《DNA的粗提取與鑒定》復(fù)習(xí)

DNA的粗提取與鑒定1.基本原理0.14mol/LNaCl酒精二苯胺溶液染成藍(lán)色2.操作過(guò)程相對(duì)較高蒸餾水紗布NaCl溶液的濃度95%的酒精沸水中加熱【警示】

（1）本實(shí)驗(yàn)不能用哺乳動(dòng)物成熟紅細(xì)胞作實(shí)驗(yàn)材料，原因是哺乳動(dòng)物成熟紅細(xì)胞無(wú)細(xì)胞核?？蛇x用雞血細(xì)胞作材料。（2）實(shí)驗(yàn)中兩次使用蒸餾水，第一次的目的是使成熟的雞血細(xì)胞漲破釋放出DNA，第二次的目的是稀釋NaCl溶液，使DNA從溶液中析出。1.DNA與蛋白質(zhì)在NaCl溶液中溶解度比較2mol/LNaCl溶液0.14mol/LNaCl溶液溶解規(guī)律DNA溶解析出

蛋白質(zhì)部分發(fā)生鹽析沉淀溶解NaCl溶液從2mol/L降低過(guò)程中，溶解度逐漸增大2.DNA粗提取實(shí)驗(yàn)材料和方法的選擇（1）不同生物的組織中DNA含量不同在選取材料時(shí)，應(yīng)本著DNA含量高、材料易得、便于提取的原則。（2）材料不同所采用的提取方法不同①植物組織：取材→研磨→過(guò)濾→沉淀。②雞血：制備雞血細(xì)胞液→提取核DNA→溶解細(xì)胞核內(nèi)DNA→析出并濾取DNA→DNA再溶解→提取較純凈的DNA?！顳NA粗提取與分離的原理、過(guò)程與鑒定是本專題在高考中的主要命題點(diǎn)，但總體來(lái)看考查頻率不大。［真題回顧］

（2012·江蘇單科）下列關(guān)于“DNA粗提取與鑒定實(shí)驗(yàn)”的敘述，正確的是（）A.洗滌劑能瓦解細(xì)胞膜并增加DNA在NaCl溶液中的溶解度B.將DNA絲狀物放入二苯胺試劑中沸水浴后冷卻變藍(lán)C.常溫下菜花勻漿中有些酶類會(huì)影響DNA的提取D.用玻棒緩慢攪拌濾液會(huì)導(dǎo)致DNA獲得量減少【解析】

本題考查DNA粗提取與鑒定實(shí)驗(yàn)的基本知識(shí)。洗滌劑能瓦解細(xì)胞膜，但對(duì)DNA在NaCl溶液中的溶解度無(wú)影響，故A錯(cuò)誤；DNA絲狀物需先溶解在適宜濃度的NaCl溶液中，然后加入二苯胺試劑，混合均勻后沸水浴，待冷卻后溶液變藍(lán)，故B錯(cuò)誤；常溫下菜花勻漿中有些水解酶可能會(huì)使DNA水解而影響DNA的提取，故C正確；用玻棒朝一個(gè)方向緩慢攪拌可減輕對(duì)DNA分子的破壞，有利于DNA分子的提取，故D錯(cuò)誤?！敬鸢浮?/p>

C［考點(diǎn)分向］考向一DNA粗提取的原理及操作步驟1.下圖表示以雞血為實(shí)驗(yàn)材料進(jìn)行DNA的粗提取與鑒定的操作程序，請(qǐng)分析回答下列問(wèn)題：（1）步驟一中，向雞血細(xì)胞液中加入

并攪拌，可使雞血細(xì)胞破裂。（2）步驟二中，過(guò)濾后收集含有DNA的

。（3）步驟三、四的操作原理是________________________；步驟四中，通過(guò)向溶液中加入

調(diào)節(jié)NaCl溶液的物質(zhì)的量濃度至

mol/L時(shí)，DNA將會(huì)析出，過(guò)濾去除溶液中的雜質(zhì)。（4）步驟七：向步驟六過(guò)濾后的

中加入等體積的冷卻的

，靜置2～3min，溶液中會(huì)出現(xiàn)

色絲狀物，這就是粗提取的DNA。（5）步驟七：DNA遇

試劑，沸水浴5min，冷卻后，溶液呈

色?！窘馕觥?/p>

破碎紅細(xì)胞應(yīng)用蒸餾水，使之吸水漲破。DNA在不同濃度的NaCl溶液中溶解度不同，在2mol/L的NaCl溶液中DNA溶解，在0.14mol/L的NaCl溶液中DNA析出?？赏ㄟ^(guò)加入蒸餾水將2mol/L的NaCl溶液稀釋為0.14mol/L的NaCl溶液。DNA不溶于冷酒精，遇二苯胺加熱呈藍(lán)色?！敬鸢浮?/p>

（1）蒸餾水（2）濾液（3）DNA在不同濃度NaCl溶液中溶解度不同，通過(guò)控制NaCl溶液的濃度去除雜質(zhì)蒸餾水0.14（4）濾液酒精白（5）二苯胺藍(lán)考向二實(shí)驗(yàn)中試劑的應(yīng)用2.下列關(guān)于DNA粗提取與鑒定實(shí)驗(yàn)中所使用的試劑、操作及作用的表述，不正確的是

（）選項(xiàng)試劑操作作用A檸檬酸鈉溶液與雞血混合防止血液凝固B蒸餾水與雞血細(xì)胞混合保持細(xì)胞形狀C蒸餾水加入到溶解有DNA的2mol/L的NaCl溶液中降低NaCl溶液的濃度，使DNA析出D二苯胺試劑DNA與二苯胺在沸水浴的條件下發(fā)生藍(lán)色反應(yīng)鑒定DNA【解析】

蒸餾水在本實(shí)驗(yàn)中的作用有兩個(gè)：一是用于調(diào)節(jié)NaCl溶液的濃度，以使DNA沉淀析出或溶解；二是用于雞血細(xì)胞的溶血，釋放細(xì)胞內(nèi)的核物質(zhì)?！敬鸢浮?/p>

B【歸納總結(jié)】

DNA粗提取與鑒定中不同試劑的用途及原理比較酒精95%（體積