微生物染色技術(shù)培訓(xùn)課件

微生物染色技術(shù)細(xì)菌的大小測量細(xì)菌大小的單位是微米（μm）多數(shù)球菌直徑為：1μm中等大小桿菌長約為２－３μm.同一種細(xì)菌可因菌齡不同和環(huán)境等因素而有差異細(xì)菌的大小與形態(tài)2微生物染色技術(shù)細(xì)菌的形態(tài)細(xì)菌的基本形態(tài)有三種：球菌(coccus)；桿菌(bacillus)螺形菌(spiralbacterium)3微生物染色技術(shù)細(xì)菌結(jié)構(gòu)模式圖4微生物染色技術(shù)細(xì)菌的結(jié)構(gòu)分為兩類：莢膜鞭毛菌毛芽孢細(xì)胞壁細(xì)胞膜細(xì)胞質(zhì)核質(zhì)細(xì)菌的基本結(jié)構(gòu)細(xì)菌的特殊結(jié)構(gòu)5微生物染色技術(shù)習(xí)慣上：細(xì)菌的結(jié)構(gòu)基本結(jié)構(gòu)特殊構(gòu)造細(xì)胞壁、細(xì)胞膜、細(xì)胞質(zhì)、核物質(zhì)、核糖體和內(nèi)含物等細(xì)菌基本生命活動中所必需各種細(xì)菌都具有的結(jié)構(gòu)

如夾膜、鞭毛、菌毛、芽孢等與基本生命活動沒有多大關(guān)系并不是所有細(xì)菌都有這些結(jié)構(gòu)6微生物染色技術(shù)細(xì)胞質(zhì)間體菌毛莢膜細(xì)胞膜鞭毛內(nèi)含顆粒核糖體核體細(xì)胞壁/外膜（如果存在）7微生物染色技術(shù)細(xì)胞壁細(xì)胞質(zhì)細(xì)胞膜細(xì)菌的染色體菌毛核糖體質(zhì)粒鞭毛內(nèi)含物莢膜8微生物染色技術(shù)一、基本構(gòu)造（一）細(xì)胞壁(Cellwall)位于細(xì)菌細(xì)胞最外層，貼近細(xì)胞膜之外，是一層堅韌而具有一定彈性的膜狀結(jié)構(gòu)。

結(jié)構(gòu)比較復(fù)雜較厚（10~80nm)質(zhì)量均勻網(wǎng)狀結(jié)構(gòu)可承受細(xì)胞內(nèi)強大的滲透壓而不破壞9微生物染色技術(shù)革蘭氏染色法

由于各種細(xì)胞壁所含成分不一樣，1884年丹麥科學(xué)家（ChristionGram）發(fā)明了一種染色方法，我們稱之為革蘭氏染色法。據(jù)革蘭氏染色反應(yīng)不同，可以把細(xì)菌分為兩大類：

-革蘭氏陽性菌

G+

-革蘭氏陰性菌

G-10微生物染色技術(shù)革蘭氏染色(Gramstaining)過程1）初染：結(jié)晶紫溶液染色1~3min,水洗2）媒染：盧戈碘液1min，水洗3）脫色：95%的酒精，脫色時間根據(jù)抹片的厚度靈活掌握，多在15~30s之間，水洗4）復(fù)染：番紅染色液染1min，水洗5）干燥：吸干或自然干燥6）鏡檢：G+菌呈藍(lán)紫色，G-菌為紅色11微生物染色技術(shù)碘液媒染95%乙醇脫色石炭酸復(fù)紅或番紅染色液復(fù)染細(xì)菌菌體涂片固定結(jié)晶紫染色GramPositiveG+GramNegativeG-12微生物染色技術(shù)GramstainofGram+Staphylococcuscells

13微生物染色技術(shù)GramstainofGram-E.colicells14微生物染色技術(shù)革蘭氏陽性菌細(xì)胞壁組分：

肽聚糖、磷壁酸革蘭氏陰性菌細(xì)胞壁組分主要有：

肽聚糖、外膜（脂蛋白脂質(zhì)雙層脂多糖）細(xì)菌的細(xì)胞壁特殊成分基本成分—肽聚糖革蘭陽性菌—磷壁酸革蘭陰性菌—外膜15微生物染色技術(shù)肽聚糖化學(xué)組成：特點：層次多（50層）三維空間網(wǎng)格結(jié)構(gòu)特點：層次少（2層）二維平面結(jié)構(gòu)G（+）菌G（-）菌聚糖骨架聚糖骨架四肽側(cè)鏈（丙、谷、賴、丙）四肽側(cè)鏈（丙、谷、二氨基庚二酸、丙）五肽交聯(lián)橋16微生物染色技術(shù)

（２）主要成份：肽聚糖(peptidoglycan)又稱mucopetide

Gram’s陽性菌：肽聚糖＋磷壁酸＋特殊蛋白肽聚糖:聚糖骨架、四肽側(cè)鏈、五肽交聯(lián)橋G+菌含量豐富，15-50層占胞壁干重50~80%

幻燈片3317微生物染色技術(shù)Ａ、聚糖骨架:N-乙酰葡萄糖胺(N-acetylglucosamine)N-乙酰胞壁酸(N-acetylmuramicacid)兩者由β

-1,4糖苷鍵聯(lián)結(jié),各種細(xì)菌的聚糖支架相同，這是肽聚糖合成的第一步。18微生物染色技術(shù)

Ｂ、四肽側(cè)鏈：氨基酸組成及聯(lián)結(jié)方式隨菌種不同而異，以金葡菌為例，N－乙酰胞壁酸上連結(jié)L－丙氨酸、D－谷氨酸（或D－異谷氨酰胺）、L－

賴氨酸、D－丙氨酸，這是肽聚糖合成的第二步。

19微生物染色技術(shù)Ｃ、五肽交聯(lián)橋：五個甘氨酸組成的交聯(lián)橋，一端接在第三位L-賴氨酸上，另一端在相鄰四肽側(cè)鏈的未端D-丙氨酸上，這是肽聚糖合成的第三步。

20微生物染色技術(shù)1、革蘭氏陽性菌細(xì)胞壁的結(jié)構(gòu)壁磷壁酸

肽聚糖脂磷壁酸

陽性菌特有細(xì)胞壁較厚，約15~80mm。其化學(xué)成分主要是肽聚糖，約占細(xì)胞壁干重的40~95%，形成15~50層聚合體。組成肽聚糖的聚糖骨架與革蘭氏陰性細(xì)菌相同，但四肽側(cè)鏈的組成和交聯(lián)方式則與革蘭氏陰性細(xì)菌不同。磷壁酸(Teichoicacid)21微生物染色技術(shù)（1）肽聚糖（peptidoglycan）又稱“粘肽”(Mucopetide)、“糖肽聚”(glycopetide)或胞壁質(zhì)（murein），是細(xì)菌細(xì)胞壁特有物質(zhì)。細(xì)胞壁的機械強度有賴于肽聚糖的存在。合成肽聚糖是原核生物特有的能力。22微生物染色技術(shù)凡能破壞肽聚糖結(jié)構(gòu)或抑制其合成的物質(zhì)，都能損傷細(xì)胞壁而使細(xì)菌變形或殺傷細(xì)菌，如：溶菌酶能水解肽聚糖支架的β-1，4糖苷鍵，引起細(xì)菌裂解。青霉素和頭孢霉素能抑制四肽側(cè)鏈上D-丙氨酸與五肽橋之間的聯(lián)結(jié)，使細(xì)菌不能合成完整的細(xì)胞壁，可導(dǎo)致細(xì)菌死亡。23微生物染色技術(shù)

不同的抗生素作用于肽聚糖合成的不同階段：

抑制第一步：磷霉素、環(huán)絲氨酸、溶菌酶

抑制第二步：萬古霉素、桿菌肽 抑制第三步：青霉素、頭孢菌

人類沒有細(xì)胞壁，因此研究和發(fā)掘破壞或阻抑肽聚糖合成的新型抗菌藥物是我們的方向之一24微生物染色技術(shù)革蘭氏陽性菌“肽聚糖”

（如金黃色葡萄球菌）由聚糖骨架、四肽側(cè)鏈和五肽交聯(lián)橋組成青霉素作用點溶菌酶作用點N-乙酰葡萄糖胺（N-acetylglucosamine，G）N-乙酰胞壁酸（N-acetylmuramicacid，M）25微生物染色技術(shù)磷壁酸

膜磷壁酸(Membraneteichoicacid)與細(xì)胞壁中肽聚糖的N-乙酰胞壁酸連結(jié)又稱脂磷壁酸(Lipteichoicacid)，和細(xì)胞膜連結(jié)，另一端均游離于細(xì)胞壁外。壁磷壁酸(Wallteichoicacid)（2）磷壁酸（Teichoicacid）G+菌特有，是由核糖醇(Ribitol)或甘油(Glyocerol)殘基經(jīng)磷酸二酯鍵相互連接而成的多聚物，并帶有一些氨基酸或糖。約30個或更多磷壁酸分子組成的長鏈，穿插于肽聚糖中。26微生物染色技術(shù)壁磷壁酸(含量多，通過共價鍵與肽聚糖分子結(jié)合,并延伸到肽聚糖分子表面)

膜磷壁酸(與細(xì)菌細(xì)胞膜的脂類結(jié)合)磷壁酸（Teichoicacid）27微生物染色技術(shù)磷壁酸的作用抗原性很強——G＋菌的表面抗原；在調(diào)節(jié)離子通過肽聚糖層中起作用；與細(xì)胞膜上一些酶的活性有關(guān)；某些細(xì)菌的磷壁酸，對宿主具有粘附作用，其作用類似菌毛，可能與致病性有關(guān)。因帶負(fù)電荷，故可與環(huán)境中的Mg＋等陽離子結(jié)合，提高這些離子的濃度，以保證細(xì)胞膜上一些合成酶維持高活性的需要。28微生物染色技術(shù)2、革蘭氏陰性菌細(xì)胞壁結(jié)構(gòu)較薄，約10～15nm，結(jié)構(gòu)成分較為復(fù)雜，由肽聚糖和外膜組成，外膜由脂蛋白、脂質(zhì)雙層、脂多糖組成。外膜：G－菌特有，為胞壁主要成分，厚8-10nm。包括：脂蛋白：向內(nèi)與肽聚糖（ＤＡＰ）相連脂質(zhì)雙層：液態(tài)，似細(xì)胞膜

脂多糖：G－菌的內(nèi)毒素，由類脂A、核心多糖、特異性多糖組成29微生物染色技術(shù)（1）革蘭氏陰性菌“肽聚糖”（大腸桿菌）包括聚糖骨架、四肽側(cè)鏈四肽側(cè)鏈的第三位氨基酸由二氨基庚二酸（DAP）替代，以肽健直接與相鄰四肽側(cè)鏈中的D-丙氨酸相連，無五肽交聯(lián)橋，形成二維結(jié)構(gòu)，故其結(jié)構(gòu)較疏松30微生物染色技術(shù)GGGGMM丙谷DAB丙丙DAB谷丙31微生物染色技術(shù)N-乙酰葡萄糖胺N-乙酰胞壁酸聚糖骨架四肽側(cè)鏈L-丙氨酸D-谷氨酸二氨基庚二酸D-丙氨酸L-丙氨酸D-谷氨酸二氨基庚二酸D-丙氨酸32微生物染色技術(shù)外膜①脂蛋白：位于肽聚糖層和脂質(zhì)雙層之間，起連接作用，使外膜和肽聚糖構(gòu)成一個整體。②脂質(zhì)雙層：磷脂雙層，內(nèi)嵌外膜蛋白（outmembraneproteinOMP），具有不同的功能。如有的外膜蛋白為孔蛋白是小分子的通道；有的是噬菌體、性菌毛、細(xì)菌素的受體。33微生物染色技術(shù)③脂多糖(lipopolysaccharide，LPS)---是革蘭氏陰性菌的內(nèi)毒素；有以下三部分組成：

類質(zhì)A（LipidA）：類脂A：是細(xì)菌內(nèi)毒素的毒性和生物學(xué)活性的主要組分，無種屬特異性。是細(xì)菌內(nèi)毒素的毒性和生物學(xué)活性的主要組分。

核心多糖(corepolysaccharide)：位于類脂A的外層，由己糖、庚糖、2-酮基-3-脫氧辛酸（KDO）、磷酸乙醇胺等組成。有種屬特異性。

特異性多糖(specificpolysaccharide)：由數(shù)個至數(shù)十個低聚糖重復(fù)單位組成的多糖鏈。具有種特異性。革蘭氏陰性菌的菌體抗原（O抗原）

34微生物染色技術(shù)脂多糖（LPS）

是革蘭陰性菌外膜的組成成分，包括類脂A、核心多糖和O特異性多糖三部分，又稱為內(nèi)毒素。類脂A是內(nèi)毒素的主要毒性成分；核心多糖具有屬特異性，同一屬細(xì)菌的核心多糖的抗原性相同；特異性多糖即菌體O抗原，具有種的特異性。概念35微生物染色技術(shù)是革蘭氏陰性細(xì)菌致病物質(zhì)－內(nèi)毒素的物質(zhì)基礎(chǔ)與磷壁酸相似，也有吸附Mg+、Ca2+等陽離子以提高這些離子在細(xì)胞表面的濃度的用；由于LPS結(jié)構(gòu)的變化，決定了革蘭氏陰性細(xì)胞表面抗原決定簇的多樣性；具有控制某些物質(zhì)進出細(xì)胞的部分選擇性屏障功能。脂多糖功能36微生物染色技術(shù)3、細(xì)菌細(xì)胞壁結(jié)構(gòu)比較特征革蘭氏陽性細(xì)菌革蘭氏陰性細(xì)菌強度較堅韌較疏松肽聚糖組成肽聚糖、側(cè)鏈、交聯(lián)橋肽聚糖、側(cè)鏈結(jié)構(gòu)類型三維空間結(jié)構(gòu)二維網(wǎng)狀結(jié)構(gòu)厚度與層次厚，20~80nm,可達50層薄，5~10nm,僅1~3層，含量多，占細(xì)胞壁干重的50~80%少，占細(xì)胞壁干重的5~20%交聯(lián)方式側(cè)鏈間以肽橋交聯(lián)側(cè)鏈間以肽鍵交聯(lián)磷壁酸有無脂蛋白無有外膜無有脂多糖無有37微生物染色技術(shù)4、細(xì)胞壁的功能1）保持：細(xì)菌外形2）保護：免受外界滲透壓和有害物用質(zhì)的損害3）屏障：它具有相對通透性，對物質(zhì)的進出，起著選擇性分子篩的屏障作用。4）抗原性：帶有多種抗原決定簇，決定細(xì)菌菌體的抗原性。5）與細(xì)菌某些染色反應(yīng)和藥物敏感性有關(guān)。38微生物染色技術(shù)（5）革蘭陽性菌與革蘭陰性菌細(xì)胞壁結(jié)構(gòu)差異的生物學(xué)意義

染色性：革蘭陽性菌細(xì)胞壁結(jié)構(gòu)致密，含脂類物質(zhì)少，不易酒精脫色，革蘭氏染色成藍(lán)紫色（紫色）；反之革蘭陰性菌染成紅色；抗原性：革蘭陽性菌的重要表面抗原之一是磷壁酸，革蘭陰性菌的核心多糖和O抗原多糖是為重要表面抗原；毒性：革蘭陰性菌的脂多糖即為內(nèi)毒素（類脂A為內(nèi)毒素主要成分），革蘭陽性菌無此成分；藥物敏感性：革蘭氏陽性菌對青霉素，溶菌酶敏感，革蘭陰性菌則否。39微生物染色技術(shù)G+菌與G-菌的差別及與細(xì)胞壁的關(guān)系革蘭陽性菌革蘭陰性菌細(xì)胞壁的關(guān)系染色性藍(lán)紫色（紫色）紅色細(xì)胞壁對酒精的通透性抗原性主要為磷壁酸主要為外膜細(xì)胞壁的化學(xué)組成不同毒性無內(nèi)毒素有內(nèi)毒素內(nèi)毒素為陰性菌細(xì)胞壁成分脂多糖對青霉素的作用有效無效青霉素作用部位為肽聚糖五肽交聯(lián)橋?qū)θ芫傅淖饔糜行o效溶菌酶作用部位為肽聚糖聚糖骨架40微生物染色技術(shù)（二）細(xì)胞膜（Cellembrane）

細(xì)菌細(xì)胞膜的結(jié)構(gòu)與真核細(xì)胞者基本相同，由蛋白質(zhì)、脂類和少量的多糖組成。所含的脂類均為磷脂，不含膽固醇。磷脂由磷酸、甘油、脂肪酸和含氮的堿基構(gòu)成。也稱質(zhì)膜(Cytoplasmicmembrane)。位于細(xì)胞壁內(nèi)側(cè)，包繞在細(xì)菌細(xì)胞質(zhì)外的具有彈性的半滲透性脂質(zhì)雙層生物膜。41微生物染色技術(shù)細(xì)胞膜的功能：1）選擇性通透作用，與細(xì)胞壁共同完成內(nèi)外物質(zhì)交換。2）膜上有多種呼吸酶，參與細(xì)胞的呼吸過程。3）膜上有多種合成酶，參與生物合成過程。4）傳遞信息，膜上的某些蛋白質(zhì)能接受光、電及化學(xué)物質(zhì)等的刺激信號并發(fā)生構(gòu)象變化，從而引起細(xì)胞內(nèi)的一系列代謝變化和產(chǎn)生相應(yīng)的反應(yīng)。5）細(xì)菌細(xì)胞膜可以形成特有的結(jié)構(gòu)。42微生物染色技術(shù)（三）核體（nucleoid）（基因組DNA）細(xì)菌為原核細(xì)胞，遺傳物質(zhì)為雙股環(huán)狀DNA，處于細(xì)胞質(zhì)中，相對集中于一個區(qū)域，無核膜，無核仁，也稱為擬核或原核。核質(zhì)由單一密閉環(huán)狀雙鏈DNA分子反復(fù)回旋卷曲盤繞組成松散網(wǎng)狀結(jié)構(gòu)核體具有細(xì)胞核功能，含有細(xì)菌的遺傳基因，控制細(xì)菌的遺傳與變異。43微生物染色技術(shù)44微生物染色技術(shù)45微生物染色技術(shù)（四）細(xì)胞質(zhì)（Cytoplasm）細(xì)菌細(xì)胞膜內(nèi)包裹的、除核體以外的所有物質(zhì)，是一種無色、透明、均質(zhì)的膠體，基本成分為水、蛋白質(zhì)、脂類、多糖、核糖核酸及無機鹽類等，是細(xì)菌進行營養(yǎng)物質(zhì)代謝及合成核酸和蛋白質(zhì)的場所。含有各種酶系統(tǒng)、核糖體、質(zhì)粒、包含物等。46微生物染色技術(shù)1、質(zhì)粒（Plasmid）1）質(zhì)粒為染色體外的遺傳物質(zhì)，存在于細(xì)胞質(zhì)中。為閉合環(huán)狀的雙鏈DNA，控制細(xì)菌某些特定的遺傳特性。2）例如：耐藥因子、細(xì)菌素及性菌毛基本均編碼在質(zhì)粒上。3）質(zhì)粒能進行獨立復(fù)制，失去質(zhì)粒的細(xì)菌仍能正常存活。4）質(zhì)粒可通過接合（conjugation）或轉(zhuǎn)化作用（transformation）等將有關(guān)性狀傳遞給另一細(xì)菌。5）人工改造的質(zhì)粒可作為基因工程載體。47微生物染色技術(shù)48微生物染色技術(shù)2、核糖體（ribosome）1）又名核蛋白體，是散布在細(xì)胞質(zhì)中的一種核糖核酸蛋白質(zhì)小顆粒，沉降系數(shù)為70S。其化學(xué)組成70%為RNA（核糖核酸rRNA）rRNA有5S、16S、23S三種，30%為蛋白質(zhì)。當(dāng)mRNA連成多聚核蛋白體，就成為合成蛋白質(zhì)的場所。細(xì)菌的70S核糖體由50S和30S兩個亞基組成。49微生物染色技術(shù)2）鏈霉素能與細(xì)菌核糖體的30S亞基結(jié)合，紅霉素能與50S亞基結(jié)合，從而干擾細(xì)菌蛋白質(zhì)的合成而導(dǎo)致細(xì)菌的死亡；真核細(xì)胞的核糖體為80S，因此對人體細(xì)胞則無影響。50微生物染色技術(shù)核糖體（ribosome）RNA和蛋白質(zhì)沉降系數(shù)70s50s+30s（真核80s60s+40s）

鏈霉素紅霉素51微生物染色技術(shù)二、特殊結(jié)構(gòu)

（一）糖被（二）鞭毛（三）菌毛（四）芽孢與基本生命活動沒多大關(guān)系52微生物染色技術(shù)（一）莢膜（capsule）

1、某些細(xì)菌在其生活過程中可在細(xì)胞壁外周產(chǎn)生一層包圍整個菌體、邊界清楚的黏液樣物質(zhì)，其厚度在200nm以上，稱為莢膜。2、如鏈球菌的M蛋白、沙門氏菌的Vi抗原及大腸桿菌的K抗原等。一團莢膜內(nèi)含多個細(xì)菌時則稱為菌膠團(Zoogloea)。53微生物染色技術(shù)肺炎鏈球菌莢膜莢膜54微生物染色技術(shù)3、普通染色不易著色，莢膜染色法可見莢膜的存在4、微莢膜（microcapsule），其厚度在200nm以下者，在光學(xué)顯微鏡下才不能直接看到，必須以電鏡或免疫學(xué)方法才能證明，稱為微莢膜。肺炎鏈球菌莢膜莢膜55微生物染色技術(shù)5、黏液層（slimelayer）：有些細(xì)菌分泌一層很疏松、與周圍邊界不明顯，易與菌體脫離的黏液樣物質(zhì)。56微生物染色技術(shù)6、莢膜的主要成分是水分、多糖、多肽或蛋白質(zhì)。

多數(shù)細(xì)菌的莢膜由多糖組成。例：志賀氏痢疾桿菌、肺炎球菌的莢膜由多糖組成；

有些細(xì)菌為多肽類，如炭疽桿菌的莢膜成分是一種D-谷氨酸多聚體；

極少數(shù)細(xì)菌由多糖和多肽兩種成分構(gòu)成。如：巨大芽孢桿菌。57微生物染色技術(shù)7、莢膜的產(chǎn)生——有種的特征，也與環(huán)境條件有密切關(guān)系。8、莢膜——使液體培養(yǎng)基具有粘性；在固體培養(yǎng)基上形成表面細(xì)潤、有光澤的光滑型(S型)或粘液型菌落。58微生物染色技術(shù)9、莢膜的功能抗吞噬和抗體作用：莢膜具有抵抗宿主吞噬細(xì)胞和抗體的作用，因而莢膜是病原菌的重要毒力因子。抗有害物質(zhì)的損傷作用：莢膜處于細(xì)胞的最外層，有保護菌體避免和減少受有害物質(zhì)的損傷作用。營養(yǎng)物質(zhì)的貯存場所與廢物排出之地免疫學(xué)實驗證明，莢膜具有抗原性59微生物染色技術(shù)細(xì)菌莢膜粘液層60微生物染色技術(shù)肺炎球菌莢膜61微生物染色技術(shù)（二）鞭毛（flagella）1、多數(shù)弧菌、螺菌、許多桿菌和個別球菌的菌體表面長有1至數(shù)10根彎曲的絲狀物，稱為鞭毛。長度：因細(xì)菌種類不同而異，多長于菌體若干倍。62微生物染色技術(shù)63微生物染色技術(shù)64微生物染色技術(shù)2、鞭毛的檢查方法：1）直接觀察法：

--電鏡能直接觀察到鞭毛，將細(xì)菌作成超薄切片，在電鏡下直接觀察。

--細(xì)菌經(jīng)特殊的鞭毛染色法，使染料沉積在鞭毛的表面，增大其直徑，在光鏡下也可看到。65微生物染色技術(shù)2、鞭毛的檢查方法：1）直接觀察法：電鏡能直接觀察到鞭毛，將細(xì)菌作成超薄切片，在電鏡下直接觀察。特殊染色法，使染料沉積在鞭毛上，增大其直徑，在光學(xué)顯微鏡下也可看見。66微生物染色技術(shù)細(xì)菌鞭毛的電鏡照片

鞭毛的光學(xué)顯微鏡照片

周生鞭毛b.極生鞭毛c.叢生鞭毛

67微生物染色技術(shù)2）間接檢查法：通過觀察細(xì)菌有無運動力間接地推斷其有無鞭毛。普通顯微鏡懸滴檢查法半固體瓊脂穿刺培養(yǎng)穿刺線周圍混濁擴散，表明該菌有鞭毛；穿刺線周圍透明，不混濁，表明該菌無鞭毛。68微生物染色技術(shù)無動力有動力半固體培養(yǎng)基（穿刺培養(yǎng)）69微生物染色技術(shù)3、根據(jù)鞭毛在菌體上的排列，可將有鞭毛的細(xì)菌分為四類

1）一端單毛菌(monotrichaete)如霍亂弧菌（Vibriocholerae）。

2）兩端單鞭毛菌(amphitrichaete)如鼠咬熱螺旋體(Spirochaetamorsusmuris)。

3）叢生鞭毛菌(lophotrichaete)菌體一端或兩端各生一束鞭毛，如銅綠假單胞菌(Pseudomonasaeruginosa)；紅色螺菌(Spirillumrubrum)。4）周生鞭毛菌(peritrichaete)周身都有鞭毛，如大腸桿菌、枯草桿菌等。

70微生物染色技術(shù)單毛菌雙毛菌叢毛菌周毛菌71微生物染色技術(shù)一端單毛菌周生鞭毛菌叢生鞭毛菌兩端單鞭毛菌72微生物染色技術(shù)73微生物染色技術(shù)74微生物染色技術(shù)4、鞭毛的功能1）細(xì)菌的運動器官——當(dāng)有規(guī)律的收縮時，引起細(xì)菌運動。并非生命活動所必需，極易脫落，有鞭毛的細(xì)菌一般在幼令時具鞭毛，老令時脫落。2）鞭毛具有抗原性，常稱為鞭毛抗原或H抗原。鞭毛的化學(xué)組分主要是蛋白質(zhì)，只含有少量的多糖或脂類。3）與致病性有關(guān)。75微生物染色技術(shù)（三）細(xì)菌菌毛（pili，F(xiàn)imbria）

1、概念：多數(shù)G－菌和少數(shù)G＋，在菌體上生有一種比鞭毛數(shù)量多、形狀較直、較細(xì)、較短的毛發(fā)狀細(xì)絲，也稱為菌毛，亦稱傘毛或纖毛。菌毛與運動力無關(guān)，電鏡下才能看到。76微生物染色技術(shù)2、菌毛由菌毛蛋白(pillin)組成因機械因素而失去菌毛細(xì)菌很快又能形成新的菌毛，因此認(rèn)為菌毛可能經(jīng)常脫落并不斷更新。77微生物染色技術(shù)3、根據(jù)菌毛功能可將其分成二大類1）普通菌毛(commonpili)：較纖細(xì)和較短，數(shù)量較多、遍布整個菌體表面，每個細(xì)菌可有數(shù)白條功能主要是能使細(xì)菌黏附于動植物、真菌以及多種其他細(xì)胞上，與致病性有一定的關(guān)系。78微生物染色技術(shù)僅見于少數(shù)革蘭陰性菌。數(shù)量少，1-4根。比普通菌毛長而粗，中空呈管狀。性菌毛由致育因子（F）編碼，故又稱F菌毛。帶有性菌毛的F+菌與無性菌毛的F-菌相遇時，性菌毛與其相應(yīng)受體結(jié)合，F(xiàn)+菌內(nèi)的質(zhì)?；駾NA可通過性菌毛進入F-菌體內(nèi)，此過程——接合(conjugation)性菌毛在F+和F－的接合中是重要的，是供體細(xì)菌向受體細(xì)菌傳遞質(zhì)粒等遺傳物質(zhì)的通道。性菌毛是某些噬菌體吸附于菌細(xì)胞的受體。2）性菌毛(sexpilus)芽胞79微生物染色技術(shù)F+F-F+F-F+F+F+F+DonorRecipient接合(conjugation)80微生物染色技術(shù)性菌毛圖81微生物染色技術(shù)（四）芽孢(spore)1、某些細(xì)菌在一定環(huán)境條件下，可在菌體內(nèi)形成一個圓形或橢圓形休眠體，稱為芽孢。帶有芽孢的菌體稱為芽孢體(sporangium)，芽孢成熟后可脫落出來，稱為游離芽孢。未形成芽胞的菌體稱為繁殖體或營養(yǎng)體。生成芽孢的細(xì)菌多為桿菌，球菌和螺旋菌僅少數(shù)種能生芽孢。83微生物染色技術(shù)芽孢的染色使用普通的染色方法，染色不易滲進芽孢內(nèi)，不能使芽孢著色，未著色的芽孢，因本身折光性強，在普通顯微鏡下，呈現(xiàn)為物色的空洞狀。特殊染色方法可使芽孢著色，一經(jīng)著色又不易脫色。84微生物染色技術(shù)85微生物染色技術(shù)2、芽胞的結(jié)構(gòu)芽孢具有較厚的芽孢壁和多層芽孢膜，結(jié)構(gòu)堅實，含水量少，代謝極低，折光性強。86微生物染色技術(shù)成熟芽孢的結(jié)構(gòu)示意圖（電鏡）

87微生物染色技術(shù)3、芽胞的形成細(xì)菌形成芽胞的能力是由菌體內(nèi)的