微生物檢驗(yàn)實(shí)驗(yàn)室彎曲菌屬檢驗(yàn)標(biāo)準(zhǔn)操作規(guī)程

微生物檢驗(yàn)實(shí)驗(yàn)室彎曲菌屬檢驗(yàn)標(biāo)準(zhǔn)操作規(guī)程1.概述彎曲菌屬是一類氧化酶陽(yáng)性、有動(dòng)力、微需氧、菌體彎曲的革蘭陰性細(xì)菌，與人有關(guān)的包括空腸彎曲菌、空腸彎曲菌德萊亞種、唾液彎曲菌唾液亞種等21個(gè)種和亞種。2.標(biāo)本類型糞便、肛拭子等標(biāo)本。3.鑒定3.1形態(tài)與染色革蘭陰性，菌體細(xì)長(zhǎng)，彎曲呈弧形。3.2培養(yǎng)特性糞便標(biāo)本應(yīng)選用CCDA活性炭無(wú)血液培養(yǎng)基(CSM)或Campy-CVA等選擇培養(yǎng)基。在彎曲菌CCDA平板上微需氧（5%CO2）培養(yǎng)48小時(shí)后，可形成半透明、邊緣整齊的菌落。3.3生化反應(yīng)氧化酶試驗(yàn)陽(yáng)性，不分解糖類，H2S（醋酸鉛）、馬尿酸鈉、觸媒和硝酸鹽還原試驗(yàn)均為陽(yáng)性，脲酶試驗(yàn)陰性，42℃生長(zhǎng)，對(duì)啶萘酸敏感，對(duì)頭孢噻吩耐藥。3.4鑒別要點(diǎn)3.4.1本菌屬特征革蘭陰性彎曲菌，微需氧，氧化酶、觸酶試驗(yàn)陽(yáng)性，不分解糖類，42℃時(shí)生長(zhǎng)。3.4.2空腸彎曲菌與胎兒彎曲菌的鑒別空腸彎曲菌馬尿酸鈉試驗(yàn)陽(yáng)性，25℃時(shí)不生長(zhǎng)；而胎兒彎曲菌則相反。3.4.3空腸彎曲菌與幽門螺桿菌的鑒別空腸彎曲菌脲酶試驗(yàn)陰性，42℃時(shí)生長(zhǎng)；而幽門螺桿菌脲酶試驗(yàn)強(qiáng)陽(yáng)性，42℃時(shí)不生長(zhǎng)。3.5操作步驟3.5.1氧化酶試驗(yàn)參見《氧化酶試驗(yàn)標(biāo)準(zhǔn)操作規(guī)程》。3.5.2鑒定從CCDA平板上挑取可疑菌落，用儀器鑒定或手工生化（觸酶、H2S、馬尿酸鈉、奈啶酸敏感試驗(yàn)）進(jìn)行菌落鑒定。4.藥敏參見《藥物敏感性試驗(yàn)標(biāo)準(zhǔn)操作規(guī)程》及CLSIM100-S20最新版本文件。5.質(zhì)量控制見《質(zhì)量管理程序》。6.檢驗(yàn)結(jié)果解釋與分析本菌感染輕癥病人，一般不需治療。體外藥敏顯示對(duì)氨基糖苷類、氟喹諾酮類、紅霉素、四環(huán)素、氯霉素、林可霉素、呋喃妥因和亞胺培南均敏感，對(duì)青霉素、萬(wàn)古霉素、利福平、甲氧芐啶等耐藥。7.臨床意義彎曲菌屬可引起腸外感染和慢性持續(xù)性感染。空腸彎曲菌是引起散發(fā)性細(xì)菌性腸炎最常見的菌種之一，引起嬰幼兒和成人腹瀉。臨床表現(xiàn)為水樣便，每日3~20次，以后轉(zhuǎn)為黏液膿血便。胎兒彎曲菌則主要引起腸外感染，如菌血癥、關(guān)節(jié)炎、腦膜炎、肺部感染等。8.鑒定流程菌落觀察：CCDA上呈微凸、半透明、邊緣整齊的菌落菌落觀察：CCDA上呈微凸、半透明、邊緣整齊的菌落涂片染色：G-，菌體細(xì)長(zhǎng)，彎曲呈弧形氧化酶+脲酶幽門螺桿菌+25℃生長(zhǎng)-胎兒彎曲菌+馬尿酸鈉-空腸彎曲菌大腸彎曲菌參考文獻(xiàn)[1]周庭銀編著.臨床微生物學(xué)診斷與圖解，第二版，上海：上?？茖W(xué)技術(shù)出版社，2007[2]葉應(yīng)嫵，王毓三，申子瑜主編，全國(guó)臨床檢驗(yàn)操作規(guī)程，第三版，南京：東南大學(xué)出版社，2006[3]中國(guó)合格評(píng)定國(guó)家認(rèn)可委員會(huì)，CNAS-GL23:2008醫(yī)學(xué)實(shí)驗(yàn)室質(zhì)量和能力認(rèn)可準(zhǔn)則在臨床微生物學(xué)檢驗(yàn)領(lǐng)域的指南，2008