食品微生物技術(shù)實(shí)訓(xùn) 大腸菌群測(cè)定 課件

適合專業(yè)（群）：食品加工技術(shù)專業(yè)群教師：萬(wàn)國(guó)福食品微生物技術(shù)實(shí)訓(xùn)項(xiàng)目教程行動(dòng)領(lǐng)域任務(wù)一

菌落總數(shù)測(cè)定任務(wù)二大腸菌群檢驗(yàn)任務(wù)三霉菌、酵母菌檢驗(yàn)任務(wù)四乳酸菌檢驗(yàn)做前準(zhǔn)備試管、平皿和吸量管的包扎滅菌培養(yǎng)基的制備任務(wù)二大腸菌群檢驗(yàn)一、實(shí)驗(yàn)?zāi)康?、學(xué)習(xí)測(cè)定食品中大腸菌群檢測(cè)程序、方法；2、掌握大腸菌群檢測(cè)結(jié)果的報(bào)告方式。二、實(shí)驗(yàn)原理

大腸菌群系指一群在37℃、24小時(shí)能發(fā)酵乳糖產(chǎn)酸產(chǎn)氣，需氧或兼性厭氧的革蘭氏陰性無(wú)芽孢桿菌。主要由腸桿菌科中埃希氏菌屬、腸桿菌屬、克雷伯氏菌屬的一部分及沙門氏屬的Ⅲ亞屬細(xì)菌組成。三、實(shí)驗(yàn)器材

培養(yǎng)基：LST培養(yǎng)基、GLGB培養(yǎng)基

器皿：1mL吸管、10mL吸管；試管（15×150），500mL三角錐瓶

其他：酒精燈、恒溫培養(yǎng)箱四、操作方法檢樣程序1、檢樣稀釋

檢樣25mL

放于含有225mL滅菌蒸餾水10-1檢樣的制備10-2、10-3檢樣的制備

每個(gè)樣品，選擇3個(gè)適宜的連續(xù)稀釋度的樣品勻液（液體樣品可以選擇原液），每個(gè)稀釋度接種3管月桂基硫酸鹽胰蛋白胨（LST）肉湯，每管接種1mL（如接種量超過(guò)1mL，則用雙料LST肉湯）,36℃±1℃培養(yǎng)24h±2h，觀察倒管內(nèi)是否有氣泡產(chǎn)生，如未產(chǎn)氣則繼續(xù)培養(yǎng)至48h±2h。

記錄在24h和48h內(nèi)產(chǎn)氣的LST肉湯管數(shù)。未產(chǎn)氣者為大腸菌群陰性，產(chǎn)氣者則進(jìn)行復(fù)發(fā)酵試驗(yàn)。2、初發(fā)酵每個(gè)稀釋度接種在3支LST發(fā)酵管中

用接種環(huán)從所有48h±2h內(nèi)發(fā)酵產(chǎn)氣的LST肉湯管中分別取培養(yǎng)物l環(huán)，移種于煌綠乳糖膽鹽(BGLB）肉湯管中，36℃±1℃培養(yǎng)48h±2h

，觀察產(chǎn)氣情況。產(chǎn)氣者，計(jì)為大腸菌群陽(yáng)性管。3、復(fù)發(fā)酵五、實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)及結(jié)果數(shù)據(jù)填表，根據(jù)實(shí)驗(yàn)證實(shí)為大腸菌群陽(yáng)性管數(shù)，查MPN檢索表，報(bào)告每g或mL大腸菌群的最可能數(shù)。稀釋度LST初發(fā)酵情況（產(chǎn)氣泡支數(shù)）BGLB復(fù)發(fā)酵情況（產(chǎn)氣泡支數(shù)）查MPN結(jié)論根據(jù)試驗(yàn)結(jié)果，