備課素材：觀察染色體的兩種細(xì)胞固定試劑 高一下學(xué)期生物人教版必修2

觀察染色體的兩種細(xì)胞固定試劑2019版高中生物學(xué)必修一介紹，以15%的鹽酸和95%的酒精等量混合解離并固定細(xì)胞：必修二介紹，以卡諾氏液固定細(xì)胞：那么，這兩種固定細(xì)胞的試劑有什么區(qū)別？固定是借助理化方法迅速將組織細(xì)胞殺死，盡量保持其形態(tài)結(jié)構(gòu)及內(nèi)含物的真實(shí)生活狀態(tài)。因此，固定液必須迅速穿過(guò)細(xì)胞使蛋白質(zhì)變性，且不影響染色體的完整性，從而達(dá)到良好的染色效果?？ㄖZ氏固定液是3份無(wú)水乙醇和一份冰醋酸混合制備而成，其中無(wú)水乙醇的功能是使細(xì)胞縮小、脆化；冰醋酸的功能是不改變細(xì)胞的原來(lái)結(jié)構(gòu)。所以卡諾氏液的功能是在不破壞細(xì)胞結(jié)構(gòu)的情況下使細(xì)胞瞬間死亡，起到固定的作用。卡諾氏固定液最好現(xiàn)用現(xiàn)配，長(zhǎng)時(shí)間放置影響固定的效果。固定時(shí)間為15～1440min，冰箱室溫均可。其適用于一般植物組織和細(xì)胞的固定，常用于根尖、花藥壓片等。在徐作英、王重力主編的《中學(xué)生物實(shí)驗(yàn)教學(xué)論》第322頁(yè)“觀察洋蔥根尖細(xì)胞有絲分裂”實(shí)驗(yàn)中，對(duì)“實(shí)驗(yàn)材料的準(zhǔn)備”根尖取材與固定是這樣描述的：待根尖長(zhǎng)到1～2cm時(shí)(注意不宜過(guò)長(zhǎng))，根據(jù)各種植物細(xì)胞有絲分裂的高峰時(shí)期，剪取根尖浸泡于固定液中2～4h，取出后保存于70%酒精中備用。由此可見(jiàn)，觀察根尖有絲分裂實(shí)驗(yàn)也可以用卡諾氏液固定，但不是必需的。因?yàn)樵趯?duì)根尖進(jìn)行解離操作時(shí)，加入鹽酸酒精混合液，其中鹽酸起解離作用，而酒精能起固定作用。該實(shí)驗(yàn)用酒精固定已經(jīng)起到了很好的作用，實(shí)驗(yàn)結(jié)果也比較理想，從簡(jiǎn)化實(shí)驗(yàn)程序考慮就不必再單獨(dú)使用卡諾氏液固定。例1、下列有關(guān)實(shí)驗(yàn)的敘述，正確的是（）A.

卡諾氏液固定細(xì)胞形態(tài)后需用體積分?jǐn)?shù)為95%的酒精沖洗B.

生長(zhǎng)素能與雙縮脲試劑發(fā)生作用產(chǎn)生紫色反應(yīng)C.

赫爾希等人用35S標(biāo)記的除菌體侵染細(xì)菌實(shí)驗(yàn)，證明DNA是遺傳物質(zhì)D.

質(zhì)壁分離復(fù)原實(shí)驗(yàn)中需用顯微鏡觀察臨時(shí)裝片2次答案：A解析：A、在低溫誘導(dǎo)植物染色體數(shù)目的變化實(shí)驗(yàn)中，利用卡諾氏液固定細(xì)胞形態(tài)后，需用體積分?jǐn)?shù)為95%的酒精沖洗兩次，A正確；B、生長(zhǎng)素的本質(zhì)不是蛋白質(zhì)，是吲哚乙酸，其不能與雙縮脲試劑發(fā)生作用產(chǎn)生紫色反應(yīng)，B錯(cuò)誤；C、赫爾希等人分別用35S或32P標(biāo)記噬菌體進(jìn)行侵染細(xì)菌實(shí)驗(yàn)，證明了DNA是遺傳物質(zhì)，C錯(cuò)誤；D、質(zhì)壁分離復(fù)原實(shí)驗(yàn)中需用顯微鏡觀察臨時(shí)裝片3次：第一次觀察為紫色洋蔥鱗片葉外表皮細(xì)胞在蒸餾水中的正常狀態(tài)，第二次觀察為紫色洋蔥鱗片葉外表皮細(xì)胞在蔗糖溶液中的質(zhì)壁分離狀態(tài)，第三次觀察為紫色洋蔥鱗片葉外表皮細(xì)胞在蒸餾水中的質(zhì)壁分離復(fù)原狀態(tài)，D錯(cuò)誤。故選：A。

例2、下列有關(guān)實(shí)驗(yàn)的說(shuō)法正確的是（） A．在觀察植物細(xì)胞有絲分裂實(shí)驗(yàn)中，用質(zhì)量分?jǐn)?shù)為15%的鹽酸和體積分?jǐn)?shù)為95%的酒精溶液的混合液進(jìn)行解離 B．在提取葉綠體色素的實(shí)驗(yàn)中，使用丙酮酸提取色素，使用層析液分離色素 C．探究醇母群數(shù)量變化時(shí)，應(yīng)設(shè)空白對(duì)照排除無(wú)關(guān)變量干擾 D．將斐林試劑加入到麥芽糖溶液中時(shí)，就會(huì)出現(xiàn)磚紅色沉淀解析：

1、綠葉中色素的提取和分離實(shí)驗(yàn)，提取色素時(shí)需要加入無(wú)水乙醇（溶解色素）、石英砂（使研磨更充分）和碳酸鈣（防止色素被破壞）；分離色素時(shí)采用紙層析法，原理是色素在層析液中的溶解度不同，隨著層析液擴(kuò)散的速度不同，最后的結(jié)果是觀察到四條色素帶，從上到下依次是胡蘿卜素（橙黃色）、葉黃素（黃色）、葉綠素a（藍(lán)綠色）、葉綠素b（黃綠色）．2、觀察細(xì)胞有絲分裂實(shí)驗(yàn)的步驟：解離（解離液由鹽酸和酒精組成，目的是使細(xì)胞分散開(kāi)來(lái)）、漂洗（洗去解離液，便于染色）、染色（用龍膽紫、醋酸洋紅等堿性染料）、制片（該過(guò)程中壓片是為了將根尖細(xì)胞壓成薄層，使之不相互重疊影響觀察）和觀察（先低倍鏡觀察，后高倍鏡觀察）．

3、探究培養(yǎng)液中酵母菌種群數(shù)量的動(dòng)態(tài)變化實(shí)驗(yàn)的原理：

（1）酵母菌可以用液體培養(yǎng)基來(lái)培養(yǎng)，培養(yǎng)液中的酵母菌種群的增長(zhǎng)情況與培養(yǎng)液中的成分、空間、pH、溫度等因素有關(guān)，我們可以根據(jù)培養(yǎng)液中的酵母菌數(shù)量和時(shí)間為坐標(biāo)軸做曲線，從而掌握酵母菌種群數(shù)量的變化情況．

（2）利用血球計(jì)數(shù)板在顯微鏡下直接計(jì)數(shù)是一種常用的細(xì)胞計(jì)數(shù)法，這種方法可以直接測(cè)定樣品中全部的細(xì)胞數(shù)目，所以一般用于單細(xì)胞微生物數(shù)量的測(cè)定，由于血球計(jì)數(shù)板上的計(jì)數(shù)室蓋上蓋玻片后的容積是一定的，所以可根據(jù)在顯微鏡下觀察到的細(xì)胞數(shù)目來(lái)計(jì)算單位體積的細(xì)胞的總數(shù)目．

4、斐林試劑可用于鑒定還原糖，在水浴加熱的條件下，溶液的顏色變化為磚紅色（沉淀）．斐林試劑只能檢驗(yàn)生物組織中還原糖（如葡萄糖、麥芽糖、果糖）存在與否，而不能鑒定非還原性糖（如淀粉、蔗糖）．在觀察植物細(xì)胞有絲分裂實(shí)驗(yàn)中，用質(zhì)量分?jǐn)?shù)為15%的鹽酸和體積分?jǐn)?shù)為95%的酒精溶液的混合液進(jìn)行解離，A正確；

在提取葉綠體色素的實(shí)驗(yàn)中，使用丙酮提取色素，丙酮酸不能提取色素，