基因擴增(PCR)實驗室作業(yè)指導(dǎo)書

PCR實驗室作業(yè)指導(dǎo)書生效日期：2019 年8月10日**醫(yī)院檢驗科基因擴增實驗室文件號:AXRY-PCR-SOP版本/修訂號：1/0生效日期：20190810人民醫(yī)院檢驗科文件號:AXRY-PCR-SOP版本/修訂號：1/0生效日期：20190810人民醫(yī)院檢驗科主題內(nèi)容目錄第PAGE第2頁共130頁目 錄序號主題內(nèi)容文件編號頁號臨床基因擴增實驗室標(biāo)準(zhǔn)操作規(guī)程1實驗室消毒標(biāo)準(zhǔn)操作規(guī)程CSHS-PCR-SOP—00152可調(diào)移液器的使用和維護保養(yǎng)標(biāo)準(zhǔn)操作規(guī)程CSHS-PCR-SOP—00273YN-H18型全自動雜交儀操作及維護規(guī)程CSHS-PCR-SOP—003104TL988實時熒光定量PCR儀標(biāo)準(zhǔn)操作規(guī)程CSHS-PCR-SOP—004185NP-968核酸提取儀CSHS-PCR-SOP—005306標(biāo)準(zhǔn)型潔凈工作臺使用與維護CSHS-PCR-SOP—006327基因擴增熱循環(huán)儀的使用和維護保養(yǎng)標(biāo)準(zhǔn)操作規(guī)程CSHS-PCR-SOP—007338凈化傳遞窗的使用與維護CSHS-PCR-SOP—008489紫外線消毒車的使用與維護CSHS-PCR-SOP—0094910生物安全柜標(biāo)準(zhǔn)操作程序CSHS-PCR-SOP—0105011恒溫金屬浴使用和維護保養(yǎng)標(biāo)準(zhǔn)操作程序CSHS-PCR-SOP—0115112離心機操作維護保養(yǎng)標(biāo)準(zhǔn)操作程序CSHS-PCR-SOP—0125313臨床標(biāo)本采集與接收標(biāo)準(zhǔn)操作程序CSHS-PCR-SOP—0135514標(biāo)本的唯一性標(biāo)識編制程序CSHS-PCR-SOP—0145715臨床標(biāo)本的保存和安全處置標(biāo)準(zhǔn)操作程序CSHS-PCR-SOP—0155816B族鏈球菌（GBS）核酸檢測實驗標(biāo)準(zhǔn)操作規(guī)程CSHS-PCR-SOP—0165917EB病毒核酸檢測實驗標(biāo)準(zhǔn)操作規(guī)程CSHS-PCR-SOP—0176218丙型肝炎（HCV）核酸定量檢測試劑盒標(biāo)準(zhǔn)操作規(guī)程CSHS-PCR-SOP—0186619DNA-RNA核酸提取試劑標(biāo)準(zhǔn)操作流程CSHS-PCR-SOP—0197120超敏乙型肝炎（HBV）核酸檢測標(biāo)準(zhǔn)操作規(guī)程CSHS-PCR-SOP—0207421單純皰疹病毒(HSV)II型核酸檢測實驗標(biāo)準(zhǔn)操作規(guī)程CSHS-PCR-SOP—0217722結(jié)核分枝桿菌復(fù)合群TB核酸檢測實驗標(biāo)準(zhǔn)操作規(guī)程CSHS-PCR-SOP—0228023解脲支原體（UU）核酸檢測標(biāo)準(zhǔn)操程序CSHS-PCR-SOP—0238424淋球菌（NG）核酸檢測標(biāo)準(zhǔn)操作規(guī)程CSHS-PCR-SOP—024862525沙眼衣原體（CT）核酸檢測標(biāo)準(zhǔn)操作規(guī)程CSHS-PCR-SOP—02526基因擴增實驗室各區(qū)標(biāo)準(zhǔn)操作程序CSHS-PCR-SOP—02627試劑的質(zhì)檢標(biāo)準(zhǔn)操作程序PCR儀樣本上機放置標(biāo)準(zhǔn)操作規(guī)程CSHS-PCR-SOP—02728CSHS-PCR-SOP—02889929596第PAGE第4頁共130頁人民醫(yī)院檢驗科主題內(nèi)容 修訂頁

文件號:AXRY-PCR-SOP—001版本/修訂號：1/0：20190810文件名稱 文件 編號 數(shù)

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批準(zhǔn)人 批準(zhǔn)日期文件號:AXRY-PCR-SOP—001版本/修訂號：1/0生效日期：20190810人民醫(yī)院檢驗科主題內(nèi)容文件號:AXRY-PCR-SOP—001版本/修訂號：1/0生效日期：20190810人民醫(yī)院檢驗科主題內(nèi)容實驗室消毒標(biāo)準(zhǔn)操作規(guī)程第PAGE第5頁共130頁實驗室消毒標(biāo)準(zhǔn)操作規(guī)程1、目的：基因檢測實驗室生物安全管理的基本要求，防止疾病傳播和交叉污染，保護環(huán)境，保障人體健康和安全。2、適用范圍：基因檢測實驗室，包括所有使用過的標(biāo)本、耗材、工作環(huán)境、實驗臺面、工作間、移液器等的清潔消毒工作。3、清潔消毒消毒液消毒實驗室主要使用含氯消毒液與紫外燈進行消毒，消毒液配置方法如下：水：84消毒液種類 （氯濃度 用途40000-70000mg/L）500mg/L1000mg/L1000mg/L消毒液種類

79:139:139:1水：工業(yè)酒精（95%）

臺面、儀器表面、傳遞窗等消毒實驗室地面消毒EP材浸泡用途75%乙醇 210.53ml：789.47ml 移液器、紫外燈消毒消毒液分別在每個實驗區(qū)進行配制，現(xiàn)配現(xiàn)用。（試劑準(zhǔn)備區(qū)→樣本制備區(qū)→擴增分析區(qū)，各區(qū)清潔工具均為專用，不可混用。進行清潔消毒時需佩戴手套。清潔方式為擦拭實驗桌面及地板，應(yīng)清潔至桌面及地面無明顯異物及灰塵。500mg/L“84”液的衛(wèi)生60紫外線消毒紫外線消毒適用于室內(nèi)空氣及物體表面的消毒；211紫外消毒須在室內(nèi)無人狀態(tài)下進行，移動紫外燈須距離消毒目標(biāo)60-90cm內(nèi)；20℃-40℃；完成紫外消毒后應(yīng)在《紫外消毒記錄表》記錄紫外消毒時間及累計時間；3.2.675%乙醇對紫外燈表面進行清潔，并使用紫外強度檢測卡對紫外燈強度

或使用累計時間超過1000h時需更換燈管。文件號:AXRY-PCR-SOP—002版本/修訂號：1/0生效日期：20190810人民醫(yī)院檢驗科主題內(nèi)容文件號:AXRY-PCR-SOP—002版本/修訂號：1/0生效日期：20190810人民醫(yī)院檢驗科主題內(nèi)容可調(diào)移液器的使用標(biāo)準(zhǔn)操作規(guī)程第PAGE第9頁共130頁可調(diào)移液器的使用標(biāo)準(zhǔn)操作程序1、目的：為規(guī)范可調(diào)移液器的使用，特制定此標(biāo)準(zhǔn)操作規(guī)程。2、適用范圍：本制度適用于實驗室的可調(diào)移液器。3、程序細(xì)則：行。移液器每年校準(zhǔn)一次，由檢驗科派人送省計量局進行校準(zhǔn)，對校準(zhǔn)結(jié)果如實記錄。操作過程選擇量程量程內(nèi)：即所需移取的體積必須在移液器的量程內(nèi)；半量程：即使用同一移液器，在半量程以上相對于半量程以下要精確；就小不就大：即移取同一體積的液體，應(yīng)選用最大量程較小的移液器，如要移取10-100ul設(shè)定容量正確的容量設(shè)定分為兩個步驟，一是粗調(diào)，即通過容量調(diào)節(jié)器將容量值迅速調(diào)整造成的影響。當(dāng)我們從大值調(diào)整到小值時，剛好就行；但從小值調(diào)整到大值時，設(shè)定所需要的100ul-1000ul300ul調(diào)至500ul，500ul刻度1/4500ul。裝配吸頭15℃-30℃即可；注：切記不可采取“反復(fù)撞擊”吸頭的方法來進行安裝。長期這樣操作，會導(dǎo)致移液否則移液器螺紋連接部分可能會松動；多道移液器裝配吸頭時，將移液器的第一道對準(zhǔn)第一個吸頭，傾斜插入，前后稍許搖動上緊，吸頭插入后略超過O型環(huán)即可。預(yù)洗吸頭在安裝了新的吸頭或增大了容量值以后應(yīng)該把需要轉(zhuǎn)移的液體吸取、排放兩到三次，達到飽和，負(fù)壓就會自動消失。吸液按下控制鈕至第一檔；1-5m（視吸頭容量大小而定0.1-10ul1-2mm；20-200ul2-3mm；1-5ml3-5mm；平穩(wěn)松開按鈕，使控制鈕緩慢滑回原位（液體越稠越慢；移液器（1000ul以下）移出液面前略等待1秒，直至液面穩(wěn)定，不再上升；緩慢取出吸頭，確保吸頭外壁無液體。排液將吸頭嘴抵住容器內(nèi)壁；1-3（越稠越慢；將控制鈕按至第二檔同時，吸頭嘴要慢慢離開液面；放開控制鈕；按壓彈射鍵棄掉吸頭。吸、排液注意點45℃；吸頭尖2-32-3慢吸慢放，控制好彈簧的伸縮速度；控制好吸排液體時的等待時間；完全脫離液面，以防止回吸；5mm，慢吸液體，達到預(yù)定33.3.7.2器活塞。使用完畢后移液器使用完畢后，把移液器量程調(diào)至最大量程，垂直放置在移液器架上。正向吸液與反向吸液正向吸液正向吸液是常用的吸液方式，吸液操作時將按鈕按到第一檔后，吸液，釋放按鈕，如：水、緩沖液、稀鹽溶液、稀酸堿溶液。反向吸液液體時只要按到第一檔即可；多吸入的液體可以補償吸頭內(nèi)部的表面吸附；積移液。第PAGE第10頁共130頁人民醫(yī)院檢驗科主題內(nèi)容 操作及維護規(guī)程

文件號:AXRY-PCR-SOP—003版本/修訂號：1/0：20190810

YN-H18型全自動雜交儀操作及維護規(guī)程安全正確使用YN-H18型全自動雜交儀，保證檢驗工作順利進行，并確保操作人員的人身安全和本儀器得到正確使用和維護保養(yǎng)。適用范圍適用YN-H18型全自動雜交儀的安全使用及維護保養(yǎng)。職責(zé) YN-H18型全自動雜交儀使用人員按本規(guī)程操作，并對本儀器進行日常維護，并作使用登記。 YN-H18型全自動雜交儀保管人負(fù)責(zé)監(jiān)督儀器操作安全維護是否符合規(guī)程，并對儀器進行定期維護、保養(yǎng)。儀器管理員負(fù)責(zé)儀器的綜合管理。安全規(guī)程20-25℃最為合適。市電輸出穩(wěn)定，儀器外殼必須有效地接地，防止滑落砸傷。儀器內(nèi)部和上方不能放置易燃、易爆、易腐蝕和過熱、過冷的物品。儀器運行時，禁止用手觸碰活動零部件，或伸進儀器內(nèi)部，防止夾傷。因，及時處理，做好故障情況記錄。操作規(guī)程實驗前準(zhǔn)備準(zhǔn)備要做的雜交樣本個數(shù)，確認(rèn)各種試劑的量，并加入各自對應(yīng)的容器中。文件號:AXRY-PCR-SOP—003版本/修訂號：1/0人民醫(yī)院檢驗科YN-H18操作及維護規(guī)程文件號:AXRY-PCR-SOP—003版本/修訂號：1/0人民醫(yī)院檢驗科YN-H18操作及維護規(guī)程主題內(nèi)容生效日期：20190810第PAGE第15頁共130頁號位放入雜交盒內(nèi)，雜交盒放置順序如圖1示。儀器運行參數(shù)設(shè)置號位放入雜交盒內(nèi)，雜交盒放置順序如圖1示。儀器運行參數(shù)設(shè)置通電開機運行，儀器三軸運動平臺自動復(fù)位，且觸摸屏顯示亞能生物L(fēng)OGO開機畫面，2秒后進入工作畫面。儀器運行后，實時顯示各個區(qū)域的溫度傎，顯示溫度包含有：反應(yīng)區(qū)、B液保溫、常溫，如圖示。點擊操作界面“設(shè)置”按鍵進入?yún)?shù)設(shè)置畫面。反應(yīng)溫度：指設(shè)定雜交過程所需的溫度值，例：某產(chǎn)品的雜交溫度為51度，反應(yīng)溫度就設(shè)定為“51”30～65℃。是指加入2ml的預(yù)熱A液。反應(yīng)盒（即雜交盒）個數(shù)：指設(shè)定雜交樣本的個數(shù)（1～45），例：選擇3是指做3個雜交樣本。300～180。B液洗膜時間：指B液洗膜時間，系統(tǒng)默認(rèn)設(shè)置參數(shù)為5分鐘；可設(shè)置范圍為0～60。POD孵育時間：指POD15分鐘；可設(shè)置范圍為0～60。AA50～60。C液洗膜時間：指C液洗膜時間，系統(tǒng)默認(rèn)設(shè)置參數(shù)為2分鐘；可設(shè)置范圍為0～60。顯色時間：指顯色液顯色時間，系統(tǒng)默認(rèn)設(shè)置參數(shù)為15分鐘；可設(shè)置范圍為0～60。30～60。運行程序儀器進入預(yù)加熱狀態(tài)并按程序步驟開始運行。HPV反應(yīng)溫度（℃）：51℃反應(yīng)溫度（℃）：51℃（mL）：5反應(yīng)盒個數(shù)（個）：實驗樣本數(shù)POD（min）：15A液洗膜時間（min）：5C液洗膜時間（min）：2雜交時間（min）：30洗膜時間（min）：10顯色時間（min）：15清洗時間（min）：3561℃時，儀器開始自動向反應(yīng)盒內(nèi)A液。當(dāng)儀器自動加注完所有樣本，液體將預(yù)熱1分鐘后，儀器操作界面彈出對話框提示操作人員加入檢測樣本（PCR產(chǎn)物..嘀”兩聲聲響。（PCR產(chǎn)物）之后，將硅橡膠膜片覆蓋雜交盒上并用帶孔雜交盒蓋板扣在膜片上面。點擊對話框“確定”按鈕，儀器自動運行完成雜交、B液洗膜、自動配制孵育液、POD孵育、A液洗膜、C液洗膜。”的對話框并伴隨有蜂鳴器的鳴叫聲（提醒操作人員配置顯色液止鳴叫，隨后界面會彈出“請配顯色液之后確定”對話框。置后點擊對話框“請配顯色液之后確定”對話框。3個樣本所需的顯示液儀器繼續(xù)運行并加注顯色液至反應(yīng)盒內(nèi)進行顯色，直至顯色過程結(jié)束。顯色液”的對話框；系統(tǒng)將默認(rèn)已配置好顯色液，直接自動進入加顯色液的實驗過程。實驗結(jié)束及清理顯色過程結(jié)束后，儀器自動運行加注純凈水清洗反應(yīng)盒內(nèi)膜條。清洗結(jié)束后，儀鳴叫兩聲，提醒操作人員整個實驗過程結(jié)束。揭開蓋板及硅膠膜，取出完成顯色的膜條并保存。關(guān)閉軟件及儀器電源，實驗結(jié)束。清理取出雜交盒，擦干雜交臺鋁板及凹槽中的液體；硅膠膜用84消毒片浸泡至少1小時，再用純水沖洗晾干；用清水沖洗雜交盒蓋板；用純水清洗孵育和顯色試劑瓶；用濕毛巾擦拭儀器平臺表面，去除污跡及其他雜物。維護規(guī)程15cm10cm以上，確?？煽可?；每次實驗操作完成后須進行清洗液路管道500ml左右潔凈的玻璃燒杯，裝進大概200ml純水；A液、B液、C液、POD液、顯色液的試劑瓶瓶蓋都放到燒杯里面；每天實驗操作完成后清潔儀器清潔之前請務(wù)必關(guān)掉儀器開關(guān)電源，準(zhǔn)備一塊干凈的濕毛巾或抹布；清潔儀器外表的灰塵或污跡；到適當(dāng)位置，清潔干凈里面的液體，注意此過程要小心接觸平臺底部光電開關(guān)及電線；不允許將水或任何清潔溶液潑灑或噴射到設(shè)備上，或者流入儀器內(nèi)部。1小時，硅膠膜使用一個月后必須更換新的；每月對所有瓶液用純凈水進行清洗；頭處的結(jié)晶。每季度更換兩個蠕液泵的U型管。每季度更換液路管道。每季度對雜交平臺進行溫控測試。每季度檢查固定儀器的螺絲是否松動、儀器運行是否有異響。異常處理如果開機運行時顯示屏顯示異常，請按“復(fù)位”按鈕，儀器便可正常工作；若無法開機、儀器不運行請依次按下列步驟進行檢查：確定電源插座是否有供電；儀器電源開關(guān)是否已經(jīng)打開，電源指示燈是否亮起，若沒有打開，請打開電源開關(guān)；檢查電源線與電源插座是否有松動，重新接好電源線；文件號:AXRY-PCR-SOP—003版本/修訂號：1/0人民醫(yī)院檢驗科YN-H18操作及維護規(guī)程文件號:AXRY-PCR-SOP—003版本/修訂號：1/0人民醫(yī)院檢驗科YN-H18操作及維護規(guī)程主題內(nèi)容生效日期：20190810第PAGE第17頁共130頁（注意：本儀器使用的電源保險F3AL250V，其他型號的保險絲不可用；檢查儀器數(shù)據(jù)線是否已連接或有松動，重新連接數(shù)據(jù)線；檢查數(shù)據(jù)連接端口號是否與電腦端口號一致，請確認(rèn)一致。校準(zhǔn)規(guī)程校準(zhǔn)條件下列情況需要進行校準(zhǔn)：儀器進行大保養(yǎng)或更換重要零部件后。實驗質(zhì)控失控時。校準(zhǔn)準(zhǔn)備確認(rèn)測溫儀、移液器、計時器正常。確認(rèn)儀器狀態(tài)正常。校準(zhǔn)程序、系數(shù)校準(zhǔn)30400120；平臺手502503010；400、B2、管路填10。四軸參數(shù)：列間距648、Z軸向上100、Z軸向下1200。溫控參數(shù)：P450、I2、D1，溫度設(shè)定51，溫度系數(shù)14設(shè)置參數(shù)：反應(yīng)溫度51，單元液量5、反應(yīng)盒個數(shù)1-45、雜交時間30、B液洗膜10、POD15、A5溫度控制檢測用儀器

、C2152。一次；檢測步驟t0t1，加t=t1-t0≤15min。觀察加溫過程繼電器上方風(fēng)扇是否正常運行，儀器平臺四周能否正常加溫，使POD孵育階段，平臺能30℃以下。底部風(fēng)扇能正常工作。雜交盒溫度穩(wěn)定性敏電阻探頭所對應(yīng)的樣品孔位置可隨意設(shè)定。開啟儀器，進入雜交步驟，溫度穩(wěn)定51℃；513min24個數(shù)值。、機械位移針管能準(zhǔn)確插入反應(yīng)區(qū)對應(yīng)的孔位，無卡蓋板無碰撞。、液量控制檢測用工具移液器（國家認(rèn)可的技術(shù)監(jiān)督或計量部門每年校準(zhǔn)一次；檢測步驟5mL。液體排空后使用移液器量取雜交盒內(nèi)剩余液體量觀測孵育盒子和顯色盒子在運行結(jié)束后，瓶內(nèi)液體都能排空。、檢測結(jié)果第PAGE第18頁共130頁人民醫(yī)院檢驗科主題內(nèi)容 規(guī)程

文件號:AXRY-PCR-SOP—004版本/修訂號：1/0：20190810

TL988實時熒光定量PCR儀標(biāo)準(zhǔn)操作規(guī)程TL988PCRTL988PCR驗。適用范圍：TL988PCR責(zé)任人：4：西安天隆科技有限公司生產(chǎn)企業(yè)許可證號：陜食藥監(jiān)械生產(chǎn)許20123142號醫(yī)療器械注冊證編號：國械注準(zhǔn)20173401384原理及適用范圍：PCRTL988PCR標(biāo)志核酸檢測。此外，TL988實時熒光定量PCR儀也可應(yīng)用于科研機構(gòu)，它所提供的核酸以檢測分析生命遺傳物質(zhì)為目的的科學(xué)研究。操作規(guī)程：開機：打開連接儀器的電腦，啟動Window系統(tǒng)，打開TL988實時熒光定量PCR儀電源，儀器正常開機自檢，自檢結(jié)束后PCR按鈕打開或者關(guān)閉樣本倉。打開軟件及默認(rèn)儀器綁定：雙擊電腦桌面TL988實時熒光定量PCR儀軟件圖標(biāo)“MedtlSyste“快速導(dǎo)航”界面）（根據(jù)儀器具體型號進行設(shè)置，設(shè)置完（1-1）文件號:AXRY-PCR-SOP—004版本/修訂號：1/0人民醫(yī)院檢驗科TL988PCR文件號:AXRY-PCR-SOP—004版本/修訂號：1/0人民醫(yī)院檢驗科TL988PCR規(guī)程主題內(nèi)容生效日期：20190810第PAGE第19頁共130頁1-1PCR新建試驗如圖（1-2）圖（1-2）新建實驗命名新建文件創(chuàng)建及命名后，軟件系統(tǒng)將自動進入主操作界面，如圖（1-3）1-3PCR運行設(shè)置：新建空試驗后需對試驗的溫度進行設(shè)置；段”下具體“步驟”的目標(biāo)溫度、恒溫時間及是否采集熒光進行設(shè)置，設(shè)置完成后對界面右側(cè)的試管類型、反應(yīng)體系、熱蓋等進行設(shè)置后完成運行設(shè)置；如圖（1-4、1-5）1-4運行溫度設(shè)置界面1-5運行溫度設(shè)置界面提醒：溫度循環(huán)文件保存成功！如圖（1-6、1-7）1-6溫度設(shè)置保存界面1-7溫度設(shè)置保存界面度循環(huán)文件名稱，并點擊<確定>打開。樣本設(shè)置：點擊“樣本設(shè)置”進入樣本孔位設(shè)置界面，根據(jù)儀器樣本倉中樣本管放（如下圖）根據(jù)具體孔位所放置的樣本類型選擇，后在下面“熒光”復(fù)選框中選擇所需熒光探顯示熒光探針無所需探針，則可在每種熒光探針后下拉菜單中選擇自己所需熒光探針；對定量試驗需帶標(biāo)準(zhǔn)品的樣本可在樣本類型選擇成“標(biāo)準(zhǔn)”后進行“標(biāo)準(zhǔn)品設(shè)置3行標(biāo)準(zhǔn)品設(shè)置則可通過“自動設(shè)置”進行設(shè)置，點擊“自動設(shè)置”后在彈出的窗口中對其實濃度、倍數(shù)進行及熒光等進行設(shè)置，后點“確定”保存；實驗設(shè)置；光”界面、右上方“熱血循環(huán)”界面、左下角的“按熒光顯示”的樣本排布界面及右下角（如圖）上角的“僅顯示選中”按鈕選擇后則顯示樣本排布界面所選中樣本孔位的曲線圖；量、熔解曲線、HRM、基因分型的試驗，可根據(jù)本次試驗類型選擇具體試驗類型，試驗結(jié)束后默認(rèn)為絕對定量試驗，若做其他試驗可在選擇“分析”界面后，在軟件主界面菜單欄中選擇“新建分析”按鈕，在彈出的窗口中選擇對應(yīng)的試驗，則在“分析”界面下新生成所選試驗類型的分析界面；在軟件主界面上方過“分析設(shè)置”可進行閾值及基線設(shè)置，一般試驗?zāi)J(rèn)基線及閾值即可，若需調(diào)整則進入（如圖）導(dǎo)出LIS：實驗分析結(jié)束后點擊主機面右上角“LIS”實驗數(shù)據(jù)，出報告或結(jié)果。標(biāo)準(zhǔn)曲線的保存及載入功能：實驗中的標(biāo)準(zhǔn)曲線進行定量時使用；中的“標(biāo)準(zhǔn)曲線”小界面可看到本次實驗的標(biāo)準(zhǔn)曲線的信息，在該界面點擊“保存標(biāo)準(zhǔn)曲（如圖）在該界面，點擊“載入標(biāo)準(zhǔn)曲線（如圖）TL988PCR清潔儀器外殼（使用前將軟布擰干，不能有滴水現(xiàn)象）清潔儀器外殼，必要（醫(yī)用酒精或無水乙醇）清潔儀器外殼，使儀器外殼保持清潔，避免備故障。清潔儀器觸摸屏摸屏，防止刮花觸摸屏。清潔樣本倉和樣本模塊關(guān)閉儀器，彈出樣本艙，使用潮濕軟布（使用前將軟布擰干，不能有滴水現(xiàn)象）清潔樣本艙，必要時使用溫和的清潔劑（醫(yī)用酒精或無水乙醇）清潔樣本艙，定期清理樣本模塊反應(yīng)孔，確保PCR待樣本模塊溫度將至待機溫度后再進行清潔，禁止實驗剛結(jié)束就進行清潔；清潔完成后，第PAGE第29頁共130頁人民醫(yī)院檢驗科主題內(nèi)容 規(guī)程

文件號:AXRY-PCR-SOP—004版本/修訂號：1/0：20190810避免引起電子設(shè)備故障。問題反饋常，請及時聯(lián)系廠家售后工程師。詳細(xì)儀器維護請參照儀器使用說明書維護部分。注意事項為保證儀器的正常使用，請嚴(yán)格遵操作規(guī)程；在把樣品管放到PCR儀時，不要用手碰到離心管的蓋及底部；編制者，及時進行修改；軟件的操作過程中，若遇到疑問應(yīng)及時請教其它操作人。文件號:AXRY-PCR-SOP—005版本/修訂號：1/0生效日期：20190810人民醫(yī)院檢驗科主題內(nèi)容文件號:AXRY-PCR-SOP—005版本/修訂號：1/0生效日期：20190810人民醫(yī)院檢驗科主題內(nèi)容NP-968第PAGE第30頁共130頁NP-968目的檢測結(jié)果具有良好的溯源性、準(zhǔn)確性和可靠性。范圍適用于NP-968核酸提取儀，不適用于其他公司同類產(chǎn)品。原理利用磁珠表面基團吸附核酸，進行磁珠轉(zhuǎn)移，將樣本中的核酸提取和純化出來。儀器性能儀器運行環(huán)境4.1.1 周圍空間溫度：10~40℃4.1.2 相對濕度：≤80%4.1.3 電源電壓：220±10v4.1.4儀器應(yīng)放置在水平堅固的平臺上，與外界電源系統(tǒng)電壓要匹配，并要求有良好的接地線,灰塵少，換氣良好的環(huán)境，避免陽光直接照射，儀器附近沒有發(fā)射高頻的機械（離心機、放電裝置等）。操作程序儀器開機、初始化程序打開儀器背面開關(guān)，開機后進行儀器自檢，自檢通過后方可進行標(biāo)本檢測。常規(guī)樣本檢測2，3準(zhǔn)操作規(guī)程操作，進行加樣。5.2.25.2.2標(biāo)簽，儀器自動進入程序，點擊運行即可。板。提取儀的紫外燈打開，照射30min。關(guān)機程序關(guān)閉紫外燈、關(guān)閉軟件、關(guān)閉儀器。維護和保養(yǎng)30鐘以上。75%的酒精的紗布對實驗艙內(nèi)壁、磁棒、磁棒架進行擦拭，再用干燥的紗布擦干。開啟紫外燈照射30分鐘進行消毒。6.46.43077.1在使用對人體有危險或發(fā)生感染的樣品時，請使用橡膠手套，不要直接接觸。7.2在儀器上面和周圍不可使用可燃性危險品、避免引起火災(zāi)和爆炸。7.3在電源開關(guān)處于on狀態(tài)下接觸線路板有觸電危險。7.4儀器的操作、保養(yǎng)應(yīng)按規(guī)定的程序進行。第PAGE第32頁共130頁安鄉(xiāng)縣人民醫(yī)院檢驗科主題內(nèi)容

文件號:AXRY-PCR-SOP—006版本/修訂號：1/0：20190810標(biāo)準(zhǔn)型潔凈工作臺使用與維護目 的：正確地使用、維護保養(yǎng)潔凈工作臺。BBS-V800型潔凈工作臺。程序細(xì)則：12（5-3℃；濕度（<85；電源（220±10，50Hz±2Hz）3、使用前提前30分鐘開機運行同時開啟風(fēng)機組和紫外燈，30分鐘后關(guān)閉紫外燈后可開始加樣操作4、新安裝的或長期未使用的工作臺，使用前用不產(chǎn)塵的工具仔細(xì)清潔5、工作臺面上禁放不必要的物品，工作時應(yīng)盡量避免作明顯擾動氣流的工作6、當(dāng)需要調(diào)節(jié)風(fēng)速時，用工作臺操作面板上的輕觸型開關(guān)進行調(diào)節(jié)7、能力83-62個月測量工作區(qū)風(fēng)速并作必要的調(diào)整910、禁止在一分鐘內(nèi)反復(fù)開啟電源開關(guān)，以免損壞電氣元件11、當(dāng)出現(xiàn)異常情況時向科主任反映并于廠家或供貨商及時聯(lián)系文件支持：SW-CJ-1F型潔凈工作臺使用說明書文件號:AXRY-PCR-SOP—007版本/修訂號：1/0人民醫(yī)院檢驗科基因擴增熱循環(huán)儀的使用和維護保養(yǎng)標(biāo)準(zhǔn)操作規(guī)程主題內(nèi)容文件號:AXRY-PCR-SOP—007版本/修訂號：1/0人民醫(yī)院檢驗科基因擴增熱循環(huán)儀的使用和維護保養(yǎng)標(biāo)準(zhǔn)操作規(guī)程主題內(nèi)容生效日期：20190810第PAGE第39頁共130頁基因擴增熱循環(huán)儀的使用和維護保養(yǎng)標(biāo)準(zhǔn)操作規(guī)程1、目的：為規(guī)范基因擴增熱循環(huán)儀的操作與維護工作，確保儀器正常運作和實驗順利進行，以保障工作人員的安全，特制定此標(biāo)準(zhǔn)操作規(guī)程。2、適用范圍：本制度適用于實驗室的基因擴增熱循環(huán)儀。3、內(nèi)容原理：DNADNA2n倍。操作指南開機打開儀器背面的電源開關(guān)，儀器將會自動進行自檢，觸摸顯示屏顯示軟件開機畫面；主界面成，如圖所示：界面介紹及選項功能描述：系統(tǒng)狀態(tài)：顯示當(dāng)前儀器的系統(tǒng)狀態(tài)。初始化：儀器正在初始化過程中；實驗中：實驗正在進行；暫停：實驗正處于暫停狀態(tài)；故障：儀器發(fā)生硬件或軟件故障，無法執(zhí)行當(dāng)前操作；儀器狀態(tài)：顯示儀器當(dāng)前狀態(tài)：儀器未連接到網(wǎng)絡(luò)；：儀器已連接到網(wǎng)絡(luò)；：儀器連接有USB設(shè)備；：熱蓋加熱功能已啟用；：儀器未連接到網(wǎng)絡(luò)；：儀器已連接到網(wǎng)絡(luò)；：儀器連接有USB設(shè)備；：熱蓋加熱功能已啟用；：熱蓋加熱功能未啟用；：熱蓋沒有關(guān)閉；：熱蓋加熱功能未啟用；：熱蓋沒有關(guān)閉；：儀器發(fā)生硬件或軟件故障；操作區(qū)：由實驗管理、運行設(shè)置、運行監(jiān)控、通用設(shè)置四部分構(gòu)成。＜運行實驗＞：運行在實驗管理標(biāo)簽中所選的實驗文件。選定實驗文件后，該按鍵＜運行實驗＞：運行在實驗管理標(biāo)簽中所選的實驗文件。選定實驗文件后，該按鍵＜＜＜＜暫停實驗＞：暫停當(dāng)前實驗。該按鍵在系統(tǒng)狀態(tài)為實驗中時有效關(guān)機／重＜故障＞：該按鍵在正常系統(tǒng)下無效（灰色圖標(biāo)＜故障＞：該按鍵在正常系統(tǒng)下無效（灰色圖標(biāo)。如果儀器運行過程紅色圖標(biāo)：儀器無法繼續(xù)執(zhí)行當(dāng)前操作。紅色圖標(biāo)：儀器無法繼續(xù)執(zhí)行當(dāng)前操作。軟件操作擇不同項目進行操作實現(xiàn)完整工作流。實驗管理：顯示實驗文件并提供相應(yīng)的實驗文件操作。運行監(jiān)控：提供實驗運行的實時狀態(tài)信息、溫度程序。通用設(shè)置：提供儀器的通用設(shè)置功能。實驗管理顯示區(qū)、實驗文件信息窗口以及實驗文件操作欄組成，如圖所示。界面介紹及顯示功能描述：實驗文件顯示區(qū)：顯示系統(tǒng)中已保存的實驗文件及文件夾，如圖所示。實驗文件顯示區(qū)內(nèi)顯示了儀器系統(tǒng)中已保存的實驗文件及文件夾相應(yīng)圖標(biāo)?？梢栽趯嶒炍募@示區(qū)右上角輕觸圖標(biāo)，該圖標(biāo)將轉(zhuǎn)換為圖標(biāo)，實驗文件顯示區(qū)可以在實驗文件顯示區(qū)右上角輕觸圖標(biāo)，該圖標(biāo)將轉(zhuǎn)換為圖標(biāo)，實驗文件顯示區(qū)內(nèi)的文件查看方式將由文件圖標(biāo)轉(zhuǎn)換為文件詳細(xì)信息列表。實驗文件信息窗口：顯示當(dāng)前系統(tǒng)內(nèi)所存儲的實驗文件數(shù)量，如圖所示。USB…＞四個按鍵組成，如圖所示。時無效;新建文件夾的三種方式為：新建文件夾:可以輕觸<新建>按鍵,并在下拉菜單中選擇<新建文件夾>創(chuàng)建一個新的文件新建實驗:若系統(tǒng)內(nèi)沒有已保存的實驗文件,或沒有選中任何實驗文件,可以輕觸<新建>按鍵,并在下拉菜單中選擇新建實驗選項,,創(chuàng)建一個新的空實驗文件;基于選擇的實驗新建實驗:若某一實驗文件已被選中,可以輕觸<新建>按鍵,并在下拉菜單中選擇基子選擇的實驗新建實驗選項,創(chuàng)建一個與已選實驗設(shè)置相同的新實驗文件。以輕觸<Enter>保存新的實驗文件或文件夾名稱,或輕觸<關(guān)閉>放棄命名并退出屏幕鍵盤。提示:文件夾里不可以新建文件夾。＜重命名＞：對已選實驗文件或文件夾重新命名，該按鍵在系統(tǒng)狀態(tài)為實驗中時無效。＜刪除＞：刪除已選實驗文件或文件夾，該按鍵在系統(tǒng)狀態(tài)為實驗中時無效。＜USB…USB設(shè)備之間實驗文件傳輸。＜導(dǎo)出實驗＞:將儀器軟件中的已選實驗導(dǎo)出到USB設(shè)備。USB設(shè)備中的已選實驗導(dǎo)入到儀器軟件。運行設(shè)置可以在運行設(shè)置頁面對新建實驗的溫度程序、反應(yīng)體系及熱蓋溫度進行設(shè)置，如圖所示。提示：在實驗管理頁面創(chuàng)建新實驗文件后，系統(tǒng)軟件將自動進入運行設(shè)置頁面；可進入運行設(shè)置頁面查看、更改已選實驗文件的相關(guān)設(shè)置。a.反應(yīng)體系：可以輕觸反應(yīng)體系右側(cè)的和按鍵對其進行設(shè)置。〇提示：反應(yīng)體a.反應(yīng)體系：可以輕觸反應(yīng)體系右側(cè)的和按鍵對其進行設(shè)置。〇提示：反應(yīng)體0ul-100ul。b.熱蓋：可以使用和按鍵對熱蓋溫度進行設(shè)置，或輕觸熱蓋復(fù)選框，確定是否使Block0Tubeb.熱蓋：可以使用和按鍵對熱蓋溫度進行設(shè)置，或輕觸熱蓋復(fù)選框，確定是否使用熱蓋加熱功能。40110C.階段設(shè)置框：屬性欄及功能鍵描述如下。階段：顯示溫度程序各階段的階段類型；＜上移＞：將所選階段上移；＜＜上移＞：將所選階段上移；＜添加＞：添加一個新階段，或在所選階段后添加一個階段；＜刪除＞：刪除所選階段；＜刪除＞：刪除所選階段；＜下移＞：將所選階段下移；＜編輯＞：可以在編輯欄輕觸圖標(biāo)對相應(yīng)步驟進行編輯；＜上移＞：將所選階段上移；＜編輯＞：可以在編輯欄輕觸圖標(biāo)對相應(yīng)步驟進行編輯；＜上移＞：將所選階段上移；＜添加＞：添加一個新階段，或在所選階段后添加一個階段；＜刪除＞：刪除所選階段；＜下移＞：將所選階段下移；可以在階段設(shè)置框內(nèi)輕觸圖標(biāo)，軟件將自動彈出階段類型選擇窗口。如圖所示：＜刪除＞：刪除所選階段；＜下移＞：將所選階段下移；可以在階段設(shè)置框內(nèi)輕觸圖標(biāo)，軟件將自動彈出階段類型選擇窗口。如圖所示：23步法擴增、和冷卻五個可供選擇的預(yù)定義階段?；氐綔囟仍O(shè)置子標(biāo)簽。提示：實驗溫度程序最少包含一個有效階段。第2進行更改。當(dāng)前階段的循環(huán)數(shù)進行設(shè)置，如圖所示。輕觸＜取消＞取消設(shè)置。第3/刪除步驟在階段設(shè)置框中選擇任一階段，右側(cè)的步驟設(shè)置框中將顯示已選階段所包含的步驟；可以添加新的步驟，或選中任一步驟，將其刪除或?qū)ζ渑判蜻M行更改；提示：一個階段的最少包含一個有效步驟。在步驟設(shè)置框中選中任一步驟，并輕觸編輯欄內(nèi)的圖標(biāo)，軟件將自動彈出步驟編輯第4在步驟設(shè)置框中選中任一步驟，并輕觸編輯欄內(nèi)的圖標(biāo)，軟件將自動彈出步驟編輯軟件提供了標(biāo)準(zhǔn)、降落、梯度和長片段四種步驟模式選項，可以輕觸各選項前的圖標(biāo)軟件提供了標(biāo)準(zhǔn)、降落、梯度和長片段四種步驟模式選項，可以輕觸各選項前的圖標(biāo)進行模式選擇，已選中的圖標(biāo)將顯示為藍色。1）步驟編輯窗口默認(rèn)選中的步驟模式為標(biāo)準(zhǔn)。溫時間、目標(biāo)速率輸入框，如圖所示。輕觸＜確定＞確認(rèn)設(shè)置，或輕觸＜取消＞取消設(shè)置。提示：目標(biāo)溫度的設(shè)置范圍0.0℃-100.0℃。提示：恒溫時間的設(shè)置范圍1s-60min。提示：目標(biāo)速率的設(shè)置范圍0.1℃/s-3.5℃/s。若將當(dāng)前步驟設(shè)置為降落步驟模式，步驟編輯窗口將如圖所示。需要為降落步驟的退火溫度范圍設(shè)定起始溫度和目標(biāo)溫度，并確定每個循環(huán)的溫度變側(cè)的空白處，并在軟件自動彈出的輸入框中輸入相應(yīng)的參數(shù)值，如圖所示。提示：降落步驟起始溫度和目標(biāo)溫度的設(shè)置范圍35.0℃-100.0℃。提示：溫度變化的設(shè)置范圍為0.1℃一5.0℃提示：起始循環(huán)的設(shè)置范圍為1到本階段的循環(huán)數(shù)。提示：其它參數(shù)設(shè)置與標(biāo)準(zhǔn)步驟模式相同。若將當(dāng)前步驟設(shè)置為長片段步驟模式，步驟編輯窗口將如圖所示。需要為長片段步驟的恒溫時間范圍設(shè)定目標(biāo)時長和起始時長，并確定每個循環(huán)的時長提示：長片段步驟起始時長和目標(biāo)時長的設(shè)置范圍為15一60min。提示：時長變化值的設(shè)置范圍為1s一10min.提示：起始循環(huán)的設(shè)置范圍為1到本階段的循環(huán)數(shù)。提示：其它參數(shù)設(shè)置與標(biāo)準(zhǔn)步驟模式相同。4）若將當(dāng)前步驟設(shè)置為梯度步驟模式，步驟編輯窗口將如圖所示?？梢詾橐堰x梯度步驟設(shè)置中心溫度和溫度偏移量，系統(tǒng)軟件將根據(jù)設(shè)置自動計算第112看，如圖所示。提示：中心溫度的設(shè)置范圍為應(yīng)在35.5℃一99.5℃之間。提示：溫度偏移的設(shè)置范圍為0.5℃一20℃。提示：所設(shè)置的中心溫度±溫度偏移溫度范圍為應(yīng)在35.0℃-100℃之間。提示：其它參數(shù)設(shè)置與標(biāo)準(zhǔn)步驟模式相同。進入運行監(jiān)控頁面，如圖所示。前實驗的運行狀態(tài)信息。l）運行狀態(tài)欄以在運行狀態(tài)欄實時查看當(dāng)前實驗的運行狀態(tài)信息。2）運行監(jiān)控圖運行監(jiān)控圖顯示了當(dāng)前實驗的溫度程序，如圖所示。下方的階段方框顯示了各階段對應(yīng)的階段類型和循環(huán)數(shù)；上方的步驟方框顯示了各步驟的編號，各個步驟由藍色實線隔開。的恒溫時長；顯示熱蓋加熱中。3.2.3.4通用設(shè)置標(biāo)簽由儀器、配置、服務(wù)三個子標(biāo)簽組成。1）儀器子標(biāo)簽：通用設(shè)置頁面上默認(rèn)選中的子標(biāo)簽為儀器，如圖所示。設(shè)備序號：顯示查看當(dāng)前儀器設(shè)備出廠的唯一編號；對儀器設(shè)備的系統(tǒng)進行升級；告警信息：顯示當(dāng)前儀器自檢或運行時出現(xiàn)的告警信息，可以輕觸＜詳細(xì)信息＞查看所有告警信息。示?？梢允褂煤桶存I設(shè)置儀器顯示的年份；可以使用和按鍵設(shè)置儀器顯示的年份；可以使用和按鍵設(shè)置儀器顯示的月份；可以在小時、分鐘、秒鐘設(shè)置框中使用和可以在小時、分鐘、秒鐘設(shè)置框中使用和按鍵設(shè)置儀器顯示的時間；可以在日期格式設(shè)置框中，點擊格式下拉菜單，選擇儀器上顯示年月日的格式，也可以點擊2412小時制，選擇儀器上顯示時間的格式；界面。2）配置子標(biāo)簽：如圖所示屏幕鍵盤輸入新的儀器名稱，如圖所示。液晶亮度：可以使用和按鍵調(diào)整屏幕亮度。網(wǎng)絡(luò)信息：顯示當(dāng)前儀器的網(wǎng)絡(luò)地址信息，可以輕觸＜編輯＞，軟件將會自動彈出網(wǎng)絡(luò)操作窗口，如圖3一5一5所示?？梢栽诖舜翱谥胁榭磍P設(shè)置的各項參數(shù)，還可以液晶亮度：可以使用和按鍵調(diào)整屏幕亮度。屏幕觸碰音：可以輕觸＜打開＞和＜關(guān)閉＞確定是否開啟屏幕觸碰音。3）服務(wù)子標(biāo)簽：如圖所示清除儲存器：可以輕觸＜清除＞，清除所有實驗文件。調(diào)試模式：可以輕觸＜進入調(diào)試模式＞并輸入密碼打開調(diào)試界面?；驍U增熱循環(huán)儀的維護保養(yǎng)儀器的清潔本儀器在常規(guī)使用的情況下，不需要大量的維護。如果長時間使用本儀器，則需要定期禁止：切勿在通電時或儀器運行過程中對儀器進行清潔或維護。禁止：切勿將水或其他溶液倒入樣本艙、樣本模塊或任儀器部件內(nèi)部。儀器通電時，禁止：切勿在通電時或儀器運行過程中對儀器進行清潔或維護。禁止：切勿將水或其他溶液倒入樣本艙、樣本模塊或任儀器部件內(nèi)部。儀器通電時，注意：乙醇為易燃易揮發(fā)性液體。暴露接觸會刺激眼睛、皮膚和呼吸道，并可能導(dǎo)致液體流入可能會導(dǎo)致電擊！注意：乙醇為易燃易揮發(fā)性液體。暴露接觸會刺激眼睛、皮膚和呼吸道，并可能導(dǎo)致套。生物危害：請視所有樣本為潛在性生物危害的樣本進行處理及操作，如果液體樣本溢應(yīng)等待樣本模塊溫度降至室溫，以免發(fā)生燙傷。生物危害：請視所有樣本為潛在性生物危害的樣本進行處理及操作，如果液體樣本溢生物危害：切勿在的未采取任何安全防護措施的情況下，對任何有潛在性生物危害的員造成傷害。生物危害：切勿在的未采取任何安全防護措施的情況下，對任何有潛在性生物危害的樣本進行處理及操作。清潔儀器外殼第1注意：請勿將清潔劑直接噴在在儀器上，這可能會引起電子設(shè)備的故障。注意：請避免使用強酸堿、75％以上的濃酒精、有機溶劑或烈性去污劑對儀器外殼注意：請勿將清潔劑直接噴在在儀器上，這可能會引起電子設(shè)備的故障。注意：請避免使用強酸堿、75％以上的濃酒精、有機溶劑或烈性去污劑對儀器外殼進行清潔，會破壞儀器表面涂層。清潔儀器觸摸屏第1注意：不要將清潔劑直接噴在在儀器上，這可能會引起電子設(shè)備的故障。注意：不要使用研磨性清潔劑或粗糙的材料來清潔觸摸屏，這可能會刮花觸摸屏。2注意：不要將清潔劑直接噴在在儀器上，這可能會引起電子設(shè)備的故障。注意：不要使用研磨性清潔劑或粗糙的材料來清潔觸摸屏，這可能會刮花觸摸屏。清潔樣本模塊第1第23清潔時請使用蘸取溫和清潔劑的棉簽清潔錐孔。注意：不要將清潔劑直接噴在儀器上，這可能會引起電子設(shè)備的故障?？赡軗p壞儀器。注意：不要將清潔劑直接噴在儀器上，這可能會引起電子設(shè)備的故障。儀器維護請定期檢查本儀器的放置區(qū)域以確?？諝饬魍ǎ⑶覠o其他物品干擾儀器周圍的空氣流動。保持供電穩(wěn)定本儀器的正常運行需要穩(wěn)定的電力供應(yīng)，因此請定期檢查本儀器的±10％的偏差。并確保電源插座的額定負(fù)載不小于儀器的要求。注意：切勿將開蓋或蓋子破損的反應(yīng)耗材放入樣本模塊錐孔中，試劑可能會漏出并覆保持儀器清潔注意：切勿將開蓋或蓋子破損的反應(yīng)耗材放入樣本模塊錐孔中，試劑可能會漏出并覆注意：長時間不使用本儀器時，請拔掉儀器電源插頭并用軟布或防塵袋覆蓋儀器，蓋在熱蓋、樣本艙和樣本模塊的表面。注意：長時間不使用本儀器時，請拔掉儀器電源插頭并用軟布或防塵袋覆蓋儀器，以防止灰塵進入?；驍U增熱循環(huán)儀的注意事項儀器操作注意事項要在連接電源線的情況下更換元器件。勿跌、損儀器，小心取放。工作不正常時，請切斷電源重新啟動儀器。在實驗操作過程中，熱蓋溫度會高達105℃，注意燙傷。禁止在實驗過程中隨意打開上蓋，以免影響實驗結(jié)果。第PAGE第50頁共130頁人民醫(yī)院檢驗科主題內(nèi)容 標(biāo)準(zhǔn)操作規(guī)程

文件號:AXRY-PCR-SOP—007版本/修訂號：1/0：20190810其他細(xì)節(jié)注意事項芯插頭，這是一種安全裝置，請配合使用此型號的三孔電源插座。（允許±10％的偏差。并確保電源插座的額定負(fù)載不小于儀器的要求。電源線本儀器通常應(yīng)使用隨機附帶的電源線。如果電源線破損，必須更換。第PAGE第48頁共130頁安鄉(xiāng)縣人民醫(yī)院檢驗科主題內(nèi)容

文件號:AXRY-PCR-SOP—008版本/修訂號：1/0：20190810凈化傳遞窗的使用與維護操作規(guī)程目 遞窗得到正確使用與維護。適用范圍：本實驗室傳遞窗1、按廠家提供的說明書正確安裝；2、使用環(huán)境條件：溫度（5-4℃；溫度（＜85；電源（220V±10，50Hz±2Hz；3、對于新安裝或長期未使用的傳遞窗在使用前必須用不產(chǎn)塵的工具仔細(xì)清潔；4、當(dāng)傳遞貨物時，打開傳遞窗傳送口的門，將被傳遞貨物放入傳遞窗內(nèi)，并關(guān)門，傳遞窗另一邊的操作人員打開傳遞窗傳送口的門，從傳遞窗取出被傳遞的物品并關(guān)門；5、開門動作要輕，傳遞物品要輕拿輕放；6、不要同時打開傳遞窗兩邊的門，以免傳遞窗兩邊空氣對流互擾；75%酒精擦拭紫外燈，免影響殺菌效果；8、檢修前必須切斷電源。第PAGE第49頁共130頁人民醫(yī)院檢驗科

文件號:AXRY-PCR-SOP—009版本/修訂號：1/0

紫外線消毒車的使用與維護操作規(guī)程生效日期：20190810紫外線消毒車的使用與維護操作規(guī)程目 室的紫外消毒車能得到正確使用與維護。適用范圍：適用于本室的紫外消毒車。12500A°—2600A220V50Hz220VA+15%燈管調(diào)節(jié)角度0-135°。2、使用時先打開保護門，用手托住燈臂往上抬至需要位置，插上電源，打開帶燈開關(guān)，根據(jù)需要設(shè)定時間。3、使用完畢將按紐摁到底，同時另一手托位燈臂慢慢將燈管放進燈箱內(nèi)關(guān)上保護門，切斷電源。4、定期用干布擦干凈產(chǎn)品外殼，用紗布沾75%酒精擦拭燈管，以保持潔凈。5、貯存環(huán)境應(yīng)在相對溫度不超過80%，無腐蝕性氣體和通風(fēng)良好的室內(nèi)。第PAGE第50頁共130頁人民醫(yī)院檢驗科主題內(nèi)容 操作規(guī)程

文件號:AXRY-PCR-SOP—010版本/修訂號：1/0：20190810生物安全柜的使用和維護保養(yǎng)標(biāo)準(zhǔn)操作規(guī)程：為規(guī)范生物安全柜的操作與維護工作，確保儀器正常運作和實驗順利進行，以保障工作人員的安全，特制定此標(biāo)準(zhǔn)操作規(guī)程。適用范圍：本制度適用于實驗室的生物安全柜。程序細(xì)則：1support”鍵打開電源4200mm，當(dāng)窗高報警時，應(yīng)將前窗高度降低switch”按鍵，打開日光燈，開始正常工作Disinfecg-switch”鍵，同時拉下前窗，使用紫外線Disinfecg-switch”鍵72000小時由生產(chǎn)廠家更換高效過濾膜相對潔凈區(qū)，右側(cè)為污染區(qū)，實驗人員操作時動作不宜過大，以免改變柜內(nèi)的氣流文件支持：生物安全柜使用說明書文件號:AXRY-PCR-SOP—011版本/修訂號：1/0人民醫(yī)院檢驗科恒溫金屬浴使用和維護保養(yǎng)標(biāo)準(zhǔn)操作程序主題內(nèi)容文件號:AXRY-PCR-SOP—011版本/修訂號：1/0人民醫(yī)院檢驗科恒溫金屬浴使用和維護保養(yǎng)標(biāo)準(zhǔn)操作程序主題內(nèi)容生效日期：20190810第PAGE第51頁共130頁恒溫金屬浴使用和維護保養(yǎng)標(biāo)準(zhǔn)操作程序目 的：正確使用和維護干式恒溫器。程序細(xì)則：干式恒溫器的正確使用：打開電源開關(guān)，設(shè)定所需達到的溫度及恒溫時間。位閃爍。按“TEMP”鍵一次閃爍位移至百位，再按一次移至十位，再按一次移至個位以此類推。閃爍位的數(shù)值按“▲”或“▼”進行修改。按“TIME”鍵立即放開，此時顯示窗顯示的值為上次運行的時間設(shè)置值，同時最右位閃00:00時，表示時間運行值為∞，儀器持續(xù)恒溫。3．溫度、時間設(shè)置完成后，按“R/S”鍵立即放開，儀器開始運行，溫度開始升高，同時伴隨“嘀”的聲音。此時，溫度顯示窗顯示的為即時溫度值，升溫過程中，小數(shù)點會有規(guī)律地閃爍。當(dāng)溫度恒定后，小數(shù)點有規(guī)律地閃爍就停止，時間顯示中“：”開始閃爍，同時恒溫倒計時開始。計時結(jié)束，運行停止，蜂鳴器鳴叫報警，此時溫度顯示窗顯示為模塊即時溫度，時間顯示窗顯示“OVE4TEMP”或“TIME”鍵可重新設(shè)置溫度或時間；直接按“R/S”鍵，可按上次設(shè)置的溫度時間參數(shù)開始運行程序。2秒鐘后運行停止。再按此鍵一次，側(cè)重新開始運行。干式恒溫器的維護：分、導(dǎo)熱良好、避免污染。支持文件：K30B干式恒溫器使用說明書文件號:AXRY-PCR-SOP—012版本/修訂號：1/0生效日期：20190810安鄉(xiāng)縣人民醫(yī)院檢驗科主題內(nèi)容文件號:AXRY-PCR-SOP—012版本/修訂號：1/0生效日期：20190810安鄉(xiāng)縣人民醫(yī)院檢驗科主題內(nèi)容離心機操作維護保養(yǎng)標(biāo)準(zhǔn)操作程序第PAGE第53頁共130頁離心機操作維護保養(yǎng)標(biāo)準(zhǔn)操作程序目 的：正確使用、維護和保養(yǎng)微量高速離心機。型微量高速離心機。程序細(xì)則：使用與操作：轉(zhuǎn)子和試管檢查否則造成的后果由用戶負(fù)責(zé)。安裝轉(zhuǎn)子將轉(zhuǎn)子套入驅(qū)動軸上,加入墊片,將鎖緊螺釘擰入驅(qū)動軸頂端的螺孔,用螺絲刀擰緊(產(chǎn)品出廠前轉(zhuǎn)子已裝好,使用前請檢查鎖緊螺釘是否已擰緊)。離心管加液及放置而產(chǎn)生振動和噪聲。門蓋的關(guān)閉,用手往上抬門蓋,檢查門蓋是否已鎖緊,門蓋打不開,表示門蓋已鎖緊。設(shè)置轉(zhuǎn)速、時間、設(shè)置轉(zhuǎn)速：按[SPEED]鍵，當(dāng)轉(zhuǎn)速顯示窗口數(shù)碼管閃爍時，即進入轉(zhuǎn)速設(shè)置狀態(tài)，（最高轉(zhuǎn)速為16000r/mi鍵確認(rèn)。、設(shè)置時間：按[TIME]鍵，當(dāng)時間顯示窗口數(shù)碼管閃爍時，即進入時間設(shè)置狀態(tài)，（99分鐘[ENTER]鍵確認(rèn)。工作時間為倒計時顯示。啟動和停止運行(1)、啟動：按[START]鍵啟動離心機運行。運行指示燈亮.運行前應(yīng)確認(rèn)轉(zhuǎn)子已被正確的固定在驅(qū)動軸上。并且離心室已清理，無雜物。（2、自動停止：運行時間倒計時到零離心機自動減速停止運行,停止指示燈亮。(3)[STOP]鍵離心機減速停止運行,停止指示燈亮.在運行中可以隨時按[STOP]鍵停止離心機工作。離心管的取出開鎖拉手向內(nèi)壓,打開門蓋,取出離心管。卸轉(zhuǎn)子當(dāng)需要更換轉(zhuǎn)子時,須卸下在用轉(zhuǎn)子,用螺絲刀擰出鎖緊螺釘,取下墊片后再取出轉(zhuǎn)子即可.維護及保養(yǎng)1．轉(zhuǎn)子從離心室取出后，及時用中性洗滌液清潔，用干凈布料擦干，防止化學(xué)腐蝕，存護。轉(zhuǎn)子安裝和取出動作要輕，垂直向上取出轉(zhuǎn)子，謹(jǐn)防轉(zhuǎn)子跌落損傷驅(qū)動軸?；Ｗo。支持文件：TG16-W型微量高速離心機使用說明書文件號:AXRY-PCR-SOP—014版本/修訂號：1/0生效日期：20190810人民醫(yī)院檢驗科主題內(nèi)容文件號:AXRY-PCR-SOP—014版本/修訂號：1/0生效日期：20190810人民醫(yī)院檢驗科主題內(nèi)容臨床標(biāo)本的采集、運送、接收程序第PAGE第55頁共130頁臨床標(biāo)本的采集、運送、接收程序目的：規(guī)范臨床待檢標(biāo)本的正確采集、送檢和處理。適用范圍：基因擴增檢驗實驗室的所有臨床檢測標(biāo)本程序：標(biāo)本的采集集并送至實驗室。標(biāo)本采集要求2ml真空采集管采集血液標(biāo)本，血標(biāo)本采集后在2小時內(nèi)送達實驗室（HCV采用EDTA抗凝的血漿1.5ml的離心管中，編號。痰標(biāo)本：用帶蓋的無菌一次性塑料杯收集清晨第一口痰標(biāo)本送檢（對于無痰或少痰的患者，45100g/LNaCl水溶液霧化吸入或改變體位以使痰液易于咳出；對于小兒可以輕壓胸骨柄上方以誘導(dǎo)咳痰，用消毒棉拭子刺激喉部引起咳嗽反射，用棉拭子采集標(biāo)本）標(biāo)本在室溫下保存不能超過24小時。c）生殖道拭子：尿道或陰道分泌物由醫(yī)生用專用取樣拭子（滅菌，一次性）采集樣本，及時送檢。采集生殖道拭子標(biāo)本，要求男性病人在采樣前2小時內(nèi)不能排尿，采樣時，將棉拭子伸入男性尿道及女性宮頸口2～3cm，轉(zhuǎn)動一周以獲得上皮細(xì)胞。d）尿液：由病人自留尿液于無菌封閉的杯中送檢。e）腦脊液和胸腹水：由臨床醫(yī)生采集后放入消毒的試管中及時送檢。注意：所有上述用于臨床標(biāo)本采集的容器，均應(yīng)使用前高壓滅菌和密封。標(biāo)本的運送標(biāo)本采集后，密閉、標(biāo)（貼）姓名，應(yīng)盡可能快的送至檢測實驗室，如運送時間需2小時以上，必須用冰盒送至實驗室。標(biāo)本中如加入了適當(dāng)?shù)姆€(wěn)定劑，如用于RNA4mol/L異硫氰酸胍鹽（GITC）的血清（漿）標(biāo)本和用于DNA測定的EDTA抗凝血等，則可在室溫下運送或郵寄。接收嚴(yán)格對各類樣本的查對和雙簽制度，對病房各樣本及時進行驗收，查對，不符合要求的樣本一律退回，并有書面記錄。分類驗證一般內(nèi)容進入實驗室的樣本在進行編號、離心前，工作人員應(yīng)再次認(rèn)真查對姓名，住院號，病區(qū)床號，項目等。對不符合要求者應(yīng)作記錄，并及時通知采樣科室，正確及時地補采樣，以免延誤病人的檢測結(jié)果報告。按檢測項目驗證標(biāo)本HBVEDTA-K2，不可使用肝素。標(biāo)本為全血時應(yīng)及時分離出血漿保存。HCV：同上，但標(biāo)本為血清時，要在1小時內(nèi)分離出血清用于檢測。c）TB：晨起第一口深部痰(不能為唾液)、胸腹水、腦脊液、膿液或穿刺液。d）CT、UU、HPV：尿道或陰道分泌物。實驗室人員對標(biāo)本進行查驗，出現(xiàn)下表中不合要求的情況時，應(yīng)拒收標(biāo)本，登記并告知相關(guān)科室。類別拒收原因1未正確使用抗凝劑的標(biāo)本造成凝血的標(biāo)本2嚴(yán)重溶血3嚴(yán)重脂血4采血量不足（血清＜200uL、全血＜1mL）5檢測項目TB的標(biāo)本是唾液而不是晨痰6標(biāo)本容器破裂，標(biāo)本被污染7標(biāo)本的病人姓名、年齡、性別等與檢驗單不相符8RNA檢測，采樣時間超過2小時9其他可能嚴(yán)重影響檢驗結(jié)果的原因3．5．2．4拒收程序a）對拒收的不合格標(biāo)本應(yīng)在拒收標(biāo)本記錄本上登記。b）填寫不合格標(biāo)本處置單，并隨同申請單送返送檢科室。c）必要時電話告之相關(guān)科室醫(yī)生或護士。本文涉及以下圖表：接收標(biāo)本登記本拒收標(biāo)本登記本第PAGE第59頁共130頁人民醫(yī)院檢驗科主題內(nèi)容

文件號:AXRY-PCR-SOP—014版本/修訂號：1/0：20190810標(biāo)本的唯一性標(biāo)識編制程序目的：保證標(biāo)本編號的唯一性，也是準(zhǔn)確發(fā)放報告的基礎(chǔ)。適用范圍：實驗室開展的所有項目。程序：按檢測日期分類標(biāo)記根據(jù)標(biāo)本送檢的日期，每天的標(biāo)本對應(yīng)標(biāo)記一種唯一的代號。如當(dāng)天為201971日，則編20190701。50105號最后編號為日期編號加標(biāo)本編號，例如：20190701012019年7月1日 1號標(biāo)本2019 07 01 01特殊標(biāo)本的編號如有特殊情況，應(yīng)在標(biāo)記前面增加特異字母區(qū)別開，如其它醫(yī)院送來的樣本。編號步驟a）對當(dāng)天送來的標(biāo)本，根據(jù)編號的基本原則編號。b）收集好每個樣本相對應(yīng)的條碼單或檢驗申請單。做好標(biāo)本的接收記錄，每個標(biāo)本的記錄都應(yīng)包括以下信息：接收時間、科室、送檢醫(yī)生、患者姓名、性別、年齡、標(biāo)本類別、標(biāo)本狀態(tài)、送標(biāo)本者、接收人、檢驗單號、標(biāo)本唯一統(tǒng)編號等。處理好樣品、點樣后，將反應(yīng)管放入擴增儀上開始擴增。e）結(jié)果分析，發(fā)放檢驗報告單。5.本文涉及以下圖表：接收標(biāo)本記錄表第PAGE第59頁共130頁安鄉(xiāng)縣人民醫(yī)院檢驗科主題內(nèi)容

文件號:AXRY-PCR-SOP—015版本/修訂號：1/0：20190810臨床標(biāo)本的保存標(biāo)準(zhǔn)操作程序1、目 的：臨床標(biāo)本正確保存，以便必要時復(fù)查。2、適應(yīng)范圍：基因擴增檢驗室的所有臨床檢測標(biāo)本。3、程序細(xì)則：處理前的標(biāo)本保存（HB4（24h內(nèi)（血漿保存于-20℃下。HCV1200μl-2RN。TB4℃下，長期保存則于-20℃下。（24h內(nèi)）4℃下，長期保存則需在-20℃下。報告發(fā)出后的標(biāo)本保存：提取的核酸標(biāo)本當(dāng)天檢測可置4℃保存，如當(dāng)天不檢測應(yīng)置-20℃保存。報告發(fā)出后第二天丟棄。-201個星期，以備復(fù)查。超1個星期保存期的標(biāo)本由室負(fù)責(zé)人酌情處理，一般按生物傳染性物品交醫(yī)院統(tǒng)一處理。血清/特殊標(biāo)本的處理：對暫不檢測的項目和規(guī)定時間外收到的零散樣本，要隨時登記和交班，以免漏檢，遺情動態(tài)考察的病人標(biāo)本一律置于-20℃下長期保存，使用時再按需取出檢測。5.本文涉及以下圖表：文件號:AXRY-PCR-SOP—016版本/修訂號：1/0人民醫(yī)院檢驗科B（GBS）核酸檢測實驗標(biāo)準(zhǔn)文件號:AXRY-PCR-SOP—016版本/修訂號：1/0人民醫(yī)院檢驗科B（GBS）核酸檢測實驗標(biāo)準(zhǔn)操作規(guī)程主題內(nèi)容生效日期：20190810第PAGE第60頁共130頁B族鏈球菌（GBS）核酸檢測實驗標(biāo)準(zhǔn)操作規(guī)程目的：保證B族鏈球菌（GBS）檢測結(jié)果準(zhǔn)確、可靠。適用范圍：B族鏈球菌（GBS）的熒光定量檢測。生產(chǎn)企業(yè)：蘇州天隆生物科技有限公司生產(chǎn)企業(yè)許可證號：蘇食藥監(jiān)械生產(chǎn)許2014-0001號原理：本試劑盒選用B族鏈球菌保守基因片段設(shè)計特異引物及特異Taqman探針，該探針能與引物擴增區(qū)域中間的一段DNAPCR延伸反應(yīng)過程中，Taq5’端熒光基團從探針上切割下來，使之游離于反應(yīng)體系中，從而脫離3’端熒光淬滅基團的屏蔽，即能接受光刺激而發(fā)出可供儀器檢測的熒光，實現(xiàn)在全封閉反應(yīng)體系中對BBNCBI網(wǎng)站進行BLAST比對分析，證實這段序列在NCBI的核酸庫中是無法找到的，不會互相干擾，根據(jù)的監(jiān)控，可有效監(jiān)控假陰性的發(fā)生。試劑主要成分：核酸提取液、GBS反應(yīng)混合液、Taq酶、GBS陽性對照、陰性對照。試劑儲存：避光保存于-20℃，試劑有效期12個月，避免反復(fù)凍溶。標(biāo)本要求：標(biāo)本類型：妊娠34-37周孕婦的生殖道分泌物樣本及直腸分泌物樣本。標(biāo)本采集：樣本采集具體方法請參考《微生物標(biāo)本采集手冊》一書。所需設(shè)備：實時熒光PCR儀、臺式高速離心機、混勻器、冰箱4℃、-2℃、生物安工作臺、離心管等。程序步驟:10.1樣本處理【樣本處理區(qū)】1ml無菌生理鹽水(凍存標(biāo)本使用前在室溫融解并充分混勻)，充分震蕩搖50μl核酸提取液()，混勻10sec，10010min，12000rpm10minPCR擴增用。50μl50μl100℃水浴或干浴10min。12000rpm10min，備用。10.2.試劑配制【試劑準(zhǔn)備區(qū)】n[n=測試數(shù)+對照數(shù)（2）]，每測試反應(yīng)體系配制如下：組分組分GBS反應(yīng)混合液35.2μlTaq酶0.8μl總體積體積36μln36μlPCR薄壁管中，然后轉(zhuǎn)移到樣本處理區(qū)。10.3加樣【樣本處理區(qū)】36μl陰性對照品、4μl樣品處理上清液，蓋緊反應(yīng)管，轉(zhuǎn)移至PCR檢測區(qū)。10.4.PCR擴增及熒光檢測【PCR擴增區(qū)】將各反應(yīng)管按一定順序放入熒光定量PCR儀上，按以下程序進行PCR擴增：步步循環(huán)數(shù)溫 度（℃）時 驟1124095946003:0000:1500:30（收集熒光）檢測熒光選擇：檢測樣本（FA，內(nèi)標(biāo)（HEX/VI）11、檢驗結(jié)果的解釋：閾值設(shè)定原則以閾值線剛好超過正常陰性對照品的最高點。陽性對照Ct值應(yīng)小于38，陰性次實驗視為無效，應(yīng)檢查儀器、試劑、擴增條件等方面的誤差。為陰性Ct值，如果內(nèi)標(biāo)VIC通道Ct值＜40的標(biāo)本為陰性標(biāo)本，內(nèi)標(biāo)Ct值無數(shù)據(jù)則懷疑有假陰性的情況，應(yīng)當(dāng)重復(fù)試驗。產(chǎn)品性能指標(biāo)：外觀：試劑盒包裝完好，盛裝各試劑的凍存管及離心管無破損，標(biāo)簽完好。8份陰性參考品，檢驗結(jié)果均應(yīng)為陰性，符合率（-/-）為8/8。8份陽性參考品，檢驗結(jié)果均應(yīng)為陽性，符合率（+/+）為8/8。檢測結(jié)果符合率應(yīng)≥17/20。數(shù)值的變異系數(shù)（CV,%）≤5%。注意事項：有關(guān)實驗室管理規(guī)范嚴(yán)格按照質(zhì)量手冊執(zhí)行本試劑盒僅用于體外檢測。本試劑盒的所有操作應(yīng)嚴(yán)格按照相關(guān)標(biāo)準(zhǔn)操作程序進行。實驗室嚴(yán)格分區(qū)操作：-準(zhǔn)備擴增所需試劑；-待檢測樣本和對照品的處理；PCR擴增區(qū)-PCR擴增檢測。各區(qū)物品均為專用，不得交換使用，避免污染，每次實驗完后立即清潔工作臺。使用不含熒光物質(zhì)的一次性手套、一次性專用離心管、自卸式移液槍和帶濾芯吸頭。質(zhì)泄露污染儀器。蓋。擴增完畢請立即取出反應(yīng)管，密閉在專用塑料袋中，放于指定地點，等待同一處理。1000mg/L品一同滅菌后丟棄。PCR反應(yīng)混合液應(yīng)避光低溫保存。不同批號的試劑請勿混用，并請在有效期范圍內(nèi)使用。14、實驗室解釋：B族鏈球菌（GBS）感染的輔助診斷以及治療提供參考依據(jù)。文件號:AXRY-PCR-SOP—017版本/修訂號：1/0生效日期：20190810人民醫(yī)院檢驗科EB文件號:AXRY-PCR-SOP—017版本/修訂號：1/0生效日期：20190810人民醫(yī)院檢驗科EB病毒核酸檢驗標(biāo)準(zhǔn)操作規(guī)程主題內(nèi)容第PAGE第63頁共130頁EB病毒核酸檢驗標(biāo)準(zhǔn)操作規(guī)程目的：保證EB病毒DNA檢測結(jié)果準(zhǔn)確、可靠。適用范圍：EB病毒DNA的熒光定量檢測。生產(chǎn)企業(yè)：蘇州天隆生物科技有限公司生產(chǎn)企業(yè)許可證號：蘇食藥監(jiān)械生產(chǎn)許2014-0001號5.產(chǎn)品標(biāo)準(zhǔn)編號：20153402134原理：本試劑盒選用EB病毒保守的基因片段設(shè)計特異引物及特異Taqman探針，該探針DNA模版發(fā)生特異性結(jié)合，再PCR延伸反應(yīng)過程中，Taq5’端熒光基團從探針上切割下來，使之游離于反應(yīng)體系中，從3’端熒光猝滅基團的屏蔽，即能接受光刺激而發(fā)出可供儀器檢測的熒光，從EB病毒核酸的自動化檢測。試劑盒中使用內(nèi)質(zhì)控體系，能夠有效地防止假陰性結(jié)果的發(fā)生。試劑主要成分：核酸提取液、EB反應(yīng)混合液、Taq酶、EB臨界陽性對照、HBV陽性1#—4#備注：定量標(biāo)準(zhǔn)品具體標(biāo)值參見試劑盒內(nèi)指示，不同批號試劑盒中各組分不可互換。試劑儲存：避光保存于-20℃，試劑有效期12個月，避免反復(fù)凍溶。標(biāo)本要求：標(biāo)本：全血。3-5EDTA抗凝劑的玻璃管，立即輕輕顛倒玻璃管混合5~10次，使抗凝劑與靜脈血充分混勻。48-20℃±5℃下保存不超過3個-70℃下長期保存，但應(yīng)避免反復(fù)凍融。所需設(shè)備：TL988型實時熒光、臺式高速離心機、混勻器、冰箱（4℃、-2℃、生燈、凈化工作臺、離心管等程序步驟:：（在試劑準(zhǔn)備區(qū)進行）取出試劑，室溫放置，待其溫度平衡至室溫，震蕩混勻后2000rpm10sec。計算需準(zhǔn)備反應(yīng)試劑人分?jǐn)?shù)【n=樣本數(shù)+對照數(shù)（3）+定量標(biāo)準(zhǔn)品數(shù)（4配制：試劑試劑用量35.4ulTaq酶0.6ul36ul量PCR反應(yīng)管中，轉(zhuǎn)移至樣本處理區(qū)。（在樣本處理區(qū)進行）45ml1×的待用紅細(xì)胞裂解液（一盒只需配備一次）500ul1000ul1.5ml5分鐘5分鐘，棄上清（4）500ul15分鐘。5分鐘，棄上清，上清盡量棄干凈50ulEBDNA分鐘50ul對照+50ul提取液，混勻)10PCR模板備用PCR（在擴增與分析區(qū)進行）PCR擴增。調(diào)用溫度設(shè)置：95℃→3分鐘，915秒、6030秒，40個循環(huán)，檢測熒光選擇：檢測樣本(FAM),最后運行反應(yīng)程序。檢驗結(jié)果的解釋：閾值設(shè)定原則以閾值線剛好超過正常陰性對照品的最高點。閾值范圍一般為0.001-0.1CtCt值應(yīng)在Ctr︱≥0.98，在閾值以上的熒光曲線應(yīng)當(dāng)是具有明顯的S型曲線，否則該次實驗視為無效，應(yīng)檢查儀器、試劑、擴增條件等方面的誤差。陰性樣本Ct值無數(shù)據(jù)且內(nèi)標(biāo)Ct值＜40。檢測樣本HBVDNA≥500IU/ml500IU/ml≤HBVDNA≤1.0×108IU/mlHBVDNA>1.0×108IU/ml時，應(yīng)做適當(dāng)稀釋，使其落入有效范圍內(nèi)。500IU/ml，且內(nèi)標(biāo)Ct值＜40，低于本試劑盒檢測下限，建議重復(fù)500IU/ml，可報告陽性結(jié)果；如果重復(fù)測定值仍500IU/ml，結(jié)果僅供參考；若檢測過程中內(nèi)標(biāo)測定無數(shù)值，應(yīng)當(dāng)排查原因，重復(fù)對該樣本檢測。產(chǎn)品性能指標(biāo)：根據(jù)臨床研究結(jié)果我們確定如下性能指標(biāo)：外觀：試劑盒包裝完好，盛裝各試劑的凍存管或離心管無破損，標(biāo)簽完好。8份陰性參考品N1~N8，檢驗結(jié)果均應(yīng)為陰性，符合率(-/-)8/8。陽性參考品符合率：8份陽性參考品P1~P(+/+為8/8。線性:1.0×103copies/ml～1.0×108copies/ml范圍內(nèi)線性參考品相關(guān)系數(shù)︱r︱≥0.98。4份定量標(biāo)準(zhǔn)品，其定量檢測的線性相關(guān)系數(shù)︱r︱≥0.98。53次定量檢測，其結(jié)果的均值應(yīng)在L1-L5規(guī)定濃度范圍內(nèi)。500copies/ml的檢測限參考品L2522次檢驗結(jié)果應(yīng)為陽性，檢出結(jié)果符合率≥22/25210次，濃度檢出值對數(shù)值的變異系數(shù)(CV,%)≤5%。18mM0.8mg/mlEDTA抗凝劑干擾物，檢測結(jié)果的濃度值的對數(shù)值F，兩者相對偏B不超過±0.5個對數(shù)數(shù)量級。本試劑盒與人巨細(xì)胞病毒(HCMV)、單純皰疹病毒Ⅱ型(HSVII)、人類白細(xì)胞抗B27(HLA-B27)樣本無交叉反應(yīng)。注意事項：有關(guān)實驗室管理規(guī)范請嚴(yán)格按照質(zhì)量手冊執(zhí)行試劑盒僅用于體外檢測。試劑盒的所有操作應(yīng)嚴(yán)格按照說明書進行。-準(zhǔn)備擴增所需試劑；樣本處理區(qū)-待檢測樣本和對照PCR擴增區(qū)-PCR擴增檢測。各區(qū)物品均為專用，不得交換使用，避免污染，每次實驗完后立即清潔工作臺。使用不含熒光物質(zhì)的一次性手套、一次性專用離心管、自卸式移液槍和帶濾芯吸頭。泄露污染儀器。擴增完畢請立即取出反應(yīng)管，密閉在專用塑料袋中，放于指定地點，等待統(tǒng)一處理。1000mg/L品一同滅菌后丟棄。PCR反應(yīng)混合液應(yīng)避光低溫保存。不同批號的試劑請勿混用，并請在有效期范圍內(nèi)使用實驗室解釋：為EB病毒感染的輔助診斷以及治療提供參考依據(jù)。文件號:AXRY-PCR-SOP—018版本/修訂號：1/0人民醫(yī)院檢驗科標(biāo)準(zhǔn)操作規(guī)程文件號:AXRY-PCR-SOP—018版本/修訂號：1/0人民醫(yī)院檢驗科標(biāo)準(zhǔn)操作規(guī)程主題內(nèi)容生效日期：20190810第PAGE第67頁共130頁1

丙型肝炎（HCV）核酸定量檢測試劑盒標(biāo)準(zhǔn)操作規(guī)程規(guī)范丙型肝炎（HCV）核酸定量檢測試劑盒（PCR）操作流程，準(zhǔn)確進行丙型肝炎核酸的定量檢測。2應(yīng)用范圍：（HCV）核酸定量檢測試劑盒（PCR）NP968（陜西食藥監(jiān)械（準(zhǔn)）20101400095）及其配套試劑盒-核酸提取試劑盒（磁珠法（陜西食藥監(jiān)械（準(zhǔn)）字20111400125）進行的丙肝病毒RNA3責(zé)任人：4生產(chǎn)企業(yè)許可證號：蘇食藥監(jiān)械生產(chǎn)許2014-0001號醫(yī)療器械注冊證編號：國械注準(zhǔn)20153400378YZB/國0708-20158本試劑盒選用丙型肝炎病毒（HCV）保守的基因片段設(shè)計特異引物及特異Taqman測技術(shù)來檢測擴增產(chǎn)物。由于Taqman探針能與引物擴增區(qū)域中間的HCV片段模板發(fā)生特PCR，Taq5’端熒光基團從探針上切割3’端熒光猝滅基團的屏蔽，即能接受光刺激HCV-RNA試劑盒中使用內(nèi)質(zhì)控體系，能夠有效地防止假陰性結(jié)果的發(fā)生；核酸提取過程中，利用磁珠吸附原理，通過特制的磁棒吸附、轉(zhuǎn)移和釋放磁珠，實現(xiàn)磁珠9HCVHCVHCVHCV1#—4#、HCV10避光保存于-20℃~-30℃，試劑有效期12個月，避免反復(fù)凍溶超過3次。標(biāo)本要求：標(biāo)本類型：血清。1ml，置于滅菌的一次性試管中室溫自然2000-4000rpm200.2ml送檢。血清標(biāo)本-20℃~-30℃保存，不宜反復(fù)凍融；（貼）姓名，應(yīng)盡可能快的送至標(biāo)本接收處，采用泡沫箱加冰袋密封進行運輸。所需設(shè)備：PCRNP968（4℃-20℃、凈化工作臺、離心管等程序步驟：（在試劑準(zhǔn)備區(qū)進行）n=樣本數(shù)+對照數(shù)3+定量標(biāo)準(zhǔn)品數(shù)4系配制如下：試劑試劑HCVHCVHCV用量19ul0.6ul0.4ul20ulPCR4（在樣本處理區(qū)進行）（陜西食藥監(jiān)械（準(zhǔn)）20101400095）（磁珠法（陜西食藥監(jiān)械（準(zhǔn)）字1400125）進行提?。粡暮怂崽崛≡噭┖校ù胖榉ǎ兾魇乘幈O(jiān)械（準(zhǔn)）字20111400125）123備用，按照對應(yīng)說明書每支核酸提人民醫(yī)院檢驗科

文件號:AXRY-PCR-SOP—018版本/修訂號：1/0

丙型肝炎（HCV）核酸定量檢測試劑盒生效日期：20190810標(biāo)準(zhǔn)操作規(guī)程310解后置于-205次，且室溫放置不超過6小時；1，顛倒混勻數(shù)次使磁珠重懸，去掉真空（也可使用孔板離心機，500rpm×1min進行離心96孔板的第1、7列中分別加入20μl2，2ulHCV200μl的樣本（包括臨床血清/血漿樣本、陰性對照品、臨界性對照品、陽性對照品、4個定量標(biāo)準(zhǔn)品、質(zhì)控等；NP968型全自動核酸提取儀按程序進行自動化提?。鹤詣踊绦蚪Y(jié)束后，將第6、12列的洗脫液轉(zhuǎn)移至干凈的無核酸酶離心管中。PCR反應(yīng)混合液的PCR20μ心數(shù)秒，通過傳遞窗轉(zhuǎn)移至基因擴增室。PCR（在擴增與分析區(qū)進行）PCRPCR調(diào)用溫度設(shè)置：檢測熒光選擇：檢測樣本(FAM)、內(nèi)標(biāo)（HEX/VIC）,最后運行反應(yīng)程序。14檢驗結(jié)果的解釋：檢測熒光選擇：檢測樣本(FAM)、內(nèi)標(biāo)（HEX/VIC）,最后運行反應(yīng)程序。14檢驗結(jié)果的解釋：0.001-0.1Ct27-32Ct數(shù)據(jù)且內(nèi)標(biāo)Ct值＜40。標(biāo)準(zhǔn)曲線線性相關(guān)系數(shù)︱r︱≥0.98，在閾值以上的熒光曲線應(yīng)當(dāng)?shù)?9頁共130頁1142℃30min2195℃10min95℃10sec3555℃30sec72℃1min4409560℃℃530secsec文件號:AXRY-PCR-SOP—018版本/修訂號：1/0人民醫(yī)院檢驗科標(biāo)準(zhǔn)操作規(guī)程文件號:AXRY-PCR-SOP—018版本/修訂號：1/0人民醫(yī)院檢驗科標(biāo)準(zhǔn)操作規(guī)程主題內(nèi)容生效日期：20190810第PAGE第71頁共130頁S誤差。Ct值無數(shù)據(jù)且內(nèi)標(biāo)Ct值＜40。檢測樣本HCVRNA≥30IU/ml均判定為陽性，其中：檢測樣本測定值在50IU/ml≤HCVRNA≤1.0×108IU/ml范圍內(nèi)，可直接報告定量結(jié)果。檢測樣本HCVRNA>1.0×108IU/ml時，應(yīng)做適當(dāng)稀釋，使其落入有效范圍內(nèi)。檢測樣本測定值介于30IU/ml≤HCVRNA≤50IU/ml，病毒載量過低，僅作定性判定，需謹(jǐn)慎跟蹤。30IU/ml，且內(nèi)標(biāo)Ct＜40，低于本試劑盒檢測下限，建議重復(fù)30IU/ml，可報告陽性結(jié)果；如果重復(fù)測定值仍小本檢測。產(chǎn)品性能指標(biāo)：根據(jù)臨床研究結(jié)果我們確定如下性能指標(biāo)：本試劑盒對國家標(biāo)準(zhǔn)品的定量結(jié)果，符合國家標(biāo)準(zhǔn)品所給定的參考值。30IU/ml，50IU/ml。精密度：臨界陽性樣本連續(xù)重復(fù)25次檢測均被檢出，且其濃度對數(shù)值的CV≤5%。線性：根據(jù)性能評估實驗，確定本試劑盒線性范圍在50IU/mlHCVRNA1.0×108IU/ml，其線性相關(guān)系數(shù)︱r︱≥0.98。亞型檢測能力：本試劑盒對HCV1、1a、1b、2、3、2a、2b、亞型的WHO能準(zhǔn)確檢出。分析特異性：本試劑盒與乙型肝炎病毒HBV、戊型肝炎病毒HEV型（E、人巨細(xì)胞病毒HCMV、甲型肝炎病毒HAV1（HSV-12（HSV-2、結(jié)核分枝桿菌（TB應(yīng)；18mM18mM170mMIgG0.5mg/mlSPSS差異顯著性分析，結(jié)果表明二者無顯著差異。注意事項：有關(guān)實驗室管理規(guī)范請嚴(yán)格按照質(zhì)量手冊執(zhí)行。本試劑盒僅用于體外檢測，不可用于血源篩查。試劑盒內(nèi)校準(zhǔn)品、質(zhì)控品或其他可能含有人源物質(zhì)的組分，雖乙型肝炎表面抗原（HbsA、人類免疫缺陷病毒抗體（-HIV1/2、丙型肝炎抗體（-HCV）傳染源對待。本試劑盒的所有操作應(yīng)嚴(yán)格按照相關(guān)標(biāo)準(zhǔn)操作程序進行。實驗室嚴(yán)格分區(qū)操作：-PCR各區(qū)物品均為專用，不得交換使用，避免污染，每次實驗完后立即清潔工作臺。使用不含熒光物質(zhì)的一次性手套、一次性專用離心管、自卸式移液槍和帶濾芯吸頭。質(zhì)泄露污染儀器。蓋。擴增完畢請立即取出反應(yīng)管，密閉在專用塑料袋中，放于指定地點，等待同一處理。品一同滅菌后丟棄。500mg/L的次氯酸鈉、75%酒精或紫外燈進行消毒。PCR不同批號的試劑請勿混用，并請在有效期范圍內(nèi)使用。實驗室解釋：為丙型肝炎病毒（HCV）感染的輔助診斷以及治療提供參考依據(jù)。文件號:AXRY-PCR-SOP—019版本/修訂號：1/0生效日期：20190810人民醫(yī)院檢驗科主題內(nèi)容文件號:AXRY-PCR-SOP—019版本/修訂號：1/0生效日期：20190810人民醫(yī)院檢驗科主題內(nèi)容DNA-RNA第PAGE第72頁共130頁DNA-RNA量處理。適用范圍：用于核酸的提取、富集、純化等步驟。其處理后的產(chǎn)物用于臨床體外檢測使用。：蘇州天隆生物科技有限公司生產(chǎn)企業(yè)許可證號：20140002號產(chǎn)品注冊號：20140007號原理：核酸提取過程中，利用磁珠吸附原理，通過特制的磁棒吸附、轉(zhuǎn)移和釋放磁珠，實現(xiàn)磁珠/組成主要成分組件規(guī)格及數(shù)量組成主要成分組件規(guī)格及數(shù)量20T/盒（DT6）20T/盒（預(yù)封裝）40T/盒（預(yù)封裝）64T/盒（預(yù)封裝）預(yù)封裝試劑鹽酸胍、超順磁珠、乙二胺四乙酸、三羥甲基氨基甲烷蛋白酶K（干粉）三羥甲基氨基甲烷1T/條×20條5T/板×4板10T/板×4板16T/板×4板蛋白酶K蛋白酶K稀釋液10mg/支×110mg/支×1支0.5ml/支×10.5ml/支×1支21mg/支×1支1ml/支×1支28mg/支×1支1.4ml/支×1支20T/盒（預(yù)封裝）規(guī)格預(yù)封裝試劑孔位說明有效工作孔位：A~E排，1~6列；1A~6A為1組提取，其余排相似。禁用孔位：F~H排，7~12列；這些為空白孔位，未添加試劑，無法完成檢測。40T/盒（預(yù)封裝）規(guī)格預(yù)封裝試劑孔位說明有效工作孔位：A~E排；1A~6A為1組提取，7A~12A為一組提取，其余排相似。禁用孔位：F~H排；