基因工程概念

細(xì)胞工程基本概念1、 細(xì)胞工程是指應(yīng)用細(xì)胞生物學(xué)和分子生物學(xué)的方法，通過類似于工程學(xué)的步驟，在細(xì)胞整體水平或細(xì)胞器水平上，按照人們的意愿來改變細(xì)胞內(nèi)的遺傳物質(zhì)以獲得新型生物或一定細(xì)胞產(chǎn)品的一門綜合性科學(xué)技術(shù)。2、 離體繁殖：即植物離體無性繁殖，也叫微型繁殖，是指利用組織培養(yǎng)方法進(jìn)行植物離體培養(yǎng)，在短期內(nèi)獲得大量遺傳性一致個體的方法。由離體無性繁殖獲得的植株稱為試管苗，以區(qū)別于種子苗、嫁接苗和打插苗。3、 細(xì)胞雜交：又稱細(xì)胞融合，是指兩個或兩個以上的細(xì)胞融合形成一個細(xì)胞的過程。4、 外植體：植物組織培養(yǎng)中用來進(jìn)行無菌培養(yǎng)的離體材料，可以是器官、組織、細(xì)胞和原生質(zhì)體等。5、 花藥培養(yǎng)：把發(fā)育到一定階段的花藥接種在人工培養(yǎng)基上，使其發(fā)育和分化成為植株的過程。6、 胚胎培養(yǎng)：植物胚胎培養(yǎng)是指對植物的胚（種胚）及胚器官（如子房,胚珠）進(jìn)行人工離體無菌培養(yǎng)，使其發(fā)育成幼苗的技術(shù)。8、 原代細(xì)胞系:凡是來源于胚胎、組織器官及外周血，經(jīng)特殊分離方法制備而來的原初培養(yǎng)的細(xì)胞稱為原代細(xì)胞，若能穩(wěn)定生長傳至10~20代以上的細(xì)胞可確立為細(xì)胞系。9、 脫分化：培養(yǎng)條件下使一個已分化的細(xì)胞回復(fù)到原始無分化狀態(tài)或分生細(xì)胞狀態(tài)的過程就是細(xì)胞脫分化。10細(xì)胞分化：是指胚胎細(xì)胞分裂后未定型的細(xì)胞，在形態(tài)和生化組成上向?qū)Ｒ恍曰蛱禺愋苑较蚍只?，或由原來較簡單具有可塑狀態(tài)向異樣化穩(wěn)定狀態(tài)進(jìn)行分化的過程。11互補(bǔ)選擇：不考12懸浮培養(yǎng)是將單個游離細(xì)胞或小細(xì)胞團(tuán)懸浮在液體培養(yǎng)基中進(jìn)行培養(yǎng)增殖的技術(shù)。13m非對稱融合：利用物理或化學(xué)方法使某親本的核或細(xì)胞質(zhì)失活后再進(jìn)行融合。14再分化：已經(jīng)脫分化的細(xì)胞在一定條件下，又可經(jīng)過愈傷組織或胚狀體再分化出根和芽，形成完整植株，這一過程叫作再分化。15逆境反應(yīng)：細(xì)胞的逆境反應(yīng)一般是快速地產(chǎn)生涉及誘發(fā)不同代謝途徑（例如苯基丙烷途徑的酶系統(tǒng)），結(jié)果形成了植物抗毒素和如木質(zhì)素一類的結(jié)構(gòu)多聚物。16器官發(fā)生：培養(yǎng)條件下的組織或細(xì)胞團(tuán)（愈傷組織）分化形成不定根、或不定芽等器官的過程。18胚性細(xì)胞：離體培養(yǎng)中通常把具有類似胚細(xì)胞性質(zhì)、容易調(diào)控分化表達(dá)全能性的一類細(xì)胞成為胚性細(xì)胞。19看護(hù)培養(yǎng)：用一塊愈傷組織或植物離體組織看護(hù)單細(xì)胞使其生長增殖的一種單細(xì)胞培養(yǎng)方法。21原生質(zhì)體：指除去細(xì)胞壁的細(xì)胞或是說一個被質(zhì)膜包圍的裸露細(xì)胞。22不定芽：不是從葉腋或枝頂發(fā)出，而是從葉子、根上或從樹干上發(fā)出的芽。23早熟萌發(fā)：幼胚接種后，離體胚不繼續(xù)胚性生長，而是在培養(yǎng)基上迅速萌發(fā)成幼苗，通常稱之為早熟萌發(fā)。（未經(jīng)完成正常的胚胎發(fā)育過程而形成幼苗的現(xiàn)象叫早熟萌發(fā)）。24對稱融合：在細(xì)胞融合過程中，兩個完整的細(xì)胞原生質(zhì)體或細(xì)胞的核或質(zhì)全部融合的過程。26體細(xì)胞無性系：把由任何形式的細(xì)胞培養(yǎng)所產(chǎn)生的植株統(tǒng)稱為體細(xì)胞無性系。27接觸抑制：細(xì)胞在生長過程中達(dá)到相互接觸時停止分裂的現(xiàn)象。28愈傷組織：脫分化后的細(xì)胞，經(jīng)過細(xì)胞分裂，產(chǎn)生無組織結(jié)構(gòu)、無明顯極性的、松散的細(xì)胞團(tuán)。29花粉培養(yǎng)：也叫小孢子培養(yǎng)（microsporeculture）,是從花藥中分離出花粉粒,使之成為分散的或游離的狀態(tài)，通過培養(yǎng)使花粉粒脫分化，進(jìn)而發(fā)育成完整植株的過程。31固定化培養(yǎng)是將被培養(yǎng)生物體固定在一定的培養(yǎng)基上進(jìn)行培養(yǎng)的過程。便于篩選所需的特定類型，或達(dá)到分離得目的。32核質(zhì)體：由原生質(zhì)膜和薄層細(xì)胞質(zhì)包圍細(xì)胞核形成的小原生質(zhì)體，也稱為微小原生質(zhì)體。33胚性發(fā)育：幼胚接種到培養(yǎng)基上以后，仍然按照在活體內(nèi)的發(fā)育方式發(fā)育，最后形成成熟胚（有時甚至可能類似種子），然后再按種子萌發(fā)途徑出苗形成完整植株，這種途徑發(fā)育的幼胚一般一個幼胚將來就是一個植株。34次生產(chǎn)物:是由次生代謝產(chǎn)生的一類細(xì)胞生命活動或植物生長發(fā)育正常運行的非必需的小分子有機(jī)化合物，其產(chǎn)生和分布通常有種屬、器官、組織以及生長發(fā)育時期的特異性。35離體受精：指在離體及人工控制的環(huán)境下，精卵細(xì)胞融合形成合子的過程。它包括配子的分離、雌雄配子融合和合子培養(yǎng)三個階段。36極性：是指植物的器官、組織、甚至單個細(xì)胞在不同的軸向上存在的某種形態(tài)結(jié)構(gòu)以及生理生化上的梯度差異。37胞質(zhì)體：不含細(xì)胞核而僅含有部分細(xì)胞質(zhì)的原生質(zhì)體。38體細(xì)胞胚：離體培養(yǎng)下沒有經(jīng)過受精過程，但經(jīng)過了胚胎發(fā)育過程所形成的胚的類似物（不管培養(yǎng)的細(xì)胞是體細(xì)胞還是生殖細(xì)胞），統(tǒng)稱為體細(xì)胞胚或胚狀體。39繼代培養(yǎng)：亦稱傳代培養(yǎng)，指從原代培養(yǎng)的細(xì)胞繼續(xù)轉(zhuǎn)接培養(yǎng)稱為繼代培養(yǎng)。（繼代培養(yǎng)是指愈傷組織在培養(yǎng)基上生長一段時間后， 營養(yǎng)物枯竭，水分散失，并已經(jīng)積累了一些代謝產(chǎn)物，此時需要將這些組織轉(zhuǎn)移到新的培養(yǎng)基上，這種轉(zhuǎn)移稱為繼代培養(yǎng)或傳代培養(yǎng)。）40人工種子：是指植物離體培養(yǎng)中產(chǎn)生的胚狀體（包括體細(xì)胞胚和性細(xì)胞胚），包裹在含有養(yǎng)分和具有保護(hù)功能的物質(zhì)中，并在適宜條件下能夠發(fā)芽出苗的顆粒體。41有限細(xì)胞系：原代細(xì)胞經(jīng)第一次傳代后，形成的細(xì)胞群體，即稱為細(xì)胞系，如細(xì)胞系的生存期限有限，則稱之為有限細(xì)胞系（即具有增殖能力，類型均勻的培養(yǎng)細(xì)胞）。43干細(xì)胞：是動物體內(nèi)具有分化潛能，并能自我更新的細(xì)胞，分為胚胎十細(xì)胞和組織十細(xì)胞。胚胎干細(xì)胞來自囊胚期的細(xì)胞團(tuán)，屬于全能干細(xì)胞，每個細(xì)胞可以發(fā)育成為完整的個體。組織十細(xì)胞存在于成體組織中，屬單能或多能十細(xì)胞，可以定向分化為一種或幾種不同的組織。45組織培養(yǎng)：細(xì)胞培養(yǎng)和組織培養(yǎng)都屬于體外培養(yǎng)，是指生物細(xì)胞和組織在離體條件下的生長和增殖。是細(xì)胞工程的最基本技術(shù)。46細(xì)胞同步化：是指同一懸浮培養(yǎng)體系的所有細(xì)胞都同時通過細(xì)胞周期的某一特定時期。47間接篩選：借助于與突變體表現(xiàn)型有關(guān)的性狀作為選擇指標(biāo)的篩選方法。48直接篩選：直接篩選法是在設(shè)計的選擇條件下，能使培養(yǎng)細(xì)胞或再生個體獲得直接感官上的差異，因此能將突變個體和非突變個體分離。（利用在選擇條件下細(xì)胞突變體可優(yōu)先生長的特點進(jìn)行篩選。）49細(xì)胞全能性：是指個體某個器官或組織已經(jīng)分化的細(xì)胞再生成完整個體的遺傳潛力。50體細(xì)胞雜交：是指兩個離體細(xì)胞通過一定誘導(dǎo)技術(shù)使質(zhì)膜接觸而融合在一起隨后導(dǎo)致兩個細(xì)胞核物質(zhì)融合的技術(shù)。植物體細(xì)胞雜交則是指除去細(xì)胞壁的原生質(zhì)體融合。1培養(yǎng)基、外植體、玻璃器皿、金屬用具以及外植體各選擇什么滅菌方法？常用的物理或化學(xué)滅菌方法？答：培養(yǎng)基：濕熱滅菌；外植體：消毒劑滅菌；玻璃器皿：干熱滅菌； 金屬用具：干熱滅菌物理滅菌方法：干熱滅菌、濕熱滅菌、過濾滅菌、射線滅菌、火焰灼燒滅菌；化學(xué)滅菌方法：消毒劑滅菌2.建立懸浮細(xì)胞系的關(guān)鍵技術(shù)有哪些？群體生長規(guī)律？及細(xì)胞在各個時期的生長特點？（1） 分離單細(xì)胞（2） a懸浮培養(yǎng)物分散性良好，細(xì)胞團(tuán)較小，一般在30?50個細(xì)胞以下，在實際培養(yǎng)中很少有完全由單細(xì)胞組成的植物細(xì)胞懸浮系。b均一性好，細(xì)胞形狀和細(xì)胞團(tuán)大小大致相同。懸浮系外觀為大小均一的小顆粒，培養(yǎng)基清澈透亮，細(xì)胞色澤呈鮮艷的乳白或淡黃色。c細(xì)胞生長迅速，懸浮細(xì)胞的生長量一般2?3天甚至更短時間便可增加一倍。⑶細(xì)胞生長各個時期的特點：滯后期（