血小板抗體篩查在彌散性血管內(nèi)凝血患者中的臨床應(yīng)用價(jià)值

血小板抗體篩查在彌散性血管內(nèi)凝血患者中的臨床應(yīng)用價(jià)值

分散性血管內(nèi)凝血（ic）是一種以出血、微循環(huán)障礙、微管內(nèi)栓塞形成的晚發(fā)性臨床綜合征。材料和方法1納入及排除標(biāo)準(zhǔn)以2017年1月至2018年5月我院按ISTH積分系統(tǒng)確診的有輸血史DIC患者68例及同期無(wú)輸血史的外科擇期手術(shù)患者60例為研究對(duì)象,納入標(biāo)準(zhǔn):①DIC患者依據(jù)2001年ISTH顯性積分系統(tǒng)2血小板抗體篩查在輸注血小板前1h,抽取3mL及2mL的靜脈血,注入到純凈真空管與包含EDTA-K取MASPATKit微孔條,編號(hào),設(shè)立陰性對(duì)照孔與陽(yáng)性對(duì)照孔,各孔加50μL血小板抗體篩選細(xì)胞,3000r/min離心5min,棄去液體,加洗滌液洗滌3次,輕扣在吸水紙吸干液體;每孔加入100μL低離子強(qiáng)度溶液(LISS),后分別加50μL患者血清、陰性對(duì)照與陽(yáng)性對(duì)照血清。封口后輕混勻,37℃空氣浴35min,洗滌5次扣干,加50μL抗人IgG及50μL指示紅細(xì)胞,輕輕混勻后3000r/min離心5min,結(jié)果分為陽(yáng)性、弱陽(yáng)性及陰性,陽(yáng)性與弱陽(yáng)性示含血小板抗體,否則無(wú)血小板抗體。血小板抗體篩查試劑購(gòu)自中國(guó)上海廣銳生物科技有限公司。微孔板加250μL洗脫液,室溫10min,甩干,稀釋液SD3:1比例稀釋陰陽(yáng)性對(duì)照、病人血清;加50μL稀釋好的血清,37℃反應(yīng)35min,甩干,洗滌;對(duì)稀釋液SD按100:1稀釋抗-IgG,除空白孔外向每孔加入50μL已經(jīng)稀釋的抗-IgG,蓋膜后于37℃放置30min,甩干,共洗板4次。稀釋液SD100:1稀釋抗-IgG,加PNPP(空白孔除外),室溫、避光孵育30min,加終止液,以酶標(biāo)儀比色,于405nm下讀取OD值,630nm作為參照波長(zhǎng)。陽(yáng)性標(biāo)準(zhǔn):OD值≥Cutoff值。3陰道出血的并發(fā)癥血小板輸注條件:①有鼻出血、牙齦出血、皮膚出血、黏膜出血、消化道出血等表現(xiàn),女性可伴陰道出血且有瘀斑,患者PLT≤20×109/L;②血小板輸注效果評(píng)估:采用血小板增高指數(shù)(CCI)評(píng)估輸注的療效,輸注后1hCCI值在9×104血小板抗體檢測(cè)結(jié)果①比較觀察組、對(duì)照組血小板抗體陽(yáng)性率;②將觀察組按照血小板輸注次數(shù)分為A組(輸注次數(shù)<3次)、B組(輸注次數(shù)在3～8次)、C組(輸注次數(shù)>8次),比較3亞組血小板抗體陽(yáng)性率;③分析不同血小板抗體水平患者輸注后的CCI值及A、B、C組的CCI值差異;④評(píng)估血小板抗體陽(yáng)性對(duì)輸注效果的影響;⑤分析輸注次數(shù)、血小板抗體陽(yáng)性率與CCI值的相關(guān)性。5統(tǒng)計(jì)處理采用SPSS20.0軟件行統(tǒng)計(jì)學(xué)處理,對(duì)血小板抗體陽(yáng)性率等計(jì)數(shù)資料以%表示,行χ結(jié)果1兩組均能比較血小板聚集陽(yáng)性率觀察組的血小板抗體陽(yáng)性率較對(duì)照組高,差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)(表1)。2給藥數(shù)量對(duì)血小板聚集陽(yáng)性率的影響DIC患者中,A組血小板抗體陽(yáng)性率低于B、C組(P<0.05)(表2)。3cci、a、c組輸注后24hcci值比較血小板抗體陽(yáng)性、陰性患者輸注后24hCCI值差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義,A、B、C組輸注后24hCCI值差異也有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義,其中A組CCI值最高,C組CCI值最低(P<0.05)(表3)。4抗血小板聚集陽(yáng)性和陰性患者的輸血效果分析血小板抗體陽(yáng)性者血小板輸注有效率明顯低于血小板抗體陰性者,差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)(表4)。5血小板抗體陽(yáng)性與cci值的關(guān)系相關(guān)性分析表明,DIC患者血小板輸注次數(shù)、血小板抗體陽(yáng)性率與輸注后24hCCI值呈負(fù)相關(guān)(r=-0.376、-0.431,P<0.05)。dic進(jìn)展的動(dòng)態(tài)分析DIC發(fā)病機(jī)制復(fù)雜,可促進(jìn)體內(nèi)產(chǎn)生更多的凝血酶,與促凝、纖溶、抗凝及內(nèi)皮等多系統(tǒng)有關(guān),患者血液內(nèi)凝血機(jī)制被彌散性激活,促發(fā)小血管內(nèi)廣泛纖維蛋白沉著,引起組織與器官損傷,凝血因子的消耗也會(huì)導(dǎo)致全身性出血傾向ISTH顯性積分系統(tǒng)中含PT、APTT、PLT、FIB與纖維蛋白相關(guān)產(chǎn)物等客觀性指標(biāo),經(jīng)過(guò)積分能對(duì)DIC進(jìn)展進(jìn)行動(dòng)態(tài)觀察,使DIC診斷更簡(jiǎn)便、科學(xué)性更強(qiáng),靈敏度、特異性分別達(dá)97%、91%。本研究將ISTH顯性積分≥5分作為DIC評(píng)估標(biāo)準(zhǔn),對(duì)DIC患者在輸注血小板后血小板抗體產(chǎn)生情況進(jìn)行篩查,并檢測(cè)DIC患者血小板輸注前后外周血PLT,分析體內(nèi)CCI值,以CCI值判斷血小板輸注效果,結(jié)果顯示觀察組血小板抗體陽(yáng)性率25.00%高于對(duì)照組的5.00%,表明在DIC患者中,血小板抗體陽(yáng)性率較無(wú)輸血史患者高,正常生理狀態(tài)時(shí),血小板具有促凝、聚集、收縮血管、黏附、保持血管內(nèi)皮完整性等作用,參與機(jī)體止血及凝血過(guò)程,而DIC患者的血液內(nèi)凝血機(jī)制被彌散性激活,血小板可能出現(xiàn)質(zhì)量缺陷,血小板結(jié)構(gòu)被破壞或引起大量消耗,產(chǎn)生一系列血小板抗原抗體免疫反應(yīng)綜上所述,反復(fù)大量輸注血制品為造成血小板抗