基礎(chǔ)與醫(yī)學(xué)技術(shù)學(xué)院檢驗(yàn)0502班丁永峰2009-03-29第2頁(yè)，課件共14頁(yè)，創(chuàng)作于2023年2月概述肉毒毒素的結(jié)構(gòu)肉毒毒素的中毒途徑肉毒毒素的作用機(jī)制肉毒毒素中毒的臨床表現(xiàn)肉毒毒素中毒的治療肉毒毒素中毒的預(yù)防第3頁(yè)，課件共14頁(yè)，創(chuàng)作于2023年2月

概述

早在1817年,JustinusKerner首先認(rèn)識(shí)到,食物中所攜帶的某種毒素,能夠?qū)е鹿趋兰『透苯桓猩窠?jīng)功能麻痹。至1897年,vanErmengem在一次暴發(fā)性食物中毒流行病學(xué)調(diào)查,于食物與人體內(nèi)均檢出了革蘭陽(yáng)性、厭氧肉毒梭菌(Clostridiumbotulinum),并定名為“肉毒病(botulism)”。肉毒梭菌所產(chǎn)生的肉毒毒素(Botulinumtoxin,BTX),具有極強(qiáng)的毒力,低至0.05μg即可致死。百余年來,肉毒毒素中毒事件在全球各地時(shí)有發(fā)生,不但威脅人體健康,并且由于其具有極強(qiáng)的神經(jīng)毒性,還有可能被用于恐怖襲擊和生物戰(zhàn)。因此，研究肉毒毒素引起食物中毒的機(jī)制和建立完善的防治措施對(duì)國(guó)民健康具有重要意義。本文簡(jiǎn)要論述了肉毒毒素的中毒情況和防治措施。第4頁(yè)，課件共14頁(yè)，創(chuàng)作于2023年2月一、肉毒毒素的結(jié)構(gòu)

肉毒梭狀芽胞桿菌為自養(yǎng)型革蘭氏陽(yáng)性厭氧菌,在缺氧條件下繁殖并產(chǎn)生外毒素。通?？蓜澐譃?種類型,即A,B,C,D,E,F,G型肉毒毒素,其中C型又可分為C1和C2(或稱Cα和Cβ)兩個(gè)亞型,因此又有8型提法。各型肉毒毒素的抗原性和免疫原性(immunogenicity)及其毒性作用機(jī)制不同,但分子結(jié)構(gòu)基本一致。其中，對(duì)人致病的主要是A、B及F型。作為生物武器使用的肉毒毒素氣溶膠濃度達(dá)到0·02~0·3mg/m3,人吸入1分鐘即可致死。肉毒毒素本身是一種蛋白質(zhì),無色無味、耐酸不耐堿。為目前已知毒素中毒性最強(qiáng)的。作用于外周神經(jīng)-肌肉接頭、自主神經(jīng)末梢及顱神經(jīng)核,致運(yùn)動(dòng)神經(jīng)麻痹。第5頁(yè)，課件共14頁(yè)，創(chuàng)作于2023年2月

特點(diǎn)：(1)40℃以上,特別是堿性環(huán)境,很容易發(fā)生肉毒毒素?zé)嶙冃?(2)空氣-液體界面形成的氣泡,能夠引起神經(jīng)毒素的伸展和形狀改變,從而使毒素溶液失去毒性;(3)氮?dú)夂投趸辑h(huán)境,也能發(fā)生毒素變性;(4)過低濃度稀釋(如μg/L)能夠降低神經(jīng)毒素穩(wěn)定性,但是采用pH≤6.8的其他蛋白(如明膠、?；蛉搜灏椎鞍?緩沖液稀釋則能有效防止這一效應(yīng)。

因此通常的藥用肉毒毒素產(chǎn)品即是一種復(fù)合制劑。第6頁(yè)，課件共14頁(yè)，創(chuàng)作于2023年2月二、肉毒毒素的中毒途徑

肉毒毒素中毒可以根據(jù)其傳播途徑不同分為四個(gè)類型:

①食源性肉毒毒素中毒:因攝入了含有肉毒毒素的食物發(fā)生中毒。傳播毒素的食品主要是在厭氧條件下生產(chǎn)或貯存的制品,如罐頭、香腸、臘肉等,發(fā)酵的豆制品和面制品如臭豆腐、豆瓣醬、豆豉、甜面醬。其中以罐頭與豆豉的厭氧環(huán)境較易生成毒素。

②創(chuàng)傷性肉毒毒素中毒:因傷口感染了能產(chǎn)生肉毒毒素的肉毒梭菌而中毒。

③嬰兒肉毒毒素中毒:進(jìn)入嬰兒腸道的肉毒梭菌孢子分泌內(nèi)毒素使中毒。

④兒童及成人肉毒毒素中毒:不同于1、2型的中毒且產(chǎn)生肉毒毒素的腸道肉毒梭菌只存在于年齡大于一周歲的人群。

第7頁(yè)，課件共14頁(yè)，創(chuàng)作于2023年2月三、肉毒毒素的作用機(jī)制

神經(jīng)毒素的作用發(fā)揮需經(jīng)過4個(gè)步驟:(1)神經(jīng)毒素H鏈的羧基端受體識(shí)別位點(diǎn)與膽堿能神經(jīng)末梢質(zhì)膜上受體特異性結(jié)合。(2)在受體介導(dǎo)下,經(jīng)能量依賴性細(xì)胞內(nèi)呑作用,完成神經(jīng)毒素跨膜轉(zhuǎn)運(yùn),形成胞內(nèi)體。(3)酸性環(huán)境的胞內(nèi)體,神經(jīng)毒素經(jīng)一系列蛋白分解活動(dòng),形成L鏈—鋅肽鏈內(nèi)切酶并釋放進(jìn)入神經(jīng)細(xì)胞胞質(zhì)。(4)L鏈-鋅肽鏈內(nèi)切酶的作用底物不同類型肉毒毒素不同,BTX-A,E,C1的L鏈裂解突觸相關(guān)膜蛋白,BTX-C的L鏈裂解突觸融合蛋白,BTX-B,D,F,G的L鏈裂解囊泡相關(guān)膜蛋白;然而,各型毒素L鏈作用底物-SNAP25,Syntaxin,VAMP的復(fù)合物,則是介導(dǎo)乙酰膽堿囊泡?？客挥|前膜及出胞的必需,如此任何類型毒素的最終效應(yīng)阻止了SNARE復(fù)合物形成,從而抑制了乙酰膽堿以囊泡為單位的“傾囊”式突觸間隙釋放,即所謂量子式釋放。第8頁(yè)，課件共14頁(yè)，創(chuàng)作于2023年2月

肉毒毒素的作用包括結(jié)合、定位和麻痹3個(gè)階段。一旦毒素與神經(jīng)細(xì)胞受體或具內(nèi)吞作用的間接受體結(jié)合后，抗體就不能中和毒素。接著內(nèi)涵體的酸性發(fā)生變化，啟動(dòng)毒素轉(zhuǎn)運(yùn)區(qū)域構(gòu)象發(fā)生變化，同時(shí)囊泡腔在囊泡膜質(zhì)子泵ATP酶作用下酸化，暴露出一個(gè)疏水區(qū)域，在膜上產(chǎn)生一個(gè)離子通道，L鏈通過此通道進(jìn)入胞液。在胞內(nèi)，毒素分解3種蛋白釋放Ach，導(dǎo)致肌肉松弛或痙攣麻痹第9頁(yè)，課件共14頁(yè)，創(chuàng)作于2023年2月四、肉毒毒素中毒的臨床表現(xiàn)

一般誤食后12~36小時(shí)發(fā)病,也可短到2小時(shí),長(zhǎng)到8天。潛伏期越短,病情越重。與一般食物中毒不同的是消化道癥狀如惡心、嘔吐、腹痛等多不明顯。而是以肌無力癥狀為主。中毒后的表現(xiàn)為,起初全身軟弱、疲乏、頭痛、眩暈,眼部癥狀也很突出,表現(xiàn)為畏光、復(fù)視、視力減退。逐漸出現(xiàn)眼外肌癱瘓,表現(xiàn)瞼下垂、復(fù)視、瞳孔擴(kuò)大,嗜睡,但容易喚醒,并有吞咽、咀嚼、言語、呼吸困難等。

第10頁(yè)，課件共14頁(yè)，創(chuàng)作于2023年2月隨著病情的發(fā)展,逐漸出現(xiàn)抬頭困難,共濟(jì)失調(diào),繼而呼吸肌及雙側(cè)下肢肌力減弱,可出現(xiàn)呼吸衰竭及心力衰竭。由于唾液腺及淚腺分泌減少,患者眼干、咽干及疼痛,飲水亦不能緩解癥狀?？谇徽衬じ稍?、發(fā)紅、常有結(jié)痂。還可出現(xiàn)腹脹、腸鳴音消失、便秘、腸梗阻及尿潴留等。肢體一般不全癱、體溫正常、神志清楚,可有體位性低血壓。重癥者可于發(fā)病后3~10天因呼吸衰竭、繼發(fā)感染或出現(xiàn)難以預(yù)測(cè)的呼吸驟停而死亡。治療順利者可于數(shù)天后逐漸恢復(fù),一般呼吸、吞咽及言語困難先行緩解,隨后其他癱瘓肌肉也逐漸恢復(fù)。視覺恢復(fù)較慢,可持續(xù)數(shù)月之久。第11頁(yè)，課件共14頁(yè)，創(chuàng)作于2023年2月五、肉毒毒素中毒的治療

1、抗毒血清：

對(duì)于中毒患者首先要及時(shí)應(yīng)用抗毒血清,這是搶救生命的關(guān)鍵。在起病后24小時(shí)內(nèi)或癱瘓發(fā)生前注入最為有效,但即使已經(jīng)發(fā)病多日,也要應(yīng)用抗血清。一般靜脈或肌肉注入多價(jià)抗毒血清5~10萬單位,必要時(shí)每6小時(shí)重復(fù)1次,重者劑量加倍,使用前要做過敏試驗(yàn),以防過敏性休克。2、監(jiān)護(hù)與改善呼吸功能及加強(qiáng)支持治療是降低病死率的關(guān)鍵。

注意保持呼吸道通暢、吸引呼吸道分泌物、給氧。由于呼吸肌無力出現(xiàn)通氣不足時(shí)要行氣管切開,必要時(shí)使用呼吸機(jī)人工通氣。第12頁(yè)，課件共14頁(yè)，創(chuàng)作于2023年2月六、肉毒毒素中毒的預(yù)防1、類毒素用肉毒類毒素疫苗進(jìn)行預(yù)防接種能預(yù)防肉毒毒素氣溶膠中毒。實(shí)驗(yàn)證明,被免疫的動(dòng)物能完全抵抗吸入致死劑量的肉毒毒素。美軍研制的A~E型肉毒5價(jià)類毒素疫苗目前被用作試驗(yàn)型新藥,皮下注射,注射間隔為0,2和12周,以后每年加強(qiáng)。2、基因工程重組疫苗根據(jù)美國(guó)防部1998年的核化生防護(hù)報(bào)告