實(shí)驗(yàn)一無(wú)菌技術(shù)及培養(yǎng)基的配制

工業(yè)微生物與育種學(xué)實(shí)驗(yàn)PartⅠ實(shí)驗(yàn)基本操作技能實(shí)驗(yàn)一無(wú)菌技術(shù)及培育基的制備主要參考資料微生物學(xué)實(shí)驗(yàn)指導(dǎo)：黃秀梨，高等教育出版社，2002微生物學(xué)實(shí)驗(yàn)教程：楊革，科學(xué)出版社微生物學(xué)教程（第2版）：周德慶，高等教育出版社，2000《工業(yè)微生物實(shí)驗(yàn)操作手冊(cè)》，諸葛健，輕工出版社，1997?！恫苁考?xì)菌系統(tǒng)發(fā)育手冊(cè)》、《真菌鑒定手冊(cè)》、《酵母鑒定手冊(cè)》、《放線菌鑒定手冊(cè)》等工具書成果評(píng)定單獨(dú)設(shè)課，作為一門獨(dú)立課程嚴(yán)格進(jìn)行成果考核。本門課程成果評(píng)定由平常成果（80%）+實(shí)驗(yàn)理論考試（20%）組成。平常成果包括下列項(xiàng)目：①實(shí)驗(yàn)紀(jì)律及籌備（20％）②平常實(shí)驗(yàn)操作和技能（25％）③實(shí)驗(yàn)報(bào)告（20％）④實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)創(chuàng)新能力及其它能力（15％）實(shí)驗(yàn)考試為理論與實(shí)踐結(jié)合的考試，隨機(jī)從題庫(kù)中抽取題目，分為：(1)微生物學(xué)實(shí)驗(yàn)的基本操作技能，包括依據(jù)菌落形態(tài)鑒別所屬菌類，制片鏡檢，選擇相應(yīng)的配方，配制斜面、平板培育基，包扎滅菌，在培育基上進(jìn)行分離接種操作等；(2)設(shè)計(jì)一個(gè)大型綜合實(shí)驗(yàn)的簡(jiǎn)略實(shí)驗(yàn)方案。相對(duì)應(yīng)的考核方法為：(1)由同學(xué)從題庫(kù)中隨機(jī)抽取5道題，現(xiàn)場(chǎng)口頭回答，每題2分力，老師依據(jù)其回答情況評(píng)分，一共10分；(2)開(kāi)卷，在大型綜合實(shí)驗(yàn)，即實(shí)驗(yàn)四進(jìn)行之前完成，占10分。實(shí)驗(yàn)支配模塊實(shí)驗(yàn)項(xiàng)目學(xué)時(shí)備注I培育基的制備6必做微生物的分離純化8必做微生物顯微技術(shù)6必做II曲藥中高溫芽孢菌的分離及初步鑒定12選做釀酒微生物生產(chǎn)特性的檢測(cè)12選做窖（曲）房空氣微生物的檢測(cè)12選做釀酒酵母的誘變及高乙醇耐受性菌株的篩選12選做四大類型菌DNA的提取及PCR擴(kuò)增12選做實(shí)驗(yàn)報(bào)告內(nèi)容目的要求實(shí)驗(yàn)原理實(shí)驗(yàn)材料實(shí)驗(yàn)步驟結(jié)果與商量1.1無(wú)菌技術(shù)與培育基的制備（1）微生物培育的常用器具及其滅菌（2）培育基配置的一般過(guò)程（3）選擇培育基1、Petridish（1）微生物培育的常用器具及其滅菌（2）培育基制備的一般程序調(diào)配

過(guò)濾

矯正pH

分裝過(guò)濾

滅菌（一般121.3℃，20-30min）

鑒定是否有菌

放入冰箱冷藏備用鑒定是否有菌可將培育基置于37℃培育24小時(shí)，然后觀察培育基：液體培育基；固體培育基；半固體培育基；固體培育基；半固體培育基；瓊脂實(shí)驗(yàn)室常用培育基肉膏蛋白胨培育基：牛肉膏3g，蛋白胨10g，NaCl5g，瓊脂15-20g，水1000ml，pH7.0-7.2；淀粉瓊脂培育基（高氏1號(hào)培育基）：可溶性淀粉20g，KNO31g，NaCl0.5g，K2HPO40.5g，F(xiàn)eSO40.01g，瓊脂20g，水1000ml，pH7.0-7.2;PDA培育基：馬鈴薯（去皮）200g，蔗糖或葡萄糖15g，瓊脂15-20g，水1000ml;因高壓之后pH值會(huì)下降0.1左右，所以矯正pH時(shí)應(yīng)比所需的pH高e.加棉塞，包裝。待分離的微生物生長(zhǎng)，其它微生物的生長(zhǎng)被抑制高溫下培育：分離嗜熱細(xì)菌；培育基中不含N：分離固氮菌；培育基加抗生素：分離抗性菌；（3）選擇培育基富集培育從自然界中分離到所需的特定微生物特定的環(huán)境條件僅適應(yīng)于該條件的微生物旺盛生長(zhǎng)待分離微生物在群落中的數(shù)量大大增加營(yíng)養(yǎng)和生理?xiàng)l件幾乎可無(wú)窮盡組合

依據(jù)微生物的