腫瘤病理診斷

腫瘤病理學(xué)診斷第1頁(yè)主要內(nèi)容第一節(jié)概述第二節(jié)腫瘤病理學(xué)診斷分類第三節(jié)腫瘤病理學(xué)診斷常用技術(shù)及應(yīng)用第四節(jié)腫瘤病理學(xué)診斷臨床應(yīng)用范例第2頁(yè)一、腫瘤病理學(xué)診斷發(fā)展歷程二、病理學(xué)診斷在腫瘤診斷中作用三、病理學(xué)診斷不足

四、腫瘤命名及分類五、腫瘤病理分級(jí)和分期第一節(jié)概述第3頁(yè)一、腫瘤病理學(xué)診斷發(fā)展歷程解剖學(xué)意大利解剖學(xué)家↓

18世紀(jì)中葉

器官（大體）病理學(xué)德國(guó)病理學(xué)家↓

19世紀(jì)中葉組織（細(xì)胞）病理學(xué)德國(guó)物理學(xué)家↓

20世紀(jì)30年代超微構(gòu)造病理學(xué)

奧地利醫(yī)學(xué)家↓

20世紀(jì)50年代免疫病理學(xué)分子生物學(xué)↓20世紀(jì)70年代分子病理學(xué)第4頁(yè)伴隨醫(yī)學(xué)技術(shù)發(fā)展，目前腫瘤病理學(xué)診斷已趨向于MICM綜合診斷-----

形態(tài)學(xué)（morphology,M）

病理診斷基礎(chǔ)和標(biāo)準(zhǔn)，是精髓免疫學(xué)（immunology,I）

病理診斷及鑒別診斷伎倆細(xì)胞遺傳學(xué)（cytogenetics,C）

病因?qū)W診斷前提分子生物學(xué)（Moleculebiology，M）

病理診斷發(fā)展方向

--------腫瘤病理學(xué)發(fā)展第5頁(yè)二、病理診斷在腫瘤診斷中作用主要作用有：①明確疾病性質(zhì)；②判斷腫瘤起源；③對(duì)腫瘤進(jìn)行組織學(xué)分類、分型；④評(píng)價(jià)腫瘤惡性程度或分化程度；⑤確定術(shù)后腫瘤病理分期；⑥確定有沒(méi)有腫瘤復(fù)發(fā)、轉(zhuǎn)移；⑦為個(gè)體化治療及靶向藥品選擇提供根據(jù)；⑧為腫瘤患者提供預(yù)后信息；第6頁(yè)常規(guī)病理診斷流程第7頁(yè)病理診斷工作流程手術(shù)切除或活檢標(biāo)本接收、固定取材、包埋切片、染色、封片組織學(xué)閱片免疫組化/分子生物學(xué)綜合診斷外科或腫瘤醫(yī)生醫(yī)生/技術(shù)人員醫(yī)生/技術(shù)人員技術(shù)人員病理醫(yī)生醫(yī)生和技術(shù)人員病理醫(yī)生技術(shù)有關(guān)原因＋人員有關(guān)原因↓病理診斷不足正確病理診斷是病理醫(yī)生和病理技術(shù)員集體勞動(dòng)和智慧結(jié)晶影響病理診斷原因第8頁(yè)三、病理診斷不足技術(shù)方面：標(biāo)本固定正確及時(shí)；組織處理流程合理；制片質(zhì)量達(dá)成要求；特染及免疫組化操作規(guī)范人員方面：標(biāo)本獲取（臨床醫(yī)生、病理醫(yī)生）合適；病理醫(yī)生經(jīng)驗(yàn)和水平等使得病理診斷有主觀性和經(jīng)驗(yàn)性疾病本身：疾病是發(fā)展變化，有疾病只有在一定階段才顯示具有診斷意義特性性變化，而鏡下變化則是靜止于某一時(shí)刻畫(huà)面，只反應(yīng)疾病某一階段病理變化，有不足。檢查本身：病理檢查屬于抽樣檢查（送檢/取材/切片）有時(shí)不能代表整個(gè)病變（穿刺/鏡檢組織等），具有片面性精確病理診斷需要詳細(xì)病史和臨床資料，有時(shí)還需結(jié)合免疫組化、超微構(gòu)造、細(xì)胞遺傳學(xué)和分子生物學(xué)特性等。臨時(shí)不能明確診斷需要隨訪觀測(cè)。第9頁(yè)

1、腫瘤概念致瘤原因克隆性增生腫瘤正常細(xì)胞局部組織、細(xì)胞在致瘤因子作用下，在基因水平上失去正常調(diào)控而致相對(duì)無(wú)限制增生，形成腫塊特點(diǎn)：異常增生新生物，相對(duì)無(wú)限制性生長(zhǎng)，失去成熟分化能力，與機(jī)體需要不相適應(yīng)良性腫瘤分化好，生長(zhǎng)遲緩，不易復(fù)發(fā)，對(duì)機(jī)體影響小惡性腫瘤生長(zhǎng)迅速，浸潤(rùn)生長(zhǎng)，易復(fù)發(fā)和轉(zhuǎn)移，對(duì)機(jī)體危害大四、腫瘤分類與命名第10頁(yè)腫瘤分類：根據(jù)腫瘤特性及其對(duì)機(jī)體影響和危害：良性、交界性和惡性根據(jù)組織學(xué)分化方向：上皮、間葉根據(jù)病因、組織分化、病理形態(tài)和腫瘤發(fā)展階段等分類根據(jù)臨床、IHC表型和分子遺傳學(xué)變化分類2、腫瘤分類及命名第11頁(yè)

良、惡性腫瘤區(qū)分腫瘤異型性（Atypia）概念：差異腫瘤組織起源正常組織任何腫瘤組織無(wú)論在細(xì)胞形態(tài)上或組織構(gòu)造上都與其起源正常組織有不一樣程度差異，這種差異稱腫瘤異型性其決定腫瘤性質(zhì)，異型性大腫瘤惡性程度高異型性體現(xiàn)為------構(gòu)造異型性；細(xì)胞異型性；核異型性-------腫瘤分類及命名第12頁(yè)---構(gòu)造異型構(gòu)造異型：腫瘤失去正常構(gòu)造，細(xì)胞排列紊亂，數(shù)目增多，無(wú)極性-------腫瘤分類及命名第13頁(yè)腫瘤組織異型性----細(xì)胞異型

細(xì)胞異型性：腫瘤細(xì)胞大小、形態(tài)不一致，可見(jiàn)瘤巨細(xì)胞。

分化好瘤細(xì)胞異型性小，分化差異型性大-------腫瘤分類及命名第14頁(yè)腫瘤組織異型性----核異型性

大、多、怪、粗、深、病理性核分裂-------腫瘤分類及命名核異型性：核大深染，染色質(zhì)粗糙，核漿比增大，核仁大，多核及病理性核分裂像。良性腫瘤異型性小，惡性腫瘤異型性大第15頁(yè)良、惡性腫瘤區(qū)分良性腫瘤惡性腫瘤細(xì)胞分化及異型核分裂生長(zhǎng)方式與周?chē)M織關(guān)系包膜及邊界生長(zhǎng)速度繼發(fā)變化復(fù)發(fā)與轉(zhuǎn)移對(duì)機(jī)體影響分化好、異型性小無(wú)/少外生性，膨脹性推擠性常有包膜，界清較慢出血壞死及鈣化少見(jiàn)無(wú)/很少較少分化差、異型性大多/病理性核分裂侵襲性（浸潤(rùn)性）破壞性無(wú)包膜、界不清快/短期迅速生長(zhǎng)出血壞死/潰爛常見(jiàn)常見(jiàn)較大，甚至危及生命-------腫瘤分類與命名第16頁(yè)

良性腫瘤一般稱為“瘤”部位+組織起源+“瘤”如：背部脂肪瘤部位+形態(tài)+“瘤”如：皮膚乳頭狀瘤

部位+形態(tài)+組織起源+“瘤”

如：卵巢漿液性乳頭狀囊腺瘤交界性腫瘤腫瘤命名：定義:介于良性與惡性之間一類腫瘤命名：在原有良性名稱前加“交界性”腫瘤命名標(biāo)準(zhǔn)：腫瘤性質(zhì)、組織起源、發(fā)生部位及特殊形態(tài)-------腫瘤分類與命名第17頁(yè)

惡性腫瘤命名

上皮組織起源---癌（carcinoma）部位+組織起源+癌如：皮膚鱗狀細(xì)胞癌間葉組織起源---肉瘤(sarcoma)

部位+組織起源+肉瘤如：皮下纖維肉瘤幼稚組織起源---母細(xì)胞瘤

部位+（組織起源）+母細(xì)胞瘤

如：腎母細(xì)胞瘤，腹膜后神經(jīng)母細(xì)胞瘤其他沿用或習(xí)慣名稱

如:惡性畸胎瘤/Ewing’stumor/精原細(xì)胞瘤轉(zhuǎn)移性腫瘤命名：

轉(zhuǎn)移部位+轉(zhuǎn)移性+組織起源

如：肝轉(zhuǎn)移性腺癌-------腫瘤分類與命名第18頁(yè)1、分級(jí)（Grading）：目：確定腫瘤惡性程度，為臨床治療和預(yù)后判斷提供依據(jù)標(biāo)準(zhǔn)：按腫瘤分化程度、異型性、核分裂數(shù)和類型等方法：多采用3級(jí)分級(jí)法，也有4級(jí)法或2級(jí)法五、腫瘤病理分級(jí)和分期腺癌分級(jí)：高分化中分化低分化第19頁(yè)-----腫瘤分級(jí)與分期

2.分期（staging)目：評(píng)估腫瘤擴(kuò)散程度，制定治療方案、評(píng)價(jià)療效、判斷預(yù)后及醫(yī)師之間信息交流方法：TNM分期法【美國(guó)癌癥聯(lián)合會(huì)（AJCC）制定】原則：①腫瘤部位；②腫瘤大小以及數(shù)目；③淋巴結(jié)受侵情況；④遠(yuǎn)處轉(zhuǎn)移。T:（tumor）原發(fā)瘤大小、浸潤(rùn)深度、范圍、鄰近器官累及（1-4）N:（lymphnode）有無(wú)局部淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移（0-3）M:（metastasis）有無(wú)遠(yuǎn)處轉(zhuǎn)移（0-1）不同腫瘤TNM分期具體標(biāo)準(zhǔn)，由各專業(yè)會(huì)議協(xié)定不同TNM組合，代表不同期別第20頁(yè)第二節(jié)腫瘤病理學(xué)診斷分類腫瘤組織病理學(xué)診斷：指活檢或切除組織，通過(guò)組織處理、浸蠟包埋、切片鏡下觀測(cè)作出診斷。

最抱負(fù)診斷辦法。腫瘤細(xì)胞病理學(xué)診斷：根據(jù)脫落細(xì)胞學(xué)、穿刺細(xì)胞學(xué)以及外周血涂片檢查而作出診斷?？煽啃圆荒艿韧诮M織病理學(xué)診斷。第21頁(yè)獲取標(biāo)本辦法標(biāo)本處理腫瘤大體形態(tài)觀測(cè)制片類型和適用范圍病理診斷報(bào)告書(shū)病理會(huì)診一、腫瘤組織病理學(xué)診斷第22頁(yè)1、獲取標(biāo)本辦法---標(biāo)本類型穿刺活檢（coreneedlebiopsy）

鉗取活檢（bitebiopsy）

切開(kāi)活檢（incisionalbiopsy）切除活檢（excisionalbiopsy）

2、標(biāo)本處理---標(biāo)本固定標(biāo)本固定是病理診斷前提和基礎(chǔ)。離體后半小時(shí)內(nèi)固定固定液：10％中性緩沖福爾馬林固定液體積：組織/固定液為1/5-10固定期間：6～48小時(shí)（穿透能力1mm/h）較大標(biāo)本還應(yīng)剖開(kāi)后再固定-----------腫瘤組織病理學(xué)檢查第23頁(yè)3、標(biāo)本大體觀測(cè)

部位：不一樣腫瘤有其特定好發(fā)部位數(shù)目：多少不一大?。喝Q與腫瘤性質(zhì)、生長(zhǎng)時(shí)間和部位，有些腫瘤體積是判斷良惡性主要指標(biāo)（如GIST）顏色：取決與腫瘤組織細(xì)胞及其代謝產(chǎn)物顏色---

脂肪瘤、血管瘤、黑色素瘤、綠色瘤如變性、出血、壞死可變化原有顏色質(zhì)地：取決與腫瘤組織及間質(zhì)成份多少-----------腫瘤組織病理學(xué)檢查第24頁(yè)腫瘤形狀及生長(zhǎng)方式：對(duì)識(shí)別腫瘤良惡性意義重大

良性：膨脹性、境界清楚生長(zhǎng)慢；惡性：浸潤(rùn)性、生長(zhǎng)快-----------腫瘤組織病理學(xué)檢查腫瘤生長(zhǎng)方式、發(fā)生部位、組織起源和腫瘤良惡性密切有關(guān)

第25頁(yè)4、病理切片類型和適用范圍常規(guī)石蠟切片：是最常用制片方法。一般需要2天完成。長(zhǎng)處：取材全面，質(zhì)量穩(wěn)定，結(jié)構(gòu)清楚。適用于各種標(biāo)本組織學(xué)檢查。迅速石蠟切片：通過(guò)加熱或微波方法減少組織處理時(shí)間，適用于小標(biāo)本迅速診斷。不宜進(jìn)行免疫組化和分子病理等深入檢查。-----------腫瘤組織病理學(xué)檢查第26頁(yè)冷凍切片：新鮮組織，用恒冷切片機(jī)制作切片，30分鐘完成報(bào)告。常用于術(shù)中手術(shù)方案選擇。只能作為參照性意見(jiàn)，最后以常規(guī)石蠟切為準(zhǔn)。適應(yīng)證：①確定病變性質(zhì)，決定手術(shù)方案腫瘤/非腫瘤，良性/惡性/交界性腫瘤；②理解腫瘤播散情況，是否侵犯鄰近組織，有沒(méi)有區(qū)域淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移。③確定手術(shù)切緣有沒(méi)有腫瘤浸潤(rùn)。④確定切除組織印片：將可疑病變組織與玻片接觸，制成印片染色后觀測(cè)，屬細(xì)胞學(xué)診斷，常與冷凍切片同用，提升術(shù)中診斷確實(shí)診率，也可作為無(wú)法進(jìn)行冷凍切片時(shí)應(yīng)急措施。-----------腫瘤組織病理學(xué)檢查第27頁(yè)5、病理診斷報(bào)告

病理學(xué)診斷報(bào)告書(shū)（病理診斷報(bào)告）是有關(guān)疾病診斷主要醫(yī)學(xué)文書(shū)應(yīng)由具有執(zhí)業(yè)資格注冊(cè)主治醫(yī)師以上（含主治醫(yī)師）病理醫(yī)師簽發(fā)低年資病理科住院醫(yī)、進(jìn)修醫(yī)師和非病理學(xué)專業(yè)醫(yī)師不得簽訂病理學(xué)診斷報(bào)告書(shū)當(dāng)包括醫(yī)、患間醫(yī)療爭(zhēng)議時(shí)，有關(guān)病理學(xué)診斷報(bào)告具有法律意義----《臨床技術(shù)操作規(guī)范?病理學(xué)分冊(cè)》第一章第四條-----------腫瘤組織病理學(xué)檢查第28頁(yè)病理報(bào)告基本內(nèi)容（1）患者基本信息：（2）肉眼和顯微鏡所見(jiàn)：（3）其他有關(guān)檢查成果：（4）附注、補(bǔ)充說(shuō)明或討論：（5）提議：-----------腫瘤組織病理學(xué)檢查第29頁(yè)病理報(bào)告解讀由于病理診斷有主觀性、經(jīng)驗(yàn)性、片面性和不足等原因，根據(jù)病理醫(yī)生對(duì)病理診斷把握程度病理診斷分下列幾個(gè)形式：（1）明確或基本明確診斷：基本明確病理診斷是指病變性質(zhì)已明確，病理確診或基本確診病例，臨床可按其進(jìn)行診治，假如有誤病理醫(yī)生應(yīng)負(fù)責(zé)。（2）不能完全肯定或有所保存診斷：指由于多種原因，不易判定病變性質(zhì)，尤其對(duì)那些僅具有部分診斷標(biāo)準(zhǔn)病變常以此診斷形式表述，在診斷前加上不一樣含義修飾詞，此時(shí)臨床醫(yī)生應(yīng)根據(jù)自己掌握實(shí)際情況結(jié)合病理診斷，作出診斷和治療；或者再深入檢查或觀測(cè)。（3）描述性診斷：送檢組織不能滿足診斷要求，病理醫(yī)生只能進(jìn)行描述。這樣診斷多數(shù)對(duì)臨床幫助很小，還需要深入檢查確診。-----------腫瘤組織病理學(xué)檢查第30頁(yè)病理會(huì)診

病理學(xué)診斷十分主要，常有討論和會(huì)診需求。病理會(huì)診可在病理診斷報(bào)告書(shū)簽發(fā)前和簽發(fā)后。病理會(huì)診包括個(gè)人會(huì)診（personalconsultation）是由于未能明確病理診斷或病理醫(yī)師意見(jiàn)不統(tǒng)一，患者或臨床醫(yī)師要求會(huì)診；醫(yī)院會(huì)診（institutionalconsultation）是病人轉(zhuǎn)院治療時(shí)，需要新單位病理醫(yī)師復(fù)查原有病理切片并給出報(bào)告。

會(huì)診咨詢意見(jiàn)僅供初診病理醫(yī)師參照-----------腫瘤組織病理學(xué)檢查第31頁(yè)二、腫瘤細(xì)胞病理學(xué)檢查1、常用辦法、涂片制作及應(yīng)用脫落細(xì)胞學(xué)檢查：適用于宮頸刮片、痰、多種內(nèi)鏡刷片、胸水、腹水、尿液、乳頭溢液等。細(xì)針穿刺細(xì)胞學(xué)檢查：適用于內(nèi)鏡檢查不能達(dá)成、又不能進(jìn)行脫落細(xì)胞檢查某些器官或腫瘤。淺表腫瘤直接穿刺，深部腫瘤超聲或X線引導(dǎo)下穿刺。標(biāo)本制作：取材后立即涂片，厚薄均勻，涂片干燥前立即置于95%乙醇或乙醇乙醚混合液固定15分鐘染色辦法有巴氏（Papanicoloau）法，瑞氏（Wright）法、吉姆薩（Giemsa）法和HE法等第32頁(yè)2、細(xì)胞病理學(xué)診斷基本內(nèi)容：同組織病理，注明涂片制作及染色辦法診斷報(bào)告基本分類（1）直接表述性診斷：根據(jù)形態(tài)學(xué)觀測(cè)實(shí)際情況，作出診斷。包括肯定性診斷、意向性診斷、描述性診斷、無(wú)法作出細(xì)胞學(xué)診斷（2）TheBethesdaSystem（簡(jiǎn)稱TBS）報(bào)告系統(tǒng)：用于宮頸細(xì)胞學(xué)診斷或甲狀腺細(xì)針穿刺細(xì)胞學(xué)診（3）間接分級(jí)性診斷：

三級(jí)法：分陽(yáng)性、可疑和陰性。巴氏法：分為惡性、高度可疑惡性、可疑惡性、非典型性和陰性五級(jí)。-----------腫瘤細(xì)胞病理學(xué)檢查第33頁(yè)3、細(xì)胞病理學(xué)報(bào)告解讀細(xì)胞病理學(xué)診斷作為診斷病理學(xué)主要分支，在疾病診治上具有與組織病理學(xué)相同主要地位和作用，不允許出現(xiàn)差錯(cuò)和對(duì)檢查成果任意解讀。WHO提議使用直接表述性診斷報(bào)告模式，棄用巴氏五級(jí)法和三級(jí)法等數(shù)字式分級(jí)診斷方式。對(duì)于特殊類別檢查則推薦使用對(duì)應(yīng)報(bào)告系統(tǒng)，例如宮頸細(xì)胞學(xué)和甲狀腺細(xì)針穿刺細(xì)胞學(xué)使用各自TBS報(bào)告系統(tǒng)。-----------腫瘤細(xì)胞病理學(xué)檢查第34頁(yè)4、細(xì)胞病理學(xué)檢查長(zhǎng)處和不足長(zhǎng)處：取材方便，損傷?。凰柙O(shè)備簡(jiǎn)單；操作、制片和檢查過(guò)程迅速；易于推廣和反復(fù)檢查。對(duì)難以獲取組織進(jìn)行病理診斷病例，細(xì)胞學(xué)診斷具有主要價(jià)值。是一種抱負(fù)腫瘤篩查及普查辦法不足：假陰性：受取材等原因影響，一般有10％左右假陰性因此，細(xì)胞學(xué)檢查陰性不代表沒(méi)有腫瘤。假陽(yáng)性：在非惡性腫瘤患者標(biāo)本中查見(jiàn)惡性細(xì)胞。假陽(yáng)性率≤1%。因此細(xì)胞學(xué)診斷應(yīng)密切結(jié)合臨床可靠性較組織病理學(xué)診斷差，不能顯示腫瘤確切部位-----------腫瘤細(xì)胞病理學(xué)檢查第35頁(yè)一、組織化學(xué)技術(shù)及應(yīng)用二、免疫組織化學(xué)技術(shù)及應(yīng)用三、細(xì)胞遺傳學(xué)和分子生物學(xué)技術(shù)四、流式細(xì)胞術(shù)五、電子顯微鏡技術(shù)六、圖像分析技術(shù)七、生物信息學(xué)第三節(jié)

腫瘤病理學(xué)診斷常用技術(shù)及應(yīng)用第36頁(yè)------腫瘤病理學(xué)診斷常用技術(shù)及應(yīng)用

一、組織化學(xué)技術(shù)及應(yīng)用組織化學(xué)（histochemistry）技術(shù)又稱特殊染色是應(yīng)用某些能與細(xì)胞內(nèi)化學(xué)成份特異結(jié)合顯色試劑原位顯示病變細(xì)胞特殊化學(xué)成份（蛋白、核酸、糖類和脂類等）。常用特染有：PAS染色、網(wǎng)狀纖維染色、淀粉染色、抗酸染色、脂肪染色、黏液染色、六胺銀染色等。用途：幫助診斷。如抗酸桿菌、真菌檢測(cè)等在診斷結(jié)核、真菌感染方面有較主要意義；PAS可顯示腺泡狀軟組織肉瘤細(xì)胞質(zhì)內(nèi)結(jié)晶。第37頁(yè)血管周細(xì)胞瘤網(wǎng)染腺泡狀軟組織肉瘤PAS染色特殊染色------腫瘤病理學(xué)診斷常用技術(shù)及應(yīng)用

第38頁(yè)二、免疫組織化學(xué)技術(shù)及應(yīng)用免疫組織化學(xué)（immunohistochemistry，IHC）技術(shù)是利用抗原-抗體特異性結(jié)合原理，用已知抗體或抗原檢測(cè)和定位組織中待測(cè)物質(zhì)一種技術(shù)。1、長(zhǎng)處：特異性強(qiáng)、敏感性高、定位精確，將形態(tài)、功能和代謝密切結(jié)合一起。是病理診斷中最主要、必不可少常規(guī)技術(shù)。2、抗體選擇：

多克隆抗體：敏感性高，但非特異性交叉反應(yīng)較多單克隆抗體：抗原特異性強(qiáng)，但敏感性較低

目前使用兔源性單克隆抗體敏感性高------腫瘤病理學(xué)診斷常用技術(shù)及應(yīng)用

第39頁(yè)3、檢測(cè)辦法：鏈霉親和素生物素（LSAB）法；葡聚糖聚合物（LDP）法；兩步LDP法（EnVision法），4、不足：①?zèng)]有絕對(duì)特異抗體，一種抗原可在多種腫瘤中體現(xiàn)；②相稱數(shù)量腫瘤缺乏特異抗原體現(xiàn)；③部分腫瘤因分化極低不體現(xiàn)有關(guān)抗原；④有時(shí)不一樣抗體滴度有不一樣陽(yáng)性成果；⑤內(nèi)源性生物素可造成假陽(yáng)性；⑥不一樣試驗(yàn)室間成果不一定完全一致；⑦定性檢查，還不能進(jìn)行定量分析

試驗(yàn)室質(zhì)量控制和規(guī)范化正確技術(shù)操作是免疫組化成果可靠前提及保障------腫瘤病理學(xué)診斷常用技術(shù)及應(yīng)用

第40頁(yè)5、免疫組化應(yīng)用輔助腫瘤分類；內(nèi)分泌腫瘤功能檢測(cè)，確定診斷及功能分類；輔助判定病變性質(zhì)；發(fā)覺(jué)微小轉(zhuǎn)移灶，尋找轉(zhuǎn)移性腫瘤原發(fā)灶；輔助腫瘤分期：判斷腫瘤是原位還是浸潤(rùn)，有沒(méi)有血管、淋巴管侵犯與腫瘤分期密切有關(guān)；指導(dǎo)治療和預(yù)后：與預(yù)后有關(guān)標(biāo)識(shí)：①類固醇激素受體：ER、PR、AR等體現(xiàn)預(yù)后好；②腫瘤基因標(biāo)識(shí)：癌基因HER-2體現(xiàn)預(yù)后差；③細(xì)胞增殖標(biāo)識(shí)：如Ki-67、PCNA等高體現(xiàn)提醒腫瘤生長(zhǎng)快。靶向治療標(biāo)識(shí)：HER-2、CD20、CD117、EGFR、Kras、BRAF基因等------腫瘤病理學(xué)診斷常用技術(shù)及應(yīng)用

第41頁(yè)P(yáng)RER52歲F縱隔淋巴結(jié)腫大------腫瘤病理學(xué)診斷常用技術(shù)及應(yīng)用

第42頁(yè)老年女性肺部包塊------腫瘤病理學(xué)診斷常用技術(shù)及應(yīng)用

第43頁(yè)三、細(xì)胞遺傳學(xué)和分子生物學(xué)技術(shù)細(xì)胞遺傳學(xué)與分子病理學(xué)診斷在增加腫瘤診斷精確性、指導(dǎo)腫瘤治療及預(yù)后評(píng)定中具有主要意義。1、核型分析（karyotypeanalysis）細(xì)胞遺傳學(xué)常用分析辦法，用形態(tài)學(xué)辦法研究染色體數(shù)目及構(gòu)造異常，是腫瘤診斷一種輔助辦法。需要新鮮組織2、熒光原位雜交（FISH）用熒光素標(biāo)識(shí)已知DNA探針與組織切片上腫瘤組織雜交，在熒光顯微鏡下觀測(cè)，顯示與其對(duì)應(yīng)染色體某個(gè)區(qū)段或整條染色體。適用于染色體易位、缺失和擴(kuò)增檢測(cè)，對(duì)腫瘤確診和治療有主要意義。新鮮組織/石蠟切片。缺陷：熒光易淬滅，不能長(zhǎng)期保存。3、比色原位雜交（CISH）用酶替代熒光檢測(cè)，在保持腫瘤構(gòu)造和細(xì)胞學(xué)特點(diǎn)下分析染色體變化。最常用于基因擴(kuò)增。長(zhǎng)處：不需要熒光顯微鏡、照相設(shè)備和分析軟件，且價(jià)格更低廉，組織切片能長(zhǎng)期保存。缺陷：敏感性不如FISH法。------腫瘤病理學(xué)診斷常用技術(shù)及應(yīng)用

第44頁(yè)4、比較基因組雜交（CGH）將消減雜交、熒光原位雜交相結(jié)合，檢測(cè)DNA序列拷貝數(shù)變異并將其定位在染色體上辦法。長(zhǎng)處：僅需微量腫瘤細(xì)胞DNA，一次試驗(yàn)就可對(duì)整個(gè)基因組中所有遺傳物質(zhì)異常進(jìn)行分析。可用新鮮標(biāo)本、石蠟包埋標(biāo)本甚至福爾馬林固定標(biāo)本。缺陷：對(duì)缺失檢出需由其他辦法加以證明，對(duì)構(gòu)造重排不能檢出。敏捷度和辨別率有待提升5、Southern印跡雜交（Southernblothybridization）是進(jìn)行基因組DNA特定序列定位通用辦法。在DNA圖譜分析及PCR產(chǎn)物分析等方面有主要價(jià)值。長(zhǎng)處：檢測(cè)抗原受體基因所有重排。缺陷：操作復(fù)雜、費(fèi)時(shí)6、聚合酶鏈反應(yīng)（PCR）是指在DNA聚合酶催化下，以母鏈DNA為模板，體外復(fù)制出與母鏈模板DNA互補(bǔ)子鏈DNA過(guò)程。假如提取腫瘤細(xì)胞中mRNA，經(jīng)反轉(zhuǎn)錄酶作用，合成cDNA，再以此為模板進(jìn)行聚合酶鏈反應(yīng)，稱為反轉(zhuǎn)錄PCR(RT-PCR)。長(zhǎng)處：技術(shù)操作簡(jiǎn)便、迅速、敏感性高，已作為常規(guī)分子生物學(xué)檢測(cè)辦法，廣泛應(yīng)用于腫瘤診斷、治療及預(yù)后判斷。------腫瘤病理學(xué)診斷常用技術(shù)及應(yīng)用

第45頁(yè)7、生物芯片技術(shù)（biochip）：是近年發(fā)展起來(lái)高新技術(shù)，按生物芯片上樣品儲(chǔ)存不一樣類型信息，可分為：基因芯片：在臨床上可用于腫瘤診斷、篩查及抗腫瘤藥品選擇；蛋白質(zhì)芯片：在臨床上可用于腫瘤診斷、篩查及抗腫瘤藥品選擇；組織芯片：是將數(shù)十個(gè)至數(shù)百個(gè)小組織片排列在載體上而成組織微陣列。是一種高通量、大樣本以及迅速分子水平分析工具。8、DNA單鏈構(gòu)象多態(tài)性技術(shù)

（SSCP）是一種基于單鏈DNA構(gòu)象差異來(lái)檢測(cè)點(diǎn)突變辦法。廣泛用于腫瘤診斷和研究9、DNA測(cè)序技術(shù)（DNAsequencing）能可靠地檢測(cè)出發(fā)生點(diǎn)突變DNA核苷酸。第二代測(cè)序技術(shù)通過(guò)捕捉新合成末端標(biāo)識(shí)來(lái)確定DNA序列。比新一代測(cè)序平臺(tái)通量更高、速度更加快。能夠開(kāi)展全基因體現(xiàn)圖譜分析，臨床醫(yī)師能夠通過(guò)全基因組圖譜，理解腫瘤患者整體遺傳信息，對(duì)診斷、治療和用藥提供指導(dǎo)性意見(jiàn)。------腫瘤病理學(xué)診斷常用技術(shù)及應(yīng)用

第46頁(yè)

四、流式細(xì)胞術(shù)（flowcytometry）用流式細(xì)胞儀進(jìn)行迅速細(xì)胞定量分析和分類新技術(shù)長(zhǎng)處：速度快，精確性和敏捷性高，可同步測(cè)定6～8個(gè)參數(shù)。缺陷：新鮮組織細(xì)胞懸液。應(yīng)用：①分析腫瘤細(xì)胞增殖周期，評(píng)定腫瘤生物學(xué)行為；

②分析細(xì)胞增殖與凋亡；

③分析細(xì)胞分化、輔助良惡性鑒別；

④腫瘤有關(guān)基因定量分析，為預(yù)后判斷提供根據(jù)；

⑤多藥耐藥基因產(chǎn)物定量，為化療藥品選擇提供根據(jù)；

⑥腫瘤療效監(jiān)測(cè)，殘余腫瘤細(xì)胞檢測(cè)判定腫瘤有沒(méi)有復(fù)發(fā)。------腫瘤病理學(xué)診斷常用技術(shù)及應(yīng)用

第47頁(yè)五、電子顯微鏡技術(shù)（electronmicroscopy）是病理診斷和研究基本技術(shù)。能清楚顯示細(xì)胞微細(xì)構(gòu)造。用于疾病病因和發(fā)病機(jī)制研究，及診斷和鑒別診斷。六、圖像分析技術(shù)（imageanalysis）利用圖像分析儀或圖像分析系統(tǒng)，客觀地測(cè)量組織特性。主要用于核形態(tài)參數(shù)測(cè)定（包括細(xì)胞核直徑、周長(zhǎng)、面積和體積）、DNA倍體測(cè)定和定量分析，有時(shí)還可輔助腫瘤病理學(xué)分級(jí)和預(yù)后判斷。七、生物信息學(xué)（bioinformatics）是由人類基因組計(jì)劃發(fā)展而產(chǎn)生一門(mén)新興交叉學(xué)科。包括生物學(xué)、數(shù)學(xué)和計(jì)算機(jī)科學(xué)，包括癌癥基因組學(xué)、癌癥轉(zhuǎn)錄組學(xué)、蛋白質(zhì)組學(xué)、常用癌癥數(shù)據(jù)庫(kù)資源（包括癌癥基因組計(jì)劃和美國(guó)人類基因組資源）等

--------病理學(xué)診斷常用技術(shù)及應(yīng)用第48頁(yè)第四節(jié)病理學(xué)診斷臨床應(yīng)用范例MICM多學(xué)科病理診斷在惡性腫瘤中應(yīng)用一、乳腺癌組織形態(tài)學(xué)特性組織學(xué)類型：組織學(xué)分級(jí)及核分級(jí)：脈管浸潤(rùn)情況：局部淋巴結(jié)及全身各臟器轉(zhuǎn)移情況pTNM分期傳統(tǒng)形態(tài)病理學(xué)診斷沒(méi)有納入可影響患者預(yù)后及治療方案選擇生物學(xué)指標(biāo)，存在一定不足。第49頁(yè)第50頁(yè)二、乳腺癌免疫病理學(xué)檢測(cè)1.雌、孕激素受體檢測(cè)：75%乳腺癌細(xì)胞體現(xiàn)ER、PR免疫組化是檢測(cè)ER、PR最佳辦法判定成果：按照腫瘤細(xì)胞染色數(shù)量和強(qiáng)度ER和/PR陽(yáng)性患者可用他莫昔芬和芳香化酶抑制劑等內(nèi)分泌治療ER和/PR體現(xiàn)缺失（陰性）是乳腺癌高危原因第51頁(yè)2.人類表皮生長(zhǎng)因子受體2（HER2）免