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是一組存在于人和動物血清與組織液中的具有酶活性的不耐熱的糖蛋白。補體性質(zhì)不穩(wěn)定0~10℃條件下活性只能保持3~4d一20℃第一節(jié)補體活性和組分的檢測血清補體總活性測定(CH50試驗)在溶血反應中,當紅細胞和溶血素定量時,溶血程度與補體的活性(但非直線關(guān)系)溶血率溶血率以引起50%溶血所需正常值:50-100U/ml增高:急性炎癥、組織損傷、惡性腫瘤等降低:嚴重肝病、某些自身免疫性疾病50%溶血標準管1235691:20稀釋血清緩沖液選擇溶血程度與50%溶血標準管最為接近的兩管,測定OD值,以OD值1u X200.3ml1、測定的是補體9種成分的綜合水平2、方法簡便、快速,但敏感性較低一)免疫溶血法去C4血清+致敏紅細胞——不溶血十溶血程度與待測血清中的C4活性成正相關(guān)(二)免疫化學法第二節(jié)補體結(jié)合實驗(CFT)原理:用已知的指示系統(tǒng)檢測試驗系統(tǒng)是否結(jié)合補體。已知抗原(或抗體)補體參與的抗原抗體反應補體結(jié)合試驗抗原抗原①靈敏度高。比沉淀反應和凝集反應的靈敏度高得多,能測定0.05μg/ml的抗體。②特異性強。各種成分都事先滴定,選擇最佳比例,出現(xiàn)交叉反應的機率小。③易于普及,試驗結(jié)果顯而易見;④試驗條件要求低,不需要特殊儀器或只用分光光度計。操作步驟繁鎖,所以常常被其他方法所但對于免疫學技術(shù)的基本訓練仍是一個第三節(jié)循環(huán)免疫復合物的檢測免疫復合物是機體內(nèi)抗原抗體形成的抗原抗體復合物,沉積在血管壁、皮膚臟器的免疫復合物稱為局部免疫復合物,隨血液循環(huán)的稱為循環(huán)免疫復合物。局部免疫復合物用免疫組化法檢測,而循環(huán)免疫復合物檢測技術(shù)分為抗原特異性檢測技術(shù)和非抗原特異性檢測技術(shù)兩類。PEG(聚乙二醇)沉降法原理:低濃度的PEG能選擇性地沉淀IC,一般PEG的最終濃度選擇3.5%,等量待檢血清→4℃16-18小時后離心沉淀→NaOH溶解3、評價:簡單方便,既可檢測又可以用于分離;但特異性差,血清中的大分子蛋白質(zhì)易造成假陽性。ELISA測定循環(huán)免疫復合物 免疫復合物檢測的臨床意義可作為評價疾病的活動情況及其
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