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文檔簡介

河科大大學(xué)生訓(xùn)練計劃(SRTP)

RNAi誘導(dǎo)tapmRNA降解對果蠅神經(jīng)發(fā)育的影響成員:喬鈺璐

丁勁峰

夏南飛

蘇珂此項目意義何在?

其研究對生命科學(xué)的研究有何作用?我們都知道原神經(jīng)(proneural)基因表達催生并確定神經(jīng)前體細胞,神經(jīng)前體細胞經(jīng)增殖分化才形成神經(jīng)系統(tǒng),因此原神經(jīng)基因?qū)ι窠?jīng)發(fā)生有決定性作用。原神經(jīng)基因最先從果蠅中發(fā)現(xiàn),后被證實為bHLH基因。接著人們又在各類脊錐動物發(fā)現(xiàn)更多的bHLH基因,其neurogenin(ngn)基因就是其中的一種,而ngn果蠅直系同源蛋白Tap的功能至今未知。目前對ngn基因的研究組要集中在ngn基因表達模式的檢測,以及制備ngn突變體以及觀察其突變表型,但對ngn基因本身的調(diào)控和被調(diào)控機制涉及甚少,因此對tap基因的功能及調(diào)控的研究將對ngn基因的相關(guān)研究具有重要的意義。一.tap基因克隆,制備相應(yīng)RNAi構(gòu)建P徑C廣R擴塘增俘五徹要修素(肅一利)善引歡物(記二動)耐模雪板(暈三縮慧)M帝g2綢+(藏四呼)t騙a喊q聚污合論酶(蜓五積)四屬種d鼻N塌T慰PP葡a肚r蹦t躁1引凱物討的屑獲春得首角先何我斗們潛應(yīng)尋該流清吳楚算,獲我畜們購研雜究露的唐是拆黑戶腹當果鎮(zhèn)蠅笨(d坑r撲o凍s岔o親p汗h臨i覆l之a(chǎn)摧m顆e框l著a肆n牲o詢g邊a嘗s以t差e幸r)墨的t碼a匯p基報因粉,所唉以卷我器們籌應(yīng)關(guān)該費在t湯h勢e按w座e宋b蜂s霜i瓜t戴e證o逐f赤p逮u爭b紡m郊e棄d上聞?wù)肄p出t代a逆p的腎完女整喊基姿因兩序雨列留。然亭后男在t象h宮e殖w瀉e亭b才s密i胡t蠶e退o遍f氧O招R結(jié)F哀f刪i肥n券d淺e您r上抗找論出t皮h瘦e拒s餡e殼q束u脫e關(guān)n松c爪e憤o塑f覺O攏R麻F罰o鏈f漏t湊a軍p上案方吊為D地N釘A序蒸列詳,窗下朗方石為移其即所匙對及應(yīng)塑的握氨剃基心酸憂。由霸于t煎a誼p基品因旁為b詠H劍L磁H模櫻式繡基紅因蕩,寬對抵比蕉文冠獻個可知得濕到胞該饞模云式畝的到基亭因酬序鉤列瞎。將籠得霉到新的中部鋪分D觀N謙A序池列楚放梢入p恨r(nóng)腸i題m組e雹r閱3軟削件謀中云得鋒到懷該墨序隔列譜的疾引牛物L坦e侄f咳t肉p蛾r掠i記m的e螞r5胞’t躬c竊g夕a寺t頂a朗c崖g賴a圖g載c懶a辛g摟c悉a健a棋t昆c音a儉c靈3廊’R階i豈g端h緒t甜p兔r駛i絹m過e染r5亮’a味t耍c搜t紋t進c志a摘c爬c袍a蘿c森t沸t今g撫g元g用t寇t膝g給g建3止’正偵向Ga放c辦t母a徹g宮tCt豬c辱g動a藏t拳a倆c蟲g丘a皆g車c品a譜g若c燙a軋a窯t彼c蘭a夕cCt班g脂a敏t摟c代aGa咳g德c挪t腫a湯t蹄g殿c釣t蹈c哄g膝t采c基g房誠t閘t敢a煮g繳t偶ga餡t糾c蛛t甘t慕c祝a低c駝c仙a剛c蓬t弓t霧g頓g曬g債t飼t恥g典gC繭T擁Ag燃c再t年a即g拔cT坦A趟Gt驗a失g軍a活a紙g照t坐g瓜g卷t齒g照a偏a濫c欄c擴c墻a目a靠c典cG監(jiān)A洪Tc鞭g祖a監(jiān)t療c彎gA劑T借Catgtacttcaag::::::::::5‘3‘SpeIAvrII反女向a沙t血c評t裳t越c傅a戚c小c射a防c栽t叛t慎g饑g裙g園t魂t關(guān)g攪gG親A革Gc匠c提a遺t亮g亡gG鏡A哄Gt標c烈g思a嘩t銹a且c昌g弟a過g遼c輸a末g年c騰a跟a亡t所c餓a閱cG帖Ca農(nóng)g程atc片tC腸GG昨Ca始g盞a阻t敗c艷tC忘Gc瞇a致c豈t紋a威a亭c斑g藍a落c犯g擇a放g搶c欺a學(xué)tG啄A壩Gc槐c以t渴a插g碑gG除A配Gg摘g啦t萄t遮g娃g營g救t淘t鄭c宏a穿c適c軋a休c租t頭t幸c桐t痛acttgaagtacat::::::::::3‘5‘NheIXbaIt駝a陶pk蛙n志o赴c宅k正d失o凈w赴n翁b勵y墊R刊N遲A茫iE貌x闖p楚r訂e裳s錦s艘e脾d房誠i而n扭f鵲l督y(tǒng)R卷N舞a黃s筑e怨m妙a鬧c眨h打i笨n緣瑞e道r氧yR怠N那A返i解c烘o箏n童s賠t貫r溫u群c債tD堆o痕u綱b票l雙e鬼s鴉t跑r勉a棄n洗d應(yīng)e幣dm似R辦N役A誦h閱a碰i柴r帥p友i劃nS肆m新a匙l腿l駝i季n坊t欺e前r存f夢e戴r暮i徐n縣gR里N沫A接s(撕s贊i典R散N遇A再)T變r境a家n偉s宇c攔r堪i草p膚t莫i惜o制nT愿a姥r未g梯e躬t造g黑e犬n其em僚R雞N堅AD即e忌g悉r停a來d餃a潮t蓬i叉o雖nN傲o繪t蝴r傷a亞n摔s宋l賴a清t定i剛o墨nT朋h眉i掌r屑d鉗:看R怒N喇A榴i構(gòu)瞇建首雹先摧在f駛l礦y棟b透a皺s故e網(wǎng)暑站告上毫找叛了妙一隔個獸適嘴合神我滲們胃用槽的v應(yīng)e棋c糟t顫o俊r(p漿W足I此Z領(lǐng)v捉e言c痕t淺o好r)槐在碌上尼面做上嘴有團四雖個騰酶喂切燃位柔點絹(T若h虎e陳y按a循r狀e攤u砍n柔i頸q伶u偷e殃i季np村W找I物Z)維,季分警別根為S樸p債e堡I、A諒v廈r遵I蛋I、N冷h奇e緣瑞I、X兼b內(nèi)a伶I弄,由組于進我懼們握所踏克恨隆村的亂基璃因播序總列晝無逢這增些淡酶逃的丈酶津切毛位檔點盼,被所盲以添我爪們震應(yīng)考該巡壽在葡引偶物澡上收加民上鏟這配些姜酶看的雁酶俘切辮位衡點(烈P遠W魯I籠Z咬v巴e貸c起t槽o偶r如壤圖壟)四洽種休限突制思性浩內(nèi)柔切脹酶農(nóng)的特序旬列S以p季e棒ⅠA揮v勁r朋ⅡN全h毫e突ⅠX迫b眉a喘Ⅰ引純物誤加截上主酶舉切俱位透點危以塘及飽保舅護誘堿級基丹以煮后:引缸物與設(shè)眠計抓共蹄兩鈴種繡:第威一徒種散:L挺P道:G蟻a袖c勒t說a飼g授t盜Ct悟c丑g承a趴t泊a雞c室g駐a劑g濃c講a鉛g拿c是a眼a野t賞c遮a杜cR憲P宅:g在g嫂a比t話c劉ca喚t澇c糟t謊t只c時a父c照c韻a狀c速t岸t慈g懷g掉g繪t知t社g旋g輛(弄?份?概?未?墓?曾?挨)第吧二請種固:L桂P扛:G蘆C紙t頭c名t竭a春g臂a遵G同Ct僚c滋g疫a謎t宵a子c賀g貢a衫g未c故a課g滴c絡(luò)a污a灘t先c晉a癢cR敵P襖:C采T穗A糠g曬c汽t剝a糾g漫c靜T碑A區(qū)Ga碰t只c向t駐t醋c綁a科c震c艱a職c餡t課t歌g掠g譜g串t館t涌g構(gòu)gP敲a刷r勾t戲2孤.模侵板配的項獲生得果日蠅D梯N抵A的迫提秤取幅和段純構(gòu)化果度蠅D決N需A的煩提羊取候和壘純炭化實妄驗趟原佳理:使壟用闖消閑化閉緩速沖羨液刷使D董N敢A從喪細槐胞濕內(nèi)屋釋杠放驅(qū)出座來捉,6具5度掠溫銷育啞可窯以花加牧速D留N紗A溶良解擦,讓酚—象—氯麻仿經(jīng)異作戊拼醇恥抽綠提川可謊以膠將址蛋徑白拔質(zhì)課與D丑N萌A分洞離油,宴冷硬的喪異起丙戒醇宜沉振淀D姐N孟A,7女0%多的鵲乙霧醇磁洗贊去D也N翠A表變面廟的抓殘乘留幟有丟機繳溶朝劑欄。酚-氯裳仿惜抽堵提漁法提寫取鳴組泳織組閥織醬勻仁漿水暈相(緣瑞D爽N球A芳,啟R現(xiàn)N億A稿)絮在狀慚沉?xí)?習(xí)D鋒N記A鬧,少鋪量脾蛋荷白蕉質(zhì),注R俊N慣A嗚)D管N工A消熟化激緩鍋沖姑液苯絡(luò)酚-氯演仿離挺心離戰(zhàn)心離姿心氯記仿-異買戊圖醇5滿m線o局l難/苗L害N肅a也C辣l冰退無事水據(jù)乙劉醇7攔5惱%乙枕醇T村E1部.消斥化饒緩共沖慶液0園.咱1督m品o繼l靜/礎(chǔ)L胞N捉a買C乓l1愿%娛S市D析S(洽十冤二蕩烷囑基珠磺機酸揉鈉匠)1誼0港m顯m碎o狠l廈/荷L歪T慰r名i唉s湖-哲H版C劉l綢p沈H遲8肆.懷01弊m吵m碌o涌l近/撐L啄E兼D抬T貍A縫p虧H弓8懷.據(jù)0陰恐離芳子冠去蠢污膚劑野,伯作削為鄰變瞞性灣劑膛和帽助制溶粉試筋劑畏,眉它疊能刺斷愁裂埋分巖子攏內(nèi)罵和慘分研子夸間豆的極氫或鍵灣,殊使腦分奶子殃去渴折好疊利,憶破垮壞盞蛋沿白娃分逃子牌的飾二罪、碎三床級蜘結(jié)開構(gòu)私。抑隊制D脫N層A酶陪活公性p霉H值河適希宜D旁N疾A游丹離昆至唇水鴉相月,興避加免疲降厭解患。苯剛酚-氯漂仿投(3都:腐1,V醉:騰V)T頭r索i討s戰(zhàn)-黎H俗C挽l飽拆和操作太時膜,金應(yīng)疾將械移候液擦管復(fù)伸少至擁試流劑疫瓶貫底消部虎,盲吸鑼取劃下喪層仍試竿劑。苯索酚樂與得氯汽仿割均袋為濫表白面搖變頁性壺劑夾,封能放夠委有養(yǎng)效膽地邪去海除襲水守溶奮液宣中員的諸蛋訓(xùn)白宜質(zhì)射,肝使香其叫變險性獎后慘沉知淀膏。氯植仿-異董戊耕醇功(2言4側(cè):斤1,V引:悉V)經(jīng)件酚頭氯號仿寄試褲劑仰第繩一友次固抽隱提政后譯的搖水景相棗中獄有永殘惱留碌的例酚夾,央由豪于俯酚位與嚴氯種仿竊是噴互券溶緩的傾,乞可嗎用車氯訓(xùn)仿痛第阻二錫次言變兔性栗殘濕余堵的燃蛋古白豆質(zhì)島,辯同少時梁一規(guī)起魂將舅酚鍛帶業(yè)走肌。加箏入君異責戊鐮醇飾能螺降筐低農(nóng)分供子哈表咽面宜張點力籠,箏所怪以蛇能跨減胖少貢抽遍提亞過夫程誘中彎的剖泡伏沫怨產(chǎn)像生損。廢同頭時鐵異毛戊探醇巷有手助蕉于妥分狂相叢,宇使柏離幫心碼后錫的乒上麻層寒水訂相斃,侮中退層瞎變瓶性蘿蛋畝白越相思以惜及普下張層際有遇機叨溶欣劑鍋相織維車持乖穩(wěn)欣定7該5愉%乙陡醇洗終滌駁作繼用冰,恭去或除座殘隊余甜的卷金害屬溉離斑子爺。腎同肌時左,犯保涼護D爺N遙A完瓶整孤性資,怨避停免付降稿解隔;抑詳制盛核禿酸懶酶雕活攏性寺。T暖E緩檔沖劑液T艙E緩篩沖胖液紹是T汪r松i歪s召+豪E修D(zhuǎn)刊T禾A緩煌沖崗液罪,卡一篇般宏用繡作中溶伸解擇劑技或僻保某持械劑圈,卷主急要舒是抗調(diào)延控p語H。T歷E緩綱沖頌液懲是趴弱肆堿亡性,對D典N霸A的世堿蝴基墊有命保漸護社性蠻。D捆N幻玉A在T倉E提嫁供惠的扔環(huán)奮境瞎中歌穩(wěn)概定牛性五較然好,不真易噸破洗壞千其朗完言整瓜性創(chuàng)或蔽產(chǎn)喊生險開桑環(huán)挖及繳斷愁裂華。艙包牛括候提孕取歐好趣的D瞧N榴A也餐要邊放柿在T肌E緩憂沖粒液毛中臣保疲存道。實驗困材料新鮮過存叢活攔的廉果眉蠅攪或亂-2率0創(chuàng)℃凍覺存1喚h的貢果琴蠅完個仆體5~1沒0個宣。實驗脅儀折器暗及粗用列具器畜具出:接玻稅璃倆棒獻、碗燒摘杯堵、肥離裕心品管段、嘩量味筒峰、批分磚析蹲天梨平幸、蔥水偏浴陷鍋答、更臺叫式液高染速榮離減心既機聰、4博℃冰采箱勸、神長絞玻搏璃惜吸白管葬、唯微發(fā)量素加層樣漏器甩、拼槍敲頭萌、盲紫需外顏分爽析嚼儀花、昂瓊紀脂碎糖沒電逐泳職裝環(huán)置涼。藥品壓和窮試劑酚汁(T湯r熊i摟s飽廈和粥酚慰)太、慮氯色仿約、晉異桿戊廊醇酸、翁十姿二固烷起基折硫油酸探鈉(索S波D火S希)、T敬r臂i桃s堿漆、苗乙謎二遮胺揪四津乙葡酸避(E洽D聚T朱A)伐、總異廈丙葉醇陷。溶液簽配擾制:消夸化素緩環(huán)沖舒液:含1趁0驕0陷m鄭M的N圣a諒c魔l,1祖0皂m落M耍T顯r侍i簽s莊.齡c哀l(P稼H點8選.樓0),抄2曠5戚m紗M的E街D純T續(xù)A(P亦H脅8井.浴0),練0擦.年5%謝的S匠D漠S。T蝴E緩慣沖端液(P皇H撞8貫.遭0)這:崇含1城0門m噴M疾T別r制i奇s趙.脾c賢l(P招H把8鐮.棉0),碗1壞m奧M的E犬D皇T珍A(P隊H紅8咸.綠0)蔑。電苗泳欲緩尸沖駛液T雀A玻E:電跌泳騎緩虛沖慕液璃(5煤0丑×恩T苗A陳E)臂:醋取T鉗r柱i肝s跳2訴4葬.室2輝g,墳冰幫醋則酸5蔥.好7盤m謠l,0廁.娘2隱5雙m姓o周l扎/寺L婦E籮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