章藥物的雜質(zhì)檢查

2023-09-021任何影響藥品純度的物質(zhì)均稱為雜質(zhì)

——《中國藥典》附錄XIXF藥品雜質(zhì)分析指導原則

無治療作用

影響藥物穩(wěn)定性和療效

對人體健康有害雜質(zhì)(impurity)的定義：雜質(zhì)的害處：2023-09-022①影響藥物的質(zhì)量②反映出生產(chǎn)或貯藏過程中存在的問題。對藥物所含雜質(zhì)進行檢查既可保證藥品質(zhì)量和用藥的安全、有效，同時也為生產(chǎn)、流通過程的質(zhì)量保證和企業(yè)管理的考核提供依據(jù)。雜質(zhì)的存在導致的問題：2023-09-023概述

藥物的純度要求

雜質(zhì)的來源和種類

雜質(zhì)的限量檢查一般雜質(zhì)檢查特殊雜質(zhì)檢查2023-09-024第一節(jié)概述藥物的純度——指藥物的純凈程度雜質(zhì)檢查——也稱純度檢查一、藥物的純度要求1.藥物純度：是反映藥品質(zhì)量的一項重要指標。雜質(zhì)超標的后果：外觀性狀物理常數(shù)藥物的穩(wěn)定性活性降低，毒副作用增加2023-09-025如：ASA中除了SA外，還存在乙酰水楊酸酐、乙酰水楊酰水楊酸等SA的衍生物，具有致敏作用。ASA

SA其它示例見教材P38阿司匹林2023-09-0262.對藥物純度的認識是在防治疾病的實踐中積累起來的，隨著分離檢測技術(shù)的提高，能進一步發(fā)現(xiàn)藥物中存在的新雜質(zhì)，從而加強對藥品生產(chǎn)工藝過程的控制，不斷提高藥物的純度要求，使之不斷改進，更加完善。如：鹽酸罌粟堿的特殊雜質(zhì)檢查ChP1985，目視比色法檢查嗎啡ChP1990，改為：薄層色譜法檢查有關物質(zhì)。原因：薄層或紅外發(fā)現(xiàn)，合成法生產(chǎn)的鹽酸罌粟堿中除了嗎啡，還有一未知物質(zhì)。ChP2010，又改為：HPLC法檢查有關物質(zhì)。2023-09-027ⅡⅢⅠ再如：鹽酸哌替啶，即度冷丁(Ⅰ)1948年收入BP，1970年經(jīng)GC分離鑒定出兩種無效雜質(zhì)(Ⅱ)和(Ⅲ)，有時高達20%～30%。產(chǎn)生原因：工藝條件控制不當ChP2010：HPLC法檢查有關物質(zhì)。2023-09-0283.藥物純度的綜合評價：

藥物的純度主要由藥品質(zhì)量標準中的“檢查”項下的雜質(zhì)檢查來控制，還可通過其性狀、理化常數(shù)、含量等反映，因此，對藥物純度的評價應綜合考慮藥物的性狀、理化常數(shù)、雜質(zhì)檢查、含量測定等方面。2023-09-029質(zhì)量標準中藥物的檢查項下包括：a雜質(zhì)檢查b有效性—指與藥物療效有關的一些指標。如：氫氧化鋁的制酸力，藥用碳的吸著力等c安全性—異常毒性，熱原，降壓物質(zhì)，無菌試驗等d藥物制劑要求—重量差異，崩解時限，含量均勻度等2023-09-02104.與試劑的純度不同，不能用化學試劑的規(guī)格代替藥品標準，更不能將化學試劑當作藥品直接用于臨床如：試劑規(guī)格的BaSO4,允許存在可溶性鋇鹽藥品中不允許：可導致醫(yī)療事故原因：雜質(zhì)的定義不同。試劑規(guī)格：能夠引起對化學使用范圍和目的有影響的物質(zhì)。不考慮雜質(zhì)的生理作用；藥用規(guī)格：可能對生物體引起生理和毒副作用的物質(zhì)。從用藥的安全、有效和對藥物穩(wěn)定性的影響來考慮。2023-09-02111．雜質(zhì)的來源：生產(chǎn)過程中引入貯藏過程中產(chǎn)生2．依雜質(zhì)來源分類：一般雜質(zhì)特殊雜質(zhì)工藝雜質(zhì)，降解產(chǎn)物，反應物及試劑中混入的雜質(zhì)等依雜質(zhì)毒性分類：信號雜質(zhì)毒性雜質(zhì)依雜質(zhì)理化性質(zhì)分類:有機雜質(zhì)無機雜質(zhì)殘留溶劑二、雜質(zhì)的來源與種類對于規(guī)定中的各種雜質(zhì)檢查項目，系指該藥品在既定工藝進行生產(chǎn)和正常貯藏過程中可能含有或產(chǎn)生并控制的雜質(zhì)(如殘留溶劑、有關物質(zhì)等)；改變生產(chǎn)工藝時需另考慮增修訂有關項目。——藥典凡例第17條2023-09-0212原料、中間體、副產(chǎn)物、無效異構(gòu)體或晶型、試劑、溶劑、制劑中新產(chǎn)生的雜質(zhì)等A+B→C→D+E①原料中間產(chǎn)物副產(chǎn)物產(chǎn)品③試劑溶劑催化劑⑤金屬容器、管道、裝置④異構(gòu)體多晶型②做制劑時用的輔料，新產(chǎn)生的雜質(zhì)等2023-09-0213地西泮（安定）3-苯-5-氯嗯呢天然產(chǎn)物提?。航Y(jié)構(gòu)相似、性質(zhì)相近教材P39：碳酸酐酶抑制藥雙氯非那胺檢查：乙醇溶液的澄清度和顏色；氯化物；有關物質(zhì)等檢查：堿性溶液的澄清度；氯化物；有關物質(zhì)等合成過程中產(chǎn)生的雜質(zhì)：2023-09-0214鹽酸普魯卡因注射液，高溫滅菌對氨基苯甲酸做制劑時用的輔料，新產(chǎn)生的雜質(zhì)等：阿司匹林：水楊酸的檢查教材P39：腎上腺素注射液2023-09-0215無效、低效的異構(gòu)體或晶型：

光學異構(gòu)體（左旋體，右旋體）Δ兩種都有治療作用，但大小不同：腎上腺素為左旋體，其升壓作用是右旋體的12倍；鹽酸普萘洛爾左旋異構(gòu)體的

-受體阻斷作用比右旋體大60倍

幾何異構(gòu)體（順式體，反式體）維生素A全反式的生物活性最高Δ一種有治療作用，另一種主要產(chǎn)生副作用：氯胺酮，右旋副作用(中樞興奮)；Δ兩種有不同的藥理作用：右旋丙氧吩鎮(zhèn)痛，左旋止咳；Δ兩種都有治療作用，主要副作用由其中一種產(chǎn)生：反應停，左旋及其代謝物毒性；2023-09-0216無效、低效的異構(gòu)體或晶型：

多晶型(晶型不同，理化常數(shù)，溶解度，穩(wěn)定性，體內(nèi)吸收和療效也不同）無味氯霉素有多晶現(xiàn)象，B晶型易被酯酶水解而吸收，為有效晶型，而A晶型則不易被酯酶水解，活性很低生產(chǎn)過程中難以除凈；貯存過程中受光、熱、濕等影響控制藥物中無效、低效及具有毒性的異構(gòu)體或晶型，在藥物純度研究中日益受到重視2023-09-0217嚴格控制藥品的貯藏條件，是保證臨床用藥安全有效的一個重要方面。貯藏過程中：保管不當、貯藏時間過長在外界條件(如：濕度、溫度、光、空氣)影響或微生物作用下，發(fā)生水解、氧化、分解、異構(gòu)化、晶型轉(zhuǎn)變、聚合、潮解、發(fā)霉等變化，產(chǎn)生有關雜質(zhì)。后果：外觀、物理常數(shù)、藥物穩(wěn)定性和質(zhì)量，療效降低甚至失去、產(chǎn)生毒性等。2023-09-0218一般雜質(zhì):在自然界分布比較廣泛，在多種藥物的生產(chǎn)或貯存過程中容易引入的雜質(zhì)。如：氯化物、硫酸鹽、重金屬、酸堿度、水分、砷鹽、鐵鹽….特殊雜質(zhì)：在特定藥物的生產(chǎn)和貯存過程中，因其生產(chǎn)工藝或藥物本身的性質(zhì)可能引入的雜質(zhì)。2023-09-0219藥典未規(guī)定的雜質(zhì)：一般不需要檢查。遇特殊情況：需要進一步追蹤、檢查。如：改變了原料、生產(chǎn)方法。新藥研究：要對純度、穩(wěn)定性進行考察。了解可能引入的雜質(zhì)為制訂其質(zhì)量標準提供依據(jù)；盡可能對雜質(zhì)進行分離，研究其結(jié)構(gòu)和降解機制，為藥物的生產(chǎn)、貯藏及新的藥物設計提供相關信息藥物的雜質(zhì)檢查也是不斷發(fā)展變化的注意：藥典中規(guī)定的檢查項目，是指正常生產(chǎn)和儲存中可能產(chǎn)生并需控制的雜質(zhì)。藥典中未規(guī)定檢查的雜質(zhì)，一般有以下幾種情況：正常生產(chǎn)和儲存中不可能引入；含量甚微，對人體和藥物質(zhì)量無不良影響；限量要求較寬，現(xiàn)有工藝生產(chǎn)的產(chǎn)品均能達到；對雜質(zhì)認識不足，有待于積累資料2023-09-0220藥物中雜質(zhì)的限量除考慮雜質(zhì)本身的性質(zhì)(安全性)外，還要結(jié)合實際的生產(chǎn)水平(生產(chǎn)的可行性)，產(chǎn)品的穩(wěn)定性，參考各國藥典的標準來制訂。三、雜質(zhì)的限量藥物中的雜質(zhì)在不影響療效、不產(chǎn)生毒性、保證藥物質(zhì)量的原則下，允許藥物存在有一定量的雜質(zhì)。這一允許量被稱為雜質(zhì)的限量。即藥物中所含雜質(zhì)的最大允許量雜質(zhì)的限量：限量表示(g/g)方法：%，ppm2023-09-0221雜質(zhì)限量控制方法：Δ對照法：有雜質(zhì)對照品取一定量的被檢雜質(zhì)標準溶液和一定量的供試品溶液，相同條件下處理，比較反應結(jié)果，以確定雜質(zhì)含量是否超過限量。Δ反應靈敏度法：供試液中加入一定量試劑，一定反應條件下是否出現(xiàn)正反應Δ比較法：取一定量的供試品依法檢查，測定特定待檢雜質(zhì)的參數(shù)(如吸光度)，與規(guī)定限量比較，不得更大注意：平行原則不出現(xiàn)正反應為合格①限量檢查法(Limittest)：通常不要求測定其準確含量，只需檢查雜質(zhì)是否超過限量②定量測定法后二者示例見：教材P412023-09-0222例1：葡萄糖中重金屬檢查取葡萄糖4.0g，加水23ml溶解后，加醋酸鹽緩沖液（pH3.5）2ml，依法檢查重金屬（中國藥典，附錄ⅤⅢH第一法），含重金屬不得過百萬分之五。問應取標準鉛溶液多少ml（每1ml相當于10μg的Pb）?對照法雜質(zhì)限量計算方法：2023-09-0223例2：對乙酰氨基酚中氯化物檢查取對乙酰氨基酚(撲熱息痛，解熱鎮(zhèn)痛藥)2.0g，加水100m1，加熱溶解后冷卻，濾過，取濾液25m1，依法檢查氯化物(中國藥典，附錄ⅤⅢA)，所發(fā)生的渾濁與標準氯化鈉溶液5.0ml(每1ml相當于10μg的Cl-)制成的對照液比較，不得更濃。問氯化物的限量是多少?注意：統(tǒng)一單位求的目的（L？C？V?S?）是否稀釋限量表示方法2023-09-0224第二節(jié)一般雜質(zhì)的檢查方法一般雜質(zhì)的檢查方法在中國藥典中收載于附錄中，藥典正文中直接引用。氯化物檢查法硫酸鹽檢查法鐵鹽檢查法

硫氰酸鹽法

巰基乙酸法重金屬檢查法

硫代乙酰胺法

硫化鈉法微孔濾膜法砷鹽檢查法古蔡氏法二乙基二硫代氨基甲酸銀法溶液顏色檢查法

目視比色法分光光度法色差計法

易碳化物檢查法溶液澄清度檢查法熾灼殘渣檢查法干燥失重測定法常壓恒溫干燥法干燥劑干燥法減壓干燥法與恒溫減壓干燥法熱分析法

水分測定法殘留溶劑測定法2023-09-0225一、氯化物檢查法1.原理：Cl﹣+Ag﹢→AgCl↓（白色）硝酸酸性條件下，微量氯化物與AgNO3溶液反應，生成白色渾濁。與一定量標準氯化鈉溶液在相同條件下生成的渾濁比較，不得更大加硝酸的作用：1）加速AgCl↓生成，產(chǎn)生較好的乳濁2）避免Ag2CO3↓,Ag3PO4,Ag2O等的形成，消除這些陰離子的干擾Cl﹣的濃度：50-80

g/50ml為宜。相當于標準NaCl溶液(10

gCl﹣/ml)5.0-8.0mlH+2023-09-02262.方法如溶液顯堿性，可滴加硝酸使成中性溶液如不澄清，應濾過容器：50ml納氏比色管2023-09-0227用含硝酸的蒸餾水洗凈濾紙中Clˉ至洗液遇AgNO3不產(chǎn)生渾濁，再過濾供試液兩份供試液1份＋AgNO3→反復過濾至澄清＋標準Clˉ與水，作為對照液1份＋AgNO3

作為樣品液比較對照液與樣品液的渾濁程度3.注意

氯化物適宜濃度：50-80μg/50ml

硝酸酸性：作用酸度以50ml供試液中含稀硝酸10ml為宜

供試液若不澄清

供試液若有色，采用內(nèi)消色法解決

避光

黑色背景下，從上至下觀察2023-09-0228Clˉ的存在狀態(tài)：溶于水的藥物——直接測定不溶于水的藥物：加水振搖，過濾，取濾液檢查；若藥物在稀乙醇或丙酮中有一定溶解度，可加稀乙醇或丙酮溶解后再檢查；也可采用超聲，加熱等方法，使Clˉ溶解，取濾液或上清夜進行檢查有機氯——有機破壞2023-09-0229二、硫酸鹽檢查法1.原理：SO42﹣+Ba2+→BaSO4↓(白色)標準K2SO4溶液（100

gSO42﹣/ml）2.方法H+2023-09-0230酸及酸度：加稀鹽酸使成酸性，作用：防止BaCO3↓,Ba3(PO4)2↓形成。但酸度不能過大，否則會使硫酸鋇溶解，降低靈敏度。以50ml供試液中含稀鹽酸2ml為宜溶液有色：內(nèi)消色法。藥物不易溶于水：加適量有機溶劑(如稀乙醇或丙酮)溶解后再檢查3.注意黑色背景下，從上至下觀察避光2023-09-0231三、鐵鹽檢查法1.硫氰酸鹽法—ChPUSP為什么要檢查鐵鹽？可能會加快藥物的氧化和降解(1)原理：Fe3++6SCNˉ→[Fe(SCN)6]3ˉ（紅色）

H+標準鐵溶液：硫酸鐵銨溶液[FeNH4(SO4)2·12H2O](10

gFe3+

/ml)2023-09-0232(2)方法2023-09-0233(3)注意標準硫酸鐵銨配制時為防止水解，需加適量硫酸過硫酸銨的作用：氧化劑，氧化Fe2+→Fe3+

；防止光線導致的硫氰酸鐵配位離子還原或分解褪色過量硫氰酸銨的作用：反應為可逆反應，加過量硫氰酸銨試劑可增加生成的配位離子的穩(wěn)定性；提高反應靈敏度；消除氯化物，PO43﹣，SO42﹣,枸櫞酸根等與鐵鹽形成有色配合物引起的干擾反應在HCl酸性中進行：可防止Fe水解。酸度：50ml溶液中含稀鹽酸4mlFe3+的濃度：目視法：10-50

gFe3+/50ml為宜，相當于標準硫酸鐵銨[FeNH4(SO4)2·12H2O]1.0-5.0ml；若用吸光度比較，則在5-90

gFe3+/50ml時，溶液的A與濃度線性關系良好。2023-09-0234供試液與對照液色調(diào)不一致或呈色淺不易比較：可加正丁醇或異戊醇提取環(huán)狀結(jié)構(gòu)的有機藥物：需經(jīng)熾灼破壞Fe的存在形式：Fe2+無此反應，需加入氧化劑過硫酸銨或硝酸(需加熱煮沸除去剩余硝酸）氧化Fe2+→Fe3+2023-09-0235鐵鹽檢查法（2010年版二部）附錄ⅧG鐵鹽檢查法除另有規(guī)定外，取各藥品項下規(guī)定量的供試品,加水溶解使成25ml，移置50ml納氏比色管中，加稀鹽酸4ml與過硫酸銨50mg，用水稀釋使成35ml后，加30％硫氰酸銨溶液3ml，再加水適量稀釋成50ml,搖勻；如顯色，立即與標準鐵溶液一定量制成的對照溶液（取各藥品項下規(guī)定量的標準鐵溶液，置50ml納氏比色管中，加水使成25ml,加稀鹽酸4ml與過硫酸銨50mg，用水稀釋使成35ml，加30％硫氰酸銨溶液3ml,再加水適量稀釋成50ml，搖勻）比較，即得。如供試管與對照管色調(diào)不一致時，可分別移至分液漏斗中，各加正丁醇20ml提取，俟分層后，將正丁醇層移置50ml納氏比色管中，再用正丁醇稀釋至25ml，比較，即得。標準鐵溶液的制備稱取硫酸鐵銨[FeNH4(SO4)2·12H2O]0.863g，置1000ml量瓶中，加水溶解后，加硫酸2.5ml，用水稀釋至刻度，搖勻，作為貯備液。臨用前，精密量取貯備液10ml，置100ml量瓶中，加水稀釋至刻度，搖勻，即得(每1ml相當于10μg的Fe)2023-09-0236鐵鹽取熾灼殘渣項下遺留的殘渣，加鹽酸1ml，置水浴上蒸干，再加稀鹽酸1ml與水適量，置水浴上加熱，濾過，坩堝用水洗滌，合并濾液與洗液使成25ml，依法檢查（附錄ⅧG），與標準鐵溶液1.0ml用同一方法制成的對照液比較，不得更深(0.001%)泛影酸中鐵鹽檢查：

泛影酸2023-09-02372.巰基醋酸法--BP(2)注意

在加巰基醋酸試液前，先加入20%枸櫞酸溶液2ml，使枸櫞酸與鐵離子形成配位離子，以免在氨堿性溶液中產(chǎn)生氫氧化鐵沉淀(1)原理

巰基醋酸還原Fe3+為Fe2+，在氨堿性試液中巰基醋酸與Fe2+作用生成紅色配位離子。與硫氰酸鹽法比較，較為靈敏，但試劑較貴2023-09-0238四、重金屬檢查法重金屬是指在實驗條件下能與硫代乙酰胺或硫化鈉(即與S2-)作用顯色的金屬雜質(zhì)，如銀、鉛、汞、銅、鎘、錫、銻、鉍等。影響藥物的穩(wěn)定性和安全性。藥品生產(chǎn)過程中遇到鉛的機會比較多，鉛在體內(nèi)又易積蓄中毒，故檢查時以鉛作為代表。

2023-09-0239ChP收載3種方法第一法硫代乙酰胺法第二法

熾灼后的硫代乙酰胺法第三法硫化鈉法2023-09-0240應用范圍：在實驗條件下供試液澄清、無色，對檢查無干擾或經(jīng)處理后對檢查無干擾的藥物一般是溶于水、稀酸、乙醇的藥物原理第一法硫代乙酰胺法CH3CSNH2+H2O→CH3CONH2+H2SH2S+Pb2+

→2H++PbS↓（黃-棕黑色）2023-09-0241方法容器：3支25ml納氏比色管甲：乙：丙：a、丙管中顯出的顏色不淺于甲管時，乙管中顯示的顏色與甲管比較，不得更深；b、如丙管中顯出的顏色淺于甲管，應取樣按第二法重新檢查。標準鉛溶液：硝酸鉛溶液。10μg

Pb2＋/ml2023-09-0242試品有微量Fe3+：在弱酸性溶液中氧化硫化氫析出S產(chǎn)生混濁影響比色，可在甲、乙、丙三管中分別加入相同量的Vc0.5-1.0g，使Fe3+還原成Fe2+再按上法檢查。注意pH3.5醋酸鹽緩沖液本反應的pH對顯色有很大影響，在pH3-3.5時，PbS↓較完全。配制供試液(乙管)時，如使用的鹽酸超過1ml，氨試液超過2ml，或加入其他試劑進行處理者，除另有規(guī)定外，甲管溶液(對照液)應取同樣同量的試劑置瓷皿中蒸干后，加醋酸鉛緩沖液(pH3.5)2ml與水15ml，微熱溶解后，移置納氏比色管中，加標準鉛溶液一定量，再用水或各品種項下規(guī)定的溶液稀釋成25ml。Pb2＋適宜比色范圍：10-20μg/25ml，相當于標準鉛溶液1~2ml觀察方法：白色背景下，從上至下觀察供試液有色時：在甲管中滴加少量稀焦糖溶液或其他無干擾的有色溶液，使之與乙、丙管一致。如仍不能使顏色一致，應取樣按第二法檢查。

2023-09-0243重金屬取本品1.0g，加乙醇23ml溶解后，加醋酸鹽緩沖液(pH3.5)2ml，依法檢查（附錄ⅧH第一法），含重金屬不得過百萬分之十阿司匹林原料藥中的重金屬檢查：2023-09-0244第二法熾灼破壞后硫代乙酰胺法應用范圍：在水、稀酸或乙醇中難溶，及含芳環(huán)或雜環(huán)的有機藥物原理：將供試品熾灼破壞后，殘渣加硝酸進一步破壞，破壞完全后，蒸干，加鹽酸轉(zhuǎn)化為易溶于水的氯化物，再按第一法檢查2023-09-0245方法：①取各品種項下規(guī)定量的供試品，按熾灼殘渣檢查法(附錄ⅧN)進行熾灼處理，然后取遺留的殘渣，②或直接取熾灼殘渣項下遺留的殘渣，③供試品若為溶液，取各品種項下規(guī)定量的溶液，蒸發(fā)至干，再按上述方法后處理后取遺留的殘渣，

供試品處理方法：④加硝酸0.5ml，蒸干，至氧化氮蒸氣除盡后，放冷2023-09-0246

對照液：（乙管）取配制供試液的試劑，置瓷皿中蒸干后，

供試液（甲管）：2023-09-0247注意：①熾灼溫度：500-600℃，以免溫度過高造成重金屬損失②熾灼殘渣加硝酸處理后，必須蒸干，除盡氧化氮，否則亞硝酸可使H2S氧化，析出S，影響比色③消除鹽酸或其它試劑中可能存在的重金屬的影響：

配制供試液時，使用鹽酸超過1ml(或與鹽酸1ml相當?shù)南←}酸)，使用氨試液超過2ml，及用硫酸、硝酸進行有機破壞或用其它試劑處理者，除另有規(guī)定外，對照液應取同樣量試劑在瓷皿中蒸干后，依法檢查。④含鈉或氟有機藥物用鉑坩堝或硬質(zhì)玻璃蒸發(fā)皿：消除腐蝕瓷坩堝引入重金屬的可能性⑤觀察方法：白色背景下，從上至下觀察2023-09-0248安乃近原料藥中的重金屬檢查：重金屬取本品1.0g，置石英坩堝或硬質(zhì)玻璃蒸發(fā)皿中，加硫酸1ml使?jié)駶?，緩緩熾灼至硫酸蒸氣除盡，放冷，加硝酸0.5ml，繼續(xù)熾灼至氧化氮蒸氣除盡后，在500～600℃熾灼使完全灰化，放冷，加鹽酸2ml，置水浴上蒸干，加水15ml使溶解，滴加氨試液至對酚酞指示液顯中性，再加醋酸鹽緩沖液(pH3.5)2ml與水適量使成25ml，依法檢查（附錄ⅧH第一法），含重金屬不得過百萬分之二十2023-09-0249在堿性介質(zhì)中，用硫化鈉作顯色劑，使Pb2+生成PbS，與一定量標準鉛溶液以同法處理后所呈顏色比較第三法硫化鈉法應用范圍：溶于堿性水溶液，不溶于稀酸或在稀酸中生成沉淀的藥物。磺胺類，巴比妥類原理：注意：方法：供試液：對照液：一定量標準鉛液同法處理硫化鈉臨用新制。原因：硫化鈉對玻璃有一定腐蝕性，且久置后會產(chǎn)生絮狀物2023-09-0250四種方法的比較：顯色劑酸堿度應用范圍原理方法注意事項第一法硫代乙酰胺pH3-3.5第二法硫代乙酰胺pH3-3.5第三法硫化鈉堿性2023-09-0251五、砷鹽（Arsenic）檢查法

古蔡氏法

二乙基二硫代氨基甲酸銀法（Ag-DDC）2023-09-0252As3++3Zn+3H+→AsH3↑+3Zn2+AsO33-+3Zn+9H+→AsH3↑+3Zn2++3H2OAsH3+HgBr2

（試紙）→砷斑與2ml標準砷溶液同法操作。砷斑：As(HgBr)3(黃色)；AsH(HgBr)2(棕色)；As2Hg3(棕黑色)第一法古蔡氏法原理:金屬鋅與酸作用產(chǎn)生新生態(tài)的氫，氫與藥物中微量砷鹽反應，生成具揮發(fā)性的砷化氫氣體，遇溴化汞試紙產(chǎn)生黃至棕色的砷斑，與一定量標準砷溶液在同樣條件下生成的砷斑比較，顏色不得更深2023-09-0253方法：儀器裝置精密量取標準砷溶液2ml，置A瓶中，加鹽酸5ml與水21ml，再加碘化鉀試液5ml與酸性氯化亞錫試液5滴，在室溫放置10分鐘后，加鋅粒2g，立即將照上法裝妥的導氣管C密塞于A瓶上，并將A瓶置25～40℃水浴中,反應45分鐘，取出溴化汞紙試，即得標準砷斑的制備取按各品種項下規(guī)定方法制成的供試品溶液，置A瓶中,照標準砷斑的制備，自“再加碘化鉀試液5ml”起，依法操作樣品砷斑的制備相當于2g砷。此時砷斑清晰2023-09-0254標準砷溶液的制備稱取三氧化二砷0.132g，置1000ml量瓶中，加20％氫氧化鈉溶液5ml溶解后，用適量的稀硫酸中和，再加稀硫酸10ml，用水稀釋至刻度，搖勻，作為貯備液。臨用前，精密量取貯備液10ml，置1000ml量瓶中，加稀硫酸10ml，用水稀釋至刻度，搖勻，即得(每1ml相當于1μg的As)2023-09-0255供試品、HCl、H2O、Zn、KI、SnCl2Pb(Ac)2棉花HgBr2試紙A砷化氫發(fā)生瓶B中空磨口塞C導氣管D具孔有機玻璃旋塞E具孔有機玻璃旋塞蓋標準砷斑樣品砷斑與砷化氫反應的靈敏度強于氯化汞，但色斑穩(wěn)定性差。故反應中應保持干燥及避光，并立即與標準砷斑比較2023-09-0256

Pb(AC)2棉花的作用：消除鋅粒和供試品中可能含有的少量的硫化物的影響。

Zn粒及供試品中可能含有少量S2ˉ,在酸性條件下產(chǎn)生H2S↑，與HgBr2作用，生成HgS↓，干擾測定，故在測砷管中部，用Pb(Ac)2棉花填充，以消除干擾。100gS存在也不干擾。

S2-+2H+H2SH2S+HgBr22HBr+HgS（汞斑）H2S+Pb(Ac)2PbS+2HAc

2023-09-0257KI和酸性SnCl2的作用：①將五價砷還原為三價砷，加快反應速度；KI生成的I2被SnCl2還原成I-，I-與反應中生成的Zn2+形成穩(wěn)定的配位離子，利于反應向右進行，促進AsH3的生成②抑制銻化氫的生成。100gSb存在也不干擾③SnCl2與鋅形成Zn-Sn齊，去極化，從而使氫氣均勻而連續(xù)地發(fā)生2023-09-0258消耗KI，SnCl2并氧化AsH3注意：（S2ˉ,SO32ˉ,S2O32ˉ）+H+→H2S↑或SO2↑遇HgBr2試紙→HgS↓或Hg↓(干擾測定)①供試品為含硫藥物:解決方法：可先加HNO3處理，使硫化物氧化成SO42ˉ,以消除干擾。例硫代硫酸鈉②供試品為鐵鹽：解決方法：可先加酸性SnCl2，使Fe3+→Fe2+，再檢查。例枸櫞酸鐵銨2023-09-02592As3++3SnCl2+6HCl→2As↓+3SnCl4+6H+膠態(tài)、棕褐色③供試品為環(huán)狀藥物:須先進行有機破壞，否則結(jié)果偏低或難檢出Ca(OH)2———例呋塞米無水Na2CO3—例苯甲酸鈉堿破壞法④含銻藥物，改用白田道夫（Betterdorff）法2023-09-0260第二法二乙基二硫代氨基甲酸銀法（silverdiethyldithiocarbamate)（Ag-DDC法）原理:金屬鋅與酸作用產(chǎn)生新生態(tài)的氫，氫與藥物中微量砷鹽反應，生成具揮發(fā)性的砷化氫氣體，還原二乙基二硫代氨基甲酸銀，產(chǎn)生紅色膠態(tài)銀，與一定量標準砷溶液在同樣條件下呈色比較。用目視比色法或在510nm下測定吸光度供試液：AsH3+6Ag(DDC)+3Et3N→6Ag＋As(DDC)3+3Et3N.HDDC（紅色膠態(tài)）對照液：標準砷溶液2ml2023-09-0261Ag(DDC)的吡啶溶液(USP)