保健食品的微生物限度檢驗(yàn)方法驗(yàn)證淺析

保健食品的微生物限度

檢驗(yàn)方法驗(yàn)證淺析

引言隨著國(guó)民生活水平的提高，人們對(duì)生活的質(zhì)量也有了較高的要求，防病于未然的健康意識(shí)逐漸被人們所重視，保健食品隨之成為人們脫離亞健康的途徑之一。我國(guó)的保健食品概念是1996年《保健食品管理辦法》中的“標(biāo)明具有特定保健功能的食品。即適宜于特定人群食用，具有調(diào)節(jié)機(jī)體功能，不以治療疾病為目的的食品”。具有三種屬性：食品屬性；功能屬性(具有特定的功能)；非藥品屬性。然而劣質(zhì)的保健食品不僅不能提高人們的生活質(zhì)量，甚至威脅生命安全，因而保健食品的安全評(píng)價(jià)及質(zhì)量檢驗(yàn)是保證人們使用合格產(chǎn)品的前提。保健食品的質(zhì)量安全包括兩方面內(nèi)容：不以傳統(tǒng)食品為載體的保健食品具有其特有的安全問題。以傳統(tǒng)食品為載體的，要考慮相應(yīng)的食品安全問題，如以植物為來源的傳統(tǒng)食品當(dāng)考慮農(nóng)殘、植物生長(zhǎng)刺激素等；以動(dòng)物為來源則應(yīng)考慮抗生素、激素等。但同時(shí)作為保健食品特有的質(zhì)量安全問題，還須高度關(guān)注保健食品中加入化學(xué)藥物（如違法添加芬氟拉明、麻黃素或速尿的減肥產(chǎn)品；又如某些“補(bǔ)品”檢出了枸櫞酸西地那非，即偉哥的主成分），各種功效成份/提取物內(nèi)源性毒物安全（如中草藥毒性及長(zhǎng)期服用安全性評(píng)價(jià)），新資源、新技術(shù)、功能性安全，進(jìn)口保健食品，偽劣保健食品，非法添加物的檢驗(yàn)等問題。鑒于保健食品于近年來暴露出的一些質(zhì)量問題，中檢所和藥檢處統(tǒng)一部署，擴(kuò)大我所檢驗(yàn)范圍，開展對(duì)保健食品的質(zhì)量監(jiān)督檢驗(yàn)工作，微生物限度作為食品藥品的必檢項(xiàng)目，顯示其基礎(chǔ)安全的重要性。我室于2005、06年進(jìn)行了保健食品衛(wèi)生微生物學(xué)限度檢驗(yàn)及方法學(xué)驗(yàn)證實(shí)驗(yàn)工作，完成了30多種購(gòu)買樣品的試檢驗(yàn)任務(wù)，以及幾個(gè)注冊(cè)品種的檢驗(yàn)，涉及口服液、片劑、膠囊、茶劑等常見保健食品類型，結(jié)合食品國(guó)標(biāo)和藥典探討保健食品的檢驗(yàn)方法及可行性，現(xiàn)對(duì)有檢驗(yàn)情況匯報(bào)如下，供檢驗(yàn)部門參考。摘要我所按中國(guó)藥典2005版微生物限度法及方法學(xué)驗(yàn)證法，對(duì)32種保健食品進(jìn)行方法學(xué)驗(yàn)證，結(jié)果表明其中15個(gè)品種（活謂素得而樂膠囊、忘不了3A腦營(yíng)養(yǎng)膠囊、金舒通膠囊、仙牌靈芝茶、事輕松膠囊、華濟(jì)堂牌護(hù)肝靈膠囊、全蟲草膠囊、再高鐵兒童成長(zhǎng)口服液、血爾口服液、瞳神牌輕亮、養(yǎng)顏鹿胎粉、夢(mèng)玉膠囊、紳寧寶膠囊、博士倫博視康牌葉黃素片、二月紅牌紅潤(rùn)片）分別對(duì)金黃色葡萄球菌和枯草桿菌有抑菌作用，染菌回收率均低于70%。結(jié)果說明：1、采用GB/T4789.1~4789.31~2003食品微生物限度檢查法不能真實(shí)反應(yīng)產(chǎn)品質(zhì)量，因而不宜采用；2、應(yīng)分別采用培養(yǎng)基稀釋法和薄膜過濾法進(jìn)行方法學(xué)驗(yàn)證。3、微生物限度方法學(xué)驗(yàn)證的必要性。關(guān)鍵詞方法學(xué)驗(yàn)證、微生物限度、回收率、保健食品質(zhì)量。一、實(shí)驗(yàn)?zāi)康拇_認(rèn)對(duì)保健品進(jìn)行微生物限度檢查時(shí)，所采用的細(xì)菌、霉菌及酵母菌計(jì)數(shù)方法和控制菌檢查方法是否適合于該保健品的微生物限度檢查。樣品（1）天元甘露低聚果糖液20040701云南綠色生物工程有限公司（2）維生素E（加州熊）040902濟(jì)南生命力生物科技有限公司（3）海王金樽040712深圳市海王健康科技發(fā)展有限公司（4）神奇壽樂牌排鉛沖劑040210常州市紅太陽(yáng)工程有限公司（5）蓋中蓋高鈣片20041207哈藥集團(tuán)制藥六廠（6）龍希膳食纖維膠囊20030718湖北恩施宏業(yè)魔芋開發(fā)有限責(zé)任公司（7）紫薇卵磷脂膠囊20041119清華紫光（集團(tuán)）總公司（8）吾老七羊胎美容濃縮液04092701浙江蘅州市吾老七保健品有限公司（9）腦輕松膠囊20041207香港康富來國(guó)際企業(yè)有限公司（10）江中亮嗓胖大海20040822云南綠生物工程有限公司（11）江中活謂素得而樂膠囊20041206廣州藍(lán)鑰匙海洋生物工程有限公司（12）忘不了3A腦營(yíng)養(yǎng)20041107山東禹王制藥有限公司（13）瞳神牌輕亮04030101北京輕爾特科技開發(fā)中心（14）再高鐵兒童成長(zhǎng)膠囊20040920廣州市紅虹生物科技有限公司（15）血爾口服液20040006香港康富來國(guó)際企業(yè)有限公司（16）金舒通膠囊20040601-05武漢名實(shí)醫(yī)藥科技有限責(zé)任公司（17）仙牌靈芝茶20050112四川仙牌靈芝集團(tuán)有限公司（18）事輕松膠囊20041026武漢靜悟綠色保健研究所（19）養(yǎng)顏鹿胎粉040606廣東廣濟(jì)堂醫(yī)藥保健品有限公司（20）老君舒壓茶20041218成都物華生物制品有限公司（21）夢(mèng)玉膠囊 20050102濟(jì)南生命生物科技有限公司（22）心態(tài)好（天一美樂寧片）031201北京樂寧科技有限責(zé)任公司（23）華濟(jì)堂牌護(hù)肝靈膠囊20060517美國(guó)德全高科技藥業(yè)2006052120060525（24）前烈立舒膠囊QLS05222香港奧美制藥廠（25）二月紅牌紅潤(rùn)片2007042425050中天(上海)營(yíng)養(yǎng)食品有限公司（26）紳寧寶膠囊20050220、20050225香港康恩堂制藥有限公司（27）博士倫博視康牌葉黃素片1515、1525、1535德國(guó)博士曼大藥廠（28）全蟲草膠囊2006210西藏天知生物科技開發(fā)有限公司（29）覺父膠囊20050307、20050327香港奧美制藥廠（30）苦瓜精華素片3117、3500美國(guó)GSL科技有限公司（31）寧烈寧膠囊20050428、20050509香港奧美制藥廠（32）富威牌劍影膠囊021333北京富威生物科技開發(fā)公司二、培養(yǎng)基膽鹽乳糖增菌液批號(hào)：040324玫瑰紅鈉瓊脂批號(hào)：050316營(yíng)養(yǎng)瓊脂批號(hào)：050310營(yíng)養(yǎng)肉湯批號(hào)：041010改良馬丁瓊脂批號(hào)：050520改良馬丁瓊脂液體批號(hào)：040302曙紅亞甲藍(lán)瓊脂批號(hào)：040413葡萄糖肉浸液肉湯批號(hào)：040902EMB批號(hào)：040413麥康凱批號(hào)：050608血營(yíng)養(yǎng)瓊脂批號(hào)：050310沙門、志賀菌屬瓊脂批號(hào)：050121胰酪胨大豆肉湯批號(hào)：050422DHL批號(hào)：0501274-甲基傘形酮葡萄糖苷(MUG)050127GN批號(hào)：040224四硫酸鈉煌綠增菌液TTB批號(hào)：040413以上培養(yǎng)基均由中國(guó)藥品生物制品檢定所提供，另由本室本室自行配制膽鹽乳糖增菌液（小倒管）10ml。三、菌種枯草桿菌(Bacillussubtilis)[CMCC(B)63501]、金黃色葡萄球菌(Staphylococcusaureus)[CMCC(B)26003]、大腸埃希菌（Escherichiacoli）[CMCC(F)44102]、白色念珠菌(Candidaalbicans)[CMCC(F)98001]、黑曲霉(Aspergillusniger)[CMCC(F)98003]弗氏志賀菌（Shigellaflexneri）[CMCC(F)51573]乙型溶血性鏈球菌（β－Hemolyticstreptococcus）[CMCC(F)32210]沙門氏菌（Salmonellaparatyphi）[CMCC(B)50094]四、方法驗(yàn)證1、菌液制備：（1）取經(jīng)37℃培養(yǎng)18-24小時(shí)，金黃色葡萄球菌、大腸桿菌、枯草桿菌、乙型溶血性鏈球菌、福氏痢疾肉湯培養(yǎng)物1ml+9ml鹽水10倍稀釋至10-5~10-7為50~100CFU/ml，做活菌計(jì)數(shù)備用。（2）取經(jīng)25℃培養(yǎng)18~24小時(shí)的白色念珠菌霉菌液體培養(yǎng)物1ml+9ml鹽水10倍稀釋至10-5為50~100CFU/ml，做活菌計(jì)數(shù)備用。（3）取經(jīng)25℃培養(yǎng)1周的黑曲霉斜面培養(yǎng)物，加3~5ml鹽水洗下霉菌孢子，吸取出菌液，用標(biāo)準(zhǔn)比濁管比濁，與濁度相當(dāng)后，取1ml+9ml鹽水=10-1，逐管10倍稀釋為10-4約50~100CFU/ml，做活菌計(jì)數(shù)備用。菌液的檢驗(yàn)

（1）取上述金黃色葡萄球菌、枯草桿菌、大腸埃希菌、乙型溶血型鏈球菌、福氏痢疾菌、沙門菌10-5~10-7稀釋液各1ml，用45℃營(yíng)養(yǎng)瓊脂培養(yǎng)基20ml注皿，各平行測(cè)定兩皿，30～35℃培養(yǎng)48小時(shí)，計(jì)數(shù)，應(yīng)約為50~100cfu/ml。（2）取上述白色念珠菌10-5~10-6稀釋液及上述黑曲霉菌10-4孢子懸液各1ml，用45℃琥紅瓊脂培養(yǎng)基20ml注皿，各平行測(cè)定兩皿，23～28℃培養(yǎng),逐日觀察計(jì)數(shù)，應(yīng)約為50~100cfu/ml。供試液制備稱取樣品10g，加0.1%蛋白胨水氯化鈉稀釋液100ml濃度均為1：10供試液。細(xì)菌、酵母菌及霉菌的方法學(xué)驗(yàn)證（1）常規(guī)法：采用加1：10供試液1ml，分別人工接種上述5種陽(yáng)性代表試驗(yàn)菌株，50~100CFU/ml，再加15~20ml瓊脂培養(yǎng)基，待凝固后，置規(guī)定溫度培養(yǎng)24~48小時(shí)觀察結(jié)果細(xì)菌計(jì)數(shù)，測(cè)定回收率結(jié)果見表2。（2）培養(yǎng)基稀釋法：采用加0.5ml、0.2ml、0.1ml/皿供試液，人工接種上述敏感試驗(yàn)菌株，再加15~20ml瓊脂培養(yǎng)基，待凝固后，置規(guī)定溫度培養(yǎng)24~48小時(shí)觀察結(jié)果細(xì)菌計(jì)數(shù)，測(cè)定回收率。結(jié)果見表3。（3）薄膜過濾法：分別取不同品種的1：10供試液取上清夜1ml加入濾器中、用0.1%蛋白胨氯化鈉稀釋液沖洗300ml/濾器再加規(guī)定敏感菌株沖洗后、取出濾膜貼規(guī)定培養(yǎng)基培養(yǎng)24~72小時(shí)觀察結(jié)果見表4。回收率測(cè)定：（1）試驗(yàn)組：分別取不同品種的1：10供試液1ml、50~100CFU/ml試驗(yàn)菌株同時(shí)加入平皿中，立即傾注瓊脂培養(yǎng)基，待凝固后，置規(guī)定溫度培養(yǎng)24~72小時(shí)觀察結(jié)果。薄膜過濾法以最后一次的沖洗液加入試驗(yàn)菌。（2）活菌組：測(cè)定每一菌株加的試驗(yàn)菌數(shù)見表1（3）供試液對(duì)照：測(cè)定供試品本底菌數(shù)（略）（4）稀釋劑對(duì)照組?；厥章实挠?jì)算按如下公式計(jì)算試驗(yàn)組的加菌回收率：（三）、控制菌檢查方法學(xué)驗(yàn)證當(dāng)建立藥品的微生物檢查法時(shí)，應(yīng)進(jìn)行控制菌的方法學(xué)驗(yàn)證，以確認(rèn)所采用的方法適合于該藥品的控制菌的檢查（1）試驗(yàn)組取1：10供試液，接入100ml/瓶5瓶膽鹽乳糖增菌培養(yǎng)基和3瓶亞碲酸鹽肉湯增菌培養(yǎng)基中，（10ml供試液/瓶）其中1瓶接種大腸埃希菌、福氏痢疾、沙門菌供試液瓶、稀釋劑對(duì)照組瓶；其中1瓶接種乙型溶血性鏈球菌、供試液瓶、置35培養(yǎng)經(jīng)24~48小時(shí)結(jié)果見表5。（2）陰性菌對(duì)照組a取金黃色葡萄球菌50~100cfu/ml，接種膽鹽乳糖增菌培養(yǎng)基中，置35培養(yǎng)經(jīng)24~48小時(shí)，陰性菌對(duì)照菌組為陰性（未生長(zhǎng)）。b取大腸埃希菌50~100cfu/ml，接種亞酸鹽肉湯增菌培養(yǎng)基中置35培養(yǎng)經(jīng)24~48小時(shí)，陰性菌對(duì)照菌組為陰性（未生長(zhǎng)）。五、結(jié)果菌落計(jì)數(shù)

表1菌落計(jì)數(shù)實(shí)驗(yàn)次數(shù)金葡菌10-6枯草桿菌10-5白色念珠菌10-5黑曲霉10-4大腸桿菌10-6126、2617、1336、35128、129134、151283、8616、2526、2494、9839、44378、8698、96100、110120、12660、62469、49100、102100、110128、13025、20表2微生物限度檢查法驗(yàn)證常規(guī)法接種陽(yáng)性菌株的回收率（%）序號(hào)供試品金葡菌枯草桿菌大腸桿菌白色念珠菌黑曲霉菌1天元甘露低聚果糖液100.080.0100.094.2100.02維生素E（加州熊）97.070.795.2100.0100.03海王金樽100.070.775.9100.090.64神奇壽樂牌排鉛沖劑98.895.187.9100.0100.05蓋中蓋高鈣片100.0100.087.799.187.46龍希膳食纖維膠囊100.0100.0100.094.282.97紫薇卵磷脂膠囊100.0100.0100.0100.095.48吾老七羊胎美容濃縮液100.0100.0100.087.6100.09腦輕松膠囊100.0100.0100.079.1100.010江中亮嗓胖大海100.0100.073.896.5100.011活謂素得而樂膠囊55.1100.0100.085.2100.012忘不了3A腦營(yíng)養(yǎng)0.0100.093.373.3100.013瞳神牌輕亮88.80.090.4100.0100.014再高鐵童少兒成長(zhǎng)口服液100.046.381.9100.0100.015血爾口服液73.20.091.898.1100.0序號(hào)供試品金葡菌枯草桿菌大腸桿菌白色念珠菌黑曲霉菌16金舒通膠囊100.036.792.3100.095.417仙牌靈芝茶74.630.080.8100.096.518事輕松膠囊100.053.376.988.790.519養(yǎng)顏鹿胎粉85.20.061.4100.085.420老舒君壓茶85.7100.095.994.287.621夢(mèng)玉膠囊0.014.086.5100.0100.022心態(tài)好（天一美樂寧片）100.085.2100.0100.091.823華濟(jì)堂牌護(hù)肝靈膠囊0.0//100.0100.024前烈立舒膠囊100.0100.071.4100.0100.025二月紅牌紅潤(rùn)片52.5100.076.477.680.226紳寧寶膠囊0.00.0100.0100.089.727博士倫博視康牌葉黃素片0.00.00.085.286.528全蟲草膠囊77.765.488.2100.0100.029覺父膠囊30苦瓜精華素片73.4100.0100.095.572.231寧烈寧膠囊32富威牌劍影膠囊100.0100.066.287.872.9注：23~31為2006年檢驗(yàn)，控制菌全部按國(guó)標(biāo)GB/T4789.1~4789.31~2003食品衛(wèi)生微生物學(xué)檢驗(yàn)方法進(jìn)行檢驗(yàn)從表2結(jié)果中可以看出：32個(gè)品種分別接種5株代表菌，有16個(gè)品種回收率均超過70%，可采用常規(guī)方法進(jìn)行測(cè)定；另16個(gè)品種（活謂素得而樂膠囊、忘不了3A腦營(yíng)養(yǎng)、再高鐵兒童成長(zhǎng)口服液、血爾口服液、瞳神牌輕亮、養(yǎng)顏鹿胎粉、金舒通膠囊、仙牌靈芝茶、事輕松膠囊、夢(mèng)玉膠囊、華濟(jì)堂牌護(hù)肝靈膠囊、二月紅牌紅潤(rùn)片、紳寧寶膠囊、博士倫博視康牌葉黃素片、全蟲草膠囊）分別對(duì)金黃色葡萄球菌、枯草桿菌和大腸桿菌有抑菌作用，染菌回收率%均低于70%，應(yīng)分別采用培養(yǎng)基稀釋法和薄膜過濾法進(jìn)行方法學(xué)驗(yàn)證。供試品金葡菌10-6枯草桿菌10-5大腸桿菌10-6忘不了3A腦營(yíng)養(yǎng)82.4常規(guī)法已通過常規(guī)法已通過活謂素得而樂膠囊82.6常規(guī)法已通過常規(guī)法已通過再高鐵兒童成長(zhǎng)口服液常規(guī)法已通過40.6常規(guī)法已通過養(yǎng)顏鹿胎粉常規(guī)法已通過38.2/金舒通膠囊常規(guī)法已通過70.2常規(guī)法已通過仙牌靈芝茶常規(guī)法已通過70.0常規(guī)法已通過事輕松膠囊常規(guī)法已通過100.0常規(guī)法已通過華濟(jì)堂牌護(hù)肝靈膠囊82.975.997二月紅牌紅潤(rùn)片0.5ml/皿100.00.0、11.1常規(guī)法已通過全蟲草膠囊0.5ml/皿常規(guī)法已通過85.9、92.6常規(guī)法已通過富威牌劍影膠囊0.5ml/皿常規(guī)法已通過常規(guī)法已通過100.0表3回收率小于70％的品種采用培養(yǎng)基稀釋法

（0.2-0.5ml/皿）回收率（%）

從表3中結(jié)果看出活謂素得而樂膠囊、忘不了3A腦營(yíng)養(yǎng)、金舒通膠囊、仙牌靈芝茶、事輕松膠囊、華濟(jì)堂牌護(hù)肝靈膠囊等6個(gè)品種采用培養(yǎng)基稀釋法0.2ml/皿，全蟲草膠囊和富威牌劍影膠囊采用培養(yǎng)基稀釋法0.5ml/皿，對(duì)金黃色葡萄球菌、枯草桿菌和大腸桿菌回收率均超過70%，使細(xì)菌正常生長(zhǎng)，可采用培養(yǎng)基稀釋法測(cè)定。再高鐵兒童成長(zhǎng)口服液，養(yǎng)顏鹿胎粉經(jīng)培養(yǎng)基稀釋法（0.2ml/皿）測(cè)定，對(duì)枯草桿菌回收率仍低于70%；二月紅牌紅潤(rùn)片采用稀釋法進(jìn)行檢測(cè)（0.5ml/皿）枯草桿菌回收率不穩(wěn)定，均低于70%，故用薄膜過濾法進(jìn)行方法學(xué)驗(yàn)證。而對(duì)回收率很低品種，血爾口服液、瞳神牌輕亮膠囊、夢(mèng)玉膠囊、紳寧寶膠囊、博士倫博視康牌葉黃素片，可直接采用薄膜過濾法進(jìn)行方法學(xué)驗(yàn)證。表1—6結(jié)果

1．32個(gè)品種其中天元甘露低聚果糖液、維生素E（加州熊）、海王金樽、神奇壽樂牌排鉛沖劑、新蓋中蓋高鈣片、龍希膳食纖維膠囊、紫薇卵磷脂膠囊、吾老七羊胎美容濃縮液、腦輕松膠囊、江中亮嗓胖大海、老舒君壓茶、前烈立舒膠囊、覺父膠囊、苦瓜精華素片、寧烈寧膠等16個(gè)品種可采用常規(guī)法進(jìn)行試驗(yàn)。2.活謂素得而樂膠囊、忘不了3A腦營(yíng)養(yǎng)膠囊、金舒通膠囊、仙牌靈芝茶、事輕松膠囊、華濟(jì)堂牌護(hù)肝靈膠囊、全蟲草膠囊、富威牌劍影膠囊8個(gè)品種細(xì)菌數(shù)可采用培養(yǎng)基稀釋法測(cè)定。3.血爾口服液、養(yǎng)顏鹿胎粉、再高鐵童少兒成長(zhǎng)膠囊、瞳神牌輕亮、夢(mèng)玉膠囊、紳寧寶膠囊、博士倫博視康牌葉黃素片和二月紅牌紅潤(rùn)片8個(gè)品種細(xì)菌數(shù)可采用薄膜過濾法測(cè)定。4.2005年所檢的22個(gè)品種沒有測(cè)定沙門菌，對(duì)于其他控制菌無抑菌活性，可采用常規(guī)法進(jìn)行測(cè)定。2006年所檢的10個(gè)品種其控制菌的檢查，按照國(guó)標(biāo)GB/T4789.1~4789.31~2003食品衛(wèi)生微生物學(xué)檢驗(yàn)方法測(cè)定了沙門菌，除華濟(jì)堂牌護(hù)肝靈膠囊采用培養(yǎng)基稀釋法進(jìn)行測(cè)定，前烈立舒膠囊、二月紅牌紅潤(rùn)片、紳寧寶膠囊、博士倫博視康牌葉黃素片、全蟲草膠囊、覺父膠囊、苦瓜精華素片、寧烈寧膠囊富威牌劍影膠囊，對(duì)霉菌、控制菌均無抑菌活性，均可采用常規(guī)法進(jìn)行測(cè)定。檢驗(yàn)結(jié)果分析

目前，保健食品按國(guó)標(biāo)GB/T4789.1~4789.31~2003食品衛(wèi)生微生物學(xué)檢驗(yàn)方法進(jìn)行檢驗(yàn)，該標(biāo)準(zhǔn)中僅提供了一般檢驗(yàn)方法，并沒有提供方法驗(yàn)證的內(nèi)容和要求。而保健食品中一些成分和添加劑的使用往往對(duì)微生物的生長(zhǎng)具有抑制作用，僅依據(jù)國(guó)標(biāo)（GB/T4789.1~4789.31~2003）方法無法去除這些因素對(duì)檢驗(yàn)結(jié)果的影響，從而無法保證結(jié)果的科學(xué)、可靠。為此采用2005版中國(guó)藥典微生物限度檢查方法驗(yàn)證的要求，對(duì)購(gòu)買的34個(gè)保健食品樣品進(jìn)行了微生物檢驗(yàn)的方法學(xué)驗(yàn)證實(shí)驗(yàn)，結(jié)果發(fā)現(xiàn)有大約50％的樣品具有抑菌作用（見表1），高于中成藥30％左右品種具有抑菌作用的比例，而且這些具有抑菌作用的品種大多可以采用培養(yǎng)基稀釋法去除抑菌活性（見表2），也有個(gè)別品種需要采用薄膜過濾法才能去除抑菌活性（見表3），這些情況也與中成藥微生物限度檢查方法驗(yàn)證情況相似。討論：

僅依據(jù)國(guó)標(biāo)GB/T4789.1~4789.31~2003食品衛(wèi)生微生物學(xué)檢驗(yàn)方法對(duì)保健食品進(jìn)行微生物檢驗(yàn)存在明顯的局限性，從保障保健食品服用的安全性出發(fā)，應(yīng)在保健食品衛(wèi)生微生物檢驗(yàn)中進(jìn)行方法的有效性確認(rèn)，尤其注冊(cè)檢驗(yàn)，要充分重視方法學(xué)研究，即方法驗(yàn)證；同時(shí)對(duì)現(xiàn)有國(guó)標(biāo)GB/T4789.1~4789.31~2003食品衛(wèi)生微生物學(xué)檢驗(yàn)方法進(jìn)行必要的補(bǔ)充，結(jié)合中國(guó)藥典的有關(guān)要求，增加陽(yáng)性對(duì)照菌株和相關(guān)檢查項(xiàng)目，采用方法大致與藥品檢查法相同，即常規(guī)法、稀釋法和薄膜過濾法。因保健食品亦有不同程度的抑菌作用，實(shí)驗(yàn)前根據(jù)含有抗菌成分，選用適當(dāng)方法進(jìn)行實(shí)驗(yàn)。參考文獻(xiàn)1、中國(guó)藥典2005版一部附錄XIIIC微生物限度檢查法2、GB/T4789.1~4789.31~2003食品微生物限度檢查法3、鄭均鏞，等藥品微生物學(xué)及檢驗(yàn)技術(shù).北京：人民衛(wèi)生出版社，19894、《中國(guó)藥典》2000年版一部5、邱世翠、榮先國(guó)、邸大琳、高飛、宮照龍。黃連的體外抑菌作用研究《時(shí)珍國(guó)醫(yī)國(guó)藥2002年04期》6、劉茹玉、陳守濤。黃連等8種中藥對(duì)常引起醫(yī)院內(nèi)感染的條件致病菌體外抗菌活性檢測(cè)《福建中醫(yī)學(xué)院報(bào)2004年02期》7、牛新華、邱世翠、邸大林、伯學(xué)柏、高飛。連翹體外抑菌作用的研究《時(shí)珍國(guó)醫(yī)國(guó)藥》2002年06期8、段飛、張雙民、楊健雄、李發(fā)榮。連翹葉提取物抑菌作用的研究《西北藥學(xué)雜志》2005年02期9、《中藥大辭典》上下冊(cè)江蘇新醫(yī)學(xué)院編上?？茖W(xué)技術(shù)出版社1985.1010、USP28:275211、BP2002ApendixXVIBA31512、JP14th:60MagneticResonanceImaging磁共振成像發(fā)生事件作者或公司磁共振發(fā)展史1946發(fā)現(xiàn)磁共振現(xiàn)象BlochPurcell1971發(fā)現(xiàn)腫瘤的T1、T2時(shí)間長(zhǎng)Damadian1973做出兩個(gè)充水試管MR圖像Lauterbur1974活鼠的MR圖像Lauterbur等1976人體胸部的MR圖像Damadian1977初期的全身MR圖像

Mallard1980磁共振裝置商品化1989

0.15T永磁商用磁共振設(shè)備中國(guó)安科

2003諾貝爾獎(jiǎng)金LauterburMansfierd時(shí)間MR成像基本原理實(shí)現(xiàn)人體磁共振成像的條件:人體內(nèi)氫原子核是人體內(nèi)最多的物質(zhì)。最易受外加磁場(chǎng)的影響而發(fā)生磁共振現(xiàn)象(沒有核輻射)有一個(gè)穩(wěn)定的靜磁場(chǎng)（磁體）梯度場(chǎng)和射頻場(chǎng)：前者用于空間編碼和選層，后者施加特定頻率的射頻脈沖，使之形成磁共振現(xiàn)象信號(hào)接收裝置：各種線圈計(jì)算機(jī)系統(tǒng)：完成信號(hào)采集、傳輸、圖像重建、后處理等

人體內(nèi)的H核子可看作是自旋狀態(tài)下的小星球。自然狀態(tài)下，H核進(jìn)動(dòng)雜亂無章，磁性相互抵消zMyx進(jìn)入靜磁場(chǎng)后，H核磁矩發(fā)生規(guī)律性排列（正負(fù)方向），正負(fù)方向的磁矢量相互抵消后，少數(shù)正向排列（低能態(tài)）的H核合成總磁化矢量M，即為MR信號(hào)基礎(chǔ)ZZYYXB0XMZMXYA:施加90度RF脈沖前的磁化矢量MzB:施加90度RF脈沖后的磁化矢量Mxy.并以Larmor頻率橫向施進(jìn)C:90度脈沖對(duì)磁化矢量的作用。即M以螺旋運(yùn)動(dòng)的形式傾倒到橫向平面ABC在這一過程中，產(chǎn)生能量

三、弛豫（Relaxation）回復(fù)“自由”的過程

1.

縱向弛豫（T1弛豫）：

M0（MZ）的恢復(fù)，“量變”高能態(tài)1H→低能態(tài)1H自旋—晶格弛豫、熱弛豫

吸收RF光子能量（共振）低能態(tài)1H高能態(tài)1H

放出能量（光子，MRS）T1弛豫時(shí)間：

MZ恢復(fù)到M0的2/3所需的時(shí)間

T1愈小、M0恢復(fù)愈快T2弛豫時(shí)間：MXY喪失2/3所需的時(shí)間；T2愈大、同相位時(shí)間長(zhǎng)MXY持續(xù)時(shí)間愈長(zhǎng)MXY與ST1加權(quán)成像、T2加權(quán)成像

所謂的加權(quán)就是“突出”的意思

T1加權(quán)成像（T1WI）----突出組織T1弛豫（縱向弛豫）差別

T2加權(quán)成像（T2WI）----突出組織T2弛豫（橫向弛豫）差別。

磁共振診斷基于此兩種標(biāo)準(zhǔn)圖像磁共振常規(guī)h檢查必掃這兩種標(biāo)準(zhǔn)圖像.T1的長(zhǎng)度在數(shù)百至數(shù)千毫秒（ms）范圍T2值的長(zhǎng)度在數(shù)十至數(shù)千毫秒（ms）范圍

在同一個(gè)馳豫過程中,T2比T1短得多

如何觀看MR圖像：首先我們要分清圖像上的各種標(biāo)示。分清掃描序列、掃描部位、掃描層面。正常或異常的所在部位---即在同一層面觀察、分析T1、T2加權(quán)像上信號(hào)改變。絕大部分病變T1WI是低信號(hào)、T2WI是高信號(hào)改變。只要熟悉掃描部位正常組織結(jié)構(gòu)的信號(hào)表現(xiàn)，通常病變與正常組織不會(huì)混淆。一般的規(guī)律是T1WI看解剖,T2WI看病變。磁共振成像技術(shù)－－圖像空間分辨力，對(duì)比分辨力一、如何確定MRI的來源（一）層面的選擇1.MXY產(chǎn)生（1H共振）條件

RF=ω=γB02.梯度磁場(chǎng)Z（GZ）

GZ→B0→ω

不同頻率的RF

特定層面1H激勵(lì)、共振

3.層厚的影響因素

RF的帶寬↓

GZ的強(qiáng)度↑層厚↓〈二〉體素信號(hào)的確定1、頻率編碼2、相位編碼

M0↑--GZ、RF→相應(yīng)層面MXY----------GY→沿Y方向1H有不同ω

各1H同相位MXY旋進(jìn)速度不同同頻率一定時(shí)間后→→GX→沿X方向1H有不同ω沿Y方向不同1H的MXYMXY旋進(jìn)頻率不同位置不同（相位不同）〈三〉空間定位及傅立葉轉(zhuǎn)換

GZ----某一層面產(chǎn)生MXYGX----MXY旋進(jìn)頻率不同

GY----MXY旋進(jìn)相位不同（不影響MXY大?。?/p>

↓某一層面不同的體素，有不同頻率、相位

MRS（FID）第三節(jié)、磁共振檢查技術(shù)檢查技術(shù)產(chǎn)生圖像的序列名產(chǎn)生圖像的脈沖序列技術(shù)名TRA、COR、SAGT1WT2WSETR、TE…….梯度回波FFE快速自旋回波FSE壓脂壓水MRA短TR短TE－－T1W長(zhǎng)TR長(zhǎng)TE－－T2W增強(qiáng)MR最常用的技術(shù)是：多層、多回波的SE（spinecho，自旋回波）技術(shù)磁共振掃描時(shí)間參數(shù)：TR、TE磁共振掃描還有許多其他參數(shù)：層厚、層距、層數(shù)、矩陣等序列常規(guī)序列自旋回波（SE）,快速自旋回波（FSE）梯度回波（FE）反轉(zhuǎn)恢復(fù)（IR），脂肪抑制（STIR）、水抑制（FLAIR）高級(jí)序列水成像（MRCP,MRU,MRM）血管造影（MRA,TOF2D/3D）三維成像（SPGR）彌散成像（DWI）關(guān)節(jié)運(yùn)動(dòng)分析是一種成像技術(shù)而非掃描序列自旋回波（SE）必掃序列圖像清晰顯示解剖結(jié)構(gòu)目前只用于T1加權(quán)像快速自旋回波（FSE）必掃序列成像速度快多用于T2加權(quán)像梯度回波（GE）成像速度快對(duì)出血敏感T2加權(quán)像水抑制反轉(zhuǎn)恢復(fù)（IR）水抑制（FLAIR）抑制自由水梗塞灶顯示清晰判斷病灶成份脂肪抑制反轉(zhuǎn)恢復(fù)（IR）脂肪抑制（STIR）抑制脂肪信號(hào)判斷病灶成分其它組織顯示更清晰血管造影（MRA）無需造影劑TOF法PC法MIP投影動(dòng)靜脈分開顯示水成像（MRCP，MRU，MRM）含水管道系統(tǒng)成像膽道MRCP泌尿路MRU椎管MRM主要用于診斷梗阻擴(kuò)張超高空間分辨率掃描任意方位重建窄間距重建技術(shù)大大提高對(duì)小器官、小病灶的診斷能力三維梯度回波（SPGR） 早期診斷腦梗塞

彌散成像MRI的設(shè)備一、信號(hào)的產(chǎn)生、探測(cè)接受1.磁體（Magnet）:靜磁場(chǎng)B0（Tesla,T）→組織凈磁矩M0

永磁型（permanentmagnet）常導(dǎo)型（resistivemagnet）超導(dǎo)型（superconductingmagnet）磁體屏蔽（magnetshielding）2.梯度線圈（gradientcoil）:

形成X、Y、Z軸的磁場(chǎng)梯度功率、切換率3.射頻系統(tǒng)（radio-frequencesystem，RF）

MR信號(hào)接收二、信號(hào)的處理和圖象顯示數(shù)模轉(zhuǎn)換、計(jì)算機(jī)，等等；MRI技術(shù)的優(yōu)勢(shì)1、軟組織分辨力強(qiáng)（判斷組織特性）2、多方位成像3、流空效應(yīng)（顯示血管）4、無骨骼偽影5、無電離輻射，無碘過敏6、不斷有新的成像技術(shù)MRI技術(shù)的禁忌證和限度1.禁忌證

體內(nèi)彈片、金屬異物各種金屬置入：固定假牙、起搏器、血管夾、人造關(guān)節(jié)、支架等危重病人的生命監(jiān)護(hù)系統(tǒng)、維持系統(tǒng)不能合作病人，早期妊娠，高熱及散熱障礙2.其他鈣化顯示相對(duì)較差空間分辨較差（體部，較同等CT）費(fèi)用昂貴多數(shù)MR機(jī)檢查時(shí)間較長(zhǎng)1.病人必須去除一切金屬物品，最好更衣，以免金屬物被吸入磁體而影響磁場(chǎng)均勻度，甚或傷及病人。2.掃描過程中病人身體（皮膚）不要直接觸碰磁體內(nèi)壁及各種導(dǎo)線，防止病人灼傷。3.紋身（紋眉）、化妝品、染發(fā)等應(yīng)事先去掉，因其可能會(huì)引起灼傷。4.病人應(yīng)帶耳塞，以防聽力損傷。掃描注意事項(xiàng)顱腦MRI適應(yīng)癥顱內(nèi)良惡性占位病變腦血管性疾病梗死、出血、動(dòng)脈瘤、動(dòng)靜脈畸形（AVM）等顱腦外傷性疾病腦挫裂傷、外傷性顱內(nèi)血腫等感染性疾病腦膿腫、化膿性腦膜炎、病毒性腦炎、結(jié)核等脫髓鞘性或變性類疾病多發(fā)性硬化（MS）等先天性畸形胼胝體發(fā)育不良、小腦扁桃體下疝畸形等脊柱和脊髓MRI適應(yīng)證1.腫瘤性病變椎管類腫瘤（髓內(nèi)、髓外硬膜內(nèi)、硬膜外），椎骨腫瘤（轉(zhuǎn)移性、原發(fā)性）2.炎癥性疾病脊椎結(jié)核、骨髓炎、椎間盤感染、硬膜外膿腫、蛛網(wǎng)膜炎、脊髓炎等3.外傷骨折、脫位、椎間盤突出、椎管內(nèi)血腫、脊髓損傷等4.脊柱退行性變和椎管狹窄癥椎間盤變性、膨隆、突出、游離，各種原因椎管狹窄，術(shù)后改變，5.脊髓血管畸形和血管瘤6.脊髓脫髓鞘疾病（如MS），脊髓萎縮7.先天性畸形胸部MRI適應(yīng)證呼吸系統(tǒng)對(duì)縱隔及肺門區(qū)病變顯示良好，對(duì)肺部結(jié)構(gòu)顯示不如CT。胸廓入口病變及其上下比鄰關(guān)系縱隔腫瘤和囊腫及其與大血管的關(guān)系其他較CT無明顯優(yōu)越性心臟及大血管大血管病變各類動(dòng)脈瘤、腔靜脈血栓等心臟及心包腫瘤，心包其他病變其他（如先心、各種心肌病等）較超聲心動(dòng)圖無優(yōu)勢(shì)，應(yīng)用不廣腹部MRI適應(yīng)證主要用于部分實(shí)質(zhì)性器官的腫瘤性病變肝腫瘤性病變，提供鑒別信息胰腺腫瘤，有利小胰癌、胰島細(xì)胞癌顯示宮頸、宮體良惡性腫瘤及分期等，先天畸形腫瘤的定位（臟器上下緣附近）、分期膽道、尿路梗阻和腫瘤，MRCP，MRU直腸腫瘤骨與關(guān)節(jié)MRI適應(yīng)證X線及CT的后續(xù)檢查手段－－鈣質(zhì)顯示差和空間分辨力部分情況可作首選：1.累及骨髓改變的骨病（早期骨缺血性壞死，早期骨髓炎、骨髓腫瘤或侵犯骨髓的腫瘤）2.結(jié)構(gòu)復(fù)雜關(guān)節(jié)的損傷（膝、髖關(guān)節(jié)）3.形狀復(fù)雜部位的檢查（脊柱、骨盆等）軟件登錄界面軟件掃描界面圖像瀏覽界面膠片打印界面報(bào)告界面報(bào)告界面2合理應(yīng)用抗菌藥物預(yù)防手術(shù)部位感染概述外科手術(shù)部位感染的2/3發(fā)生在切口醫(yī)療費(fèi)用的增加病人滿意度下降導(dǎo)致感染、止血和疼痛一直是外科的三大挑戰(zhàn)，止血和疼痛目前已較好解決感染仍是外科醫(yī)生面臨的重大問題，處理不當(dāng)，將產(chǎn)生嚴(yán)重后果外科手術(shù)部位感染占院內(nèi)感染的14%～16%，僅次于呼吸道感染和泌尿道感染，居院內(nèi)感染第3位嚴(yán)重手術(shù)部位的感染——病人的災(zāi)難，醫(yī)生的夢(mèng)魘

預(yù)防手術(shù)部位感染（surgicalsiteinfection,SSI)

手術(shù)部位感染的40%–60%可以預(yù)防圍手術(shù)期使用抗菌藥物的目的外科醫(yī)生的困惑★圍手術(shù)期應(yīng)用抗生素是預(yù)防什么感染？★哪些情況需要抗生素預(yù)防？★怎樣選擇抗生素？★什么時(shí)候開始用藥？★抗生素要用多長(zhǎng)時(shí)間？定義：指發(fā)生在切口或手術(shù)深部器官或腔隙的感染分類：切口淺部感染切口深部感染器官／腔隙感染一、SSI定義和分類二、SSI診斷標(biāo)準(zhǔn)——切口淺部感染

指術(shù)后30天內(nèi)發(fā)生、僅累及皮膚及皮下組織的感染，并至少具備下述情況之一者：

1．切口淺層有膿性分泌物

2．切口淺層分泌物培養(yǎng)出細(xì)菌

3．具有下列癥狀體征之一：紅熱，腫脹，疼痛或壓痛，因而醫(yī)師將切口開放者（如培養(yǎng)陰性則不算感染）

4．由外科醫(yī)師診斷為切口淺部SSI

注意：縫線膿點(diǎn)及戳孔周圍感染不列為手術(shù)部位感染二、SSI診斷標(biāo)準(zhǔn)——切口深部感染

指術(shù)后30天內(nèi)（如有人工植入物則為術(shù)后1年內(nèi)）發(fā)生、累及切口深部筋膜及肌層的感染，并至少具備下述情況之一者：

1.切口深部流出膿液

2.切口深部自行裂開或由醫(yī)師主動(dòng)打開，且具備下列癥狀體征之一：①體溫＞38℃；②局部疼痛或壓痛

3.臨床或經(jīng)手術(shù)或病理組織學(xué)或影像學(xué)診斷，發(fā)現(xiàn)切口深部有膿腫

4.外科醫(yī)師診斷為切口深部感染

注意：感染同時(shí)累及切口淺部及深部者，應(yīng)列為深部感染

二、SSI診斷標(biāo)準(zhǔn)—器官／腔隙感染

指術(shù)后30天內(nèi)（如有人工植入物★則術(shù)后1年內(nèi)）、發(fā)生在手術(shù)曾涉及部位的器官或腔隙的感染，通過手術(shù)打開或其他手術(shù)處理，并至少具備以下情況之一者：

1.放置于器官/腔隙的引流管有膿性引流物

2.器官/腔隙的液體或組織培養(yǎng)有致病菌

3.經(jīng)手術(shù)或病理組織學(xué)或影像學(xué)診斷器官/腔隙有膿腫

4.外科醫(yī)師診斷為器官/腔隙感染

★人工植入物：指人工心臟瓣膜、人工血管、人工關(guān)節(jié)等二、SSI診斷標(biāo)準(zhǔn)—器官／腔隙感染

不同種類手術(shù)部位的器官/腔隙感染有：

腹部：腹腔內(nèi)感染（腹膜炎，腹腔膿腫）生殖道：子宮內(nèi)膜炎、盆腔炎、盆腔膿腫血管：靜脈或動(dòng)脈感染三、SSI的發(fā)生率美國(guó)1986年～1996年593344例手術(shù)中，發(fā)生SSI15523次，占2.62%英國(guó)1997年～2001年152所醫(yī)院報(bào)告在74734例手術(shù)中，發(fā)生SSI3151例，占4.22%中國(guó)？SSI占院內(nèi)感染的14～16%，僅次于呼吸道感染和泌尿道感染三、SSI的發(fā)生率SSI與部位：非腹部手術(shù)為2%～5%腹部手術(shù)可高達(dá)20%SSI與病人：入住ICU的機(jī)會(huì)增加60%再次入院的機(jī)會(huì)是未感染者的5倍SSI與切口類型：清潔傷口 1%～2%清潔有植入物 ＜5%可染傷口＜10%手術(shù)類別手術(shù)數(shù)SSI數(shù)感染率(%)小腸手術(shù)6466610.2大腸手術(shù)7116919.7子宮切除術(shù)71271722.4肝、膽管、胰手術(shù)1201512.5膽囊切除術(shù)8222.4不同種類手術(shù)的SSI發(fā)生率：三、SSI的發(fā)生率手術(shù)類別SSI數(shù)SSI類別（%）切口淺部切口深部器官/腔隙小腸手術(shù)6652.335.412.3大腸手術(shù)69158.426.315.3子宮切除術(shù)17278.813.57.6骨折開放復(fù)位12379.712.28.1不同種類手術(shù)的SSI類別：三、SSI的發(fā)生率延遲愈合疝內(nèi)臟膨出膿腫，瘺形成。需要進(jìn)一步處理這里感染將導(dǎo)致:延遲愈合疝內(nèi)臟膨出膿腫、瘺形成需進(jìn)一步處理四、SSI的后果四、SSI的后果在一些重大手術(shù)，器官/腔隙感染可占到1/3。SSI病人死亡的77%與感染有關(guān)，其中90%是器官/腔隙嚴(yán)重感染

——InfectControlandHospEpidemiol,1999,20(40:247-280SSI的死亡率是未感染者的2倍五、導(dǎo)致SSI的危險(xiǎn)因素（1）病人因素：高齡、營(yíng)養(yǎng)不良、糖尿病、肥胖、吸煙、其他部位有感染灶、已有細(xì)菌定植、免疫低下、低氧血癥五、導(dǎo)致SSI的危險(xiǎn)因素（2）術(shù)前因素：術(shù)前住院時(shí)間過長(zhǎng)用剃刀剃毛、剃毛過早手術(shù)野衛(wèi)生狀況差（術(shù)前未很好沐浴）對(duì)有指征者未用抗生素預(yù)防五、導(dǎo)致SSI的危險(xiǎn)因素（3）手術(shù)因素：手術(shù)時(shí)間長(zhǎng)、術(shù)中發(fā)生明顯污染置入人工材料、組織創(chuàng)傷大止血不徹底、局部積血積液存在死腔和/或失活組織留置引流術(shù)中低血壓、大量輸血刷手不徹底、消毒液使用不當(dāng)器械敷料滅菌不徹底等手術(shù)特定時(shí)間是指在大量同種手術(shù)中處于第75百分位的手術(shù)持續(xù)時(shí)間其因手術(shù)種類不同而存在差異超過T越多，SSI機(jī)會(huì)越大五、導(dǎo)致SSI的危險(xiǎn)因素（4）SSI危險(xiǎn)指數(shù)（美國(guó)國(guó)家醫(yī)院感染監(jiān)測(cè)系統(tǒng)制定）：病人術(shù)前已有≥3種危險(xiǎn)因素污染或污穢的手術(shù)切口手術(shù)持續(xù)時(shí)間超過該類手術(shù)的特定時(shí)間（T）

（或一般手術(shù)＞2h)六、預(yù)防SSI干預(yù)方法根據(jù)指南使用預(yù)防性抗菌藥物正確脫毛方法縮短術(shù)前住院時(shí)間維持手術(shù)患者的正常體溫血糖控制氧療抗菌素的預(yù)防/治療預(yù)防

在污染細(xì)菌接觸宿主手術(shù)部位前給藥治療

在污染細(xì)菌接觸宿主手術(shù)部位后給藥

防患于未然六、預(yù)防SSI干預(yù)方法

——抗菌藥物的應(yīng)用102預(yù)防和治療性抗菌素使用目的：清潔手術(shù)：防止可能的外源污染可染手術(shù)：減少粘膜定植細(xì)菌的數(shù)量污染手術(shù)：清除已經(jīng)污染宿主的細(xì)菌六、預(yù)防SSI干預(yù)方法

——抗菌藥物的應(yīng)用103需植入假體，心臟手術(shù)、神外手術(shù)、血管外科手術(shù)等六、預(yù)防SSI干預(yù)方法

——抗菌藥物的應(yīng)用預(yù)防性抗菌素使用指征：可染傷口(Clean-contaminatedwound)污染傷口（Contaminatedwound）清潔傷口（Cleanwound）但存在感染風(fēng)險(xiǎn)六、預(yù)防SSI干預(yù)方法

——抗菌藥物的應(yīng)用外科預(yù)防性抗生素的應(yīng)用：預(yù)防性抗生素對(duì)哪些病人有用?什么時(shí)候開始用藥?抗生素種類選擇?使用單次還是多次?采用怎樣的給藥途徑？六、預(yù)防SSI干預(yù)方法

——抗菌藥物的應(yīng)用預(yù)防性抗菌素顯示有效的手術(shù)有：婦產(chǎn)科手術(shù)胃腸道手術(shù)(包括闌尾炎)口咽部手術(shù)腹部和肢體血管手術(shù)心臟手術(shù)骨科假體植入術(shù)開顱手術(shù)某些“清潔”手術(shù)六、預(yù)防SSI干預(yù)方法

——抗菌藥物的應(yīng)用外科預(yù)防性抗生素的應(yīng)用：預(yù)防性抗生素對(duì)哪些病人有用?什么時(shí)候開始用藥?抗生素種類選擇?使用單次還是多次?采用怎樣的給藥途徑？六、預(yù)防SSI干預(yù)方法

——抗菌藥物的應(yīng)用

理想的給藥時(shí)間？目前還沒有明確的證據(jù)表明最佳的給藥時(shí)機(jī)研究顯示：切皮前45～75min給藥，SSI發(fā)生率最低，且不建議在切皮前30min內(nèi)給藥影響給藥時(shí)間的因素:所選藥物的代謝動(dòng)力學(xué)特性手術(shù)中污染發(fā)生的可能時(shí)間病人的循環(huán)動(dòng)力學(xué)狀態(tài)止血帶的使用剖宮產(chǎn)細(xì)菌在手術(shù)傷口接種后的生長(zhǎng)動(dòng)力學(xué)

手術(shù)過程

012345671hr2hrs6hrs1day3-5days細(xì)菌數(shù)logCFU/ml六、預(yù)防SSI干預(yù)方法

——抗菌藥物的應(yīng)用109術(shù)后給藥，細(xì)菌在手術(shù)傷口接種的生長(zhǎng)動(dòng)力學(xué)無改變

手術(shù)過程抗生素血腫血漿六、預(yù)防SSI干預(yù)方法

——抗菌藥物的應(yīng)用Antibioticsinclot

手術(shù)過程

血漿中抗生素予以抗生素血塊中抗生素血漿術(shù)前給藥，可以有效抑制細(xì)菌在手術(shù)傷口的生長(zhǎng)六、預(yù)防SSI干預(yù)方法

——抗菌藥物的應(yīng)用111ClassenDC,etal..NEnglJMed1992;326:281切開前時(shí)間切開后時(shí)間予以抗生素切開六、預(yù)防SSI干預(yù)方法

——抗菌藥物的應(yīng)用不同給藥時(shí)間，手術(shù)傷口的感染率不同NEJM1992;326:281-6投藥時(shí)間感染數(shù)（%）相對(duì)危險(xiǎn)度(95%CI)早期（切皮前2-24h）36914(3.8%)6.7(2.9-14.7)4.3手術(shù)前（切皮前45-75min)170810(0.9%)1.0圍手術(shù)期（切皮后3h內(nèi)）2824(1.4%)2.4(0.9-7.9) 2.1手術(shù)后（切皮3h以上）48816(3.3%)5.8(2.6-12.3)

5.8全部284744(1.5%)似然比病人數(shù)六、預(yù)防SSI干預(yù)方法

——抗菌藥物的應(yīng)用結(jié)論：抗生素在切皮前45-75min或麻醉誘導(dǎo)開始時(shí)給藥，預(yù)防SSI效果好113六、預(yù)防SSI干預(yù)方法

——抗菌藥物的應(yīng)用切口切開后，局部抗生素分布將受阻必須在切口切開前給藥?。?！抗菌素應(yīng)在切皮前45～75min給藥六、預(yù)防SSI干預(yù)方法

——抗菌藥物的應(yīng)用外科預(yù)防性抗生素的應(yīng)用：預(yù)防性抗生素對(duì)哪些病人有用?什么時(shí)候開始用藥?抗生素種類選擇?使用單次還是多次?采用怎樣的給藥途徑？有效安全殺菌劑半衰期長(zhǎng)相對(duì)窄譜廉價(jià)六、預(yù)防SSI干預(yù)方法

——抗菌藥物的應(yīng)用抗生素的選擇原則：各類手術(shù)最易引起SSI的病原菌及預(yù)防用藥選擇六、預(yù)防SSI干預(yù)方法

——抗菌藥物的應(yīng)用

手術(shù)最可能的病原菌預(yù)防用藥選擇膽道手術(shù)革蘭陰性桿菌，厭氧菌頭孢呋辛或頭孢哌酮或

(如脆弱類桿菌）頭孢曲松闌尾手術(shù)革蘭陰性桿菌，厭氧菌頭孢呋辛或頭孢噻肟；

(如脆弱類桿菌）＋甲硝唑結(jié)、直腸手術(shù)革蘭陰性桿菌，厭氧菌頭孢呋辛或頭孢曲松或

(如脆弱類桿菌）頭孢噻肟；＋甲硝唑泌尿外科手術(shù)革蘭陰性桿菌頭孢呋辛；環(huán)丙沙星婦產(chǎn)科手術(shù)革蘭陰性桿菌，腸球菌頭孢呋辛或頭孢曲松或

B族鏈球菌，厭氧菌頭孢噻肟；+甲硝唑莫西沙星（可單藥應(yīng)用）注:各種手術(shù)切口感染都可能由葡萄球菌引起六、預(yù)防SSI干預(yù)方法

——抗菌藥物的應(yīng)用外科預(yù)防性抗生素的應(yīng)用：預(yù)防性抗生素對(duì)哪些病人有用?什么時(shí)候開始用藥?抗生素種類選擇?使用單次還是多次?采用怎樣的給藥途徑？六、預(yù)防SSI干預(yù)方法

——抗菌藥物的應(yīng)用單次給藥還是多次給藥？沒有證據(jù)顯示多次給藥比單次給藥好傷口關(guān)閉后給藥沒有益處多數(shù)指南建議24小時(shí)內(nèi)停藥沒有必要維持抗菌素治療直到撤除尿管和引流管手術(shù)時(shí)間延長(zhǎng)或術(shù)中出血量較大時(shí)可重復(fù)給藥細(xì)菌污染定植感染一次性用藥用藥24h用藥4872h數(shù)小時(shí)從十?dāng)?shù)小時(shí)到數(shù)十小時(shí)六、預(yù)防SSI干預(yù)方法

——抗菌藥物的應(yīng)用用藥時(shí)機(jī)不同，用藥期限也應(yīng)不同短時(shí)間預(yù)防性應(yīng)用抗生素的優(yōu)點(diǎn)：六、預(yù)防SSI干預(yù)方法

——抗菌藥物的應(yīng)用減少毒副作用不易產(chǎn)生耐藥菌株不易引起微生態(tài)紊亂減輕病人負(fù)擔(dān)可以選用單價(jià)較高但效果較好的抗生素減少護(hù)理工作量藥品消耗增加抗菌素相關(guān)并發(fā)癥增加耐藥抗菌素種類增加易引起脆弱芽孢桿菌腸炎MRSA（耐甲氧西林金黃色葡萄球菌）定植六、預(yù)防SSI干預(yù)方法

——抗菌藥物的應(yīng)用延長(zhǎng)抗菌素使用的缺點(diǎn)：六、預(yù)防SSI干預(yù)方法

——抗菌藥物的應(yīng)用外科預(yù)防性抗生素的應(yīng)用：預(yù)防性抗生素對(duì)哪些病人有用?什么時(shí)候開始用藥?抗生素種類選擇?使用單次還是多次?采用怎樣的給藥途徑？正確的給藥方法：六、預(yù)防SSI干預(yù)方法

——抗菌藥物的應(yīng)用應(yīng)靜脈給藥，2030min滴完肌注、口服存在吸收上的個(gè)體差異，不能保證血液和組織的藥物濃度，不宜采用常用的-內(nèi)酰胺類抗生素半衰期為12h，若手術(shù)超過３４h，應(yīng)給第２個(gè)劑量，必要時(shí)還可用第３次可能有損傷腸管的手術(shù)，術(shù)前用抗菌藥物準(zhǔn)備腸道局部抗生素沖洗創(chuàng)腔或傷口無確切預(yù)防效果，不予提倡不應(yīng)將日常全身性應(yīng)用的抗生素應(yīng)用于傷口局部（誘發(fā)高耐藥）必要時(shí)可用新霉素、桿菌肽等抗生素緩釋系統(tǒng)（PMMA—青大霉素骨水泥或膠原海綿)局部應(yīng)用可能有一定益處六、預(yù)防SSI干預(yù)方法

——抗菌藥物的應(yīng)用不提倡局部預(yù)防應(yīng)用抗生素：時(shí)機(jī)不當(dāng)時(shí)間太長(zhǎng)選藥不當(dāng)，缺乏針對(duì)性六、預(yù)防SSI干預(yù)方法

——抗菌藥物的應(yīng)用預(yù)防用藥易犯的錯(cuò)誤：在開刀前45-75min之內(nèi)投藥按最新臨床指南選藥術(shù)后24小時(shí)內(nèi)停藥擇期手術(shù)后一般無須繼續(xù)使用抗生素大量對(duì)比研究證明，手術(shù)后繼續(xù)用藥數(shù)次或數(shù)天并不能降低手術(shù)后感染率若病人有明顯感染高危因素或使用人工植入物，可再用1次或數(shù)次小結(jié)預(yù)防SSI干預(yù)方法

——正確的脫毛方法用脫毛劑、術(shù)前即刻備皮可有效減少SSI的發(fā)生手術(shù)部位脫毛方法與切口感染率的關(guān)系：備皮方法 剃毛備皮 5.6%

脫毛0.6%備皮時(shí)間 術(shù)前24小時(shí)前 ＞20%

術(shù)前24小時(shí)內(nèi) 7.1%

術(shù)前即刻 3.1%方法/時(shí)間 術(shù)前即刻剪毛 1.8%

前1晚剪/剃毛 4.0%THANKYOUMagneticResonanceImagingPART01磁共振成像發(fā)生事件作者或公司磁共振發(fā)展史1946發(fā)現(xiàn)磁共振現(xiàn)象BlochPurcell1971發(fā)現(xiàn)腫瘤的T1、T2時(shí)間長(zhǎng)Damadian1973做出兩個(gè)充水試管MR圖像Lauterbur1974活鼠的MR圖像Lauterbur等1976人體胸部的MR圖像Damadian1977初期的全身MR圖像

Mallard1980磁共振裝置商品化1989

0.15T永磁商用磁共振設(shè)備中國(guó)安科

2003諾貝爾獎(jiǎng)金LauterburMansfierd時(shí)間PART02MR成像基本原理實(shí)現(xiàn)人體磁共振成像的條件:人體內(nèi)氫原子核是人體內(nèi)最多的物質(zhì)。最易受外加磁場(chǎng)的影響而發(fā)生磁共振現(xiàn)象(沒有核輻射)有一個(gè)穩(wěn)定的靜磁場(chǎng)（磁體）梯度場(chǎng)和射頻場(chǎng)：前者用于空間編碼和選層，后者施加特定頻率的射頻脈沖，使之形成磁共振現(xiàn)象信號(hào)接收裝置：各種線圈計(jì)算機(jī)系統(tǒng)：完成信號(hào)采集、傳輸、圖像重建、后處理等

人體內(nèi)的H核子可看作是自旋狀態(tài)下的小星球。自然狀態(tài)下，H核進(jìn)動(dòng)雜亂無章，磁性相互抵消zMyx進(jìn)入靜磁場(chǎng)后，H核磁矩發(fā)生規(guī)律性排列（正負(fù)方向），正負(fù)方向的磁矢量相互抵消后，少數(shù)正向排列（低能態(tài)）的H核合成總磁化矢量M，即為MR信號(hào)基礎(chǔ)ZZYYXB0XMZMXYA:施加90度RF脈沖前的磁化矢量MzB:施加90度RF脈沖后的磁化矢量Mxy.并以Larmor頻率橫向施進(jìn)C:90度脈沖對(duì)磁化矢量的作用。即M以螺旋運(yùn)動(dòng)的形式傾倒到橫向平面ABC在這一過程中，產(chǎn)生能量

三、弛豫（Relaxation）回復(fù)“自由”的過程

1.

縱向弛豫（T1弛豫）：

M0（MZ）的恢復(fù)，“量變”高能態(tài)1H→低能態(tài)1H自旋—晶格弛豫、熱弛豫

吸收RF光子能量（共振）低能態(tài)1H高能態(tài)1H

放出能量（光子，MRS）T1弛豫時(shí)間：

MZ恢復(fù)到M0的2/3所需的時(shí)間

T1愈小、M0恢復(fù)愈快T2弛豫時(shí)間：MXY喪失2/3所需的時(shí)間；T2愈大、同相位時(shí)間長(zhǎng)MXY持續(xù)時(shí)間愈長(zhǎng)MXY與ST1加權(quán)成像、T2加權(quán)成像

所謂的加權(quán)就是“突出”的意思

T1加權(quán)成像（T1WI）----突出組織T1弛豫（縱向弛豫）差別

T2加權(quán)成像（T2WI）----突出組織T2弛豫（橫向弛豫）差別。

磁共振診斷基于此兩種標(biāo)準(zhǔn)圖像磁共振常規(guī)h檢查必掃這兩種標(biāo)準(zhǔn)圖像.T1的長(zhǎng)度在數(shù)百至數(shù)千毫秒（ms）范圍T2值的長(zhǎng)度在數(shù)十至數(shù)千毫秒（ms）范圍

在同一個(gè)馳豫過程中,T2比T1短得多

如何觀看MR圖像：首先我們要分清圖像上的各種標(biāo)示。分清掃描序列、掃描部位、掃描層面。正常或異常的所在部位---即在同一層面觀察、分析T1、T2加權(quán)像上信號(hào)改變。絕大部分病變T1WI是低信號(hào)、T2WI是高信號(hào)改變。只要熟悉掃描部位正常組織結(jié)構(gòu)的信號(hào)表現(xiàn)，通常病變與正常組織不會(huì)混淆。一般的規(guī)律是T1WI看解剖,T2WI看病變。磁共振成像技術(shù)－－圖像空間分辨力，對(duì)比分辨力一、如何確定MRI的來源（一）層面的選擇1.MXY產(chǎn)生（1H共振）條件

RF=ω=γB02.梯度磁場(chǎng)Z（GZ）

GZ→B0→ω

不同頻率的RF

特定層面1H激勵(lì)、共振

3.層厚的影響因素

RF的帶寬↓

GZ的強(qiáng)度↑層厚↓〈二〉體素信號(hào)的確定1、頻率編碼2、相位編碼

M0↑--GZ、RF→相應(yīng)層面MXY----------GY→沿Y方向1H有不同ω

各1H同相位MXY旋進(jìn)速度不同同頻率一定時(shí)間后→→GX→沿X方向1H有不同ω沿Y方向不同1H的MXYMXY旋進(jìn)頻率不同位置不同（相位不同）〈三〉空間定位及傅立葉轉(zhuǎn)換

GZ----某一層面產(chǎn)生MXYGX----MXY旋進(jìn)頻率不同

GY----MXY旋進(jìn)相位不同（不影響MXY大小）

↓某一層面不同的體素，有不同頻率、相位

MRS（FID）第三節(jié)、磁共振檢查技術(shù)檢查技術(shù)產(chǎn)生圖像的序列名產(chǎn)生圖像的脈沖序列技術(shù)名TRA、COR、SAGT1WT2WSETR、TE