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吡蟲啉等4種農(nóng)藥對(duì)克氏原螯蝦和中華絨螯蟹的急性毒性試驗(yàn)
近年來(lái),稻田綜合栽培已成為一種新興的高效養(yǎng)殖技術(shù)模式。其特點(diǎn)是水稻、蝦、蟹和魚類等水生生物的共同生態(tài)特性和生活特征的綜合利用,形成了一種三維繁殖模式。1材料和方法1.1試驗(yàn)農(nóng)藥基本信息試驗(yàn)用中華絨螯蟹[體質(zhì)量(9.65±1.82)g]和克氏原螯蝦[體質(zhì)量(1.96±0.74)g],均自南京市高淳區(qū)養(yǎng)殖戶獲得,暫養(yǎng)于有生物過(guò)濾水再循環(huán)系統(tǒng)(配備有冷卻和加熱功能,流速5L/min,光照時(shí)間14h)的水族箱中(每箱放養(yǎng)中華絨螯蟹30~40尾或克氏原螯蝦80~100尾,水族箱體積為0.18m2種試驗(yàn)農(nóng)藥基本信息見表2。1.2藥物質(zhì)量濃度的確定采用急性毒性試驗(yàn)方法,選取規(guī)格一致、附肢完全、健康狀況良好的克氏原螯蝦和中華絨螯蟹用于預(yù)試驗(yàn)。結(jié)果顯示,克氏原螯蝦對(duì)吡蟲啉和辛硫磷24h的無(wú)死亡質(zhì)量濃度和全致死質(zhì)量濃度區(qū)間分別約為1~70mg/L、0.001~0.030mg/L;中華絨螯蟹對(duì)吡蟲啉和辛硫磷24h的無(wú)死亡質(zhì)量濃度和全致死質(zhì)量濃度區(qū)間分別為10~700mg/L、0.1~5.0mg/L;準(zhǔn)備70cm×48cm×30cm的水族箱若干,根據(jù)預(yù)試驗(yàn)結(jié)果,按等對(duì)數(shù)間距設(shè)置藥物質(zhì)量濃度梯度,并設(shè)置1個(gè)空白對(duì)照組,每組設(shè)3個(gè)平行。每個(gè)質(zhì)量濃度的配制藥液放置試驗(yàn)動(dòng)物20尾,雌雄各半。試驗(yàn)期間不間斷充氧,每24h更換一次相同質(zhì)量濃度新配的染毒溶液。試驗(yàn)中觀察試驗(yàn)動(dòng)物的活動(dòng)狀況,隨時(shí)取出死亡個(gè)體,試驗(yàn)動(dòng)物的死亡以鑷子觸碰無(wú)反應(yīng)為準(zhǔn),試驗(yàn)周期為96h,期間不投喂,記錄各質(zhì)量濃度組試驗(yàn)動(dòng)物在24、48、72、96h時(shí)的死亡數(shù)量。1.3試驗(yàn)數(shù)據(jù)的分析利用SPSS統(tǒng)計(jì)軟件對(duì)試驗(yàn)數(shù)據(jù)進(jìn)行線性回歸統(tǒng)計(jì)分析,得出24、48、72、96h累計(jì)死亡率(經(jīng)驗(yàn)公式:SC=96hLC2結(jié)果與分析2.1吡蟲啉對(duì)克氏原螯蝦的毒性作用放入吡蟲啉溶液中的大部分試驗(yàn)蝦并未有異常反應(yīng),隨著時(shí)間的延長(zhǎng),部分試驗(yàn)蝦開始聚集抱團(tuán),活力下降,靜伏在水底,直至死亡。只有60mg/L質(zhì)量濃度組的個(gè)別試驗(yàn)蝦上下竄游,隨后腹部向上,只有游泳足游動(dòng)。死亡個(gè)體尾部蜷曲,體色發(fā)白,極少數(shù)個(gè)體體色發(fā)紅。剛放入辛硫磷溶液中的試驗(yàn)蝦游動(dòng)快速,異常活躍,隨后適應(yīng),隨著時(shí)間的延長(zhǎng),試驗(yàn)蝦的活力隨之下降,排泄物增加,有部分活力較好的試驗(yàn)蝦趴在活力較差的個(gè)體上,死亡個(gè)體腹部朝上,尾部卷曲,體色發(fā)白。不同質(zhì)量濃度吡蟲啉對(duì)克氏原螯蝦的毒性作用見圖1。當(dāng)吡蟲啉質(zhì)量濃度≤1.865mg/L時(shí),24h克氏原螯蝦的活力與對(duì)照組無(wú)差異,無(wú)明顯異常和死亡,24h后個(gè)別克氏原螯蝦活動(dòng)緩慢且失去平衡,死亡率逐漸升高;當(dāng)吡蟲啉質(zhì)量濃度為30mg/L時(shí),24h內(nèi)克氏原螯蝦的死亡數(shù)量達(dá)到半數(shù),且剩余克氏原螯蝦活力下降;當(dāng)吡蟲啉質(zhì)量濃度為60mg/L時(shí),克氏原螯蝦在72h全數(shù)死亡。不同質(zhì)量濃度辛硫磷脅迫下克氏原螯蝦96h內(nèi)的死亡數(shù)量和質(zhì)量濃度—累計(jì)死亡率見圖2。當(dāng)辛硫磷質(zhì)量濃度≤0.001563mg/L時(shí),克氏原螯蝦的活力在24h內(nèi)均與對(duì)照組無(wú)差異;當(dāng)辛硫磷質(zhì)量濃度為0.0125mg/L時(shí),24h內(nèi)克氏原螯蝦的死亡率為25%;當(dāng)辛硫磷質(zhì)量濃度為0.0250mg/L時(shí),克氏原螯蝦的死亡數(shù)急劇增加,且在48h全數(shù)死亡。2.2質(zhì)量濃度吡蟲啉對(duì)中華絨螯蟹的毒性作用放入吡蟲啉溶液中的大部分試驗(yàn)蟹并未有異常反應(yīng);隨著時(shí)間的延長(zhǎng),部分試驗(yàn)蟹整體出現(xiàn)抱團(tuán)現(xiàn)象,向氣石處聚集,且活動(dòng)緩慢,靜伏于水中;死亡個(gè)體肢體完整、外形無(wú)異常。剛放入辛硫磷溶液中的試驗(yàn)蟹反應(yīng)強(qiáng)烈,來(lái)回快速游動(dòng),急于逃離試驗(yàn)環(huán)境;隨著時(shí)間延長(zhǎng),反應(yīng)減弱,沉于水底;死亡的中華絨螯蟹大部分足脫落,腹部向上,眼睛呈白色,體色也由暗轉(zhuǎn)淡。不同質(zhì)量濃度吡蟲啉對(duì)中華絨螯蟹的毒性作用見圖3。當(dāng)吡蟲啉質(zhì)量濃度≤10mg/L時(shí),中華絨螯蟹的活力與對(duì)照組無(wú)差異,僅在96h時(shí)出現(xiàn)個(gè)別死亡;當(dāng)吡蟲啉質(zhì)量濃度≤20mg/L時(shí),24h內(nèi)中華絨螯蟹反應(yīng)與對(duì)照組無(wú)明顯差異,未見死亡,在48h時(shí),個(gè)別中華絨螯蟹死亡;當(dāng)吡蟲啉質(zhì)量濃度為80mg/L時(shí),48h中華絨螯蟹的死亡率為50%,且持續(xù)上升。不同質(zhì)量濃度辛硫磷脅迫下中華絨螯蟹96h內(nèi)的死亡率見圖4。當(dāng)辛硫磷質(zhì)量濃度為0.1mg/L時(shí),48h內(nèi)中華絨螯蟹無(wú)明顯異常,有極個(gè)別活動(dòng)緩慢,在72h時(shí)出現(xiàn)死亡現(xiàn)象,死亡個(gè)體肢體完整;當(dāng)辛硫磷質(zhì)量濃度≥0.2mg/L時(shí),隨著時(shí)間的增加,中華絨螯蟹的死亡率逐漸升高;當(dāng)辛硫磷質(zhì)量濃度≥2mg/L時(shí),48h中華絨螯蟹的死亡率超過(guò)50%。2.32線性回歸法計(jì)算采用線性回歸法計(jì)算吡蟲啉對(duì)克氏原螯蝦在24、48、72、96h半致死質(zhì)量濃度分別為35.949、26.193、12.320、3.547mg/L,安全質(zhì)量濃度為0.354mg/L;辛硫磷對(duì)克氏原螯蝦在24、48、72、96h半致死質(zhì)量濃度分別為0.018、0.013、0.012、0.010mg/L,安全質(zhì)量濃度為0.001mg/L(表3~4)。采用線性回歸法計(jì)算吡蟲啉對(duì)中華絨螯蟹在24、48、72、96h半致死質(zhì)量濃度分別為432.252、280.366、211.901、171.831mg/L,安全質(zhì)量濃度為17.183mg/L;辛硫磷對(duì)中華絨螯蟹在24、48、72、96h半致死質(zhì)量濃度分別為3.051、2.326、1.817、1.294mg/L,安全質(zhì)量濃度為0.129mg/L(表4、表5)。3討論3.1解決稻田常用農(nóng)藥蝦蟹的毒性效應(yīng)稻田套養(yǎng)蝦蟹作為一項(xiàng)水田經(jīng)營(yíng)新模式,變單一經(jīng)營(yíng)為綜合經(jīng)營(yíng)、變平面生產(chǎn)為立體生產(chǎn),充分利用本地資源優(yōu)勢(shì),是發(fā)展生態(tài)農(nóng)業(yè)的良好途徑。解決稻田常用農(nóng)藥對(duì)蝦蟹的毒性效應(yīng),對(duì)于指導(dǎo)稻田套養(yǎng)的合理用藥具有重要的實(shí)踐意義,因此科學(xué)評(píng)價(jià)不同藥劑品種對(duì)水生生物的毒性,并劃分風(fēng)險(xiǎn)性等級(jí),可為藥劑的安全合理使用提供科學(xué)指導(dǎo)。農(nóng)藥對(duì)克氏原螯蝦和中華絨螯蟹的毒性等級(jí)劃分參考《化學(xué)農(nóng)藥環(huán)境安全評(píng)價(jià)試驗(yàn)準(zhǔn)則》3.2吡蟲啉用量對(duì)中華絨螯蟹的安全性評(píng)價(jià)吡蟲啉是一種硝基亞甲基類內(nèi)吸性殺蟲劑,主要作用于動(dòng)物的煙酸乙酰酯酶受體,從而破壞動(dòng)物的中樞神經(jīng)正常傳導(dǎo),使昆蟲神經(jīng)麻痹后迅速死亡,具有廣譜、高效等特點(diǎn)本試驗(yàn)結(jié)果表明,吡蟲啉對(duì)中華絨螯蟹的毒性較小,因此在套養(yǎng)中華絨螯蟹的稻田中適量使用吡蟲啉具有可行性,且不會(huì)造成中華絨螯蟹的死亡,而短期內(nèi)克氏原螯蝦幼蝦在常規(guī)用藥的環(huán)境中是不安全的。但是常規(guī)用藥和毒性試驗(yàn)的操作方法上存在著差異,常規(guī)用藥時(shí)為噴霧,其中一部分藥液會(huì)落在稻葉上,水體中實(shí)際的藥物劑量要低于配制劑量,隨著時(shí)間的延長(zhǎng),其劑量會(huì)越來(lái)越低3.3辛硫磷對(duì)蝦的安全性辛硫磷又名倍腈松、肟硫磷,是一種有機(jī)磷光譜殺蟲制劑,有機(jī)磷農(nóng)藥通過(guò)抑制動(dòng)物體內(nèi)乙酰膽堿酯酶4克氏原螯蝦的安全質(zhì)量在本試驗(yàn)條件下,吡蟲啉對(duì)克氏原螯蝦的安全質(zhì)量濃度為0.354mg/L,屬于中毒、低中等風(fēng)險(xiǎn)等級(jí);辛硫磷對(duì)克氏原螯蝦的安全質(zhì)
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