實驗一無菌技術及培養(yǎng)基的配制

工業(yè)微生物與育種學實驗PartⅠ實驗基本操作技能實驗一無菌技術及培育基的制備主要參考資料微生物學實驗指導：黃秀梨，高等教育出版社，2002微生物學實驗教程：楊革，科學出版社微生物學教程（第2版）：周德慶，高等教育出版社，2000《工業(yè)微生物實驗操作手冊》，諸葛健，輕工出版社，1997?！恫苁考毦到y發(fā)育手冊》、《真菌鑒定手冊》、《酵母鑒定手冊》、《放線菌鑒定手冊》等工具書成果評定單獨設課，作為一門獨立課程嚴格進行成果考核。本門課程成果評定由平常成果（80%）+實驗理論考試（20%）組成。平常成果包括下列項目：①實驗紀律及籌備（20％）②平常實驗操作和技能（25％）③實驗報告（20％）④實驗設計創(chuàng)新能力及其它能力（15％）實驗考試為理論與實踐結合的考試，隨機從題庫中抽取題目，分為：(1)微生物學實驗的基本操作技能，包括依據菌落形態(tài)鑒別所屬菌類，制片鏡檢，選擇相應的配方，配制斜面、平板培育基，包扎滅菌，在培育基上進行分離接種操作等；(2)設計一個大型綜合實驗的簡略實驗方案。相對應的考核方法為：(1)由同學從題庫中隨機抽取5道題，現場口頭回答，每題2分力，老師依據其回答情況評分，一共10分；(2)開卷，在大型綜合實驗，即實驗四進行之前完成，占10分。實驗支配模塊實驗項目學時備注I培育基的制備6必做微生物的分離純化8必做微生物顯微技術6必做II曲藥中高溫芽孢菌的分離及初步鑒定12選做釀酒微生物生產特性的檢測12選做窖（曲）房空氣微生物的檢測12選做釀酒酵母的誘變及高乙醇耐受性菌株的篩選12選做四大類型菌DNA的提取及PCR擴增12選做實驗報告內容目的要求實驗原理實驗材料實驗步驟結果與商量1.1無菌技術與培育基的制備（1）微生物培育的常用器具及其滅菌（2）培育基配置的一般過程（3）選擇培育基1、Petridish（1）微生物培育的常用器具及其滅菌（2）培育基制備的一般程序調配

過濾

矯正pH

分裝過濾

滅菌（一般121.3℃，20-30min）

鑒定是否有菌

放入冰箱冷藏備用鑒定是否有菌可將培育基置于37℃培育24小時，然后觀察培育基：液體培育基；固體培育基；半固體培育基；固體培育基；半固體培育基；瓊脂實驗室常用培育基肉膏蛋白胨培育基：牛肉膏3g，蛋白胨10g，NaCl5g，瓊脂15-20g，水1000ml，pH7.0-7.2；淀粉瓊脂培育基（高氏1號培育基）：可溶性淀粉20g，KNO31g，NaCl0.5g，K2HPO40.5g，FeSO40.01g，瓊脂20g，水1000ml，pH7.0-7.2;PDA培育基：馬鈴薯（去皮）200g，蔗糖或葡萄糖15g，瓊脂15-20g，水1000ml;因高壓之后pH值會下降0.1左右，所以矯正pH時應比所需的pH高e.加棉塞，包裝。待分離的微生物生長，其它微生物的生長被抑制高溫下培育：分離嗜熱細菌；培育基中不含N：分離固氮菌；培育基加抗生素：分離抗性菌；（3）選擇培育基富集培育從自然界中分離到所需的特定微生物特定的環(huán)境條件僅適應于該條件的微生物旺盛生長待分離微生物在群落中的數量大大增加營養(yǎng)和生理條件幾乎可無窮盡組合

依據微生物的