ATP檢測(cè)技術(shù)培訓(xùn)

——評(píng)價(jià)醫(yī)療器械清洗效果ATP生物熒光檢測(cè)技術(shù)器械清洗的目的：降低器械上微生物負(fù)荷；去除器械上的有機(jī)物和無(wú)機(jī)物；控制包裝區(qū)的污染，達(dá)到環(huán)境標(biāo)準(zhǔn)要求；確保滅菌達(dá)到無(wú)菌保障水平（SAV）10-6

ATP檢測(cè)示意圖殘留污染物細(xì)菌細(xì)胞中含有ATP有機(jī)污染物中含有ATP＋O2螢光素酶熒光素反應(yīng)發(fā)光細(xì)菌

含ATP有機(jī)物殘留

清洗質(zhì)量是保證滅菌成功的前提降低微生物負(fù)荷：去除大多數(shù)微生物后，再進(jìn)行消毒和滅菌，才能有效的達(dá)到消毒滅菌效果；去除微生物滋生的條件，阻礙殘留的微生物繁殖（有機(jī)物、溫度）減少熱源的產(chǎn)生（革蘭氏陰性桿菌滅活后，細(xì)胞壁釋放的內(nèi)毒素）深度清潔監(jiān)測(cè)中ATP生物熒光法更全面消毒不合格清潔不合格培養(yǎng)法：不合格ATP法：不合格↑↑培養(yǎng)法：合格ATP法：不合格↑培養(yǎng)法：合格ATP法：合格清潔不合格消毒合格、清潔合格有效去除殘留的有機(jī)物可阻斷微生物滋生環(huán)境

清洗質(zhì)量是保證滅菌成功的前提去除有機(jī)物或雜質(zhì)：覆蓋在器械上的有機(jī)物或無(wú)機(jī)物，滅菌劑不易穿透，有效的保護(hù)了細(xì)菌芽孢的滅活。使用中脫落在病人的體內(nèi)（轉(zhuǎn)移其他病人），可引起臟器粘連和傷口內(nèi)感染，甚至危及病人生命。ATP存在于細(xì)胞內(nèi)ATP（三磷酸腺苷）存在于動(dòng)物細(xì)胞、細(xì)菌細(xì)胞、植物細(xì)胞中，同類活細(xì)胞內(nèi)的含量基本一致；體細(xì)胞ATP含量大約為1×10-15molATP；細(xì)菌細(xì)胞中ATP含量大約為2×10-18molATP；細(xì)胞在自然凋亡的情況下，ATP含量會(huì)有所變化；因此可通過ATP的殘留量，直接反映清潔的效果。技術(shù)原理沾染在物體表面、醫(yī)療器械上的血液、組織液等體液中含有大量的體細(xì)胞和細(xì)菌等污染物，這些生物污染可以通過ATP生物熒光法測(cè)出。螢光素酶在Mg2＋、ATP、O2的參與下進(jìn)行酶促反應(yīng)放出光子儀器定量測(cè)定加入ATP標(biāo)準(zhǔn)品前后的相對(duì)發(fā)光值RLU，從而獲知污染物中的ATP含量，來(lái)判斷醫(yī)療器械的污染程度和清洗效果。通過使用體細(xì)胞ATP消除技術(shù)，也可對(duì)殘留細(xì)菌進(jìn)行檢測(cè)。ATP的可重復(fù)性實(shí)驗(yàn)以細(xì)菌內(nèi)ATP為指示物，取105大腸埃希菌（ATCC8099）菌懸液50μL，加入無(wú)菌離心管中進(jìn)行ATP含量測(cè)定并用菌落計(jì)數(shù)法對(duì)照；上述試驗(yàn)重復(fù)三天，每天同一管菌液重復(fù)測(cè)十次；將每天測(cè)的次數(shù)與ATP含量之間的關(guān)系進(jìn)行曲線標(biāo)定。菌落總數(shù)（CFU）第一天1.78×104第二天1.23×104第三天1.88×104

中國(guó)CDC消毒檢測(cè)中心

ATP生物熒光法與細(xì)菌計(jì)數(shù)法的相關(guān)性研究金黃色葡萄球菌（ATCC6538）測(cè)定結(jié)果：菌落計(jì)數(shù)相對(duì)光單位CFULog(CFU)RLULog（RLU）2.79×1088.4545829016.662.78×1077.4423217006.372.76×1066.446999315.852.81×1055.45810964.912.75×1044.4481603.912.82×1033.459852.992.82×1022.451762.252.75×101.441202.08表中cfu和RLU值均為5次試驗(yàn)結(jié)果平均值。中國(guó)消毒學(xué)雜志1001-7658（2008）03-0245-0448小時(shí)5秒y=1.3199x-0.8317R2

=0.97780.001.002.003.004.005.006.007.008.009.000.001.002.003.004.005.006.007.00relativelightunit(Log10)colonyformingunit(Log10)金黃色葡萄球菌菌落數(shù)對(duì)數(shù)值與RLU對(duì)數(shù)值的線性關(guān)系中國(guó)CDC消毒檢測(cè)中心

ATP生物熒光法與血液殘留的相關(guān)性研究對(duì)不同稀釋度血液的RLU觀察：血液稀釋度相對(duì)光單位稀釋度Log(倍數(shù))RLULog（RLU）1.0×10-2-252977566.721.0×10-3-328780836.461.0×10-4-46065645.781.0×10-5-5738074.875.0×10-6-5.3351734.552.5×10-6-5.6194844.291.0×10-6-682073.911.0×10-7-711813.071.0×10-8-82872.461.0×10-9-91792.25中國(guó)消毒學(xué)雜志1001-7658（2008）03-0245-04血液稀釋倍數(shù)對(duì)數(shù)值與RLU對(duì)數(shù)值的線性關(guān)系型號(hào)：BT-112D儀器靈敏度：10-18molatp用途：器械表面潔凈度、微生物檢測(cè)、水質(zhì)檢測(cè)等型號(hào)：PLUS儀器靈敏度：10-15molatp用途：物表潔凈度及手衛(wèi)生產(chǎn)品介紹微生物檢測(cè)試劑盒表面、管腔采樣器100ul水質(zhì)采樣器ATP技術(shù)檢測(cè)的使用方法1、取出拭子，涂抹器械表面（采樣面積：按照管理規(guī)范的要求）2、取樣后放回試管、掰斷閥芯3、擠下試劑并振蕩4、放入儀器內(nèi)檢測(cè)儀器檢測(cè)時(shí)間5秒鐘涂抹2掰斷閥芯3擠入試劑5秒鐘得到檢測(cè)結(jié)果4中國(guó)疾病預(yù)防控制中心消毒所推薦使用此儀器評(píng)價(jià)醫(yī)療器械清洗效果的參考標(biāo)準(zhǔn)值為RLU≤2000如何使用ATP技術(shù)（1）低靈敏度儀器可用于重點(diǎn)科室的物表和手衛(wèi)生監(jiān)測(cè)

臨床醫(yī)務(wù)人員手衛(wèi)生：手頻繁接觸物表：各種設(shè)備操作表面、治療車、床欄、床頭柜、門把手、燈開關(guān)、水龍頭等低風(fēng)險(xiǎn)器械表面：如血壓計(jì)袖帶、聽診器等使用科室：

ICU、NICU、燒傷病房、感染病房、手術(shù)室、新生兒病房、移植病房、透析室、血液科食堂等15秒如何使用ATP技術(shù)（3）高靈敏度熒光儀可用于：器械清洗效果檢測(cè)：管腔、內(nèi)鏡、外來(lái)器械重點(diǎn)監(jiān)測(cè)；清洗環(huán)節(jié)監(jiān)測(cè)：酶洗、超聲前后的對(duì)比建立標(biāo)準(zhǔn)化清洗流程；水質(zhì)檢測(cè)：口腔科用水、血液透析、呼吸機(jī)濕化罐、醫(yī)院水塔等器械消毒效果檢測(cè)：消化內(nèi)鏡、呼吸機(jī)管路等5秒其他應(yīng)用滅菌器械風(fēng)險(xiǎn)評(píng)估醫(yī)用清洗劑評(píng)價(jià)全自動(dòng)清洗機(jī)的清洗評(píng)價(jià)水處理設(shè)備環(huán)節(jié)監(jiān)控空氣微生物檢測(cè)（配合空氣采樣器）……..非管腔類器械

1、采樣時(shí)間：清洗后干燥的器械；2、采樣面積：100cm2以上只采100cm2,100cm2除手持部位全采；3、采樣：佩戴無(wú)菌的無(wú)粉手套、帽子、口罩，持器械手柄，從試管中取出采樣拭子，在器械表面往返涂抹并轉(zhuǎn)動(dòng)拭子5次，（齒部、關(guān)節(jié)部、溝槽部可重點(diǎn)涂抹），將拭子放回試管；4、檢測(cè)：掰斷速流閥，擠下試劑，振蕩15次，放入儀器檢測(cè)。

5、結(jié)果判定：

RLU＜2000合格、RLU＜2000＜4000警告、RLU＞4000不合格采樣要求某三甲醫(yī)院重點(diǎn)科室物表冰箱把手2258使用中的尺子2171床把手1815使用中的聽診器1299暖箱窗口把手1057三通管路接頭922護(hù)士站鼠標(biāo)893使用中的電話725監(jiān)護(hù)儀按鈕667床尾遙控器522呼吸機(jī)面板458病歷夾399操作臺(tái)291手衛(wèi)生（物表)潔凈后標(biāo)準(zhǔn)≤

30為合格

30-100為警告

100以上為不合格物表使用中檢測(cè)標(biāo)準(zhǔn)≤100為合格100-300為警告300以上不合格第一次使用ATP熒光檢測(cè)儀檢測(cè)結(jié)果數(shù)值某三甲醫(yī)院重點(diǎn)科室物表手衛(wèi)生（物表)潔凈后標(biāo)準(zhǔn)≤

30為合格

30-100為警告

100以上為不合格物表使用中檢測(cè)標(biāo)準(zhǔn)≤100為合格100-300為警告300以上不合格冰箱把手125使用中的尺子105床把手98使用中的聽診器87暖箱窗口把手79三通管路接頭66護(hù)士站鼠標(biāo)54使用中的電話48監(jiān)護(hù)儀按鈕35床尾遙控器29呼吸機(jī)面板25病歷夾21操作臺(tái)11持續(xù)使用ATP熒光檢測(cè)儀干預(yù)監(jiān)督三個(gè)月后檢測(cè)數(shù)值手衛(wèi)生（物表)潔凈后標(biāo)準(zhǔn)≤

30為合格

30-100為警告

100以上為不合格物表使用中檢測(cè)標(biāo)準(zhǔn)≤100為合格100-300為警告300以上不合格某三甲醫(yī)院ICU感染病房采樣部位數(shù)值培養(yǎng)結(jié)果6床病室內(nèi)治療臺(tái)面11＜0.4cfu/cm2固定護(hù)理6床病人護(hù)士洗過的手11＜0.4cfu/cm26床床頭桌臺(tái)面562鮑曼不動(dòng)桿菌、表皮葡萄球菌6床病人手指接觸的電線312表皮葡萄球菌6床病人胸前擦拭的皮膚256表皮葡萄球菌6床病人使用心電監(jiān)護(hù)儀按鈕56＜0.4cfu/cm26床病人床尾48＜0.4cfu/cm26床病人被服6＜0.4cfu/cm2這是某醫(yī)院ICU6號(hào)床物表檢測(cè)的數(shù)值，培養(yǎng)出鮑曼，葡萄球菌的部位，ATP的檢測(cè)數(shù)值非常的高，細(xì)菌培養(yǎng)物表合格的，ATP的數(shù)值很低。小結(jié)：特點(diǎn)

1、全面的檢測(cè)范圍：ATP生物熒光檢測(cè)技術(shù)可檢測(cè)出殘留在器械表面上的體細(xì)胞、細(xì)菌等污染物，可全面評(píng)價(jià)醫(yī)療器械清洗效果，是一種綜合評(píng)價(jià)方法。2、現(xiàn)場(chǎng)快速檢測(cè)：操作簡(jiǎn)單，手持機(jī)15秒，臺(tái)式機(jī)5秒可得到檢測(cè)結(jié)果，實(shí)時(shí)快捷。3、定量檢測(cè)的模式：手持機(jī)RLU≤30，臺(tái)式機(jī)RLU≤20004、檢測(cè)項(xiàng)目：可以做潔凈度檢測(cè)，ATP含量和細(xì)菌計(jì)數(shù)。5、數(shù)字化的質(zhì)量控制：可對(duì)清洗效果和操作環(huán)節(jié)進(jìn)行質(zhì)量控制，建立數(shù)字化控制體系。

檢查醫(yī)院重點(diǎn)部門的污染狀況和潔凈狀況；（手術(shù)室、新生兒病房、重癥監(jiān)護(hù)室、透析室、內(nèi)鏡室、病房、盥洗室等）

廣東省某醫(yī)院臨床實(shí)驗(yàn)

使用2000RLU（相對(duì)發(fā)光值）對(duì)硬式腔鏡的操作齒鉗、鉗柄管腔清洗過程和清洗效果的檢測(cè),及醫(yī)療器械、器具使用清洗機(jī)清洗前后的效果評(píng)價(jià)鉗柄管腔清洗調(diào)查取樣面積4.66cm2，取樣數(shù)量30。分析1、30例鉗柄管腔通過初洗、酶洗、風(fēng)吹干燥或清洗干燥后ATP含量100%呈下降趨勢(shì)2、以2000RUL作為合格標(biāo)準(zhǔn)，有28例通過，合格率93%3、超聲清洗環(huán)節(jié)有14例樣品ATP有升高現(xiàn)象，表示此超聲清洗環(huán)節(jié)存在二次污染。4、使用本系統(tǒng)可找到清洗過程中的薄弱環(huán)節(jié)，提高工作效率。1號(hào)2號(hào)10號(hào)11號(hào)12號(hào)清洗前7223758792810426660213668184416176初洗后11264622474203052688931309酶擦沖水后20911693219713243390超聲沖水后435514202301718574446清洗機(jī)清洗醫(yī)療器械、器具前后的效果評(píng)價(jià)

取樣部位:齒鉗類取齒部和關(guān)節(jié)部位，彎盤等取內(nèi)部所有部位，吸引器吸頭取管腔內(nèi)壁。分析

1、清洗干燥后ATP含量100%呈下降趨勢(shì)。

2、器械在清洗機(jī)中碼放密度和碼放方式直接影響清洗機(jī)的清洗效果。

3、管腔類器械在清洗機(jī)中清洗效果不好，應(yīng)使用專用的管腔類清洗設(shè)備，或上機(jī)前對(duì)管腔類器械預(yù)先清洗。1號(hào)2號(hào)3號(hào)4號(hào)5號(hào)………清洗前13278901925951342521365648906786579………清洗后18074678258067016987………ATP生物熒光檢測(cè)技術(shù)可全面評(píng)價(jià)醫(yī)療器械清洗效果ATP生物熒光檢測(cè)技術(shù)可檢測(cè)出殘留在器械表面上的體細(xì)胞、細(xì)菌等污染物，使清洗效果檢測(cè)更加全面，是一種綜合評(píng)價(jià)方法。使用快捷方便，5秒鐘可得到檢測(cè)結(jié)果，操作過程不超過1分鐘?？啥繖z測(cè)清洗效果。（RLU≤2000）可對(duì)清洗效果和操作環(huán)節(jié)進(jìn)行質(zhì)量控制，建立數(shù)字化關(guān)鍵點(diǎn)控制體系。已列入即將頒布的國(guó)標(biāo)“醫(yī)用清洗劑”質(zhì)量認(rèn)定的國(guó)標(biāo)方法。在已經(jīng)發(fā)布“醫(yī)院消毒供應(yīng)中心管理規(guī)范的釋義”中提出用ATP法監(jiān)測(cè)評(píng)價(jià)清