第二章抗原抗體反應課件

第二章抗原抗體反應第三臨床醫(yī)學院臨床檢驗教研室王飛副主任醫(yī)師,副教授第二章抗原抗體反應第三臨床醫(yī)學院1第一節(jié)抗原抗體反應的原理

一、抗原抗體結(jié)合力

二、抗原抗體的親和性和親和力

三、親水膠體轉(zhuǎn)化為疏水膠體第二節(jié)抗原抗體反應的特點一、特異性二、可逆性三、比例性四、階段性第一節(jié)抗原抗體反應的原理

一、抗原抗體結(jié)合力

二、抗2第三節(jié)影響抗原抗體反應的因素

一、反應物自身因素

二、環(huán)境因素第四節(jié)免疫學檢測技術的類型思考題小結(jié)第三節(jié)影響抗原抗體反應的因素

一、反應物自身因素

3一、教學目的：1、掌握抗原抗體反應的原理、特點和影響因素。2、熟悉抗原抗體反應的類型。3、了解免疫學檢測技術的類型。

一、教學目的：4抗原指能刺激機體免疫系統(tǒng)，并能與相應免疫應答產(chǎn)物（抗體或致敏淋巴細胞）在體內(nèi)或體外發(fā)生特異性結(jié)合的物質(zhì)。抗原指能刺激機體免疫系統(tǒng)，并能與相應免疫應答產(chǎn)5抗原的兩個重要特性免疫原性

抗原能刺激機體產(chǎn)生免疫應答，誘生抗體或致敏淋巴細胞的能力?？乖裕庖叻磻裕┛乖稍隗w內(nèi)外與其所誘生的抗體或或致敏淋巴細胞發(fā)生特異性結(jié)合的能力?？乖膬蓚€重要特性免疫原性抗原能刺激機體產(chǎn)生免疫應答，6按抗原的性能分類完全抗原：具有免疫原性和抗原性的物質(zhì)。不完全抗原（半抗原）：只有抗原性而無免疫原性的物質(zhì)。半抗原多為簡單的小分子物質(zhì)，當與大分子蛋白質(zhì)載體結(jié)合后才具有免疫原性。按抗原的性能分類完全抗原：具有免疫原性和抗原性的物質(zhì)。7抗原的特異性免疫原性的特異性：某種抗原只能刺激機體產(chǎn)生某種特定的應答產(chǎn)物（抗體或致敏淋巴細胞)如：傷寒桿菌→傷寒桿菌抗體抗原性的特異性：抗原只能與其相應的抗體或致敏淋巴細胞結(jié)合如：傷寒桿菌只能與傷寒桿菌抗體結(jié)合抗原的特異性免疫原性的特異性：某種抗原只能刺激機體產(chǎn)生某種特8抗原決定簇是指抗原分子中決定抗原特異性的特殊化學集團，又稱表位?？乖瓫Q定簇與相應淋巴細胞表面的抗原受體結(jié)合，誘導免疫應答?？乖瓫Q定簇是指抗原分子中決定抗原特異性的特殊化學集團，又稱表9第二章抗原抗體反應課件10共同抗原表位與交叉反應抗原的特異性是相對的，因為天然的抗原分子表面可存在著多種表位，不同的抗原分子表面可存在相同或相似的表位，可引起交叉反應。1）共同抗原表位：不同抗原之間含有的相同或相似的抗原表位2）交叉反應：

抗體或致敏淋巴細胞對具有相同或相似表位的不同抗原的反應共同抗原表位與交叉反應抗原的特異性是相對的，因為天然的抗原分11交叉反應血清：Ab1、Ab2+AgA特異性反應+AgB交叉反應意義與疾病發(fā)生有關：如急性腎小球腎炎用于疾病診斷：如外斐反應引起生物學假陽性：如肥達反應交叉反應血清：Ab1、Ab2+AgA12與疾病發(fā)生有關：如急性腎小球腎炎A組溶血性鏈球菌某些型別的胞壁抗原和胞漿抗原與人腎基底膜和心瓣膜成分相同用于疾病診斷：如外斐反應用普通變形桿菌的某些OX菌株抗原代替立克次體抗原引起生物學假陽性：如肥達反應傷寒沙門菌抗O增高，抗H不高與疾病發(fā)生有關：如急性腎小球腎炎13免疫球蛋白是B細胞識別抗原后活化增殖分化為漿細胞所產(chǎn)生的一種蛋白質(zhì)，主要存在于血清等體液中，約占血漿蛋白總量的20%。

免疫球蛋白是B細胞識別抗原后活化增殖分化為漿細14抗體是B細胞識別抗原后活化增殖分化為漿細胞所產(chǎn)生的一類能與相應抗原特異性結(jié)合的球蛋白。抗體是免疫球蛋白，而免疫球蛋白并非都具有抗體的活性?？贵w是B細胞識別抗原后活化增殖分化為漿細胞所產(chǎn)生的一類能與相15免疫球蛋白的基本結(jié)構(一)重鏈(heavychain，H）2條輕鏈（lightchain，L）2條(二)可變區(qū)（variableregion,V區(qū)）恒定區(qū)（constantregion,C區(qū)）(三)超變區(qū)（hyper-variableregion,HVR）,又稱互補決定區(qū)(complementarydeterminingregion,CDR)骨架區(qū)（frameworkregion,FR）(四)鉸鏈區(qū)（hingeregion）免疫球蛋白的基本結(jié)構(一)重鏈(heavych16１Ｈ鏈：Ig分五類即IgG、IgA、IgM、IgD和IgE，它們的Ｈ鏈分別由α鏈，γ鏈，μ鏈，δ鏈，ε鏈。２Ｌ鏈經(jīng)二硫鍵連接在Ｈ鏈的氨基端?？蓪ⅲ替湻譃棣舒満挺随?/p>

（一）重鏈和輕鏈１Ｈ鏈：（一）重鏈和輕鏈17第二章抗原抗體反應課件18（二）可變區(qū)和恒定區(qū)１可變區(qū)：在Ig多肽鏈Ｎ端Ｌ鏈的1/2與Ｈ鏈的1/4或1/5區(qū)域內(nèi)，氨基酸的種類，排列順序與構型變化很大，故稱該區(qū)為可變區(qū)２恒定區(qū)：在Ig多肽鏈羧基端（Ｃ端）Ｌ鏈的1/2與Ｈ鏈的３/4或４/5區(qū)域內(nèi)，氨基酸的種類，排列順序與構型相對恒定，故稱該區(qū)位恒定區(qū)（二）可變區(qū)和恒定區(qū)１可變區(qū)：在Ig多肽鏈Ｎ端Ｌ鏈的1/2與19（三）超變區(qū)HVRVH和VL的三個高變區(qū)共同組成Ig與抗原結(jié)合的部位，該部位形成一個與表位互補的表面，稱為互補性決定區(qū)。不同的抗體其CDR序列不相同，并因此決定抗體的特異性。（三）超變區(qū)HVRVH和VL的三個高變區(qū)共同組成Ig與抗原20（三）絞鏈區(qū)在IgＧ，IgＡ的CH1與CH2之間的區(qū)域稱為絞鏈區(qū)。此區(qū)域含有大量脯氨酸，富有彈性及伸展性，能使抗體分子與不同距離的抗原決定簇結(jié)合，也利于暴露Ig分子上的補體C1q結(jié)合點而激活補體。（三）絞鏈區(qū)在IgＧ，IgＡ的CH1與CH2之間的區(qū)域稱為絞21第二章抗原抗體反應課件22第二章抗原抗體反應課件23第一節(jié)抗原抗體反應的原理

抗原抗體反應:指抗原與相應抗體之間所發(fā)生的特異性結(jié)合反應。物質(zhì)基礎:抗原表位與抗體高變區(qū)間的互補結(jié)合抗原表位與抗體高變區(qū)的溝槽分子表面的結(jié)合抗原抗體之間的結(jié)合力親水膠體轉(zhuǎn)化為疏水膠體第一節(jié)抗原抗體反應的原理抗原抗體反應:指抗原與相應抗體24靜電引力（electrostaticforces）范德華引力:作用最?。╲anderWaalsinteractions）氫鍵:最具特異性（hydrogenbond）疏水作用力:作用最大（hydrophobicinteractions）

抗原抗體結(jié)合力示意圖一、抗原抗體結(jié)合力靜電引力抗原抗體結(jié)合力示意圖一、抗原抗體結(jié)合力25抗體分子上一個抗原結(jié)合點與對應的抗原決定簇之間相適應而結(jié)合的強度，是抗原抗體間固有的結(jié)合力親和性(affinity)抗原抗體親和力示意圖二、抗原抗體的親和力和親合力抗體分子上一個抗原結(jié)合點與對應的抗原決定簇之間相適應而結(jié)合的26一個抗體分子與整個抗原表位之間結(jié)合的強度，與抗體結(jié)合價直接相關。即多價優(yōu)勢。親合力(avidity)抗原抗體親合力示意圖親合力(avidity)抗原抗體親合力示意圖27

可見反應抗原抗體復合物(疏水膠體)電解質(zhì)抗原(親水膠體)

抗體(親水膠體)

+三、親水膠體轉(zhuǎn)化為疏水膠體可見反應抗原抗體復合物電解質(zhì)抗原抗體+28第二節(jié)抗原抗體反應的特點特異性可逆性比例性階段性第二節(jié)抗原抗體反應的特點29特異性：抗原與抗體結(jié)合反應的專一性抗原抗體反應特異性示意圖分子基礎:抗原表位與抗體分子高變區(qū)之間空間構型的互補性一、特異性特異性：抗原與抗體結(jié)合反應的專一性抗原抗體反應特異性示意圖分30兩種不同的抗原分子具有部分相同或類似結(jié)構的抗原表位，可與彼此相應的抗血清發(fā)生反應交叉反應（crossreactions）抗原抗體交叉反應示意圖兩種不同的抗原分子具有部分相同或類似結(jié)構的抗原表位，可與彼此31二、可逆性可逆性：抗原與相應抗體結(jié)合成復合物后，在一定條件下又可解離為游離抗原與抗體的特性影響因素：抗體對相應抗原的親合力－親合力越高，結(jié)合越牢固，越不易解離環(huán)境因素對復合物的影響－pH、離子強度

二、可逆性可逆性：抗原與相應抗體結(jié)合成復合物后，在一定條件下32三、比例性比例性：以沉淀反應為例，若在加入固定量抗體的一組試管中在依次加入遞增濃度的相應可溶性抗原，根據(jù)所形成的沉淀及抗原抗體的比例關系可繪制出反應曲線。三、比例性比例性：以沉淀反應為例，若在加入固定量抗體的一組試33前帶(prezone)：抗體過量后帶(postzone)：抗原過量等價帶(equivalencezone)：

抗原抗體比例合適

比例性：抗原與抗體發(fā)生可見反應需遵循一定的量比關系三、比例性前帶(prezone)：抗體過量比例性：抗原與抗體發(fā)生可見反34第一階段：特異性結(jié)合階段，反應快，不可見第二階段：反應可見階段，反應慢，出現(xiàn)凝集、沉淀和細胞溶解等現(xiàn)象四、階段性第一階段：特異性結(jié)合階段，反應快，不可見四、階段性35第三節(jié)影響抗原抗體反應的因素抗原、抗體反應物的自身因素環(huán)境因素第三節(jié)影響抗原抗體反應的因素抗原、抗體反應物的自身因素36一、反應物自身因素抗原:理化性狀、表位種類和數(shù)目抗體:來源、特異性、親和性、效價一、反應物自身因素抗原:理化性狀、表位種類和數(shù)目37電解質(zhì):生理鹽水或緩沖液酸堿度:pH6～pH9溫度:15℃～40℃，37℃最適二、環(huán)境因素電解質(zhì):生理鹽水或緩沖液二、環(huán)境因素38反應類型實驗技術結(jié)果判斷凝集反應直接凝集試驗觀察凝集現(xiàn)象間接凝集試驗同上抗球蛋白試驗同上沉淀反應液相沉淀試驗觀察沉淀，檢測濁度免疫電泳技術觀察掃描沉淀峰、沉淀弧補體參與的反應補體溶血試驗觀察測定溶血現(xiàn)象補體結(jié)合試驗同上第四節(jié)免疫學檢測技術的類型反應類型實驗技術結(jié)果判斷凝集反應直接凝集試驗觀察凝集現(xiàn)象間接39反應類型實驗技術結(jié)果判斷中和反應病毒中和試驗檢測病毒感染性毒素中和試驗檢測外毒素毒性標記免疫反應熒光免疫技術檢測熒光現(xiàn)象放射免疫技術檢測放射性強度酶免疫技術檢測酶底物顯色發(fā)光免疫技術檢測發(fā)光強度金免疫技術檢測金顆粒沉淀反應類型實驗技術結(jié)果判斷中和反應病毒中和試驗檢測病毒感染性毒40小結(jié)抗原抗體反應是指抗原與相應抗體之間所發(fā)生的特異性結(jié)合反應?？乖贵w之間的結(jié)合力涉及靜電引力、范德華引力、氫鍵和疏水作用力。抗原抗體反應的特點是特異性、可逆性、比例性和階段性。影響抗原抗體反應的因素包括反應物的自身因素和環(huán)境因素。免疫學檢測技術的基礎是抗原抗體反應，免疫學技術有凝集反應、沉淀反應、補體參與的反應、中和反應和標記免疫反應五種類型。小結(jié)抗原抗體反應是指抗原與相應抗體之間所發(fā)生的特異性411．什