光譜分析二紫外可見光度法

光譜分析二紫外可見光度法第1頁，課件共54頁，創(chuàng)作于2023年2月2

一、概述1、紫外可見吸收光譜法

根據(jù)溶液中物質(zhì)的分子或離子對紫外光譜區(qū)或可見光譜區(qū)輻射能的吸收以研究物質(zhì)組成和結(jié)構(gòu)的方法。2、可見吸收光譜法分類：

比色法、分光光度法第一章光譜分析

第一節(jié)紫外可見吸收光譜法

第2頁，課件共54頁，創(chuàng)作于2023年2月3

一、概述3、物質(zhì)對光的選擇性吸收(1)當(dāng)一束光照射到某物質(zhì)或其溶液時(shí)，組成該物質(zhì)的分子、原子或離子與光子發(fā)生“碰撞”，光子的能量就轉(zhuǎn)移到分子、原子上，使這些粒子由最低能態(tài)（基態(tài)）躍遷到較高能態(tài)（激發(fā)態(tài)）：M+hυ→M*

這個(gè)作用叫物質(zhì)對光的吸收。

第一章光譜分析

第一節(jié)紫外可見吸收光譜法

第3頁，課件共54頁，創(chuàng)作于2023年2月4

一、概述(2)分子、原子或離子具有不連續(xù)的量子化能級，僅當(dāng)照射光光子的能量（hυ）與被照射物質(zhì)粒子的基態(tài)和激發(fā)態(tài)能量之差相當(dāng)或?yàn)槠湔麛?shù)倍時(shí)才能發(fā)生吸收。不同的物質(zhì)微粒由于結(jié)構(gòu)不同而具有不同的量子化能級，其能量差也不相同。所以物質(zhì)對光的吸收具有選擇性?；鶓B(tài)能級激發(fā)態(tài)能級E0E2E1第一章光譜分析

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第4頁，課件共54頁，創(chuàng)作于2023年2月5

一、概述（3）吸收曲線（吸收光譜）吸光度(A)--波長(λ)曲線稱--。光吸收程度最大處的波長叫最大吸收波長，用λmax表示。高錳酸鉀的λmax=525nm。濃度不同時(shí)，光吸收曲線形狀不同，最大吸收波長不變，只是相應(yīng)的吸光度大小不同。

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第5頁，課件共54頁，創(chuàng)作于2023年2月6

一、概述4、可見吸收光譜法的特點(diǎn)（1）靈敏度高常用于測定試樣中1%-10-3%的微量組分，甚至可測定低至10-4%-10-5%的痕量組分。（2）準(zhǔn)確度較高相對誤差為2%-10%。如采用精密分光光度計(jì)測量，相對誤差可減少至1%-2%。（3）應(yīng)用廣泛幾乎所有的無機(jī)離子和許多有機(jī)化合物都可直接或間接地用此法測定。（4）操作簡便快速，儀器設(shè)備也不復(fù)雜第一章光譜分析

第一節(jié)紫外可見吸收光譜法

第6頁，課件共54頁，創(chuàng)作于2023年2月7

一、概述作業(yè)：解釋下列名詞：（1）光吸收曲線（2）最大吸收波長

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第7頁，課件共54頁，創(chuàng)作于2023年2月8

二、光吸收的基本定律朗白比耳定律:A=lg(I0/It)=Kbc

該公式的物理意義為：當(dāng)一束平行單色光通過單一均勻的、非散射的吸光物質(zhì)的理想溶液時(shí)，溶液的吸光度與溶液的濃度和液層厚度的乘積成正比。該定律適用于溶液，也適用于其他均勻非散射的吸光物質(zhì)（氣體、固體），是各類吸光光度法定量分析的依據(jù)。第一章光譜分析

第一節(jié)紫外可見吸收光譜法

第8頁，課件共54頁，創(chuàng)作于2023年2月二、光吸收的基本定律1、溶液對光的形為及有關(guān)術(shù)語當(dāng)光束照射到物質(zhì)上時(shí),物質(zhì)可以產(chǎn)生反射、散射、吸收、透射。如果被照射的是均勻的溶液，那么光的散射可以忽略，所以對于溶液來說，對光的就是產(chǎn)生一部分被溶液吸收，一部分被界面反射，其余光則透過溶液。I0=It+Ia+IrIa---吸收光的強(qiáng)度It---透射光的強(qiáng)度Ir---反射光的強(qiáng)度Io---入射光的強(qiáng)度第一章光譜分析

第一節(jié)紫外可見吸收光譜法

ItI0IrIa1-1-2光通過溶液的情況9

第9頁，課件共54頁，創(chuàng)作于2023年2月二、光吸收的基本定律2、溶液對光的形為及有關(guān)術(shù)語

當(dāng)一束平行單色光照射溶液時(shí)，一部分光被溶液吸收，其余的光透過溶液，我們把透射光強(qiáng)度與入射光強(qiáng)度的比值稱為透光度或透光率。用“T”表示。則：

T=It/I0

透光度T還常用百分透光率表示：

T%=T×100%

溶液的透光度越大，表示它對光的吸收越?。环粗?，透光度越小，表示它對光的吸收越大。常用吸光度來表示物質(zhì)對光的吸收程度，其定義為：

A=-ìgT=lg1/T=lg(I0/It)

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第10頁，課件共54頁，創(chuàng)作于2023年2月二、光吸收的基本定律3、Lambert定律

該定律是由Lambert于1760年提出的，他在研究物質(zhì)對光的吸收時(shí)發(fā)現(xiàn)，如果溶液的濃度一定，則光的吸收程度與液層的厚度成正比，這個(gè)關(guān)系稱為Lambert定律。

A=k1bA-----吸收度；

k1-----比例系數(shù)；

b-----液層厚度或收光程長度。第一章光譜分析

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第11頁，課件共54頁，創(chuàng)作于2023年2月二、光吸收的基本定律4、Beer定律該定律是由Beer于1852年研究發(fā)現(xiàn)的，Beer研究了各種無機(jī)鹽水溶液對紅光的吸收，從而得出這樣一個(gè)結(jié)論：當(dāng)單色光通過液層厚度一定時(shí)，溶液的吸光度與溶液的濃度成正比。表示為：

A=k2ck2-----比例常數(shù)；

c-----溶液濃度。第一章光譜分析

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第12頁，課件共54頁，創(chuàng)作于2023年2月

同時(shí)考慮溶液的濃度和液層厚度這兩個(gè)因素，如果同時(shí)變化，那么都影響物質(zhì)對光的吸收，所以兩個(gè)定律合并在一起，稱為Lamber-Beer定律，即表示為：A=abca是一個(gè)新的比例常數(shù)，稱為吸光系數(shù)。液層厚度用“cm”表示，濃度以“g/L”為單位。因?yàn)锳是無因次量，則α的單位是“L/g·cm”。通常濃度以mol/l為單位，此時(shí)吸光系數(shù)稱為摩爾吸光系數(shù)，用“ε”表示，單位為“L/mol·cm”,所以Lamber-Beer定律也可以表示為：

A=εbc

物理意義：當(dāng)束平行單色光通過單一均勻的、非散射的吸光物質(zhì)溶液時(shí)，溶液的吸光度與溶液濃度和液層厚度的乘積成正比。這個(gè)定律是各類吸光光度法定量分析的基礎(chǔ)。第一章第一節(jié)紫外可見吸收光譜法

二、光吸收的基本定律13

第13頁，課件共54頁，創(chuàng)作于2023年2月14

二、光吸收的基本定律

（1）ε是吸光物質(zhì)在特定波長和溶劑情況下的一個(gè)特征常數(shù)，數(shù)值上等于1mol·L-1吸光物質(zhì)在1cm光程中的A。

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第14頁，課件共54頁，創(chuàng)作于2023年2月15

二、光吸收的基本定律（2）影響ε值的因素：內(nèi)因--吸光物質(zhì)分子結(jié)構(gòu)；外因—入射光波長；（3）ε是吸光物質(zhì)吸光能力的量度它可作定性鑒定參數(shù)，也可用以估量定量方法的靈敏度：ε值愈大，方法靈敏度愈高。第一章光譜分析

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第15頁，課件共54頁，創(chuàng)作于2023年2月16

二、光吸收的基本定律例1：鐵（Ⅱ）濃度為50×10-4g·L-1的溶液,與1,10-鄰二氮雜菲反應(yīng),生成橙紅色絡(luò)合物，該絡(luò)合物在波長508nm有最大吸收,比色皿厚度為2cm時(shí),測得A=0.190。計(jì)算1,10-鄰二氮雜菲亞鐵的a及ε。(已知鐵的相對原子質(zhì)量為55.85)

解：根據(jù)比耳定律A=abc得：

a=A/bc=0.190/(2×50×10-4)=19L·g-1·cm-1

ε=Ma=55.85×19=11×102L·mol-1·cm-1

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第16頁，課件共54頁，創(chuàng)作于2023年2月17

二、光吸收的基本定律偏離朗伯-比耳定律的原因

據(jù)比耳定律：Ａ＝abc=K’cA∝C，作圖，應(yīng)得到一過原點(diǎn)的直線，稱標(biāo)準(zhǔn)曲線或工作曲線。但在實(shí)際中，常發(fā)現(xiàn)標(biāo)準(zhǔn)曲線不成直線，這種情況稱偏離朗伯-比耳定律。第一章光譜分析

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第17頁，課件共54頁，創(chuàng)作于2023年2月18

二、光吸收的基本定律最重要的引起偏離比耳定律的因素:(一）由于非單色光引起的偏離（二）

由于溶液本身的化學(xué)和物理因素引起的偏離

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第18頁，課件共54頁，創(chuàng)作于2023年2月(一）由于非單色光引起的偏離

Lamber-Beer定律的基本假設(shè)條件是入射光為單色光。但目前儀器所提供的入射光實(shí)際上是由波長范圍較窄的光帶的組成的復(fù)合光。由于物質(zhì)對不同波長光的吸收程度不同，因而引起了對Lamber-Beer偏離。

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第19頁，課件共54頁，創(chuàng)作于2023年2月假設(shè)入射光僅由兩種波長λ1和λ2的光組成，在這兩種波長下Lamber-Beer定律適用的，摩爾吸收系數(shù)分別為ε1和ε2和，入射光強(qiáng)度分別是Ⅰ0′、Ⅰ0〞，透射光強(qiáng)度分別為Ⅰ1、Ⅰ2，對于波長為λ1的單色光吸光度為A′，則：A′=ε1bc=lgⅠ0′/Ⅰ1Ⅰ1=Ⅰ0′×10-ε1bc對于波長為λ2的單色光吸光度為A〞，則：A〞=ε2bc=lgⅠ0〞/Ⅰ2Ⅰ2=Ⅰ0″×10-ε2bc測定時(shí)入射光強(qiáng)度為（Ⅰ0′+Ⅰ0〞

），透射光強(qiáng)度為（Ⅰ1+Ⅰ2），因此所得吸光度值為：A=lgⅠ0′+Ⅰ0〞Ⅰ0′×10-ε1bc+Ⅰ0″×10-ε2bc第一章

第一節(jié)紫外可見吸收光譜法

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第20頁，課件共54頁，創(chuàng)作于2023年2月當(dāng)ε1=ε2=ε時(shí)，A=εbc,A與c成直線關(guān)系。如果ε1≠ε2，A與c則不成直線關(guān)系。ε1與ε2差別越大，A與c間的線性關(guān)系的偏離也越大。其它條件一定時(shí)，ε隨入射光波長而變化。實(shí)驗(yàn)證明，若能用一束吸光度隨波長變化不大的復(fù)合光作入射光來進(jìn)行測定，由于ε變化不大，所引起的偏離就小，標(biāo)準(zhǔn)曲線基本上呈直線。所以光度分析并不嚴(yán)格要求用很純的單色光，只要入射光所包含的波長范圍在被測溶液的吸收曲線較平直部分，也可得到較好的線型關(guān)系。譜帶A譜帶BλA第一章

第一節(jié)紫外可見吸收光譜法

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第21頁，課件共54頁，創(chuàng)作于2023年2月(二）化學(xué)因素引起的偏離

Lamber-Beer定律的基本假設(shè)，除要求入射光是單色光外，還假設(shè)吸收粒子是獨(dú)立的，彼此之間相互無作用，在高濃度時(shí)（通常>0.01mol/L)，隨濃度增大，吸光度與濃度的關(guān)系就偏離線性關(guān)系。所以一般認(rèn)為該定律僅適用于稀溶液。另一方面，溶液中有吸光物質(zhì)等構(gòu)成的化學(xué)體系，常因條件變化而形成新的化合物或改變吸光物質(zhì)的濃度，例如,重鉻酸鉀在水溶液中存在如下平衡:Cr2o72-+H2o2H++2Cro42-第一章

第一節(jié)紫外可見吸收光譜法

橙色黃色22

第22頁，課件共54頁，創(chuàng)作于2023年2月作業(yè)：朗白-比爾定律的物理意義是什么？什么是透光度？什么是吸光度？二者之間的關(guān)系是什么？第一章

第一節(jié)紫外可見吸收光譜法23

第23頁，課件共54頁，創(chuàng)作于2023年2月24

三、分光光度計(jì)結(jié)構(gòu)簡介儀器組成及作用：光源→單色器→吸收池→檢測系統(tǒng)A光源：提供所需波長范圍內(nèi)的連續(xù)光源。B單色器：將光源發(fā)出的連續(xù)光譜分解為最容易被樣液吸收的單色光C吸收池：用于盛吸收試液D檢測系統(tǒng)：將透過吸收池的光It轉(zhuǎn)換成電流測量。

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第一節(jié)紫外可見吸收光譜法

第24頁，課件共54頁，創(chuàng)作于2023年2月25

三、分光光度計(jì)結(jié)構(gòu)簡介作業(yè)：

簡述光度計(jì)儀器組成及各部件的作用。

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第25頁，課件共54頁，創(chuàng)作于2023年2月26

四、顯色反應(yīng)及其影響因素

1、吸光光度法對顯色反應(yīng)的要求顯色反應(yīng)的定義：將待測組分轉(zhuǎn)變成可能測量的有色化合物的反應(yīng)，叫--。顯色劑：與待測組分形成有色化合物的試劑稱-。第一章光譜分析

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第26頁，課件共54頁，創(chuàng)作于2023年2月27

四、顯色反應(yīng)及其影響因素2、顯色反應(yīng)滿足下列要求（1）選擇性好，干擾少，或干擾容易消除。（2）靈敏度足夠高常選ε高的顯色反應(yīng)。但靈敏度高不一定選擇性好，另外，對于高含量組分測定，也不一定選用最靈敏的顯色反應(yīng)。（3）有色化合物的組成恒定，符合一定的化學(xué)式

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第27頁，課件共54頁，創(chuàng)作于2023年2月28

四、顯色反應(yīng)及其影響因素（4）有色化合物的化學(xué)性質(zhì)應(yīng)足夠穩(wěn)定，至少保證在測量過程中溶液的A變化小。要求有色化合物不易受外界環(huán)境影響，如光射、空氣中氧和二氧化碳的作用等。（5）有色化合物與顯色劑之間的顏色差別要大顏色差別用“反襯度（對比度）”

表示Δλ，要求Δλ≥60nm

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第28頁，課件共54頁，創(chuàng)作于2023年2月29

四、顯色反應(yīng)及其影響因素3、顯色條件的選擇

顯色條件：指M+R==MR這一反應(yīng)相關(guān)的條件。如,顯色劑濃度及用量;酸度;溫度;顯色時(shí)間;緩沖溶液種類及用量;用表面活性劑的加入等等。選擇的總原則：AMR最大且恒定

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第29頁，課件共54頁，創(chuàng)作于2023年2月30

四、顯色反應(yīng)及其影響因素3、顯色條件的選擇（1）顯色劑R的用量顯色反應(yīng)一般可用下式表示：

M+RMR

被測組分顯色劑有色化合物

AMR==εMRbcMR

據(jù)平衡原理,R↑,MR↑,則AMR↑,靈敏度↑但R過量,有時(shí)會引起副反應(yīng)故,顯色劑(R)用量最終應(yīng)由實(shí)驗(yàn)來定。第一章光譜分析

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第30頁，課件共54頁，創(chuàng)作于2023年2月31

四、顯色反應(yīng)及其影響因素R用量對顯色反應(yīng)的影響情況如圖所示。

a、開始時(shí)，隨R↑，試液的A↑，當(dāng)R濃度達(dá)到某一數(shù)值時(shí)，A不再增加，出現(xiàn)ab平坦部分。可在ab間選合適的R濃度測定。返回

試液吸光度與顯色劑的關(guān)系第一章光譜分析

第一節(jié)紫外可見吸收光譜法

第31頁，課件共54頁，創(chuàng)作于2023年2月（b)的平坦部分窄，當(dāng)顯色劑濃度繼續(xù)增大時(shí)，試液的吸光度反而下降。例：用SCN-測定MO時(shí)，可以生成MO（SCN)2+(淺紅）、MO(SCN)5(橙紅）、MO（SCN)6-(淺紅）配位數(shù)不同的配合物，用吸光度測的是MO(SCN)5的吸光度。因此必須嚴(yán)格控制顯色劑量，否則的不到正確的結(jié)果。（c）圖是隨著顯色劑用量增大，試液的吸光度也增大。例：用SCN-測定Fe3+，隨著SCN-濃度的增大，生成顏色越來越深的高配合物Fe（SCN）4-和Fe（SCN)52-

，溶液顏色由橙黃變至血紅色。所以只有嚴(yán)格控制顯色劑用量才能的到正確的結(jié)果。第32頁，課件共54頁，創(chuàng)作于2023年2月（2）溶液的酸度a影響顯色劑的平衡濃度和顏色例M++HRMR+H+b影響被測金屬離子的存在狀態(tài)c影響配合物的組成第一章第一節(jié)紫外可見吸收光譜法

四、顯色反應(yīng)及其影響因素33

第33頁，課件共54頁，創(chuàng)作于2023年2月（3）顯色反應(yīng)時(shí)間

必須經(jīng)實(shí)驗(yàn)來確定最合適測定的時(shí)間范圍。實(shí)驗(yàn)方法為配制一份顯色溶液，從加入顯色劑其計(jì)算時(shí)間，每隔幾分鐘測量一次吸光度，制作吸光度-時(shí)間曲線，根據(jù)曲線來確定適宜時(shí)間。（4）顯色反應(yīng)溫度

顯色反應(yīng)一般在室溫下進(jìn)行。但有些反應(yīng)需加熱到一定溫度才能完成。例：硅鉬酸測定硅的反應(yīng)是，在室溫下需10min才能完成；而在沸水浴中則只需30s完成。許多有色化合物溫度高時(shí)也容易發(fā)生分解。（5）溶劑第一章第一節(jié)紫外可見吸收光譜法

四、顯色反應(yīng)及其影響因素34

第34頁，課件共54頁，創(chuàng)作于2023年2月有機(jī)溶劑常降低有色化合物的解離度，提高了顯色反應(yīng)的靈敏度。例：Fe（SCN)3的溶液中加入與水混溶的有機(jī)溶劑（如丙酮），由于降低了Fe（SCN)3的解離度而使顏色加深，提高了靈敏度。此外，有機(jī)溶劑還能提高顯色反應(yīng)的速率，影響有色配合物的溶解度和組成。如用偶氮氯膦Ⅲ法測定Ca2+，加入乙醇后，吸光度顯著增大。第35頁，課件共54頁，創(chuàng)作于2023年2月36

五、測量誤差和測量條件的選擇

1、儀器測量誤差在光分析中，儀器誤差是測量不準(zhǔn)確的主要因素。適宜的吸光度范圍:(T:15-65%)或（A:0.2-0.8）最佳的取值點(diǎn):當(dāng)T=36.8%或A=0434

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第36頁，課件共54頁，創(chuàng)作于2023年2月37

五、測量誤差和測量條件的選擇

2、測量條件的選擇為使測定結(jié)果有較高的靈敏度和準(zhǔn)確度，必須注意：①入射光波長的選擇最大吸收原則：選λmax的光作入射光。此時(shí)，靈敏度較高，測定時(shí)偏離朗伯-比耳定律的程度減小，其準(zhǔn)確度也較好。

“MR的吸收最大、對MR測定的干擾最小”的原則：當(dāng)有干擾物質(zhì)存在時(shí)，應(yīng)據(jù)此來選擇入射光的波長。第一章光譜分析

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第37頁，課件共54頁，創(chuàng)作于2023年2月38

五、測量誤差和測量條件的選擇

例;丁二酮肟比色法測鋼中的鎳，丁二酮肟鎳λmax≈470nm，試樣中的鐵用酒石酸鈉鉀掩蔽后，在470nm也有吸收，對測定有干擾。當(dāng)λ測＞500nm后，干擾較小。因此，可在520nm處測定，否則，要分離鐵后才能測定

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第一節(jié)紫外可見吸收光譜法

第38頁，課件共54頁，創(chuàng)作于2023年2月39

五、測量誤差和測量條件的選擇②控制適當(dāng)?shù)奈舛确秶?/p>

為使測量結(jié)果的測量誤差較小，準(zhǔn)確度較高，應(yīng)控制A在0.2–0.8(0.434)范圍內(nèi)。方法：

1、選擇不同厚度的吸收池。

2、控制溶液濃度，如改變試樣稱量和改變?nèi)芤合♂尪鹊取?/p>

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第39頁，課件共54頁，創(chuàng)作于2023年2月40

五、測量誤差和測量條件的選擇

例某鋼樣含鎳約0.12%，用丁二酮肟光度法（ε=13×104L·mol-1

·cm-1）進(jìn)行測定。試樣溶解后，轉(zhuǎn)入100mL容量瓶中，顯色，再加入水稀釋至刻度。取部分試液于波長470nm處用1cm吸收池進(jìn)行測量，如果希望此時(shí)的測量誤差最小，應(yīng)稱取試樣多少？(鎳:58.69)

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第40頁，課件共54頁，創(chuàng)作于2023年2月41

五、測量誤差和測量條件的選擇解：A=εbCC=A/εb

將A=0.434b=1ε=13×104L·mol-1·cm-1

代入上式

C=0.434/13×104=3.34×10-6mol·L-1

設(shè)應(yīng)稱取試樣Wg，則:W×0.12%=100×10-3×3.34×10-6×58.69W=0.016g

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第41頁，課件共54頁，創(chuàng)作于2023年2月42

五、測量誤差和測量條件的選擇③選擇適當(dāng)?shù)膮⒈热芤?/p>

在吸光度測量中,必須將溶液裝入由透明材料制成的比色皿中由于材料及溶劑對I0將產(chǎn)生一定的反射、吸收、散射等，最終導(dǎo)致It減弱。參比溶液的作用：使光強(qiáng)度的減弱僅與溶液中待測物的濃度有關(guān)。方法：用光學(xué)性質(zhì)及厚度相同的比色皿盛純試劑作參比，調(diào)節(jié)儀器，使透過參比皿的A=0或T=100%。第一章光譜分析

第一節(jié)紫外可見吸收光譜法

第42頁，課件共54頁，創(chuàng)作于2023年2月43

五、測量誤差和測量條件的選擇選用原則：待測離子(M)顯色劑(R)參比溶液的選用無色無色純?nèi)軇┗蛘麴s水有色無色試樣空白（不加顯色劑的待測試液）無色有色試劑空白（不加M的顯色劑）有色有色將試樣加適當(dāng)掩蔽劑，將M掩蔽起來，然后加入顯色劑作參比溶液返回

第一章光譜分析

第一節(jié)紫外可見吸收光譜法

第43頁，課件共54頁，創(chuàng)作于2023年2月44

六、常用的定量分析方法

由吸光度值確定試樣的濃度的理論依據(jù)是朗白-比耳定律，即：

A=abc或A∝C1

標(biāo)準(zhǔn)曲線法（工作曲線法）是指先配制標(biāo)準(zhǔn)系列的溶液，測繪出標(biāo)準(zhǔn)曲線，后，在相同條件下，配制樣品溶液，測其吸光度，在標(biāo)準(zhǔn)曲線上查出樣品濃度的一種分析方法。第一章光譜分析

第一節(jié)紫外可見吸收光譜法

第44頁，課件共54頁，創(chuàng)作于2023年2月45

六、常用的定量分析方法2、示差吸光光度法

一般分光光度測定選用試劑空白或溶液空白作為參比，差示法則選用一已知濃度的溶液作參比。設(shè)用作參比的標(biāo)準(zhǔn)溶液濃度為c0，待測試液濃度為cx，且cx大于c0。根Lambert-Beer定律得到：Ax=εcxbA0=εc0bA相對=△A=Ax-A0=εb(cx-c0)=εb△c=εbc相對返回

第一章光譜分析

第一節(jié)紫外可見吸收光譜法

第45頁，課件共54頁，創(chuàng)作于2023年2月3、雙波長吸光光度法它是通過兩個(gè)單色器分別將光源發(fā)出的光分成λ1，λ2兩束單色光，經(jīng)切光器并束后交替通過同一吸收池。因此檢測的是試樣溶液對兩波長光吸收后的吸光度差。設(shè)波長為λ1和λ2的兩束單色光的強(qiáng)度相等，則有：Aλ1=ελ1bcAλ2=ελ2bc△A=Aλ1-Aλ2=(ελ1-ελ2)bc第46頁，課件共54頁，創(chuàng)作于2023年2月雙波長分光光度法的特點(diǎn)：

1、可用于懸濁液和懸浮液的測定，消除背景吸收。

2、無須分離，可用于吸收峰相互重疊的混合組分的同時(shí)測定。

3、可用于測定高濃度溶液中吸光度在0.01-0.005以下的痕量組分。

第47頁，課件共54頁，創(chuàng)作于2023年2月48

七、

絡(luò)合物組成及弱酸離解常數(shù)測定1、絡(luò)合物組成的測定

①飽和法固定金屬離子M濃度，變