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文檔簡介

重組DNA技術(shù)與基因工程5

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重組DNA技術(shù)與基因工程的基本概念重組DNA技術(shù)所需的基本條件重組DNA技術(shù)的操作過程目的基因的克隆與基因文庫的構(gòu)建外源基因在大腸桿菌中的表達外源基因在酵母中的表達A大腸桿菌作為表達外源基因受體菌的特征5

外源基因在大腸桿菌中的表達大腸桿菌表達外源基因的優(yōu)勢全基因組測序,共有4405個開放型閱讀框架基因克隆表達系統(tǒng)成熟完善繁殖迅速、培養(yǎng)簡單、操作方便、遺傳穩(wěn)定被美國FDA批準(zhǔn)為安全的基因工程受體生物A大腸桿菌作為表達外源基因受體菌的特征5

外源基因在大腸桿菌中的表達大腸桿菌表達外源基因的劣勢缺乏對真核生物蛋白質(zhì)的復(fù)性功能缺乏對真核生物蛋白質(zhì)的修飾加工系統(tǒng)內(nèi)源性蛋白酶降解空間構(gòu)象不正確的異源蛋白細(xì)胞周質(zhì)內(nèi)含有種類繁多的內(nèi)毒素B外鐘源慮基夫因已在釣大葡腸溪桿暢菌購中浮高宴效秋表血達豎的外原米理5外忠源吼基猜因暮在瓜大貸腸唱桿窩菌言中遲的步表前達啟正動懂子終噸止俯子核叔糖嗽體瞎結(jié)評合扁位廁點密侮碼飄子質(zhì)續(xù)粒樣拷借貝拘數(shù)啟冷動臉子啟夸動問子手最打佳憂距怒離講的冬探康測目槳的法基碧因EEAEE啟懷動肅子A酶車切滑開B個a療l策3乖1酶成解目固的胖基詳因啟割動咸子啟和動吐子痕的最篩隙選A粒pro筑r衫ig蔑a印l膏Kp迷K笑O咸1終拒止徹密持碼跡子采體用倦鳥要槍染法光戰(zhàn)折略格,寒將巾合摘適凝大趕小慕的D奮N水A片摸段克賊隆役到油啟椒動誘子握探勢針鐮質(zhì)移粒p辣K度O偽1上冤。受思體蓄細(xì)鄙胞擱染潮色魯體D瞞N泄A上蕩的g啊a什l忌E、g圈a負(fù)l慰T與憑質(zhì)粒碰上勞報兄告激基唐因g祖a稱l厘k的巾表奶達鞭產(chǎn)炎物釘聯(lián)貼合噴作棋用快,可腎將蘇培擠養(yǎng)代基起中坦的看半朵乳標(biāo)糖妹酵溜解置成短紅肉色柿素叨物壯質(zhì)轉(zhuǎn)妙化g憤a轟l記E+、g葬a海l如T+、g決a盈l屑K-的農(nóng)大監(jiān)腸遞桿替菌貢受晝體糠菌哭株含賊有濤外涂源制啟卸動挽子敏活良性聰?shù)臒熤鼗糜窠M辰克未隆啟滿動構(gòu)子啟遵動澆子相的僑構(gòu)刷建-素3賞5油區(qū)見序冤列-重1打0籮區(qū)哈序楊列PlLPr菌e誘c隙APt每r繩pPl鉤a顆cPt絞r膏a米APt僅a類c啟睬動委子T膽T蘆G街A借C配AG寺A冬T航A給C絹TT錄T久G或A白T邊AT早A伶T救A廚A儉TT急T隊G所A北C腸AT慨T烏A眨A裂C排TT駕A努G匠A欠C寬AT桶A楚A別T段G短TT程T坊T南A趕C福AT攔A在T患A縱A穩(wěn)TT歐T橋G要A損C嚴(yán)AT逆A放T絞A啊A座TPt感a絡(luò)c=3Pt畢r稱p=1豈1Pl獸a虹c啟鐵動臥子啟鞋動歪子法的駛可磁控科性P乳嘗糖車啟偵動漫子Pl龜a虜c的腎可獸控棉性宏:OPO高藍效做轉(zhuǎn)浪錄阻接遏騾蛋愛白誘衡導(dǎo)乳謀糖變異值丙態(tài)基央-b-愧D林-硫莖代膀半遠(yuǎn)乳這糖牢苷細(xì)(I件P本T把G碌)野毀生走型床的Pl騾a驗c與唱其擱控膚制戚區(qū)Ol襖a項c偶惱聯(lián)嬸在贊一使起冶,窩在退沒閉有誘塊導(dǎo)則物富存六在蘇時撕,種操蹈縱坐子基挪底條水辟平狠轉(zhuǎn)膨錄處方于糧基尺底迅水礦平盼表診達豆;蝕誘導(dǎo)彎物孕可翁以喇使叔啟甘動露子Pl持a啄c介導(dǎo)趟的合轉(zhuǎn)蝕錄淺大扔幅透提井高況。啟站動蛾子啟約動督子置的市可本控債性Pl懷a父c乳雹糖勿啟普動紙子Pl潛a幻玉c的習(xí)可付控歷性布:OPl尖a沒cO高牲效狐轉(zhuǎn)把錄葡計萄擔(dān)糖站代竊謝野難生遠(yuǎn)型度的Pl蹄a露c上甚游復(fù)附落近奧擁么有詞代蠶謝激謝活售因壁子慣(C客A媽P些)結(jié)雨合教區(qū)遍,下小分剪子c毅A籠M齒P激秘活C短A般P皂,爪C足A益P結(jié)基狼底獎水撒平刃轉(zhuǎn)苗錄啟籌動恥子念控抬制誰區(qū)舉,宰進夾而先促蜂進Pl旁a喬c介導(dǎo)語的攏轉(zhuǎn)授錄物。淺葡瀉萄棒糖怎代慌謝職使c察A收M財P減柔少舌,攏也譜能切阻閘遏Pl瓣a辛c介然導(dǎo)誤的謙基私因轉(zhuǎn)繳錄辨。管因后此童,皮基臂因鋤工探程醬中象使區(qū)用的丈乳題糖盒啟奮動號子診均容為生抗衰葡剛萄繡糖陡代謝垮阻么遏跡的暗突裝變掀型漆,與即Pl倍a塞cU畢V華5。C破A孩Pc緞A下M甘Pc喬A偉M亮P濃臂度鼓降紹低Pl密a蓄cU水V糟5O高泥效身轉(zhuǎn)截錄Pt桌r斤p色決氨篇酸唯啟箱動棒子Pt礎(chǔ)r筆p的怕可花控宜性價:Ot寺r霧p除輛去色丸氨覆酸色后氨系酸凡啟嚇動極子Pt景r符p受疏色己氨擇酸偉-箭阻鄭遏蛋訊白成復(fù)花合岔物瘡的勿阻恭遏計,惹轉(zhuǎn)某錄毅呈理基淘底狀糠態(tài)倆。王在若培熟養(yǎng)滲系立統(tǒng)污中橡去膚除雁色沾氨業(yè)酸基鐵底襪水震平怖轉(zhuǎn)荒錄或紫者稻加景入3堪-箱吲倒哚帖丙東烯碎酸(I蒼A憲A示)模,便敞可稠有猴效項地秒解跪除丙阻凳遏寧抑姑制昏作兄用龍。在現(xiàn)正界常程的傾細(xì)良菌疼培也養(yǎng)濱體揉系館中蓬,掃除臺去色亞氨禽酸垮是東困錢難低的豎,愧因望此框基療因領(lǐng)工球程中覺往籌往蹦添廊加I釀A牙A誘民導(dǎo)Pt族r割p介幣導(dǎo)替的植目基散因疼的期表斧達仇。色安氨厚酸或?qū)偌?掌-做吲房誠哚可丙饑烯正酸高基效棗轉(zhuǎn)升錄阻西遏己蛋帳白(I裹A午A)Ot某r亦pPt自r茫p高張效丘轉(zhuǎn)元錄Ot妖r膽pPt臨r拔p啟摟動登子啟跑動物子徑的??筛饪胤葱詌噬敬菌灶體啟柿動水子PlL的寄可速控冊性譯:噬盼菌借體童啟列動范子PL受C慘I阻仿遏翼蛋陵白筆阻遏辦,奸很速難跡直河接兄誘彈導(dǎo)裹控愈制匙。恰在謹(jǐn)基勢因工新程表中店常謎使嫁用慕溫排度映敏例感隱型熱的c落I突變來基拳因c融I8韻5樹7控濟制PL。賭c鍋I8撓5菠7阻山遏概蛋白迎在鬧4鉗2等℃印時納失累活倆脫哀落龍,PL便電介吩導(dǎo)目豆的納基肆因穗的劈燕表檔達廊。誤但右在宜大再型屢細(xì)到菌培敘養(yǎng)旗罐伸中紐奉迅付速身升磁溫南非工常塵困覺難亡,粥因此呆常碧使希用徐一靜個白雙滲質(zhì)苗粒符控雖制糞系璃統(tǒng)俘,用何色反氨售酸君間汁接惡控加制請目剖的撓基隊因醉表排達Pt葛r回pABc農(nóng)I8射5疲7PL目豎的轉(zhuǎn)基除因阻孔遏繡作超用Pt創(chuàng)r滲pABPL表擺達色再氨誘酸啟域動蒜子啟收動床子軟的湯可話控亭性終地止彩子強傻化益轉(zhuǎn)本錄申終虎止恢的退必舉要壺性外倡源否基眼因價在港強取啟龜動直子擺的活控性制攔下寒表您達柿,猛容偉易煤發(fā)綱生祝轉(zhuǎn)傾錄改過葛頭差現(xiàn)顯象施,就即R驢N皇A聚猶合笑酶四滑聯(lián)過米終冬止步子寒結(jié)小構(gòu)庫繼顏續(xù)年轉(zhuǎn)和錄瘋質(zhì)主粒族上獨鄰第近盾的D閉N赤A序窄列飲,治形師成材長躬短禾不敬一脹的m時R傲N紀(jì)A混夠合攝物過袖長振轉(zhuǎn)陵錄演物疼的怨產(chǎn)野生追在明很止大退程婦度銷上苦會雜影拉響犬外貨源敲基拐因浸的浙表屠達救,鞋其疏原旬因度如框下劈燕:轉(zhuǎn)花錄化產(chǎn)走物風(fēng)越儉長充,R顏N乞A聚爺合迎酶集轉(zhuǎn)張錄珠一紗分蔽子m朗R正N弱A所橡需芽的椅時癥間廣就拜相趟應(yīng)燥增露加考,玻外櫻源匠基鎖因搶本危身暮的積轉(zhuǎn)傻錄瓦效所率真下鵝降晌;如早果塵外使源寶基米因竄下哀游輪緊蹲接貧有燙載鴿體塘上茄的罰其躍它減重雖要盾基桿因均或D落N戶A功處能訴區(qū)宴域剩,延如絨選灑擇黃性改標(biāo)倍記臟基領(lǐng)因鼓和贈復(fù)辯制案子慰結(jié)膊構(gòu)幟等醬,濫則R申N座A聚可合呈酶智在私此漲處范的陸轉(zhuǎn)你錄服可賊能猴干除擾耗質(zhì)墾粒禿的卵復(fù)亮制憶及蘭其差它政生嚷物袋功明能邀,舒甚統(tǒng)至列導(dǎo)膛致呢重抹組艷質(zhì)互粒淚的凱不爺穩(wěn)鼠定件性酒;過行長丈的m罪R牌N營A往嘉往襯會魔產(chǎn)我生致大陳量亭無蔽用濾的蔑蛋娘白逆質(zhì)初,牙增厭加五工胸程豪菌盯無拔謂醬的撓能蕉量蝦消橋耗縮慧;更施為諒嚴(yán)遞重斑的絞是捆,生過端長鍬的恭轉(zhuǎn)斜錄賠物受往井往扭不媽能伴形翼成瘋理械想紹的條二評級祝結(jié)悔構(gòu)繁,姨從癥而易大夾大群降繪低寄外間源哪基族因央編抄碼維產(chǎn)喉物寬的真翻辛譯崇效通率北。終炭止求子強創(chuàng)終豆止搭子益的與選傲擇句與帥使騙用目擾前拿外咳源日基評因杏表甘達邀質(zhì)栽粒漸中格常王用費的擠終昌止鑰子把是衫來趣自逢大膊腸肯桿企菌r察R稱N完A操扭縱抹子輸上躬的r賊r量n摟T1T2以餃及T趙7噬趨菌塑體D裁N蠶A上龜?shù)腡f。對毒于躍一補些肥終咬止融作巧用熊較涼弱蝕的胞終春止隔子贊,午通犁常坊可廚以擇采枝用垮二診聚隆體素終糧止?fàn)N子獻串韻聯(lián)喂的煩特嗓殊輔結(jié)pCP1AproriTcr篩郵選A嫂pr、T鋸cs的星轉(zhuǎn)售化船子終追止蠟子協(xié)也班可系以錄象遇啟洋動坡子臣那落樣榮,爹通犬過浴特籠殊廈的鼠探踏針表質(zhì)抓粒捕從淘細(xì)綠菌宰或浴噬越菌固體缺基構(gòu)弓,某以樹增妨強弦其臂轉(zhuǎn)響錄裕終犯止蛾作酷用疼?;饕蚰罱MD常N碰A中潤克耍隆奧篩跳選俊。核炊糖搜體逼結(jié)罩合圈位爭點外襯源采基錯因陽在佛大鬼腸局桿聾菌堤細(xì)金胞劑中往的賽高解效縮慧表贈達晚不蟲僅篇取踢決想于棟轉(zhuǎn)客錄菠啟挪動叼的名頻嚴(yán)率既,葉而授且浮在彈很稱大藏程狐度福上掏還巷與m污R往N劉A的壟翻披譯惕起灘始但效懇率本密充切幼相殲關(guān)社。球大筐腸閘桿拋菌匆細(xì)立胞嗚中殿結(jié)燥構(gòu)啊不決同疼的m際R剩N撕A分注子束具楊有譜不顧同周的標(biāo)翻藏譯辭效嚇率榜,詞它忌們遠(yuǎn)之嶼間括的業(yè)差透別偉有拒時歇可紙高蝴達常數(shù)室百此倍蛋。m藥R胳N娛A翻思譯再的獨起次始主效處率麻主齊要拍由太其5型‘端旱的誰結(jié)越構(gòu)惡序鴉列油所橋決柱定圖,冬稱技為核案糖嬸體筍結(jié)色合位位乎點(R陣B佩S),滲大蜻約播涉汪及3賭0個泰堿助基的邁長揀度大款腸先桿夫菌沃核壯糖禮體挎結(jié)譽合獲位撓點隨包辜括匠下勝列圖四降個耽特?fù)险黛柦Y(jié)匪構(gòu)喝要嘗素吸:位江于徒翻成譯椒起識始小密苦碼銅子皺上葉游1截0個萌堿蘆基昂內(nèi)某的遲序?qū)O列5僚’-庸U塞A愁A(yù)食G拆G期A劇G傍G宣3旱’,即S岔h艇i武n旅e儉-零D菌a城l賣g昌a張r昏n臭o(S攜D)序念列在,嘗它尸通葡過堡識護別形大凱腸陶桿窩菌驅(qū)核鎮(zhèn)糖橡體辦小丈亞芳基煙中杰的1羊6S裙r暮R敞N杏A催3責(zé)’端槳區(qū)桌域3賭’A示U客U伐C跪C魔U掛C僅C窮5忠’并劃與黃之雜專臨一獅性顏結(jié)冰合割,志將m女R裂N將A定開位宇于蠻核潛糖洞體拌上并,燈從誓而燒啟殼動乏翻搞譯塵;翻倦譯居起訓(xùn)始崗密克碼扎子,穩(wěn)大渠腸昌桿刑菌眾絕送大蔽部陷分究基恒因搭以A待U呼G作烤為替閱故讀意框諷架壺的熄起鈔始姑位圈點疊,宜但鋪有壺些真基刷因既也涌使雷用G系U善G或U藝U死G作握為椒翻山譯州起效始欲密悲碼產(chǎn)子貌;S小D序稀列意與蒸翻酬譯逝起誓始斯密爺碼系子也之達間大的燦距笛離若及董堿承基鴿組撲成;基難因繳編槍碼箭區(qū)夫5票’僑端筑若描干街密諸碼蘆子佳的攪堿深基廟序衡列;核仙糖值體粗結(jié)銳合胞位寒點核紛糖騙體溪結(jié)斷合如位桶點歷的茂結(jié)犧構(gòu)核土糖魄體撥結(jié)薄合特位胃點核暑糖賺體族結(jié)戴合樹位始點夫?qū)]外案源夜基稀因布表霉達源的稅影齡響S給D序利列項的該影筍響:一孟般叨來營說鋒,m似R雅N雕A與尊核忍糖暖體社的恰結(jié)今合煌程畏度赤越宅強灶,腳翻足譯挖的傳起掩始叔效聾率循就從越攔高寫,既而增這巧種濁結(jié)詢合昨程料度仿主蛋要摧取嘗決根于S眉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