考研生物化學(xué)分類模擬48

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一、判斷題1.反轉(zhuǎn)錄酶能催化RNA指導(dǎo)的DNA合成反應(yīng)。

對(duì)錯(cuò)

A

2.核酶的底物通常是自身的RNA分子。

對(duì)錯(cuò)

A

3.反義RNA指與mRNA特異性結(jié)合并互補(bǔ)的核苷酸片段，它阻斷翻譯過程，在基因表達(dá)調(diào)控中起作用。

對(duì)錯(cuò)

A

4.內(nèi)含子的自我剪接說明某些RNA也具有酶活性。

對(duì)錯(cuò)

A

5.艾滋病病毒HIV是一種單鏈RNA病毒。

對(duì)錯(cuò)

A

6.堿基堆積作用在穩(wěn)定RNA的結(jié)構(gòu)中起主要作用。

對(duì)錯(cuò)

B

[解析]堿基堆積作用在穩(wěn)定DNA的雙螺旋結(jié)構(gòu)中起主要作用，其次是氫鍵。

7.原核細(xì)胞rRNA無轉(zhuǎn)錄后加工過程。

對(duì)錯(cuò)

B

[解析]原核細(xì)胞rRNA有轉(zhuǎn)錄后加工。先合成30S前體rRNA。成熟后還有甲基化修飾。

8.乳糖操縱子中，基因I的突變可導(dǎo)致操縱子基因產(chǎn)物的組成型表達(dá)。

對(duì)錯(cuò)

A

9.TATA結(jié)合蛋白是在RNA聚合酶Ⅰ啟動(dòng)子的TATA盒上組裝預(yù)起始復(fù)合物的第一個(gè)成分。

對(duì)錯(cuò)

B

[解析]TATA框的主要作用是使TATA結(jié)合蛋白組裝成預(yù)起始復(fù)合物確保轉(zhuǎn)錄精確地起始，是RNA聚合酶Ⅱ的結(jié)合轉(zhuǎn)錄部位。

10.細(xì)胞中還含有在5碳原子以外其他位置磷酸化的核苷酸。

對(duì)錯(cuò)

A

11.一般來講，真核生物單順反子mRNA就是一個(gè)初級(jí)RNA轉(zhuǎn)錄物。

對(duì)錯(cuò)

A

12.RNA病毒的復(fù)制通常不需要引物。

對(duì)錯(cuò)

A

13.RNA干擾技術(shù)是一種抑制DNA轉(zhuǎn)錄出RNA的技術(shù)。

對(duì)錯(cuò)

B

[解析]RNA干擾技術(shù)是在體外合成能與靶基因mRNA互補(bǔ)的雙鏈RNA。

14.幾乎所有真核生物結(jié)構(gòu)基因下游都存在polydT作為其轉(zhuǎn)錄產(chǎn)物polyA的模板。

對(duì)錯(cuò)

B

[解析]結(jié)構(gòu)基因不存在polydT的模板。

15.核糖體的校正功能僅限于密碼子與反密碼子的相互作用。

對(duì)錯(cuò)

A

[解析]核糖體的校正功能只有密碼子與反密碼子的相互作用。

16.σ因子幫助酵母RNA聚合酶Ⅲ識(shí)別編碼特定基因的啟動(dòng)子。

對(duì)錯(cuò)

B

[解析]酵母是真核生物，σ因子只能幫助原核生物的RNA聚合酶識(shí)別啟動(dòng)子。

17.大腸桿菌中的fMet-tRNA無法單獨(dú)與核糖體結(jié)合。

對(duì)錯(cuò)

A

18.真核生物成熟mRNA的兩端均帶有游離的3—OH。

對(duì)錯(cuò)

A

二、問答與計(jì)算題1.簡(jiǎn)述真核生物與原核生物的RNA聚合酶的種類和主要功能。

真核生物RNA聚合酶(pol)有3種：①polⅠ，rRNA轉(zhuǎn)錄酶，合成rRNA前體(18S、2.8S、28S)；②polⅡ，mRNA(hnRNA)轉(zhuǎn)錄酶，合成mRNA前體，專一識(shí)別蛋白質(zhì)基因的啟動(dòng)子；③polⅢ，小分子RNA轉(zhuǎn)錄酶，識(shí)別的啟動(dòng)子通常位于結(jié)構(gòu)基因的內(nèi)部，合成小分子RNA，如tRNA、5SrRNA、snRNA(smallnuclearRNA)等。原核生物RNA聚合酶通常只有一種，識(shí)別基因上游的啟動(dòng)子，催化合成所有類別的RNA。

2.復(fù)制DNA的聚合酶(依賴于DNA的DNA聚合酶)有校正功能，解釋為什么RNA聚合酶沒有這種功能?

在DNA水平保持遺傳信息的忠實(shí)性是至關(guān)重要的，因此DNA指導(dǎo)的DNA聚合酶具有校正功能是必不可少的。轉(zhuǎn)錄產(chǎn)物與RNA復(fù)制及RNA分子通常半衰期較短，所以轉(zhuǎn)錄中的錯(cuò)誤可以通過具有天然降解活性的RNA酶進(jìn)行修復(fù)。無功能的產(chǎn)物可以被正確的副本所替換。

3.比較真核生物與原核生物轉(zhuǎn)錄起始的第一步有什么不同?

細(xì)菌中，DNA指導(dǎo)的RNA聚合酶核心酶由4個(gè)亞基(α2ββ)組成，核心酶與σ亞基結(jié)合產(chǎn)生全酶。核心酶可以催化NTP的聚合，但只有全酶才能夠引發(fā)轉(zhuǎn)錄的開始。主要的步驟是：具有特異識(shí)別能力的σ亞基識(shí)別轉(zhuǎn)錄起始點(diǎn)上游的啟動(dòng)子特異同源序列，這樣可以使全酶與啟動(dòng)子序列結(jié)合力增加，形成封閉的二元復(fù)合物。關(guān)鍵的作用是RNA聚合酶與DNA的相互作用。真核生物中，當(dāng)含TBP(TATAboxbindingprotein)的轉(zhuǎn)錄因子與DNA相互作用時(shí)，其他因子也結(jié)合上來，形成起始復(fù)合體，這一復(fù)合體再與RNA聚合酶結(jié)合，因此主要是RNA聚合酶與蛋白質(zhì)之間的作用。

4.概括說明σ因子對(duì)啟動(dòng)子調(diào)節(jié)的輔助功能。

σ因子有識(shí)別啟動(dòng)子序列的結(jié)構(gòu)域。作為游離的蛋白質(zhì)，σ因子并不具備與DNA結(jié)合的構(gòu)象。當(dāng)σ因子與核心酶結(jié)合后構(gòu)象發(fā)生改變，其N端游離出與DNA結(jié)合的結(jié)構(gòu)域。σ因子的這一調(diào)節(jié)方式是為了防止游離的σ因子與啟動(dòng)子區(qū)結(jié)合，而阻礙了依賴于全酶的轉(zhuǎn)錄啟動(dòng)。另外，這樣也可防止形成全酶的σ因子的濃度被稀釋，因?yàn)槊恳粋€(gè)細(xì)胞中，大約每3個(gè)核心酶對(duì)應(yīng)于一個(gè)σ因子。

5.簡(jiǎn)述反轉(zhuǎn)錄酶及其性質(zhì)，為什么說反轉(zhuǎn)錄酶是一種重要的工具酶?

反轉(zhuǎn)錄酶發(fā)現(xiàn)自逆病毒(反轉(zhuǎn)錄病毒)。這類病毒屬正鏈RNA病毒，在其生活周期中須經(jīng)一種自身攜帶的酶反轉(zhuǎn)錄酶(亦稱逆轉(zhuǎn)錄酶)，把RNA基因組反轉(zhuǎn)錄成DNA。然后這種病毒的雙鏈DNA形式整合到寄主染色體上，經(jīng)轉(zhuǎn)錄形成子代RNA(亦是mRNA)。反轉(zhuǎn)錄酶有三種酶的活性：①以RNA為模板合成互補(bǔ)DNA的DNA聚合酶活性；②以DNA為模板合成DNA的DNA聚合酶活性；③去掉RNA-DNA雜合雙鏈中RNA鏈的RNaseH活性。

由于大多數(shù)真核細(xì)胞產(chǎn)生的mRNA都有多聚腺苷酸尾巴polyA，這些mRNA在寡聚胸腺嘧啶核苷酸oligodT的引導(dǎo)下經(jīng)反轉(zhuǎn)錄酶的作用產(chǎn)生cDNA；因此可以做成真核細(xì)胞的cDNA文庫(kù)。故反轉(zhuǎn)錄酶是一種重要的工具酶。

6.為什么DNA聚合酶有核酸酶活性而RNA聚合酶無核酸酶活性?

因DNA聚合酶負(fù)責(zé)染色體DNA的復(fù)制。通過復(fù)制把親代所攜帶的遺傳信息準(zhǔn)確地傳遞給子代。DNA復(fù)制時(shí)出現(xiàn)錯(cuò)誤影響到遺傳信息的準(zhǔn)確傳遞，造成突變和大部分子代細(xì)胞死亡。因此DNA聚合酶應(yīng)具有3→5外切核酸酶活性以隨時(shí)修正復(fù)制過程中出現(xiàn)的錯(cuò)配核苷酸，保證遺傳信息傳遞的穩(wěn)定性。RNA聚合酶可催化大量mRNA的合成，且合成的mRNA的半衰期很短。轉(zhuǎn)錄時(shí)個(gè)別錯(cuò)配堿基的出現(xiàn)，也會(huì)導(dǎo)致合成的蛋白質(zhì)的個(gè)別氨基酸與正常的不同，但細(xì)胞可以容忍這些小的錯(cuò)誤發(fā)生。大腸桿菌DNA聚合酶Ⅰ的5→3外切酶活性是用于切除岡崎片段的RNA引物及切除受損傷的DNA片段，以便合成正確的DNA鏈替換，因此，這些外切酶活性是DNA復(fù)制、修復(fù)、重組所必需的。

7.何謂轉(zhuǎn)錄?簡(jiǎn)述轉(zhuǎn)錄與復(fù)制的異同點(diǎn)?

生物體內(nèi)在DNA指導(dǎo)的RNA聚合酶催化下，以DNA為模板，以4種NTP為原料，按堿基配對(duì)原則合成RNA的過程稱為轉(zhuǎn)錄。

RNA的轉(zhuǎn)錄合成從化學(xué)角度來講類似于DNA的復(fù)制，二者都是酶促的核苷酸聚合過程，都以DNA為模板，都須依賴DNA的聚合酶，多核苷酸鏈的合成都是以5→3的方向，在3-OH末端與加入的核苷酸形成磷酸二酯鍵，均遵從堿基配對(duì)規(guī)律。但是，由于復(fù)制和轉(zhuǎn)錄的目的不同，二者又各具特點(diǎn)：①對(duì)于一個(gè)基因組來說，轉(zhuǎn)錄只發(fā)生在一部分基因，而且每個(gè)基因的轉(zhuǎn)錄都受到相對(duì)獨(dú)立的控制；而復(fù)制則是發(fā)生于整個(gè)基因組的。②RNA的轉(zhuǎn)錄合成是以DNA的一條鏈為模板而進(jìn)行的，所以這種轉(zhuǎn)錄方式又稱不對(duì)稱轉(zhuǎn)錄；而復(fù)制則是兩條鏈均作為模板。③轉(zhuǎn)錄的原料是NTP，而復(fù)制則是dNTP。④催化轉(zhuǎn)錄的是RNA聚合酶，該酶缺乏3→5外切酶活性，所以沒有校正功能。復(fù)制則是由DNA聚合酶催化的，該酶具有校正功能。⑤轉(zhuǎn)錄時(shí)不需要引物，而且RNA鏈的合成是連續(xù)的；復(fù)制需要引物，且后隨鏈的合成是不連續(xù)的。⑥轉(zhuǎn)錄的堿基配對(duì)為A-U/T-A/G-C，而復(fù)制則是A-T/G-C。⑦轉(zhuǎn)錄產(chǎn)物是各種RNA，復(fù)制產(chǎn)物為子代雙鏈DNA。

8.簡(jiǎn)述原核生物與真核生物中啟動(dòng)子的結(jié)構(gòu)特點(diǎn)及功能。

啟動(dòng)子是DNA分子中可以與RNA聚合酶特異結(jié)合的部位，也就是使轉(zhuǎn)錄開始的部位。在基因表達(dá)的調(diào)控中，轉(zhuǎn)錄的起始是個(gè)關(guān)鍵。某個(gè)基因能否表達(dá)常常決定于特定的啟動(dòng)子起始過程。對(duì)原核生物100多個(gè)啟動(dòng)子的序列進(jìn)行比較后發(fā)現(xiàn)：在RNA轉(zhuǎn)錄起始點(diǎn)上游大約—10bp和—35bp處有兩個(gè)保守的序列，在—10bp區(qū)附近有一組5-TATAAT的序列，是Pribnow首先發(fā)現(xiàn)的，稱為Pribnow框，因富含AT，解鏈溫度低，兩條DNA鏈易分離，有利于RNA聚合酶發(fā)揮作用，是RNA聚合酶與DNA模板結(jié)合的部位。在—35bpK附近，有一組5-TTGACA的序列，與轉(zhuǎn)錄起始的辨認(rèn)有關(guān)，是RNA聚合酶中σ亞基識(shí)別并結(jié)合的部位。

真核生物的啟動(dòng)子有其特殊性，真核生物有3種RNA聚合酶，每一種都有自己的啟動(dòng)子類型。除啟動(dòng)子外，真核生物轉(zhuǎn)錄起始點(diǎn)上游處還有一個(gè)稱為增強(qiáng)子的序列，它能極大地增強(qiáng)啟動(dòng)子的活性，它的位置往往不固定，可存在于啟動(dòng)子的上游或下游，對(duì)啟動(dòng)子來說它們正向排列和反向排列均有效，對(duì)異源的基因也可起到增強(qiáng)作用。但許多實(shí)驗(yàn)證實(shí)它仍可能具有組織特異性，如免疫球蛋白基因的增強(qiáng)子只有在B淋巴細(xì)胞內(nèi)活性最高，胰島素基因和胰凝乳蛋白酶基因的增強(qiáng)子也都有很高的組織特異性。

9.簡(jiǎn)述rRNA的轉(zhuǎn)錄后加工。

真核細(xì)胞rRNA基因(rDNA)屬于豐富基因族，為中度重復(fù)序列，位于核仁內(nèi)，自成一組轉(zhuǎn)錄單位，大多數(shù)真核生物核內(nèi)產(chǎn)生45SrRNA轉(zhuǎn)錄產(chǎn)物，是3種rRNA的前體，其間有內(nèi)含子序列。在核仁小RNA(snRNA)的參與下，45SrRNA經(jīng)多步剪接后，切除內(nèi)含子序列，形成18SrRNA、5.8SrRNA、28SrRNA。rRNA加工成熟后，就在核仁上裝配與核糖體蛋白質(zhì)一起形成核糖體，輸出至胞質(zhì)，參與蛋白質(zhì)的合成。除剪接加工外，rRNA前體的加工還包括某些堿基的甲基化等。甲基化發(fā)生的位點(diǎn)是高度保守的，由SAM作為甲基供體。甲基化可能在rRNA前體的加工中起一定作用。

10.真核生物成熟mRNA的結(jié)構(gòu)特點(diǎn)及各結(jié)構(gòu)的功能是什么?

mRNA分子帶有蛋白質(zhì)編碼信息，在翻譯中起模板作用。真核生物成熟mRNA主要由以下幾部分組成。

(1)5端帽子結(jié)構(gòu)：是mRNA翻譯起始的必要結(jié)構(gòu)，為核糖體小亞基提供識(shí)別位點(diǎn)；增加mRNA的穩(wěn)定性，保護(hù)mRNA免遭5外切核酸酶的降解；并在成熟轉(zhuǎn)錄產(chǎn)物的出核運(yùn)輸過程中發(fā)揮重要作用。

(2)3端polyA尾結(jié)構(gòu)：可能與mRNA從細(xì)胞核向細(xì)胞質(zhì)的轉(zhuǎn)運(yùn)有關(guān)，對(duì)真核mRNA的翻譯效率具有一定作用，并能穩(wěn)定mRNA結(jié)構(gòu)，保持一定的生物半衰期。

(3)開放讀碼框(ORF)：mRNA上從起始密碼子AUG至終止密碼子之間的核苷酸序列稱為ORF，讀碼框內(nèi)每3個(gè)堿基組成一個(gè)三聯(lián)體密碼，決定一個(gè)氨基酸，編碼蛋白質(zhì)的氨基酸序列。

(4)5端和3端非翻譯序列：mRNA上位于ORF上游和下游的序列，不翻譯成蛋白質(zhì)，但參與翻譯的調(diào)控。

11.有一RNA的粗制品，先用蒸餾水配制成1mg/ml的原液，取原液2ml經(jīng)消化后用蒸餾水定容至50ml，取此液3ml加入3ml定磷試劑，以3ml蒸餾水加3ml定磷試劑做空白對(duì)照，測(cè)得粗制品中的總磷量為11μg，取原液2ml不經(jīng)消化直接用蒸餾水定容至50ml，取此液3ml加3ml定磷試劑，測(cè)得粗制品中的無機(jī)磷含量為1μg，求此RNA粗制品中RNA的百分含量。

由題意得知：有機(jī)磷=總磷量-無機(jī)磷=11μg-1μg；

RNA分子含磷量為9%左右，則1μg磷相當(dāng)于11μg核酸，由此推出用于定磷的3ml粗制品中的RNA含量為10×11=110μg；

2ml原液中RNA含量=110×50/3=1833.33μg，原液中RNA的濃度為1833.33/2=916.7μg/ml，則RNA粗制品中RNA的百分含量=(0.9167/1)×100%=91.67%。

12.請(qǐng)簡(jiǎn)要描述反義RNA調(diào)控基因表達(dá)的基本機(jī)制。

反義RNA調(diào)控基因表達(dá)的基本機(jī)制分為兩類。①轉(zhuǎn)錄前調(diào)控：這類反義RNA直接作用于其靶mRNA的SD序列和(或)編碼區(qū)，引起翻譯的直接抑制或與靶mRNA結(jié)合后引起該雙鏈RNA分子對(duì)RNA酶Ⅲ的敏感性增加，使其降解。②轉(zhuǎn)錄后調(diào)控：反義RNA與mRNA的SD序列的上游非編碼區(qū)結(jié)合，從而抑制靶mRNA的翻譯功能。可能是反義RNA與靶mRNA的上游序列結(jié)合后會(huì)引起核糖體結(jié)合位點(diǎn)區(qū)域的二級(jí)結(jié)構(gòu)發(fā)生改變，因而阻止了核糖體的結(jié)合。③復(fù)制前調(diào)控：反義RNA可直接抑制靶mRNA的轉(zhuǎn)錄。

13.簡(jiǎn)要描述鑒別RNA聚合酶等蛋白質(zhì)在DNA結(jié)合位點(diǎn)的方法。

(1)酵母單雜交技術(shù)，通過對(duì)酵母細(xì)胞內(nèi)報(bào)告基因表達(dá)狀況的分析，來鑒別DNA結(jié)合位點(diǎn)并發(fā)現(xiàn)潛在的結(jié)合蛋白基因，或?qū)NA結(jié)合位點(diǎn)進(jìn)行分析。

(2)凝膠阻滯實(shí)驗(yàn)又稱DNA遷移率變動(dòng)實(shí)驗(yàn)。若目的DNA與特異性蛋白質(zhì)結(jié)合，其移動(dòng)的速度受到阻滯，對(duì)凝膠進(jìn)行放射性自顯影，就可找到DNA結(jié)合蛋白。

(3)DNaseⅠ足跡實(shí)驗(yàn)。被RNA聚合酶或其他蛋白結(jié)合的地方則保留下來。

(4)硫酸二甲酯法。經(jīng)過硫酸二甲酯處理的DNA樣品同樣可以通過足跡法和序列分析確定這些接觸位點(diǎn)。這種方法的優(yōu)勢(shì)在于可以找出RNA聚合酶與DNA空間上的作用位點(diǎn)。

14.什么是mRNA編輯?有何意義?

RNA編輯是指在mRNA水平上改變遺傳信息的過程。具體說來，指基因轉(zhuǎn)錄產(chǎn)生的mRNA分子中，由于核苷酸的缺失、插入或置換，基因轉(zhuǎn)錄物的序列不與基因編碼序列互補(bǔ)，使翻譯生成的蛋白質(zhì)的氨基酸組成，不同于基因序列中的編碼信息的現(xiàn)象。

生物學(xué)意義：①改變和補(bǔ)充遺傳信息；②RNA的編排能增加基因產(chǎn)物的多樣性；③RNA編輯與生物細(xì)胞發(fā)育與分化有關(guān)，是基因表達(dá)調(diào)控的一種重要方式；④RNA編輯還可能是基因產(chǎn)物獲得新的結(jié)構(gòu)和功能，有利于復(fù)雜的生物進(jìn)化；⑤RNA編輯很可能與學(xué)習(xí)、記憶有關(guān)。

15.E.coli中rRNA基因有多個(gè)拷貝，以利于細(xì)菌快速生長(zhǎng)，若核糖體蛋白與rRNA以1:1比例組裝成核糖體顆粒，為什么核糖體蛋白通常由單拷基因編碼?

rRNA和核糖體蛋白是1:1組成核糖體的。而核糖體蛋白編碼基因轉(zhuǎn)錄1個(gè)mRNA可翻譯多個(gè)核糖體蛋白；rDNA只能轉(zhuǎn)錄1個(gè)rRNA。所以要使其保持1:1的比例，基因比或轉(zhuǎn)錄活性比必須大于1。rRNA在生物體內(nèi)的半衰期要遠(yuǎn)遠(yuǎn)短于核糖體蛋白，而為了滿足足夠的rRNA與核糖體蛋白結(jié)合以完成生物體內(nèi)蛋白質(zhì)合成的生理需求，生物體內(nèi)必須要有足夠的rRNA基因數(shù)。

16.假如你從某一動(dòng)物組織提取一份總RNA樣品，可采用一些什么方法檢測(cè)它的質(zhì)量(完整性)、純度和濃度?并說明判斷的依據(jù)。

①利用紫外分光光度計(jì)測(cè)定的OD值可以反映出純度狀況和濃度值。濃度可用A260進(jìn)行測(cè)定，樣品純度可用A260/A280比值表示，1.8～2.2表示樣品純度高。②電泳法。出現(xiàn)嚴(yán)重彌散條帶或者條帶消失表明樣品嚴(yán)重降解。

17.請(qǐng)?jiān)O(shè)計(jì)一個(gè)體外轉(zhuǎn)錄實(shí)驗(yàn)，證明RNA的合成方向是5→3。

(1)γ-32P標(biāo)記的GTP和非標(biāo)記的GTP可證明RNA的合成方向，若RNA中的32P無變化，證明合成方向?yàn)?→3，反之則是3→5。

(2)用代謝抑制劑3-脫氧腺苷證明RNA鏈合成方向?yàn)?→3。

(3)E.coli在0℃時(shí)需要13s才能加上一個(gè)核苷酸，但在37℃時(shí)每秒就可加上40個(gè)核苷酸。利用這個(gè)差別以14C標(biāo)記U，在0℃培養(yǎng)E.coli，提取這種正在伸長(zhǎng)的mRNA分子，發(fā)現(xiàn)14C標(biāo)記首先出現(xiàn)在伸長(zhǎng)的3，因此可以證明合成是沿著5→3方向進(jìn)行的。

三、論述題1.原核生物和真核生物RNA聚合酶各有何特點(diǎn)和功能?

真核和原核細(xì)胞內(nèi)都存在依賴于DNA的RNA聚合酶(DDRP)，迄今發(fā)現(xiàn)的DDRP均有以下特點(diǎn)：①以DNA為模板；②以4種三磷酸核苷為底物；③都遵循DNA與RNA之間的堿基配對(duì)原則，A=U，T=A，C≡G，合成與模板DNA序列互補(bǔ)的RNA鏈；④RNA鏈的延長(zhǎng)方向是5→3的連續(xù)合成；⑤需要Mg2+或Mn2+；⑥不需要引物。RNA聚合酶缺乏3→5外切酶活性，所以沒有校正功能。但在原核生物和真核生物中RNA聚合酶的結(jié)構(gòu)和性質(zhì)是不同的。

在原核生物各種RNA的合成都是由一種RNA聚合酶催化的。大腸桿菌RNA聚合酶研究得比較透徹，其活性形式(全酶)是由α2、β、β和σ4種亞基組成的五聚體蛋白質(zhì)，各亞基及其功能各不相同。α2ββ稱為核心酶，其本身就能催化核苷酸按模板的指引合成RNA，但合成的RNA沒有固定的起始位點(diǎn)。α2ββσ稱為全酶，σ亞基的功能是辨認(rèn)轉(zhuǎn)錄起始點(diǎn)，因此全酶能在特定的起始點(diǎn)上開始轉(zhuǎn)錄?；罴?xì)胞的轉(zhuǎn)錄起始需要全酶，但至轉(zhuǎn)錄延長(zhǎng)階段，僅需要核心酶。利福平和利福霉素能結(jié)合在p亞基上而對(duì)此酶發(fā)生強(qiáng)烈的抑制作用。原核生物的a亞基已發(fā)現(xiàn)多種，通常以其分子質(zhì)量來命名并加以區(qū)分。其中d是最典型的辨認(rèn)轉(zhuǎn)錄起始點(diǎn)的蛋白質(zhì)。轉(zhuǎn)錄起始時(shí)，需要全酶與啟動(dòng)子結(jié)合，但在延長(zhǎng)階段只需要核心酶。

真核生物中已發(fā)現(xiàn)有4種RNA聚合酶，分別稱為RNA聚合酶Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ和線粒體RNA聚合酶，分子質(zhì)量大致都在500kDa左右，它們專一性地轉(zhuǎn)錄不同的基因，因此由它們催化的轉(zhuǎn)錄產(chǎn)物也各不相同。RNA聚合酶Ⅰ合成RNA的活性最顯著，負(fù)責(zé)轉(zhuǎn)錄編碼rRNA的基因，細(xì)胞內(nèi)絕大部分RNA是rRNA。RNA聚合酶Ⅱ負(fù)責(zé)核內(nèi)不均一RNA(hnRNA)的合成，hnRNA是mRNA的前體。RNA聚合酶Ⅲ負(fù)責(zé)合成tRNA和許多小的核內(nèi)RNA。鵝膏蕈堿是真核生物RNA聚合酶特異性抑制劑，各種真核生物RNA聚合酶對(duì)鵝膏蕈堿的反應(yīng)不同。

真核生物RNA聚合酶分子質(zhì)量較原核生物的大，而且結(jié)構(gòu)復(fù)雜。它們都含有2個(gè)大亞基和12～15個(gè)小亞基，各亞基的功能尚不清楚。但其核心亞基與大腸桿菌核心酶高度同源。原核生物RNA聚合酶全酶可以直接結(jié)合啟動(dòng)子，靠RNA聚合酶就可完成起始、延長(zhǎng)、終止的轉(zhuǎn)錄全過程。真核生物RNA聚合酶不與DNA分子直接結(jié)合，而是通過各種轉(zhuǎn)錄因子的作用間接結(jié)合DNA模板，從而完成轉(zhuǎn)錄過程。

2.簡(jiǎn)述原核生物轉(zhuǎn)錄終止的兩種方式。

轉(zhuǎn)錄是在DNA模板某一位置上停止的，人們比較了若干原核生物RNA轉(zhuǎn)錄終止位點(diǎn)附近的DNA序列，發(fā)現(xiàn)D