食用菌菌種標(biāo)準(zhǔn)使用指南

食用菌菌種標(biāo)準(zhǔn)

使用指南

1/48金科玉律種子法食用菌菌種管理措施黑木耳菌種GB19169-2023香菇菌種GB19170-2023雙孢蘑菇菌種GB19171-2023平菇菌種GB19172-2023杏鮑菇和白靈菇菌種NY862-20232/48一、術(shù)語(yǔ)和定義我國(guó)食用菌菌種繁育體系菌種culture生長(zhǎng)在合適基質(zhì)上具結(jié)實(shí)性菌絲培養(yǎng)物，包括母種、原種和栽培種。3/48一、術(shù)語(yǔ)和定義母種stockculture經(jīng)多種辦法選育得到具有結(jié)實(shí)性菌絲體純培養(yǎng)物及其繼代培養(yǎng)物，也稱(chēng)一級(jí)種、試管種。

4/48一、術(shù)語(yǔ)和定義原種motherspawn由母種移植、擴(kuò)大培養(yǎng)而成菌絲體純培養(yǎng)物。也稱(chēng)二級(jí)種。

5/48一、術(shù)語(yǔ)和定義栽培種spawn由原種移植、擴(kuò)大培養(yǎng)而成菌絲體純培養(yǎng)物。栽培種只能用于栽培，不可再次擴(kuò)大繁殖菌種。也稱(chēng)三級(jí)種。

6/48一、術(shù)語(yǔ)和定義拮抗現(xiàn)象antagonism具有不一樣遺傳基因菌落間互相抑制產(chǎn)生不生長(zhǎng)區(qū)帶或形成不一樣形式線(xiàn)形邊緣現(xiàn)象。

7/48一、術(shù)語(yǔ)和定義角變sectoring因菌絲體局部變異或感染病毒而造成菌絲變細(xì)、生長(zhǎng)遲緩、菌絲體表面特性成角狀異?，F(xiàn)象。8/48一、術(shù)語(yǔ)和定義高溫抑制線(xiàn)（高溫圈）high-temperaturedline食用菌菌種在培養(yǎng)過(guò)程中受高溫和通氣不足不良影響，培養(yǎng)物出現(xiàn)圈狀發(fā)黃、發(fā)暗或菌絲變稀弱現(xiàn)象。9/48一、術(shù)語(yǔ)和定義生物學(xué)效率biologicalefficiency單位數(shù)量培養(yǎng)料風(fēng)干物質(zhì)所培養(yǎng)產(chǎn)生出子實(shí)體或菌絲體質(zhì)量（鮮重），常用百分?jǐn)?shù)表達(dá)。如風(fēng)干料100千克產(chǎn)生了新鮮子實(shí)體50千克，即為生物學(xué)效率50％。

種性charactersofvariety指食用菌品種特性。一般包括生理特性、農(nóng)藝性狀和商品性狀。10/48二、檢測(cè)內(nèi)容

容器感官檢查微生物學(xué)檢查菌絲生長(zhǎng)速度母種農(nóng)藝性狀和商品性狀11/48二、檢測(cè)內(nèi)容

母種質(zhì)量要求容器：使用玻璃試管和棉塞試管18mm×180mm或20mm×200mm棉塞要使用梳棉，不應(yīng)使用脫脂棉。12/48二、檢測(cè)內(nèi)容

母種質(zhì)量要求感官要求：項(xiàng)目要求容器完整，無(wú)損棉塞或無(wú)棉塑料蓋干燥、潔凈、松緊適度，能滿(mǎn)足透氣和濾菌要求培養(yǎng)基灌入量為試管總?cè)莘e四分之一至五分之一培養(yǎng)基斜面長(zhǎng)度頂端距棉塞40mm－50mm接種量（3-5）mm×（3-5）mm菌種外觀菌絲生長(zhǎng)量長(zhǎng)滿(mǎn)斜面菌絲體特性雪白濃密、棉毛狀菌絲體表面均勻、平整、無(wú)角變菌絲分泌物無(wú)黑木耳黃褐色色素菌落邊緣整潔雜菌菌落無(wú)斜面背面外觀培養(yǎng)基不干縮，顏色均勻、無(wú)暗斑、無(wú)色素氣味有特有香味，無(wú)酸、臭、霉等異味13/48二、檢測(cè)內(nèi)容

項(xiàng)目要求備注菌絲生長(zhǎng)狀態(tài)粗壯、豐滿(mǎn)、均勻黑木耳菌絲粗細(xì)不均，常出現(xiàn)根狀分枝鎖裝聯(lián)合有雙孢蘑菇?jīng)]鎖狀聯(lián)合雜菌無(wú)14/48二、檢測(cè)內(nèi)容

母種質(zhì)量要求：菌絲生長(zhǎng)速度：在PDA上，在適溫下，長(zhǎng)滿(mǎn)斜面10d~14d。香菇：24±1℃10d~14d平菇：25±2℃6d~8d黑木耳：26±2℃10d~15d雙孢蘑菇：24±1℃15d~20d母種栽培性狀：供種單位，需經(jīng)試驗(yàn)確證農(nóng)藝性狀和商品性等種性合格后，方可用于擴(kuò)大繁殖或發(fā)售。產(chǎn)量性狀：平菇生物學(xué)效率不低于10％雙孢蘑菇需進(jìn)行EST同工酶類(lèi)型判定，判定與對(duì)照相同生物學(xué)效率不低于3％.15/48二、檢測(cè)內(nèi)容

原種質(zhì)量要求容器：使用650ml-750ml，耐126℃高溫?zé)o色或近無(wú)色玻璃菌種瓶，或850ml耐126℃高溫白色半透明符合GB9678衛(wèi)生要求塑料菌種瓶；或15cm×28cm耐126℃高溫符合GB9688衛(wèi)生要求聚丙烯塑料袋；棉塞要使用梳棉，不應(yīng)使用脫脂棉。也能夠使用能滿(mǎn)足濾菌和透氣要求無(wú)棉塑料蓋替代棉塞16/48二、檢測(cè)內(nèi)容原種質(zhì)量要求感官要求：項(xiàng)目要求容器完整，無(wú)損棉塞或無(wú)棉塑料蓋干燥、潔凈、松緊適度，能滿(mǎn)足透氣和濾菌要求培養(yǎng)基上表面距瓶（袋）口距離50mm±5mm接種量（4－6）瓶（袋），≥12mm×15mm菌種外觀菌絲生長(zhǎng)量長(zhǎng)滿(mǎn)容器菌絲體特性雪白濃密、生長(zhǎng)健旺培養(yǎng)物表面菌絲體生長(zhǎng)均勻、無(wú)角變、無(wú)高溫抑制線(xiàn)培養(yǎng)基及菌絲體緊貼瓶壁、無(wú)干縮培養(yǎng)基表面分泌物無(wú)，允許有少許深黃色至棕黃色水珠雜菌菌落無(wú)拮抗現(xiàn)象無(wú)子實(shí)體原基無(wú)允許有少許膠質(zhì)、琥珀色顆粒狀耳芽氣味有特有香味，無(wú)酸、臭、霉等異味17/48原基primordium

尚未分化原始子實(shí)體組織團(tuán)。18/48項(xiàng)目要求備注菌絲生長(zhǎng)狀態(tài)粗壯、豐滿(mǎn)、均勻黑木耳菌絲粗細(xì)不均，常出現(xiàn)根狀分枝鎖裝聯(lián)合有雙孢蘑菇?jīng)]鎖狀聯(lián)合雜菌無(wú)原種質(zhì)量要求和母種質(zhì)量要求相同微生物學(xué)要求：19/48二、檢測(cè)內(nèi)容

原種質(zhì)量要求：菌絲生長(zhǎng)速度：在合適培養(yǎng)基上，在適溫（23±2℃）下，長(zhǎng)滿(mǎn)容器35d-50d。香菇（23±2℃）35d-50d。平菇（25±2℃）25d-30d。黑木耳（26±2℃）40d-45d。雙孢蘑菇（24±1℃）≤45d。栽培性狀（無(wú)），與母種不一樣20/48二、檢測(cè)內(nèi)容

栽培種質(zhì)量要求：容器：能夠使用原種要求使用容器；或≤17cm×35cm耐126℃高溫符合GB9688衛(wèi)生要求聚丙烯塑料袋；21/48二、檢測(cè)內(nèi)容

栽培種質(zhì)量要求感官要求：項(xiàng)目要求容器完整，無(wú)損棉塞或無(wú)棉塑料蓋干燥、潔凈、松緊適度，能滿(mǎn)足透氣和濾菌要求培養(yǎng)基上表面距瓶（袋）口距離50mm±5mm接種量（30－50）瓶（袋）菌種外觀菌絲生長(zhǎng)量長(zhǎng)滿(mǎn)容器菌絲體特性雪白濃密、生長(zhǎng)健旺培養(yǎng)物表面菌絲體生長(zhǎng)均勻、無(wú)角變、無(wú)高溫抑制線(xiàn)培養(yǎng)基及菌絲體緊貼瓶壁、無(wú)干縮培養(yǎng)基表面分泌物無(wú)，允許有少許深黃色至棕黃色水珠雜菌菌落無(wú)拮抗現(xiàn)象無(wú)子實(shí)體原基無(wú)允許有少許淺褐色至黑褐色菊花狀或不規(guī)則膠質(zhì)耳芽氣味有特有香味，無(wú)酸、臭、霉等異味22/48二、檢測(cè)內(nèi)容

栽培種質(zhì)量要求和母種、原種質(zhì)量要求相同微生物學(xué)要求：項(xiàng)目要求備注菌絲生長(zhǎng)狀態(tài)粗壯、豐滿(mǎn)、均勻黑木耳菌絲粗細(xì)不均，常出現(xiàn)根狀分枝鎖裝聯(lián)合有雙孢蘑菇?jīng)]鎖狀聯(lián)合雜菌無(wú)23/48二、檢測(cè)內(nèi)容

栽培種質(zhì)量要求：菌絲生長(zhǎng)速度：在合適培養(yǎng)基上，在適溫（23±2℃）下，長(zhǎng)滿(mǎn)容器40d-50d。栽培性狀（無(wú)），與母種不一樣，和原種相同24/48三、抽樣

質(zhì)檢部門(mén)抽樣應(yīng)具有代表性；母種按品種、培養(yǎng)條件、接種時(shí)間分批編號(hào)；原種、栽培種按菌種起源、制種辦法和接種時(shí)間分批編號(hào)。按批隨機(jī)抽取被檢樣品母種、原種、栽培種抽樣量10％、5％、1％抽樣數(shù)量不得少于10支(瓶、袋)超出100支(瓶、袋)，可進(jìn)行兩級(jí)抽樣.25/48四、試驗(yàn)辦法感官檢查微生物學(xué)檢查菌絲生長(zhǎng)速度母種農(nóng)藝性狀和商品性狀留樣26/48四、試驗(yàn)辦法感官檢查肉眼觀測(cè)必要時(shí)使用5×放大鏡鼻嗅27/48母種感官檢查辦法（一）1.棉塞或無(wú)棉塑料蓋檢測(cè)辦法肉眼觀測(cè)棉塞材料、潔凈度和干燥是否，手捏棉塞是否松緊適度，是否有彈性,手提棉塞外露部分，棉塞應(yīng)不松動(dòng)、不脫落。2.培養(yǎng)基灌入量按常規(guī)做培養(yǎng)基斜面辦法目測(cè)判斷培養(yǎng)基灌入量，應(yīng)為試管總?cè)莘e四分之一至五分之一。3.斜面長(zhǎng)度用游標(biāo)卡尺測(cè)量斜面最上端量起至棉塞最底部距離（mm）。28/48母種感官檢查（二）4.接種塊大?。ń臃N量）

在無(wú)菌條件下挑出接種塊,用游標(biāo)卡尺測(cè)量接種菌絲面長(zhǎng)和寬，用mm×mm表達(dá)，保存整數(shù)位。5.菌種外觀檢測(cè)5.1菌絲生長(zhǎng)量觀測(cè)菌絲是否長(zhǎng)滿(mǎn)整個(gè)斜面。5.2菌絲體特性肉眼觀測(cè)菌絲體顏色、密集程度，菌絲體是否舒展、旺健及其形態(tài)（棉毛狀、細(xì)羊毛狀等）。29/48母種感官檢查（三）5.3菌絲體表面肉眼觀測(cè)菌絲體是否生長(zhǎng)均勻、平整，有沒(méi)有角變現(xiàn)象。5.4菌絲分泌物

肉眼觀測(cè)有沒(méi)有分泌物，如有則統(tǒng)計(jì)分泌物顏色和數(shù)量。5.5菌落邊緣肉眼觀測(cè)菌落邊緣是否整潔。5.6雜菌菌落用放大鏡觀測(cè)菌絲體顏色和外觀形態(tài)，根據(jù)顏色和形態(tài)是否有差異判定是否有雜菌菌落。30/48母種感官檢查（四）5.7蟲(chóng)（螨）體用放大鏡觀測(cè)培養(yǎng)物上有沒(méi)有蟲(chóng)（螨）體。6.斜面背面外觀根據(jù)培養(yǎng)基是否與試管相脫離判斷是否干縮；在充足光線(xiàn)下，對(duì)著光源方向，觀測(cè)顏色是否均勻，有沒(méi)有色素和暗斑。7.氣味在無(wú)菌條件下打開(kāi)棉塞（或無(wú)棉塑料蓋），聞試管內(nèi)氣味是否正常。31/48菌種退化在母種階段體現(xiàn)1.菌落形態(tài)不正常，如本來(lái)菌落平展品種體現(xiàn)為菌落緊皺；絲狀氣生菌絲變?yōu)檠┗?；氣生菌絲變多或變少甚至沒(méi)有了；菌絲色澤變化，如多數(shù)種和品種在母種斜面上菌絲呈白色，退化了品種常展現(xiàn)微黃色、淺褐色或其他色澤，或由鮮亮變暗淡；2.菌絲倒伏，生長(zhǎng)勢(shì)弱；3.長(zhǎng)速變慢,過(guò)快或過(guò)慢都是不正常；4.個(gè)體間長(zhǎng)速和長(zhǎng)相不均一；5.色素出現(xiàn)。多數(shù)食用菌菌種在母種階段不形成色素,假如出現(xiàn)色素,說(shuō)明品種退化嚴(yán)重。32/48四、試驗(yàn)辦法微生物學(xué)檢驗(yàn)菌絲生長(zhǎng)狀態(tài)和鎖狀聯(lián)適用≥10×40光學(xué)顯微鏡對(duì)培養(yǎng)物水封片進(jìn)行觀察，每一檢樣應(yīng)觀察不少于50個(gè)視野。細(xì)菌檢驗(yàn)：取少量疑有細(xì)菌污染培養(yǎng)物，按無(wú)菌操作接種于(營(yíng)養(yǎng)肉湯培養(yǎng)液)GB/T4789.28，25℃-28℃振蕩培養(yǎng)1d-2d，觀察培養(yǎng)液是否混濁。若混濁，則有細(xì)菌污染。霉菌檢驗(yàn)：取少量疑有霉菌污染培養(yǎng)物，按無(wú)菌操作接種于(PDA)GB/T4789.28，25℃-28℃培養(yǎng)5d-7d，菌落出現(xiàn)白色以外雜色者，或有異味者為霉菌污染。必要時(shí)進(jìn)行水封片進(jìn)行觀察。33/48菌絲生長(zhǎng)狀態(tài)取潔凈載波片，滴1滴無(wú)菌水，用無(wú)菌操作辦法挑取少許菌絲涂于水滴中，蓋上蓋玻片，置于10×40顯微鏡下觀測(cè)菌絲形態(tài)，是否粗壯、豐滿(mǎn)、均勻，是否有鎖狀聯(lián)合。每一檢樣應(yīng)檢查不少于50個(gè)視野。34/48鎖狀聯(lián)合35/48雜菌—細(xì)菌檢查根據(jù)不一樣菌種選擇適用辦法1.1在無(wú)菌條件下，挑取少許疑有細(xì)菌污染培養(yǎng)物接種至肉湯培養(yǎng)液中，于25~28℃振蕩培養(yǎng)1~2天，觀測(cè)培養(yǎng)液是否渾濁，若渾濁則有細(xì)菌污染，澄清透明為未污染細(xì)菌。1.2在無(wú)菌條件下，挑取可疑或有代表性樣品，接種于肉湯培養(yǎng)基斜面或平板，于25~28℃振蕩培養(yǎng)1~2天，觀測(cè)培養(yǎng)基斜面是否有細(xì)菌菌落長(zhǎng)出，有細(xì)菌菌落長(zhǎng)出者做顯微鏡檢查，確認(rèn)是細(xì)菌，則判定為細(xì)菌污染；不然為無(wú)細(xì)菌污染。36/48雜菌—霉菌檢查挑取少許可疑霉菌污染培養(yǎng)物或有代表性樣品接至PDA培養(yǎng)基中，于25~28℃培養(yǎng)4天，出現(xiàn)其他色澤菌落或其他形態(tài)菌落或有異味為霉菌污染物，必要時(shí)進(jìn)行水封片鏡檢。37/4838/48四、試驗(yàn)辦法菌絲生長(zhǎng)速度母種：PDA24℃±1℃原種和栽培種：要求培養(yǎng)基（24℃±1℃）計(jì)算長(zhǎng)滿(mǎn)天數(shù)。39/48母種生長(zhǎng)速度檢測(cè)辦法菌種不一樣,對(duì)母種生長(zhǎng)速度測(cè)定方法和要求亦不一樣：選擇A.1或A.2培養(yǎng)基配方，配制后按菌種生產(chǎn)標(biāo)準(zhǔn)要求分裝于試管（18×180mm或20×200mm）中，121℃滅菌30min，取出擺成斜面或制備培養(yǎng)基平板（90mm），冷卻，隨機(jī)抽取10~20支斜面或3個(gè)培養(yǎng)基平板置于28℃±2℃培養(yǎng)二十四小時(shí)，確認(rèn)滅菌良好后使用。將待檢菌種接種于PDA培養(yǎng)基或CPDA培養(yǎng)基上，接種塊（3~5）×（3~5）mm，置于斜面中央偏下或培養(yǎng)皿中央，恒溫培養(yǎng)箱適宜條件下培養(yǎng)，計(jì)算長(zhǎng)滿(mǎn)斜面天數(shù)。三個(gè)反復(fù)。40/48四、試驗(yàn)辦法母種農(nóng)藝性狀和商品性狀將被檢母種制成原種。要求培養(yǎng)基；菌棒45根接種后，分三組進(jìn)行管理做好栽培統(tǒng)計(jì)與該母種出發(fā)菌株設(shè)為對(duì)照黑木耳含水量62％±2％雙孢蘑菇含水量68％360kg，分3組，每組2m2雙孢蘑菇酯酶同工酶母種長(zhǎng)滿(mǎn)所需時(shí)間總產(chǎn)原種長(zhǎng)滿(mǎn)所需時(shí)間單產(chǎn)菌棒長(zhǎng)滿(mǎn)所需時(shí)間單菇質(zhì)量第一潮產(chǎn)量最高時(shí)間生物學(xué)效率第二潮產(chǎn)量最高時(shí)間菇形、質(zhì)地、色澤產(chǎn)菇盛期連續(xù)時(shí)間菇蓋直徑、厚度、柄長(zhǎng)、柄直徑41/48四、試驗(yàn)辦法母種農(nóng)藝性狀和商品性狀判定：以時(shí)間計(jì)項(xiàng)目，不得推遲5d（含5d）產(chǎn)量顯著低于對(duì)照；子實(shí)體形態(tài)顯著與對(duì)照不一樣或畸形42/48四、試驗(yàn)辦法留樣各級(jí)菌種均要留樣備查留樣數(shù)量：3-5支（瓶），于4℃～6℃時(shí)間：香菇：母種、原種7個(gè)月；栽培種5個(gè)月平菇：母種5個(gè)月、原種4個(gè)月；栽培種2個(gè)月黑木耳：母種、原種