動物細胞工程細胞融合與單克隆抗體

動物細胞工程細胞融合與單克隆抗體第1頁，課件共22頁，創(chuàng)作于2023年2月一、動物細胞融合

細胞融合是正常的生命活動兩個細胞正在融合

受精作用第2頁，課件共22頁，創(chuàng)作于2023年2月動物細胞融合（也稱細胞雜交）是指兩個或多個動物細胞結(jié)合形成一個細胞的過程。雜交細胞融合后形成的具有原來兩個或多個細胞遺傳信息的單核細胞，稱為雜交細胞。第3頁，課件共22頁，創(chuàng)作于2023年2月細胞A細胞B雜交細胞滅活的病毒物理法化學法仙臺病毒皰疹病毒新城雞瘟病毒電激聚乙二醇（PEG）第4頁，課件共22頁，創(chuàng)作于2023年2月病毒表面含有的糖蛋白和一些酶能夠與細胞膜上的糖蛋白發(fā)生作用，使細胞相互凝聚，細胞模上的蛋白質(zhì)分子和脂質(zhì)分子重新排布，細胞膜打開，細胞發(fā)生融合。滅活病毒誘導細胞融合的原理第5頁，課件共22頁，創(chuàng)作于2023年2月滅活是指用物理或化學手段使病毒或細菌失去感染能力，但是并不破壞這些病原體的抗原結(jié)構(gòu)。第6頁，課件共22頁，創(chuàng)作于2023年2月動物細胞融合第7頁，課件共22頁，創(chuàng)作于2023年2月細胞融合的應用已成為研究細胞遺傳，細胞免疫，腫瘤和生物新品種培育等的重要手段。特別是利用細胞融合技術而發(fā)展起來的雜交瘤技術，為制造單克隆抗體開辟了新途徑。第8頁，課件共22頁，創(chuàng)作于2023年2月二、單克隆抗體什么是抗體？

抗體是機體受抗原刺激后產(chǎn)生的、并能與該抗原發(fā)生特異性結(jié)合的具有免疫功能的球蛋白。B淋巴細胞產(chǎn)生抗體。第9頁，課件共22頁，創(chuàng)作于2023年2月長期以來，人們?yōu)榱双@得抗體，采用的方法是向動物體內(nèi)反復注射某種抗原，使動物產(chǎn)生抗體，然后，從動物的血清中分離所需抗體。缺點：產(chǎn)量低，純度低，而且制備的抗體特異性差。第10頁，課件共22頁，創(chuàng)作于2023年2月B淋巴細胞與抗體１．B淋巴細胞受抗原刺激后，可以產(chǎn)生抗體。２．動物體內(nèi)的B淋巴細胞可以產(chǎn)生百萬種以上的抗體，每種抗體對特定的抗原具有特異性免疫作用。

３．每一個淋巴細胞只能產(chǎn)生一種抗體。第11頁，課件共22頁，創(chuàng)作于2023年2月1僅用細胞培養(yǎng)技術可行嗎？我們所學的哪種細胞是可以無限增殖的？有什么方法能使B細胞產(chǎn)生抗體的能力和腫瘤細胞無限增殖能力同時具備呢？第12頁，課件共22頁，創(chuàng)作于2023年2月如何大量生產(chǎn)單克隆抗體？利用淋巴細胞產(chǎn)生抗體的功能利用腫瘤細胞無限增殖的特性利用細胞融合的技術將兩種細胞融合獲得具有淋巴細胞和腫瘤細胞特性的雜交瘤細胞利用動物細胞培養(yǎng)技術大量培養(yǎng)雜交瘤細胞第13頁，課件共22頁，創(chuàng)作于2023年2月單克隆抗體制備過程

注射抗原B淋巴細胞骨髓瘤細胞細胞融合、篩選雜交瘤細胞細胞培養(yǎng)篩選，繼續(xù)培養(yǎng)足夠數(shù)量的、能產(chǎn)生特定抗體的細胞群體外培養(yǎng)注射到小鼠腹腔單克隆抗體第14頁，課件共22頁，創(chuàng)作于2023年2月兩次篩選的目的第一次篩選是將未融合的B淋巴細胞，骨髓瘤細胞以及同類型融合的細胞通過選擇培養(yǎng)基淘汰，篩選出B淋巴細胞和骨髓瘤細胞融合的細胞。第二次篩選是將產(chǎn)生特定抗體的雜交瘤細胞通過細胞培養(yǎng)用相應抗原檢測的辦法篩選出來。因為體內(nèi)取免疫過的B淋巴細胞時取出很多種，形成的雜交瘤細胞很多種，所以需篩選出特定抗體的雜交瘤細胞。第15頁，課件共22頁，創(chuàng)作于2023年2月單克隆抗體由單個B淋巴細胞經(jīng)過無性繁殖（克?。?，形成基因型相同的細胞群，這一細胞群所產(chǎn)生的化學性質(zhì)單一、特異性強的抗體稱為單克隆抗體。

特點：

特異性強、靈敏度高

第16頁，課件共22頁，創(chuàng)作于2023年2月動物的胚胎移植解決某些妊娠時間長、每胎產(chǎn)子數(shù)量少的優(yōu)良種畜的繁殖速度問題。第17頁，課件共22頁，創(chuàng)作于2023年2月胚胎移植技術試管動物（嬰兒）培養(yǎng)過程卵細胞精子體外受精受精卵胚胎新個體母體子宮內(nèi)孕育、產(chǎn)出第18頁，課件共22頁，創(chuàng)作于2023年2月

下圖為某同學根據(jù)雜交瘤技術的方法，設計的生產(chǎn)破傷風桿菌的抗體實驗方案2、該方案能達到預期效果嗎？為什么？4、圖中B為________過程，常用_________作為誘導劑，該細胞繼承___________的遺傳特性，既能__________,又能___________。1、該實驗方案的目的是__________3、A是從小鼠的脾臟中取得_______,該細胞能夠產(chǎn)生______5、C過程指細胞培養(yǎng)，該過程包括_____培養(yǎng)和_____培養(yǎng)兩個階段，其中_____代以內(nèi)的的細胞屬于細胞株。制備單克隆抗體B細胞抗體細胞融合滅活病毒雙親細胞分泌抗體無限增殖原代傳代50B體外培養(yǎng)骨髓瘤細胞雜交瘤細胞足夠數(shù)量的細胞群注射到小鼠腹腔AC第19頁，課件共22頁，創(chuàng)作于2023年2月世界上第一只克隆羊“多莉”的培育過程如圖所示，請據(jù)圖回答：乙甲abcdef(1)圖中的甲為蘇格蘭綿羊，乙為多莉羊。那么，a和b是通過_______分裂形成的，其DNA含量是體細胞的_______；c肯定是__細胞，乙的遺傳性狀與提供___________的綿羊一致.減數(shù)一半體細胞核第20頁，課件共22頁，創(chuàng)作于2023年2月乙甲abcdef(2)產(chǎn)生甲和乙的過程分別是—————和————（3）在形成乙是的過程中，需要將d的細胞核取出，將c細胞核移入d細胞內(nèi)，此技術叫———。所需的受體細胞大多采用動物卵細胞的原因是————————————————————————（4）綿羊的白色對黑色為顯色。若甲是白色綿羊，要判斷它是否純合體，選用與它交配的綿羊最好是————-------------------------有性生殖克隆核移植卵細胞大，易于操作；卵細胞具有繼續(xù)分化的潛能。黑毛第21頁，課件共22頁，創(chuàng)作于2023年2月乙甲abcdef（5）在產(chǎn)生多莉羊時，需將e細胞形成的早期胚胎移入另一頭母羊（f）子宮里，這種技術在細胞工程中叫——————（6）繼植物組織培養(yǎng)后，克隆綿羊的培育成功，證明