高三生物第一輪復(fù)習(xí)：+微生物培養(yǎng)技術(shù)及應(yīng)用+課件

第33講微生物的培養(yǎng)及其應(yīng)用例．從自然界分離到的微生物在其發(fā)生突變前的原始菌株，稱為野生型菌株，而營(yíng)養(yǎng)缺陷型菌株是野生型菌株經(jīng)過人工誘變或自發(fā)突變失去合成某種特殊營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)的能力，只能在完全培養(yǎng)基或補(bǔ)充了相應(yīng)特殊營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)的基本培養(yǎng)基中正常生長(zhǎng)的變異菌株。精氨酸營(yíng)養(yǎng)缺陷型谷氨酸棒狀杄菌缺乏將鳥氨酸轉(zhuǎn)化為精氨酸的酶，但可作為鳥氨酸發(fā)酵的優(yōu)良菌種?，F(xiàn)通過對(duì)野生型谷氨酸棒狀桿菌的誘變和篩選過程獲得鳥氨酸發(fā)酵優(yōu)良菌種，如圖為選育過程，③是向培養(yǎng)基中添加了某種物質(zhì)后繼續(xù)培養(yǎng)。回答下列問題：（1）圖中三個(gè)培養(yǎng)皿的培養(yǎng)基中都必須包括______________________等營(yíng)養(yǎng)要素，圖中紫外線的作用是

，①過程中將野生型菌液接種到了液體培養(yǎng)基中，這種培養(yǎng)基與甲、乙中的培養(yǎng)基最大的差異是

。碳源、氮源、水、無機(jī)鹽誘發(fā)基因突變

無瓊脂（或凝固劑）

（2）從營(yíng)養(yǎng)組成的角度分析，甲中的培養(yǎng)基類型是______________________（填“基本培養(yǎng)基”或“完全培養(yǎng)基”），③添加的物質(zhì)為___________。A、B菌落中___________菌落可作為鳥氨酸發(fā)酵的優(yōu)良菌種。（3）谷氨酸棒狀桿菌是好氧型細(xì)菌，在用篩選出的細(xì)菌獲得鳥氨酸時(shí)，要注意進(jìn)行攪拌，其目的是:

?？梢栽黾尤芙庋?，使菌體與培養(yǎng)液充分接觸

基本培養(yǎng)基

精氨酸

BP458T4.(2021·濰坊期末)微生物的接種方法有很多種，穿刺接種是指用接種針挑取少量的菌，自培養(yǎng)基的中心垂直地刺入半固體培養(yǎng)基中，然后沿原穿刺線將針拔出的接種法。下列有關(guān)敘述正確的是

(

)A.該接種方法可用于厭氧菌種的接種B.滅菌后待培養(yǎng)基冷卻到室溫時(shí)，在酒精燈火焰附近將其倒入培養(yǎng)裝置C.在火焰上灼燒接種針后要立即接種，防止空氣中雜菌污染接種針D.培養(yǎng)基的配制、分裝及微生物的接種過程都需要進(jìn)行無菌操作A(1)概念：人們按照微生物對(duì)

的不同需求，配制出供其________的營(yíng)養(yǎng)基質(zhì)。(2)用途：用以

。營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)生長(zhǎng)繁殖培養(yǎng)、分離、鑒定、保存微生物或積累其代謝物1.培養(yǎng)基的配制培養(yǎng)基種類特點(diǎn)用途

培養(yǎng)基不含

，呈

狀態(tài)工業(yè)生產(chǎn)

培養(yǎng)基含

，呈__

狀態(tài)微生物的分離、鑒定，活菌計(jì)數(shù)，菌種保藏(3)類型：按物理狀態(tài)分類液體固體凝固劑液體凝固劑(如瓊脂)體固(4)成分1.培養(yǎng)基的配制成分含義作用來源碳源__________構(gòu)成生物體的細(xì)胞的物質(zhì)和一些代謝產(chǎn)物，有些也是異養(yǎng)生物的能源物質(zhì)無機(jī)碳源：CO2、NaHCO3等；有機(jī)碳源：糖類、牛肉膏等氮源_________________________無機(jī)氮源：N2、NH3、銨鹽、硝酸鹽等；有機(jī)氮源：蛋白胨等合成蛋白質(zhì)、核酸等物質(zhì)提供碳元素的物質(zhì)提供氮元素的物質(zhì)(4)成分1.培養(yǎng)基的配制成分含義作用來源無機(jī)鹽為微生物提供除碳、氮之外的各種重要元素，包括大量元素和微量元素?zé)o機(jī)化合物：KH2PO4、K2HPO4、NaCl等水生物體含量最高的無機(jī)化合物培養(yǎng)基、代謝產(chǎn)物為微生物提供無機(jī)營(yíng)養(yǎng)，調(diào)節(jié)培養(yǎng)基的pH等良好的溶劑，參與化學(xué)反應(yīng)等幾種微生物的營(yíng)養(yǎng)和能量來源1.培養(yǎng)基的配制

除了上述主要營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)外，還需要滿足微生物生長(zhǎng)對(duì)_________________

的需求。例如，在培養(yǎng)乳酸桿菌時(shí)，需要在培養(yǎng)基中添加_____

；在培養(yǎng)霉菌時(shí)，一般需要將培養(yǎng)基調(diào)至

；在培養(yǎng)細(xì)菌時(shí)，一般需要將培養(yǎng)基調(diào)至

；在培養(yǎng)厭氧微生物時(shí)，需要提供_____的條件。pH、特殊營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)以及氧氣酸性中性或弱堿性無氧維生素(4)成分（5）區(qū)分選擇培養(yǎng)基與鑒別培養(yǎng)基種類特點(diǎn)用途舉例選擇培養(yǎng)基允許___________________，同時(shí)_____________________________加入青霉素分離得到酵母菌和霉菌鑒別培養(yǎng)基鑒別不同種類的微生物用伊紅—亞甲藍(lán)培養(yǎng)基鑒別大腸桿菌特定種類的微生物生長(zhǎng)抑制或阻止其他種類微生物生長(zhǎng)常見選擇培養(yǎng)基舉例：①缺少氮源的培養(yǎng)基可以篩選能利用大氣中N2的微生物。②含青霉素的培養(yǎng)基可淘汰細(xì)菌，篩選出真菌。③無有機(jī)碳源的培養(yǎng)基可篩選出自養(yǎng)微生物。從眾多微生物中分離所需的微生物根據(jù)微生物的代謝特點(diǎn)在培養(yǎng)基中加入某種指示劑或化學(xué)藥品，進(jìn)而產(chǎn)生特定的顏色或其他變化下列表格是某公司研發(fā)的一種培養(yǎng)大腸桿菌的培養(yǎng)基配方，請(qǐng)結(jié)合所學(xué)知識(shí)，回答下列相關(guān)問題。成分含量蛋白胨10.0g乳糖5.0g蔗糖5.0gK2HPO42.0g顯色劑（伊紅美藍(lán)）0.2g瓊脂12.0g將上述物質(zhì)溶解后，用蒸餾水定容到1000mL（1）根據(jù)用途劃分，該培養(yǎng)基屬于

培養(yǎng)基，若要分離能分解尿素的細(xì)菌，需對(duì)培養(yǎng)基做出的最關(guān)鍵的調(diào)整是

，若還需鑒定分解尿素的細(xì)菌.需做出的調(diào)整是

。鑒別將蛋白胨換成尿素將伊紅美藍(lán)換成酚紅指示劑（2）從培養(yǎng)基的成分上看，大腸桿菌的同化類型為

。該培養(yǎng)基能否用于分離篩選出大腸桿菌？為什么？_______________________________。（3）在實(shí)驗(yàn)室培養(yǎng)微生物時(shí)，獲得純凈培養(yǎng)物的關(guān)鍵是

，紫外線可對(duì)空氣進(jìn)行滅菌的原因是___________________________。（4）某同學(xué)嘗試純化大腸桿菌，其中一個(gè)平板的菌落分布如上圖，推測(cè)該同學(xué)接種時(shí)可能的操作失誤是_____________________________。異養(yǎng)型

不能，原因是培養(yǎng)基中的碳源種類很多，可供多種微生物生存防止外來雜菌的感染紫外線能使蛋白質(zhì)變性，還能破壞DNA的結(jié)構(gòu)涂布不均勻注意事項(xiàng)(1)培養(yǎng)基要冷卻到50℃左右時(shí)開始倒平板。溫度過高會(huì)燙手，過低培養(yǎng)基又會(huì)凝固。(2)要使錐形瓶的瓶口通過酒精燈火焰。通過灼燒滅菌，防止瓶口的微生物污染培養(yǎng)基。(3)倒平板時(shí)，要用左手的拇指和食指將培養(yǎng)皿打開一條稍大于瓶口的縫隙，不要完全打開，以免雜菌污染培養(yǎng)基。(4)平板冷凝后，要將平板倒置。因?yàn)槠桨謇淠?，皿蓋上會(huì)凝結(jié)水珠，平板倒置后，既可避免培養(yǎng)基表面的水分過快地?fù)]發(fā)，又可防止皿蓋上的水珠落入培養(yǎng)基，造成污染。（6）倒平板(5)在倒平板的過程中，如果不小心將培養(yǎng)基濺在皿蓋與皿底之間的部位，那么這個(gè)平板不能用來培養(yǎng)微生物。因?yàn)榭諝庵械奈⑸锟赡茉诿笊w與皿底之間的培養(yǎng)基上滋生。(6)整個(gè)操作過程要在酒精燈火焰旁進(jìn)行，避免雜菌污染。例1.請(qǐng)回答下列與大腸桿菌有關(guān)的問題：(1)下表是某公司研發(fā)的一種培養(yǎng)大腸桿菌菌群的培養(yǎng)基配方。成分蛋白胨乳糖蔗糖K2HPO4顯色劑瓊脂含量10.0g5.0g5.0g2.0g0.2g12.0g將上述物質(zhì)溶解后，用蒸餾水定容到1000mL該培養(yǎng)基屬于

(填“固體”或“液體”)培養(yǎng)基，該培養(yǎng)基中的氮源是

。(2)在微生物培養(yǎng)操作過程中，為防止雜菌污染，需對(duì)培養(yǎng)基和培養(yǎng)皿進(jìn)行

(填“消毒”或“滅菌”)；操作者的雙手需要進(jìn)行清洗和

。固體蛋白胨滅菌消毒(2020·江蘇卷，19)為純化菌種，在鑒別培養(yǎng)基上劃線接種纖維素降解細(xì)菌，培養(yǎng)結(jié)果如圖所示。下列敘述正確的是

(

)BA.倒平板后需間歇晃動(dòng)，以保證表面平整B.圖中Ⅰ、Ⅱ區(qū)的細(xì)菌數(shù)量均太多，應(yīng)從Ⅲ區(qū)挑取單菌落C.該實(shí)驗(yàn)結(jié)果因單菌落太多，不能達(dá)到菌種純化的目的D.菌落周圍的纖維素被降解后，可被剛果紅染成紅色P458T2(2019·全國(guó)卷Ⅲ，37)回答下列與細(xì)菌培養(yǎng)相關(guān)的問題。 (1)在細(xì)菌培養(yǎng)時(shí)，培養(yǎng)基中能同時(shí)提供碳源、氮源的成分是________(填“蛋白胨”“葡萄糖”或“NaNO3”)。通常，制備培養(yǎng)基時(shí)要根據(jù)所培養(yǎng)細(xì)菌的不同來調(diào)節(jié)培養(yǎng)基的pH，其原因是_________________________。

硝化細(xì)菌在沒有碳源的培養(yǎng)基上________(填“能夠”或“不能”)生長(zhǎng)，原因是____________________________________________________。 (2)用平板培養(yǎng)細(xì)菌時(shí)一般需要將平板________(填“倒置”或“正置”)。

蛋白胨不同細(xì)菌生長(zhǎng)繁殖所需要的最適pH不同能夠硝化細(xì)菌是自養(yǎng)型生物，可以利用空氣中的CO2作為碳源倒置(2019·全國(guó)卷Ⅲ，37)回答下列與細(xì)菌培養(yǎng)相關(guān)的問題。(3)單個(gè)細(xì)菌在平板上會(huì)形成菌落，研究人員通?？筛鶕?jù)菌落的形狀、大小、顏色等特征來初步區(qū)分不同種的微生物，原因是________________。 (4)有些使用后的培養(yǎng)基在丟棄前需要經(jīng)過________處理，這種處理可以殺死丟棄物中所有的微生物。在一定的培養(yǎng)條件下，不同種微生物表現(xiàn)出各自穩(wěn)定的菌落特征滅菌

(2018·全國(guó)卷Ⅱ，37)在生產(chǎn)、生活和科研實(shí)踐中，經(jīng)常通過消毒和滅菌來避免雜菌的污染?；卮鹣铝袉栴}： (1)在實(shí)驗(yàn)室中，玻璃和金屬材質(zhì)的實(shí)驗(yàn)器具_(dá)_______(填“可以”或“不可以”)放入干熱滅菌箱中進(jìn)行干熱滅菌。 (2)牛奶的消毒常采用巴氏消毒法或高溫瞬時(shí)消毒法，與煮沸消毒法相比，這兩種方法的優(yōu)點(diǎn)是__________。

可以營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)損失少

(2018·全國(guó)卷Ⅱ，37)在生產(chǎn)、生活和科研實(shí)踐中，經(jīng)常通過消毒和滅菌來避免雜菌的污染?；卮鹣铝袉栴}：

(3)密閉空間內(nèi)的空氣可采用紫外線照射消毒，其原因是紫外線能_____________________。在照射前，適量噴灑________，可強(qiáng)化消毒效果。 (4)水廠供應(yīng)的自來水通常是經(jīng)過________(填“氯氣”“乙醇”或“高錳酸鉀”)消毒的。 (5)某同學(xué)在使用高壓蒸汽滅菌鍋時(shí)，若壓力達(dá)到設(shè)定要求，而鍋內(nèi)并沒有達(dá)到相應(yīng)溫度，最可能的原因是_____________。破壞DNA的結(jié)構(gòu)消毒液氯氣冷空氣未排盡(1)目的：獲得

。(2)關(guān)鍵：

。(3)區(qū)別：消毒與滅菌的比較純凈的培養(yǎng)物防止雜菌污染3.無菌技術(shù)比較項(xiàng)目條件結(jié)果常用方法應(yīng)用范圍消毒較為溫和的______

或生物等方法僅殺死物體表面或內(nèi)部一部分微生物煮沸消毒法日常用品__________不耐高溫的液體______________操作空間、操作者的衣物和手等紫外線消毒法接種室、接種箱或超凈工作臺(tái)物理、化學(xué)巴氏消毒法化學(xué)藥物消毒法比較項(xiàng)目條件結(jié)果常用方法應(yīng)用范圍滅菌強(qiáng)烈的理化方法殺死物體內(nèi)外所有的微生物，包括芽孢和孢子__________培養(yǎng)基、容器等__________玻璃器皿、金屬用具等___________接種工具等濕熱滅菌法干熱滅菌法灼燒滅菌法(3)區(qū)別：消毒與滅菌的比較選擇無菌技術(shù)的原則：一要考慮無菌技術(shù)的效果，滅菌的效果比消毒要好；二要考慮操作對(duì)象的承受能力，活體生物材料、操作者的手等只能采用消毒，而不能用滅菌。(4)其他操作①做好消毒和滅菌工作后，要注意避免已經(jīng)滅菌處理的材料用具與

接觸。②為了避免周圍環(huán)境中微生物的污染，接下來的許多操作都應(yīng)在超凈工作臺(tái)上并在

附近進(jìn)行。周圍的物品酒精燈火焰

教材隱性知識(shí)：源于選擇性必修3P10“相關(guān)信息”：生物消毒法是指利用生物或其

除去環(huán)境中的部分微生物的方法。代謝物(1)概念辨析固體培養(yǎng)基一定形態(tài)結(jié)構(gòu)3.微生物的純培養(yǎng)(2)酵母菌純培養(yǎng)的操作步驟15～20g瓊脂濕熱滅菌(高壓蒸汽滅菌)法干熱滅菌3.微生物的純培養(yǎng)(2)酵母菌純培養(yǎng)的操作步驟酒精燈火焰灼燒滅菌平板劃線法恒溫培養(yǎng)箱中28請(qǐng)思考以下問題：①平板冷凝后，要將平板倒置的原因是什么？

因?yàn)槠桨謇淠?，皿蓋上會(huì)凝結(jié)水珠，平板倒置后，既可避免培養(yǎng)基表面的水分過快地?fù)]發(fā)，又可防止皿蓋上的水珠落入培養(yǎng)基，造成污染。②在接種前隨機(jī)取若干個(gè)滅菌后的未接種的平板，先行培養(yǎng)了一段時(shí)間，這樣做的目的是

。檢測(cè)培養(yǎng)基平板滅菌是否合格3.微生物的純培養(yǎng)(2)酵母菌純培養(yǎng)的操作步驟(3)平板劃線法操作步驟據(jù)圖思考以下問題：①第二次及其以后的劃線操作總是從上一次劃線末端開始，這樣做的目的是什么？

能使微生物的數(shù)目隨著劃線次數(shù)的增加而逐漸減少，最終得到由單個(gè)微生物繁殖形成的純培養(yǎng)物。例2.(2022·山西高三適應(yīng)考試)自然界里有多種微生物，將其進(jìn)行合理的篩選、培養(yǎng)和應(yīng)用，能給醫(yī)藥和化工等生產(chǎn)領(lǐng)域帶來巨大經(jīng)濟(jì)效益?；卮鹣铝袉栴}：(1)對(duì)培養(yǎng)基進(jìn)行滅菌時(shí)，多采取

法，而對(duì)接種環(huán)或涂布器滅菌時(shí)則用

法，若要將微生物采用平板劃線法進(jìn)行分離操作，在固體培養(yǎng)基表面連續(xù)進(jìn)行了5次劃線，則需要對(duì)接種環(huán)灼燒

次。平板劃線在做第二次及其以后的劃線操作時(shí)，要從上次劃線的

開始劃線，最后一次劃的線不能與第一次劃的線

。高壓蒸汽滅菌(濕熱滅菌)灼燒滅菌6末端相連②操作第一步即取菌種之前及每次劃線之前都需要進(jìn)行火焰灼燒滅菌，劃線操作結(jié)束時(shí)，仍需灼燒接種環(huán)，每次灼燒的目的填寫下表：項(xiàng)目第一次操作每次劃線之前劃線結(jié)束目的__________殺死上次劃線后接種環(huán)上殘留的菌種，使下次劃線的菌種直接來源于____________，使每次劃線菌種數(shù)目減少_________________________殺死接種環(huán)上原有的微生物上次劃線的末端殺死接種環(huán)上殘存的菌種，避免微生物污染環(huán)境和感染操作者(3)平板劃線法操作步驟3.微生物的純培養(yǎng)(1)稀釋涂布平板法步驟①系列稀釋操作：該操作常用在將細(xì)胞接種到培養(yǎng)基之前，通過液體稀釋的方法分散細(xì)胞，隨著稀釋程度的增大，單位體積中的微生物細(xì)胞數(shù)量減少，細(xì)胞得以分散。操作步驟：2.微生物的選擇培養(yǎng)和數(shù)量測(cè)定(1)稀釋涂布平板法步驟②涂布平板操作步驟2.微生物的選擇培養(yǎng)和數(shù)量測(cè)定(2)微生物的數(shù)量測(cè)定方法①顯微鏡直接計(jì)數(shù)法2.微生物的選擇培養(yǎng)和數(shù)量測(cè)定②間接計(jì)數(shù)法——活菌計(jì)數(shù)法(即稀釋涂布平板法)原理：當(dāng)樣品的稀釋度足夠高時(shí)，培養(yǎng)基表面生長(zhǎng)的一個(gè)單菌落，來源于樣品稀釋液中的一個(gè)活菌。通過統(tǒng)計(jì)平板上的菌落數(shù)，就能推測(cè)出樣品中大約含有多少活菌。(2)微生物的數(shù)量測(cè)定方法2.微生物的選擇培養(yǎng)和數(shù)量測(cè)定根據(jù)圖示問答以下問題：Ⅰ.為了保證結(jié)果準(zhǔn)確，一般選擇菌落數(shù)在

的平板進(jìn)行計(jì)數(shù)。Ⅱ.為什么用此種方法統(tǒng)計(jì)的菌落數(shù)目往往比活菌的實(shí)際數(shù)目低？

因?yàn)楫?dāng)兩個(gè)或多個(gè)細(xì)胞連在一起時(shí)，平板上觀察到的只是一個(gè)菌落。30～300(2)微生物的數(shù)量測(cè)定方法2.微生物的選擇培養(yǎng)和數(shù)量測(cè)定Ⅲ.某同學(xué)在稀釋倍數(shù)為106的培養(yǎng)基中測(cè)得平板上菌落數(shù)的平均值為234個(gè)(涂布平板時(shí)所用稀釋液的體積為0.1mL)，那么稀釋倍數(shù)為106的試管中細(xì)菌的濃度是

個(gè)/mL，稀釋倍數(shù)為10的錐形瓶中細(xì)菌的濃度為

個(gè)/mL，所以每克樣品中的細(xì)菌數(shù)是

個(gè)。2.34×1032.34×1082.34×109(2)微生物的數(shù)量測(cè)定方法2.微生物的選擇培養(yǎng)和數(shù)量測(cè)定脲酶尿素(1)實(shí)驗(yàn)原理3.土壤中分解尿素的細(xì)菌的分離與計(jì)數(shù)的實(shí)驗(yàn)操作(2)實(shí)驗(yàn)流程3～830～300稀釋涂布平板30～37菌落數(shù)目穩(wěn)定教材隱性知識(shí)：選擇性必修3P19“探究·實(shí)踐”：本活動(dòng)初步篩選了能分解尿素的細(xì)菌，請(qǐng)進(jìn)一步借助于生物化學(xué)的方法來鑒定所分離的菌種：

。分解尿素的細(xì)菌合成的脲酶可以將尿素分解成氨，氨會(huì)使培養(yǎng)基的堿性增強(qiáng)，在培養(yǎng)基中加入酚紅指示劑培養(yǎng)細(xì)菌，若指示劑變紅，可確定該細(xì)菌能夠分解尿素

5.分解纖維素的微生物的分離(1)分離方法與原理(2)纖維素分解菌的培養(yǎng)基成分及鑒定原理纖維素剛果紅紅色復(fù)合物例3.營(yíng)養(yǎng)缺陷型菌株是野生型菌株經(jīng)過人工誘變或自發(fā)突變失去合成某種成長(zhǎng)因子的能力，只能在補(bǔ)充了相應(yīng)的生長(zhǎng)因子的基本培養(yǎng)基中才能正常生長(zhǎng)的變異菌株。某研究小組對(duì)酵母菌用紫外線照射后將其接種到甲培養(yǎng)皿的培養(yǎng)基上，一段時(shí)間后將甲培養(yǎng)皿的菌落影印接種(不改變菌落位置)到乙、丙兩培養(yǎng)皿的培養(yǎng)基中，進(jìn)一步培養(yǎng)得到如下圖所示結(jié)果。下列分析正確的是()A.接種到甲培養(yǎng)皿采用的是平板劃線法B.甲、丙兩培養(yǎng)皿中的培養(yǎng)基是基本培養(yǎng)基C.甲培養(yǎng)皿中菌落數(shù)有可能比接種的酵母菌數(shù)少D.甲、乙、丙三個(gè)培養(yǎng)皿都可能存在營(yíng)養(yǎng)缺陷型菌落C例3.(2020·全國(guó)Ⅰ，37)某種物質(zhì)S(一種含有C、H、N的有機(jī)物)難以降解，會(huì)對(duì)環(huán)境造成污染，只有某些細(xì)菌能降解S。研究人員按照下圖所示流程從淤泥中分離得到能高效降解S的細(xì)菌菌株。實(shí)驗(yàn)過程中需要甲、乙兩種培養(yǎng)基，甲的組分為無機(jī)鹽、水和S，乙的組分為無機(jī)鹽、水、S和Y。P314T2回答下列問題：(1)實(shí)驗(yàn)時(shí)，盛有水或培養(yǎng)基的搖瓶通常采用

的方法進(jìn)行滅菌。乙培養(yǎng)基中的Y物質(zhì)是

。甲、乙培養(yǎng)基均屬于_____培養(yǎng)基。高壓蒸汽滅菌(濕熱滅菌)瓊脂選擇(2)實(shí)驗(yàn)中初步估測(cè)搖瓶M中細(xì)菌細(xì)胞數(shù)為2×107個(gè)/mL，若要在每個(gè)平板上涂布100μL稀釋后的菌液，且保證每個(gè)平板上長(zhǎng)出的菌落數(shù)不超過200個(gè)，則至少應(yīng)將搖瓶M中的菌液稀釋

倍。104(3)在步驟⑤的篩選過程中，發(fā)現(xiàn)當(dāng)培養(yǎng)基中的S