丙型肝炎病毒核糖核酸測定試劑注冊技術(shù)審查指導(dǎo)原則

word.zl.word.zl.丙型肝炎病毒核糖核酸測定試劑

注冊技術(shù)審查指導(dǎo)原那么一、前言本指導(dǎo)原那么旨在指導(dǎo)注冊申請人對丙型肝炎病毒〔hepatitisCvirus,HCV〕核糖核酸(ribonucleicacid,RNA)定量檢測試劑注冊申報(bào)資料的準(zhǔn)備及撰寫，同時(shí)也為技術(shù)審評部門對注冊申報(bào)資料的技術(shù)審評提供參考。本指導(dǎo)原那么是對丙型肝炎病毒核糖核酸定量檢測試劑的一般要求，申請人應(yīng)依據(jù)產(chǎn)品的具體特性確定其中容是否適用，假設(shè)不適用，需具體闡述理由及相應(yīng)的科學(xué)依據(jù)，并依據(jù)產(chǎn)品的具體特性對注冊申報(bào)資料的容進(jìn)展充實(shí)和細(xì)化。如申請人認(rèn)為有必要增加本指導(dǎo)原那么未包含的研究容，可自行補(bǔ)充。本指導(dǎo)原那么是對申請人和審查人員的指導(dǎo)性文件，但不包括注冊審批所涉及的行政事項(xiàng)，亦不作為法規(guī)強(qiáng)制執(zhí)行，如果有能夠滿足相關(guān)法規(guī)要求的其他方法，也可以采用，但需要提供詳細(xì)的研究資料和驗(yàn)證資料，相關(guān)人員應(yīng)在遵循相關(guān)法規(guī)的前提下使用本指導(dǎo)原那么。本指導(dǎo)原那么是在現(xiàn)行法規(guī)和標(biāo)準(zhǔn)體系以及當(dāng)前認(rèn)知水平下制定的，隨著法規(guī)和標(biāo)準(zhǔn)的不斷完善，以及科學(xué)技術(shù)的不斷開展，本指導(dǎo)原那么相關(guān)容也將適時(shí)進(jìn)展調(diào)整。二、適用圍丙型肝炎是一種主要經(jīng)血液傳播的疾病，丙型肝炎病毒慢性感染可導(dǎo)致肝臟慢性炎癥壞死和纖維化，局部患者可開展為肝硬化甚至肝細(xì)胞癌，對患者的安康和生命危害極大，已成為嚴(yán)重的社會和公共衛(wèi)生問題。HCV特點(diǎn)HCV屬于黃病毒科(flaviviridae)，其基因組為單股正鏈RNA，易變異，目前可分為6個(gè)基因型及50多種不同亞型，按照國際通行的方法，以阿拉伯?dāng)?shù)字表示HCV基因型，以小寫的英文字母表示基因亞型(如1a、2b、3c等)。基因1型呈全球性分布，占所有HCV感染的70％以上。HCV基因組含有一個(gè)開放讀框(openreadingframe,ORF)，編碼10余種構(gòu)造和非構(gòu)造(NS)蛋白，NS3蛋白是一種多功能蛋白，氨基端具有蛋白酶活性，羧基端具有螺旋酶/三磷酸核苷酶活性；NS5B蛋白是RNA依賴的RNA聚合酶，為HCV復(fù)制所必需，是抗病毒治療的重要靶位，其末端具有核苷酸轉(zhuǎn)移酶活性，但由于RNA酶缺乏矯正功能不能修正錯(cuò)配，屢次復(fù)制后易導(dǎo)致HCV多種變異產(chǎn)生。丙型肝炎感染分布丙型肝炎呈全球性流行，是歐美及日本等終末期肝病的最主要原因。據(jù)世界衛(wèi)生組織統(tǒng)計(jì)，全球HCV的感染率約為3%，估計(jì)約1.7億人感染HCV，每年新發(fā)丙型肝炎病例約3.5萬例。HCV1b和2a基因型在我國較為常見，其中以1b型為主；某些地區(qū)有1a、2b和3b型報(bào)道；6型主要見于和澳門地區(qū)，在南方邊境省份也可見此基因型。〔三〕HCVRNA定量檢測HCVRNA定量檢測方法包括實(shí)時(shí)熒光逆轉(zhuǎn)錄聚合酶鏈反響(qRT-polymerasechainreaction，qRT-PCR)、分枝DNA(bDNA)等。本指導(dǎo)原那么所指的HCVRNA定量檢測試劑是指利用qRT-PCR方法的核酸檢測技術(shù)，以HCV基因序列為檢測靶標(biāo)，對人血清、血漿及其他人體樣本中的HCVRNA進(jìn)展體外定量檢測的試劑，可作為HCV現(xiàn)癥感染的證據(jù)和抗病毒療效評估的觀察指標(biāo)。其他類同用途的核酸定量檢測方法可參照本指導(dǎo)原那么，但應(yīng)根據(jù)產(chǎn)品特性確定其中具體容是否適用，如不適用，應(yīng)另行選擇符合自身方法學(xué)特性的技術(shù)要求或評價(jià)方法。本指導(dǎo)原那么適用于進(jìn)展首次注冊申報(bào)和相關(guān)許可事項(xiàng)變更的產(chǎn)品。本指導(dǎo)原那么不適用于按照藥品管理的用于血源篩查用途的HCVRNA檢測試劑。三、根本要求〔一〕綜述資料綜述資料主要包括產(chǎn)品預(yù)期用途、產(chǎn)品描述、有關(guān)生物平安性的說明、研究結(jié)果的總結(jié)評價(jià)以及同類產(chǎn)品上市情況介紹等容，其中同類產(chǎn)品上市情況介紹局部應(yīng)著重從方法學(xué)及檢出限等方面寫明擬申報(bào)產(chǎn)品與目前市場上已獲批準(zhǔn)的同類產(chǎn)品之間的主要區(qū)別。應(yīng)符合?體外診斷試劑注冊管理方法?〔總局令第4號〕和?體外診斷試劑注冊申報(bào)資料要求及說明?〔食品藥品監(jiān)視管理總局公告2021年第44號〕的相關(guān)要求?！捕持饕牧系难芯抠Y料應(yīng)提供主要原材料如引物、探針、酶、標(biāo)準(zhǔn)品或企業(yè)參考品等的選擇與來源、制備過程、質(zhì)量分析和質(zhì)控標(biāo)準(zhǔn)等的相關(guān)研究資料。如主要原材料為企業(yè)自己生產(chǎn)，其生產(chǎn)工藝應(yīng)穩(wěn)定；如主要原材料源于外購，應(yīng)提供的資料包括：選擇該原材料的依據(jù)及比照試驗(yàn)資料、供貨方提供的質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)、出廠檢定報(bào)告，以及該原材料到貨后的質(zhì)量檢驗(yàn)資料。研究資料如下：企業(yè)部參考品:應(yīng)詳細(xì)說明有關(guān)企業(yè)部參考品的原料選擇、制備、定值過程等試驗(yàn)資料。建議優(yōu)先選擇不同型別的臨床陽性樣本制備部參考品以直接反映臨床實(shí)際情況并起到質(zhì)控的作用；企業(yè)也可選擇假病毒〔如，蛋白包裹RNA,armoredRNA〕作為部參考品，假病毒的優(yōu)點(diǎn)是易制備、型別全且無生物平安性風(fēng)險(xiǎn)，但不像臨床樣本可以完整反響實(shí)際的檢測效能。建議企業(yè)部參考品應(yīng)覆蓋1-6型，至少包括1b、2a型別的臨床樣本，各型別參考品在同一濃度水平應(yīng)有多份樣本。陽性參考品：應(yīng)能至少覆蓋常見亞型1b、2a,每個(gè)亞型設(shè)置三個(gè)梯度并盡量覆蓋線性圍，其中需包括至少一份弱陽性參考品接近檢測下限〔可高于檢測下限一個(gè)數(shù)量級〕。陽性參考品的亞型以及濃度需經(jīng)過可靠方法進(jìn)展確認(rèn)。陰性參考品：可采用經(jīng)確認(rèn)無HCV感染的臨床樣本。檢測限參考品：檢測限參考品的原料要求參考陽性參考品。在進(jìn)展最低檢測限性能評估時(shí),應(yīng)設(shè)置多個(gè)梯度,從擴(kuò)增反響終體系核酸濃度進(jìn)展評價(jià)，建議采用95%[n>20〕的陽性檢出率作為最低檢測限確定的標(biāo)準(zhǔn)。當(dāng)設(shè)置檢測限參考品時(shí),可以僅設(shè)置一個(gè)濃度水平,該水平可略高于95%的陽性檢出率水平,而設(shè)置為100%檢出,應(yīng)明確參考品中靶核酸濃度水平。精細(xì)度參考品：精細(xì)度參考品原料要求參考陽性參考品,需至少包括對6個(gè)型別弱陽性、中或強(qiáng)陽性水平的精細(xì)度驗(yàn)證；如有必要,建議同時(shí)設(shè)置陰性參考品對精細(xì)度進(jìn)展驗(yàn)證。試劑盒對照品〔質(zhì)控品〕試劑盒的質(zhì)控體系通過設(shè)置各種試劑盒對照品來實(shí)現(xiàn),質(zhì)控體系需考慮對樣本核酸別離/純化、配液及加樣、試劑及儀器性能、擴(kuò)增反響抑制物〔管抑制〕、穿插污染、靶核酸降解等因素可能造成的假陰性或假陽性結(jié)果進(jìn)展合理的質(zhì)量控制。對照品可采用質(zhì)粒、假病毒或臨床樣本的核酸提取液等進(jìn)展配置。申報(bào)資料應(yīng)對試劑盒對照品有關(guān)原料選擇、制備、定值過程等試驗(yàn)資料詳細(xì)說明°HCVRNA定量檢測試劑的質(zhì)控品應(yīng)至少設(shè)置三個(gè)量級水平的系列質(zhì)控品:弱陽性質(zhì)控品、強(qiáng)陽性質(zhì)控品和陰性質(zhì)控品。校準(zhǔn)品和質(zhì)控品均應(yīng)參與樣本核酸的平行提取，以對整個(gè)PCR反響過程、試劑/設(shè)備、穿插污染等環(huán)節(jié)進(jìn)展合理質(zhì)量控制。企業(yè)應(yīng)對各種質(zhì)控品的Ct做出明確的圍要求。試劑盒質(zhì)控體系主要考慮以下幾方面：陽性對照品〔質(zhì)控品〕建議對每個(gè)樣品反響管設(shè)置強(qiáng)陽性對照品〔質(zhì)控品〕及弱陽性對照品，陽性對照品應(yīng)參與樣本核酸的平行提取〔如有必要〕，以對樣本核酸別離/純化、試劑及儀器性能、擴(kuò)增反響過程等環(huán)節(jié)進(jìn)展質(zhì)量控制，企業(yè)應(yīng)對各種陽性對照品〔質(zhì)控品〕的Ct值做出明確的圍要求。如，可采用陰性人血漿+假病毒制備，應(yīng)使用權(quán)威方法確認(rèn)陰性人血漿的生物平安性及無干擾性：抗-HCV、抗-HIV1/2、HBsAg等檢測陰性，HCVRNA等檢測陰性。陰性對照〔質(zhì)控品〕：可采用陰性人血漿，應(yīng)使用權(quán)威方法確認(rèn)陰性人血漿的生物平安性及無干擾性，以對可能存在的穿插污染進(jìn)展假陽性結(jié)果的質(zhì)控。陰性對照品應(yīng)參與樣本核酸的平行提取。校準(zhǔn)品：基質(zhì)應(yīng)采用血漿或血清，并能溯源至/國際標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)，單位應(yīng)使用IU/ml表示。提交完整溯源性文件，可參照GB/T21415-2021?體外診斷醫(yī)療器械生物樣品中量的測量校準(zhǔn)品和控制物質(zhì)賦值的計(jì)量學(xué)溯源性?。企業(yè)部參考品、二級參考品、用于制備商品化校準(zhǔn)品的儲藏液以及不同基因型的陽性樣本均應(yīng)能夠溯源至參考品/國際參考品。使用參考品/國際參考品為校準(zhǔn)品，應(yīng)用多臺儀器對企業(yè)一級參考品進(jìn)展校準(zhǔn)，以下逐級對企業(yè)二級參考品、校準(zhǔn)儲藏液、陽性參考品進(jìn)展校準(zhǔn)。核酸別離/純化組分〔如有〕的主要組成、原理介紹及相關(guān)的驗(yàn)證資料。聚合酶鏈反響〔PCR〕組分的主要材料〔包括引物、探針、標(biāo)、各種酶及其他主要原料〕的選擇、制備、質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)及實(shí)驗(yàn)研究資料，主要包括以下容：〔1〕脫氧三磷酸核苷〔dNTP〕核酸的組成成分，包括：dATP、dUTP、dGTP、dCTP、dTTP，對純度、濃度、保存穩(wěn)定性等的詳細(xì)驗(yàn)證資料?！?〕引物由一定數(shù)量的dNTP構(gòu)成的特定序列，合成后經(jīng)聚丙烯酰胺凝膠電泳或其他適宜方法純化，并包括對序列準(zhǔn)確性、純度、穩(wěn)定性、功能性實(shí)驗(yàn)等方面的驗(yàn)證。如為外購，應(yīng)提供合成機(jī)構(gòu)出具的包括如上性能的質(zhì)檢證明，如聚丙烯酰胺凝膠電泳法〔PAGE〕結(jié)果或高效液相色譜法〔HPLC〕分析圖譜?！?〕探針特定的帶有示蹤物〔標(biāo)記物〕的核酸片段〔寡聚核苷酸片段〕，能與互補(bǔ)核酸序列退火雜交，用于特定核酸序列的探測。合成后經(jīng)PAEG或其他適宜方法純化，在5'-端標(biāo)記熒光素報(bào)告基團(tuán)或其他發(fā)光標(biāo)記物，在3'-端標(biāo)記熒光素淬滅基團(tuán)，并經(jīng)HPLC或其他適宜方法純化,純度應(yīng)到達(dá)高效液相色譜純。如為外購，應(yīng)提供合成機(jī)構(gòu)出具的合成產(chǎn)物的質(zhì)檢證明（HPLC分析圖譜）；應(yīng)對探針的核酸序列及標(biāo)記的熒光素或化學(xué)發(fā)光物進(jìn)展核實(shí)，并作HPLC分析?！?〕RT-PCR反響所需酶通常包括以下幾種活性：①DNA聚合酶活性：以RNA為模板，催化dNTP聚合成DNA的過程。②核糖核酸酶H〔RNaseH〕活性；由反轉(zhuǎn)錄酶催化合成的cDNA與模板RNA形成的雜交分子，將由RNaseH從RNA5'端水解掉RNA分子。③DNA指導(dǎo)的DNA聚合酶活性；以反轉(zhuǎn)錄合成的第一條DNA單鏈為模板，以dNTP為底物，再合成第二條DNA分子。④熱穩(wěn)定性。為了去除過程中產(chǎn)物污染，建議試劑盒組成體系增加尿嘧啶糖基化酶〔UNG〕，該酶應(yīng)具有尿嘧啶糖基化活性，無核酸外切酶及核酸切酶活性。應(yīng)對酶活性有合理驗(yàn)證，應(yīng)提供有關(guān)保存穩(wěn)定性、活性及功能性實(shí)驗(yàn)等的研究資料。4.對照〔標(biāo)〕、校準(zhǔn)品及質(zhì)控品的原料選擇、制備、定值過程及試驗(yàn)資料。申請人應(yīng)對標(biāo)的引物、探針和模板的濃度做準(zhǔn)確驗(yàn)證，標(biāo)設(shè)置應(yīng)合理，標(biāo)值應(yīng)在一定圍設(shè)定上下限圍且Ct值不受靶序列的影響；通常選擇假病毒,因不能反映提取問題，標(biāo)不應(yīng)使用裸露RNAO5.核酸類檢測試劑的包裝材料和耗材應(yīng)無脫氧核糖核酸酶〔Dnase〕和核糖核酸酶〔Rnase〕污染?！踩持饕に嚰胺错戵w系的研究資料根本生產(chǎn)工藝主要包括：配制工作液、半成品檢定、分裝和包裝。配制工作液的各種原材料及其配比應(yīng)符合要求，原材料應(yīng)混合均勻，配制過程應(yīng)對pH、電導(dǎo)率等關(guān)鍵參數(shù)進(jìn)展有效控制。生產(chǎn)工藝研究的資料應(yīng)能對反響體系涉及到的根本容，如樣本類型、樣本用量、試劑用量、反響條件、校準(zhǔn)方法、質(zhì)控方法、穩(wěn)定性和有效期提供確切的依據(jù)，主要包括以下容：主要生產(chǎn)工藝介紹，應(yīng)用流程圖方式表示，并標(biāo)明關(guān)鍵工藝質(zhì)控步驟。反響原理介紹?；蛭稽c(diǎn)選擇、PCR方法學(xué)特性介紹。確定最正確PCR反響體系的研究資料，包括酶濃度、引物/探針濃度、dNTP濃度、陽離子濃度、樣本量、加樣量及反響體積等。樣本量應(yīng)不少于200微升，提取純化后盡可能將全部儲藏液參加反響體系中，加樣量和反響體積參考相應(yīng)行業(yè)標(biāo)準(zhǔn)，經(jīng)研究驗(yàn)證后確定。確定PCR各階段溫度、時(shí)間及循環(huán)數(shù)的研究資料。對于基線閾值〔threshold〕和閾值循環(huán)數(shù)〔Ct〕確定的研究資料。不同適用機(jī)型的反響條件的比照分析，如果有差異應(yīng)分別詳述，并提供驗(yàn)證資料證明差異性對試驗(yàn)結(jié)果的影響?！菜摹撤治鲂阅茉u估資料申請人應(yīng)提交生產(chǎn)者在產(chǎn)品研制或成品驗(yàn)證階段對試劑盒進(jìn)展的所有性能驗(yàn)證的研究資料，對于每項(xiàng)分析性能的評價(jià)都應(yīng)包括具體研究目的、實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)、研究方法、可承受標(biāo)準(zhǔn)、實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)、統(tǒng)計(jì)方法等詳細(xì)資料。有關(guān)分析性能驗(yàn)證的背景信息也應(yīng)在申報(bào)資料中有所表達(dá)，包括實(shí)驗(yàn)地點(diǎn)〔實(shí)驗(yàn)室〕、適用儀器、試劑規(guī)格、批號、臨床樣本來源等。分析性能評價(jià)的實(shí)驗(yàn)方法可以參考相關(guān)的美國臨床實(shí)驗(yàn)室標(biāo)準(zhǔn)化協(xié)會批準(zhǔn)指南〔CLSI-EP〕文件或國有關(guān)體外診斷產(chǎn)品性能評估的指導(dǎo)原那么進(jìn)展。對于HCVRNA測定試劑，建議著重對以下分析性能進(jìn)展研究。HCVRNA提取純化由于RNA酶的廣泛存在，血樣的保存運(yùn)輸以及RNA的提取純化均應(yīng)注意防止RNA酶的污染。病毒RNA提取主要有以下目的：富集目的基因濃度、保證目的基因序列的完整性、增加PCR模板溶液均一性、去除PCR抑制物，是決定PCR成敗的關(guān)鍵環(huán)節(jié)。因此，無論申扌艮產(chǎn)品是否含有RNA別離/純化的組分，企業(yè)都應(yīng)對核酸提取的環(huán)節(jié)做詳細(xì)的驗(yàn)證。臨床標(biāo)本中可能含有各式各樣的PCR抑制物，因此，對于RNA提取試劑的選擇，除最大量別離出目的RNA外，還應(yīng)有純化步驟〔如磁珠提取法〕盡可能去除PCR抑制物，防止使用無純化步驟的簡易方法。申請人應(yīng)結(jié)合申報(bào)產(chǎn)品的特性，合理選擇優(yōu)化RNA別離/純化試劑，建議包含純化步驟且標(biāo)、校準(zhǔn)品、質(zhì)控品均應(yīng)全程參與提取純化，并提供詳細(xì)的驗(yàn)證資料，應(yīng)至少包括提取效率、重復(fù)性和抗干擾研究。最低檢出限與定量限〔1〕最低檢出限與定量限確實(shí)定建議使用國際參考品/參考品進(jìn)展梯度稀釋并屢次檢測，將具有95%陽性檢出率的病毒水平作為最低檢出限。根據(jù)詢證醫(yī)學(xué)中有關(guān)對HCV感染者進(jìn)展抗病毒治療效果及預(yù)后評估的需要，建議HCV核酸定量檢測試劑的最低檢出限設(shè)定不高于20IU/mlo定量限應(yīng)高于或等于檢出限，將屢次〔至少20次〕測量的結(jié)果符合試劑準(zhǔn)確度要求的最低病毒水平作為定量限。血清、血漿應(yīng)分別進(jìn)展最低檢測限的驗(yàn)證。〔2〕最低檢出限和定量限的驗(yàn)證申報(bào)試劑應(yīng)在最低檢出限或接近最低檢出限的丙型肝炎病毒濃度進(jìn)展驗(yàn)證，總測試數(shù)不少于60次。定量限的驗(yàn)證應(yīng)總測試數(shù)不少于40次。企業(yè)應(yīng)能夠提供用于最低檢出限/定量限驗(yàn)證的病毒株的來源、型別確認(rèn)及滴度確認(rèn)試驗(yàn)等信息。線性圍線性圍確定的研究應(yīng)使用高值臨床樣本〔由可溯源至參考品/國際參考品的方法定量〕進(jìn)展梯度稀釋，稀釋液應(yīng)使用經(jīng)確認(rèn)為陰性的混合人血清或血漿，應(yīng)包含不少于9個(gè)濃度〔應(yīng)包含接近最低檢測限的臨界值濃度〕，使用至少3個(gè)批次的試劑進(jìn)展試驗(yàn)。通過評價(jià)一定圍的線性關(guān)系及各水平的準(zhǔn)確度確定該產(chǎn)品的線性圍。應(yīng)分別對血清、血漿、不同適用機(jī)型的加樣體積〔如適用〕、不同基因型進(jìn)展線性分析及定量上、下限確實(shí)認(rèn)。準(zhǔn)確度對測量準(zhǔn)確度的評價(jià)依次包括：與參考品〔和/或國際參考品〕的比對研究、回收實(shí)驗(yàn)、方法學(xué)比對等方法，企業(yè)可根據(jù)實(shí)際情況選擇合理方法進(jìn)展研究?！?〕/國際參考品驗(yàn)證此類檢測試劑有相應(yīng)的/國際參考品，應(yīng)使用/國際參考品對試劑進(jìn)展驗(yàn)證，重點(diǎn)觀察對相應(yīng)參考品檢測結(jié)果的符合情況?！?〕回收試驗(yàn)。用于評估定量檢測方法準(zhǔn)確測定參加純分析物的能力，結(jié)果用回收率表示。通常對樣本進(jìn)展3?5次回收試驗(yàn)，取平均值即平均回收率?；厥赵囼?yàn)本卷須知：參加的標(biāo)準(zhǔn)液體積一般應(yīng)小于樣本體積的10%；盡量使參加標(biāo)準(zhǔn)液后樣本中的被測物濃度接近醫(yī)學(xué)決定水平；標(biāo)準(zhǔn)物的濃度應(yīng)該足夠高，以得到不同濃度的回收樣本；注意基質(zhì)效應(yīng)，盡量采用與臨床待測樣本一致的基質(zhì)〔3〕方法學(xué)比對采用參考方法或國/國際普遍認(rèn)為質(zhì)量較好的同類試劑作為比照方法，與擬申報(bào)試劑同時(shí)檢測一批病人樣品，從測定結(jié)果間的相關(guān)性了解擬申報(bào)試劑與參比方法間的一致情況。如顯著相關(guān)，說明兩檢測系統(tǒng)對病人標(biāo)本測定結(jié)果根本相符，對同一份臨床樣本的醫(yī)學(xué)解釋，擬申報(bào)試劑與比照方法相比不會產(chǎn)生顯著差異結(jié)果。實(shí)施方法學(xué)比對前，應(yīng)分別對擬申報(bào)試劑和比照試劑進(jìn)展初步評估，只有在確認(rèn)兩者都分別符合各自相關(guān)的質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)前方可進(jìn)展比對試驗(yàn)。方法學(xué)比對時(shí)應(yīng)注意質(zhì)量控制、樣本類型、濃度分布圍并對結(jié)果進(jìn)展合理的統(tǒng)計(jì)學(xué)分析〔如，報(bào)告斜率和截距的95%置信區(qū)間〕。精細(xì)度測量精細(xì)度的評價(jià)方法并無統(tǒng)一的標(biāo)準(zhǔn)可依，可根據(jù)不同產(chǎn)品特征或企業(yè)的研究習(xí)慣進(jìn)展，前提是必須保證研究的科學(xué)合理性，具體實(shí)驗(yàn)方法可以參考相關(guān)的美國臨床實(shí)驗(yàn)室標(biāo)準(zhǔn)化協(xié)會批準(zhǔn)指南〔CLSI-EP〕或國有關(guān)體外診斷產(chǎn)品性能評估的文件進(jìn)展。企業(yè)應(yīng)對每項(xiàng)精細(xì)度指標(biāo)的評價(jià)標(biāo)準(zhǔn)做出合理要求，如標(biāo)準(zhǔn)差或變異系數(shù)的圍等。針對本類產(chǎn)品的精細(xì)度評價(jià)主要包括以下要求：〔1〕對可能影響檢測精細(xì)度的主要變量進(jìn)展驗(yàn)證，除申報(bào)試劑〔包括提取組分和聚合酶鏈反響組分〕本身的影響外，還應(yīng)對PCR分析儀、操作者、地點(diǎn)等要素進(jìn)展相關(guān)的驗(yàn)證?！?〕合理的精細(xì)度評價(jià)周期，例如：為期至少20天的連續(xù)檢測，每天至少由2人完成不少于2次的完整檢測，從而對批/批間、日/日間以及不同操作者之間的精細(xì)度進(jìn)展綜合評價(jià)。如有條件，申請人應(yīng)選擇不同的實(shí)驗(yàn)室進(jìn)展重復(fù)實(shí)驗(yàn)以對室間精細(xì)度進(jìn)展評價(jià)。〔3〕用于精細(xì)度評價(jià)的質(zhì)控品應(yīng)至少包括三個(gè)水平:陰性質(zhì)控品：不含丙型肝炎病毒核糖核酸〔HCVRNA〕的質(zhì)控品，不得檢出陽性〔n》20〕。弱陽性質(zhì)控品：待測物濃度呈弱陽性〔高于定量限濃度1個(gè)數(shù)量級〕，陽性檢出率為100%且變異系數(shù)〔CV〕符合標(biāo)準(zhǔn)要求〔n》20〕。強(qiáng)陽性質(zhì)控品：待測物濃度呈中度至強(qiáng)陽性，陽性檢出率為100%且CV符合標(biāo)準(zhǔn)要求〔n》20〕。HCV不同基因型的覆蓋：應(yīng)對丙型肝炎病毒預(yù)期用途聲稱可以檢測的不同基因型進(jìn)展以上性能的全部評估，每個(gè)基因型的病毒樣本稀釋成至少3個(gè)濃度水平，對每水平樣本進(jìn)展重復(fù)測定。特異性〔1〕穿插反響用于HCVRNA檢測試劑穿插反響驗(yàn)證的病原體種類主要考慮以下幾方面可能性：核酸序列具有同源性、易引起一樣或相似的臨床病癥〔推薦種類見表1〕。建議在病毒和細(xì)菌感染的醫(yī)學(xué)相關(guān)水平進(jìn)展穿插反響的驗(yàn)證。通常，細(xì)菌感染的水平為106cfu/ml或更高，病毒為105pfu/ml或更高。申請人應(yīng)提供所有用于穿插反響驗(yàn)證的病毒和細(xì)菌的來源、種屬/型別和濃度確認(rèn)等試驗(yàn)資料。有關(guān)穿插反響驗(yàn)證的信息應(yīng)以列表的方式在產(chǎn)品說明書的【產(chǎn)品性能指標(biāo)】項(xiàng)中有所表達(dá)。表1用于穿插反響研究的微生物〔推薦〕微生物黃病毒科〔如：西尼羅病毒等〕登革熱病毒

人巨細(xì)胞病毒E-B病毒人類免疫缺陷病毒1、2乙型肝炎病毒甲型肝炎病毒梅毒人類皰疹病毒6型單純皰疹病毒1型單純皰疹病毒2型甲型流感病毒金黃色葡萄球菌白色念珠菌〔2〕干擾物質(zhì)潛在的干擾物質(zhì)主要包括：源性物質(zhì)〔見表2〕和常用的治療藥物如普通干擾素IFNa、復(fù)合IFN和聚乙二醇干擾素a、利巴韋林、粒細(xì)胞刺激因子〔GMCSF〕等，應(yīng)采用已報(bào)道峰濃度的幾倍藥物濃度進(jìn)展驗(yàn)證。使用醫(yī)學(xué)相關(guān)水平的干擾物濃度進(jìn)展驗(yàn)證，另外，亦建議申請人在每種干擾物質(zhì)的潛在最大濃度（最差條件）條件下進(jìn)展評價(jià)。對于常見藥物干擾試驗(yàn)，建議參照相應(yīng)藥物藥代動(dòng)力學(xué)研究確定的治療藥物濃度添加相應(yīng)藥物進(jìn)展干擾驗(yàn)證。建議在病毒的檢測臨界值水平對每種干擾物質(zhì)的干擾影響進(jìn)展檢測。表2建議用于干擾研究的物質(zhì)〔推薦〕膽紅素總G總G型免疫球蛋白〔IgG〕*為必須驗(yàn)證的干擾物質(zhì)。使用HCVRNA陰性樣本〔血清、血漿〕進(jìn)展評估，評估試劑的特異性。臨床其他需注意問題對于適用多個(gè)機(jī)型的產(chǎn)品，應(yīng)提供如產(chǎn)品說明書【適用機(jī)型】項(xiàng)中所列的所有型號儀器的性能評估資料。如適用于不同樣本類型，應(yīng)提交對不同樣本類型一致性的驗(yàn)證，包括不同抗凝劑、采血管的驗(yàn)證?！参濉酬栃耘袛嘀荡_定資料對于此類試劑，正常人群中不應(yīng)檢出HCVRNA，參考值確定資料主要是指Ct確實(shí)認(rèn)資料，建議申請人采用受試者工作特征CROC〕曲線的方式對申報(bào)產(chǎn)品用于結(jié)果判斷的臨界值予以確認(rèn)。〔六〕穩(wěn)定性研究資料穩(wěn)定性研究資料主要涉及兩局部容，申報(bào)試劑的穩(wěn)定性和適用樣本的穩(wěn)定性研究。前者主要包括實(shí)時(shí)穩(wěn)定性〔有效期〕、運(yùn)輸穩(wěn)定性、開瓶穩(wěn)定性及凍融次數(shù)限制等研究，申請人可根據(jù)實(shí)際需要選擇合理的穩(wěn)定性研究方案。穩(wěn)定性研究資料應(yīng)包括研究方法確實(shí)定依據(jù)、具體的實(shí)施方案、詳細(xì)的研究數(shù)據(jù)以及結(jié)論。對于實(shí)時(shí)穩(wěn)定性研究，應(yīng)提供至少三批樣品在實(shí)際儲存條件下保存至成品有效期后的研究資游離血紅蛋白*甘油三酯*系統(tǒng)性紅斑狼瘡患者血抗核抗體類風(fēng)濕因子應(yīng)對樣本穩(wěn)定性進(jìn)展研究，主要包括對不同樣本類型〔血清、血漿〕室溫保存、冷藏和冷凍條件下的有效期驗(yàn)證，可以在合理的溫度圍選擇溫度點(diǎn)〔溫度圍〕，每間隔一定的時(shí)間段即對儲存樣本進(jìn)展全性能的分析驗(yàn)證，從而確認(rèn)不同類型樣本的效期穩(wěn)定性。適于冷凍保存的樣本還應(yīng)對凍融次數(shù)進(jìn)展評價(jià)。試劑穩(wěn)定性和樣本穩(wěn)定性兩局部容的研究結(jié)果均應(yīng)在說明書【儲存條件及有效期】和【樣本要求】兩項(xiàng)中進(jìn)展詳細(xì)說明?！擦钞a(chǎn)品說明書說明書承載了產(chǎn)品預(yù)期用途、試驗(yàn)原理、試驗(yàn)方法、檢測結(jié)果解釋以及本卷須知等重要信息，是指導(dǎo)實(shí)驗(yàn)室工作人員正確操作、臨床醫(yī)生針對檢驗(yàn)結(jié)果給出合理醫(yī)學(xué)解釋的重要依據(jù)。因此，產(chǎn)品說明書是體外診斷試劑注冊申報(bào)最重要的文件之一。產(chǎn)品說明書的格式應(yīng)符合?體外診斷試劑說明書編寫指導(dǎo)原那么?〔食品藥品監(jiān)視管理總局通告2021年第17號〕的要求，境外產(chǎn)品的中文說明書除格式要求外，其容應(yīng)盡量保持與原文說明書的一致性，翻譯力求準(zhǔn)確且符合中文表達(dá)習(xí)慣。產(chǎn)品說明書的所有容均應(yīng)與申請人提交的注冊申報(bào)資料中的相關(guān)研究結(jié)果保持一致，如某些容引用自參考文獻(xiàn)，那么應(yīng)以規(guī)格式對此容進(jìn)展標(biāo)注，并單獨(dú)列明參考文獻(xiàn)的相關(guān)信息。結(jié)合?體外診斷試劑說明書編寫指導(dǎo)原那么?的要求，下面對HCVRNA定量檢測試劑說明書的重點(diǎn)容進(jìn)展詳細(xì)說明?！绢A(yù)期用途】應(yīng)描述為：試劑用于定量檢測人血清/血漿樣本中的HCVRNA,用于需進(jìn)展HCV感染診斷的患者和承受抗病毒治療的丙型肝炎患者，應(yīng)當(dāng)說明該試劑能夠檢測的基因型別。檢測結(jié)果不得作為患者病情評價(jià)的唯一指標(biāo)，必須結(jié)合患者臨床表現(xiàn)和其他實(shí)驗(yàn)室檢測對病情進(jìn)展綜合分析并明確說明該檢測試劑不得用于血源篩查。應(yīng)對丙型肝炎病毒感染及治療臨床背景進(jìn)展簡介?！局饕M成成分】〔1〕說明試劑盒所包含組分的名稱、數(shù)量、比例或濃度等信息，如定量標(biāo)準(zhǔn)品、陰/陽性質(zhì)控品含有人源組分，應(yīng)提供其生物學(xué)來源、活性及其他特性；說明不同批號試劑盒中各組分是否可以互換?！?〕試劑盒中不包含但該項(xiàng)檢測必需的組分，說明書中應(yīng)列出相關(guān)試劑/耗材的名稱、注冊證號〔如有〕及其他相關(guān)信息?！?〕如果試劑盒中不包含用于核酸別離/純化的試劑組分，那么應(yīng)在此注明經(jīng)歷證后推薦配合使用的商品化核酸別離/純化試劑盒的生產(chǎn)企業(yè)、產(chǎn)品名稱、注冊證號〔如有〕以及配套儀器等詳細(xì)信息。【儲存條件及有效期】說明試劑盒的效期穩(wěn)定性、開瓶穩(wěn)定性、復(fù)溶穩(wěn)定性、運(yùn)輸穩(wěn)定性、凍融次數(shù)要求等，應(yīng)標(biāo)明具體的儲存條件及效期?！緲颖疽蟆俊?〕樣本收集要求：結(jié)合臨床需要并參照丙型肝炎防治指南〔現(xiàn)行版〕推薦的采樣要求。〔2〕血液樣本應(yīng)當(dāng)說明對采血管及抗凝劑的要求：明確樣本類型、采血管和抗凝劑，其他樣本應(yīng)說明樣本采集、處理及保存方式。〔3〕樣本處理、運(yùn)送及保存：對血液樣本離心條件的要求，核酸提取前的預(yù)處理、運(yùn)送條件、保存條件及期限〔短期、長期〕等。冷藏/冷凍樣本檢測前是否需恢復(fù)至室溫，凍融次數(shù)的要求。如有需要應(yīng)對高于檢測圍的樣本稀釋方法進(jìn)展規(guī)定?！具m用機(jī)型】注明所有適用的儀器型號，并提供與儀器有關(guān)的重要信息以指導(dǎo)用戶操作。【檢驗(yàn)方法】詳細(xì)說明試驗(yàn)操作的各個(gè)步驟，包括：〔1〕試劑準(zhǔn)備及配制方法、本卷須知。〔2〕詳述待測樣本、相關(guān)校準(zhǔn)品及質(zhì)控品核酸提取的條件、步驟及本卷須知?！?〕核酸提取/純化方法的詳細(xì)介紹。〔4〕擴(kuò)增反響前準(zhǔn)備：加樣體積、順序等?！?〕PCR各階段的溫度、時(shí)間設(shè)置、循環(huán)設(shè)置及相關(guān)本卷須知?！?〕儀器設(shè)置：特殊參數(shù)、結(jié)合探針的熒光素標(biāo)記情況對待測基因及標(biāo)的熒光通道選擇?！?〕基線、循環(huán)閾值〔Ct值〕的選擇方法?！?〕校準(zhǔn)方法的描述?！?〕實(shí)驗(yàn)的有效性判斷：試劑盒陰/陽性質(zhì)控品、標(biāo)的Ct值要求?！緳z驗(yàn)結(jié)果的解釋】檢驗(yàn)結(jié)果應(yīng)用IU/ml表示，結(jié)合陰、陽性質(zhì)控結(jié)果，對低于檢出限未檢出、低于定量限、檢測圍及高于檢測圍的檢測結(jié)果分別進(jìn)展界定?！緳z驗(yàn)方法的局限性】〔1〕本試劑盒的檢測結(jié)果僅供臨床參考，對患者的臨床診治應(yīng)結(jié)合其病癥/體征、病史、其他實(shí)驗(yàn)室檢查及治療反響等情況綜合考慮。（2）可靠的結(jié)果取決于樣本采集、轉(zhuǎn)運(yùn)、儲存及處理程序。（3）明確該試劑僅限于規(guī)定的樣本類型及適用機(jī)型?！?〕被試驗(yàn)處理劑和或探針覆蓋的病毒基因組高度保守片段部發(fā)生的突變可能會導(dǎo)致檢測到的病毒含量偏低或者檢測不到病毒?！?〕HCVRNA的定量取決于樣本中存在的病毒顆粒數(shù)，而這會受到樣本收集方法，病人因素〔如年齡，是否存在病癥〕和/或感染階段等因素的影響。9.【產(chǎn)品性能指標(biāo)】詳述以下性能指標(biāo)：評估方法、數(shù)據(jù)、結(jié)果〔2〕最低檢出限及定量限：說明試劑不同樣本類型的最低檢出濃度和最低定量濃度，簡單介紹最低檢出限/定量限確實(shí)定方法以及對最低檢出限/定量限驗(yàn)證所采用的基因型。〔3〕精細(xì)度：精細(xì)度參考品的組分、濃度及評價(jià)標(biāo)準(zhǔn)、評價(jià)結(jié)果?！?〕線性圍：確定線性圍的方法、濃度圍、相關(guān)系數(shù)等信息?！?〕對不同基因型的覆蓋：驗(yàn)證該試劑對HCV不同基因型的檢測效果?！?〕特異性：穿插反響：易產(chǎn)生穿插反響的其他病原體核酸的驗(yàn)證情況，建議以列表的方式表示經(jīng)過穿插反響驗(yàn)證的病原體名稱、型別、濃度等信息。干擾物質(zhì)：樣本中常見干擾物質(zhì)對檢測結(jié)果的影響，如血紅蛋白、甘油三酯、膽紅素等，應(yīng)注明可承受的最高限值。藥物影響：常用抗病毒藥物、干擾素等對檢測結(jié)果的影響，如未進(jìn)展相關(guān)研究也應(yīng)提供相關(guān)警示說明?！?〕臨床比照試驗(yàn)研究：簡要介紹比照試劑〔方法〕的信息、所采用的統(tǒng)計(jì)學(xué)方法及統(tǒng)計(jì)分析結(jié)果?！颈揪眄氈繎?yīng)至少包括以下容：〔1〕由于本試驗(yàn)涉及到病毒RNA的提取及PCR擴(kuò)增，應(yīng)小心防止試劑和擴(kuò)增反響混合物受到污染。應(yīng)推薦定期監(jiān)測實(shí)驗(yàn)室擴(kuò)增產(chǎn)物存在的方法及步驟?！?〕應(yīng)提示RNA提取擴(kuò)增過程中的本卷須知〔3〕有關(guān)人源組分〔如有〕的警告，如：試劑盒校準(zhǔn)品、質(zhì)控品或其他可能含有人源物質(zhì)的組分，雖已通過乙肝炎外表抗原〔HbsAg〕、人類免疫缺陷病毒抗體〔抗-HIV1/2〕、丙型肝炎抗體〔抗-HCV〕等工程的檢測為陰性，但截至目前，沒有任何一項(xiàng)檢測可以確保絕對平安，故仍應(yīng)將這些組分作為潛在傳染源對待。提示對于潛在傳染源的處理方式?！?〕對于試劑中其他組分可能涉及到的潛在危險(xiǎn)的提示，如防腐劑如有疊氮鈉等的風(fēng)險(xiǎn)警示及處理方式?！?〕臨床實(shí)驗(yàn)室應(yīng)嚴(yán)格按照?臨床基因擴(kuò)增實(shí)驗(yàn)室工作規(guī)?配備設(shè)備及操作人員，應(yīng)嚴(yán)格按照說明書要求進(jìn)展操作?！财摺钞a(chǎn)品技術(shù)要求擬定產(chǎn)品技術(shù)要求應(yīng)符合?體外診斷試劑注冊管理方法?〔總局令第4號〕、?體外診斷試劑注冊申報(bào)資料要求及說明?〔食品藥品監(jiān)視管理總局公告2021年第44號〕和?醫(yī)療器械產(chǎn)品技術(shù)要求編寫指導(dǎo)原那么?〔食品藥品監(jiān)視管理總局通告2021年第9號〕的相關(guān)要求。另外，對于第三類產(chǎn)品，應(yīng)參考?中國生物制品規(guī)程?〔現(xiàn)行版〕，將擬申報(bào)產(chǎn)品的主要原材料、生產(chǎn)工藝及半成品檢定等容作為附錄附于技術(shù)要求正文后，并在正文的“產(chǎn)品分類〞項(xiàng)中引出該附錄容。附錄中應(yīng)將待測靶基因區(qū)域，引物/探針來源及驗(yàn)證情況，各種酶的來源、特性以驗(yàn)證情況等信息的重點(diǎn)容予以明確。HCVRNA定量檢測試劑的注冊檢測應(yīng)符合相應(yīng)參考品檢測要求，產(chǎn)品的性能指標(biāo)應(yīng)與說明書容相符。如果擬申報(bào)試劑已有相應(yīng)的/行業(yè)標(biāo)準(zhǔn)發(fā)布，那么企業(yè)標(biāo)準(zhǔn)的要求不得低于上述標(biāo)準(zhǔn)要求?？蓞⒖?YY/T1182-2021核酸擴(kuò)增用檢測試劑（盒）??！舶恕匙詸z測根據(jù)總局第5號令要求，首次申請注冊的第三類產(chǎn)品應(yīng)在食品藥品監(jiān)視管理局認(rèn)可的、具有相應(yīng)承檢圍的醫(yī)療器械檢測機(jī)構(gòu)進(jìn)展連續(xù)三個(gè)生產(chǎn)批次樣品的注冊檢測。如已有相應(yīng)參考品，在注冊檢測時(shí)應(yīng)采用參考品進(jìn)展檢測并符合要求。〔九〕臨床評價(jià)資料研究方法對于該類試劑已有同類產(chǎn)品上市，按照法規(guī)要求選擇境已批準(zhǔn)上市、臨床普遍認(rèn)為質(zhì)量較好的同類產(chǎn)品作為比照試劑，采用擬申報(bào)產(chǎn)品〔以下稱考核試劑〕與之進(jìn)展比照試驗(yàn)研究，證明本品與已上市產(chǎn)品等效或優(yōu)于已上市產(chǎn)品。建議預(yù)實(shí)驗(yàn)選擇兩種比照試劑同時(shí)進(jìn)展驗(yàn)證，考察其誤差圍，選擇其中一種作為正式試驗(yàn)的比照試劑，另一種可作為第三方試劑〔建議在此對第三方試劑的選擇原那么作簡單介紹〕。比照試劑的適用樣本類型及檢測圍應(yīng)能夠涵蓋考核試劑的樣本及檢測性能要求，以免造成考核試劑局部性能無法驗(yàn)證的情況。比照試驗(yàn)結(jié)果不一致〔檢測值差異較大〕的樣本應(yīng)采用公認(rèn)較好的第三方試劑進(jìn)展驗(yàn)證。強(qiáng)調(diào)：臨床試驗(yàn)研究應(yīng)使用說明書配套使用的提取純化試劑盒，并在方案中明示。臨床研究單位的選擇建議申請人在選擇臨床研究單位時(shí)，應(yīng)考慮到各試驗(yàn)單位之間的平行性和一定的地域代表性，臨床研究單位應(yīng)具有分子生物學(xué)方法檢測的優(yōu)勢，實(shí)驗(yàn)操作人員應(yīng)有足夠的時(shí)間熟悉檢測系統(tǒng)的各環(huán)節(jié)〔儀器、試劑、質(zhì)控及操作程序等〕，熟悉評價(jià)方案。在整個(gè)實(shí)驗(yàn)中，考核試劑和比照試劑都應(yīng)處于有效的質(zhì)量控制下，最大限度保證試驗(yàn)數(shù)據(jù)的準(zhǔn)確性及可重復(fù)性。臨床試驗(yàn)方案臨床試驗(yàn)實(shí)施前，研究人員應(yīng)從流行病學(xué)、統(tǒng)計(jì)學(xué)、臨床醫(yī)學(xué)、檢驗(yàn)醫(yī)學(xué)等多方面考慮，設(shè)計(jì)科學(xué)合理的臨床研究方案。各臨床研究機(jī)構(gòu)的方案設(shè)置應(yīng)根本一致，且保證在整個(gè)臨床試驗(yàn)過程中遵循預(yù)定的方案實(shí)施，不可隨意改動(dòng)。整個(gè)試驗(yàn)過程應(yīng)在臨床研究機(jī)構(gòu)的實(shí)驗(yàn)室并由本實(shí)驗(yàn)室的技術(shù)人員操作完成，申報(bào)單位的技術(shù)人員除進(jìn)展必要的技術(shù)指導(dǎo)外，不得隨意干預(yù)實(shí)驗(yàn)進(jìn)程，尤其是數(shù)據(jù)收集過程。試驗(yàn)方案中應(yīng)確定嚴(yán)格的病例納入/排除標(biāo)準(zhǔn)，任何已經(jīng)入選的病例再被排除出臨床研究都應(yīng)記錄在案并明確說明原因。在試驗(yàn)操作過程中和判定試驗(yàn)結(jié)果時(shí)應(yīng)采用盲法以保證試驗(yàn)結(jié)果的客觀性。各研究單位選用的比照試劑應(yīng)一致，以便進(jìn)展合理的匯總統(tǒng)計(jì)學(xué)分析，同時(shí)方案中應(yīng)明確寫明對測定結(jié)果不符的樣本進(jìn)展確認(rèn)的第三方試劑或方法。病例選擇及樣本類型臨床試驗(yàn)樣本數(shù)應(yīng)不少于500例，其中應(yīng)主要選擇丙型肝炎患者樣本〔陽性樣本〕，不少于450例。在病例選擇時(shí)應(yīng)考慮到地域性的差異，以1b及2a型為主，其他聲稱的可覆蓋基因型不少于10例，應(yīng)注重不同藥物治療的丙型肝炎患者。陽性樣本應(yīng)覆蓋試劑線性圍，均勻分布高、中、低值。建議選擇不少于50例的陰性樣本進(jìn)展比對試驗(yàn)，陰性樣本主要考慮可能存在的穿插反響情況，應(yīng)選擇其他類病毒性肝炎、其他病毒感染〔如HIV病毒〕以及其他良性或惡性肝臟疾病患者〔如，肝細(xì)胞癌、酒精肝、非酒精性脂肪肝、肝硬化、自身免疫性肝炎〕，以從臨床角度考察其特異性。臨床試驗(yàn)中所涉及的樣本類型應(yīng)為實(shí)際臨床檢測中常用的樣本類型。對于同時(shí)能夠檢測血清和血漿樣本的試劑，在滿足一種樣本類型不少于500例的前提下，可增加對另一種臨床試驗(yàn)樣本數(shù)至少為200例，并在至少2家〔含2家〕臨床試驗(yàn)機(jī)構(gòu)完成的臨床試驗(yàn)；或應(yīng)對至少50例同一丙型肝炎患者分別采集的血清和血漿樣本進(jìn)展比對試驗(yàn)研究，陽性樣本〔不少于30例〕應(yīng)包括強(qiáng)、中、弱陽性。應(yīng)對臨床樣本進(jìn)展說明：新鮮或者為庫存樣本，臨床研究應(yīng)以新鮮樣本為主。稀有基因型可使用回憶性樣本?；蛐痛_認(rèn)可使用分型試劑或測序方法。統(tǒng)計(jì)學(xué)分析對臨床試驗(yàn)結(jié)果的統(tǒng)計(jì)應(yīng)選擇適宜的統(tǒng)計(jì)方法，對于本類產(chǎn)品比照實(shí)驗(yàn)的等效性研究，常用相關(guān)性、線性回歸對log10滴度