刺五加總黃酮提取工藝研究

刺五加總黃酮提取工藝研究

傳統(tǒng)的中醫(yī)刺五加在中醫(yī)臨床應(yīng)用中有著悠久的歷史，其中黃酮類化合物具有廣泛的藥理活性。機械化學(mechanochemistry)最早發(fā)源于同生理機能有關(guān)的生物化學中機械運動能與化學能的轉(zhuǎn)變,目前主要指通過擠壓、剪切、摩擦等手段,對物質(zhì)施加機械能,從而誘發(fā)其物理化學性質(zhì)變化,使物質(zhì)與周圍環(huán)境中的固體、液體、氣體發(fā)生化學變化的現(xiàn)象11.1紫外分光光度計和冷凍干燥機WZJ(BFM)-6J振動研磨機(濟南倍力粉技術(shù)工程有限公司);TU-1900雙光束紫外可見分光光度計(北京普析通用儀器有限責任公司);FD-ID冷凍干燥機(北京博醫(yī)康儀器有限公司);標準分樣篩(河南新鄉(xiāng)康達新機械有限公司);LS100Q激光粒度儀(美國BeckmanCoulter公司)。1.2材料表面刺五加根及根莖(購自大連開發(fā)區(qū)大藥房,產(chǎn)地吉林,按照《中國藥典》鑒定22.1機械化學法的輔助提取2.1.1添加劑的選擇刺五加中黃酮類物質(zhì)主要為槲皮素及其相關(guān)的黃酮苷類化合物2.1.2試驗溶液的制備用小型中藥粉碎機將刺五加藥材粉碎至60目,60℃下干燥3h備用(即粗粉,以下同)。取粗粉200g與一定量助劑(Na2.1.3單因素實驗分別考察助劑用量、物料粒度(D2.1.4正交實驗根據(jù)單因素試驗結(jié)果,作L2.2其他提取方法包括試劑溶液的制備2.2.1超微粉碎輔助提取取刺五加粗粉200g研磨至粒度D2.2.2物理混合樣品的提取取超微粉碎后的刺五加粉200g(D2.2.3供試品溶液的制備精確稱取刺五加粗粉5.0g,用250ml,75%乙醇回流2h,離心,取上清,沉淀重復(fù)提取2次,合并上清液并濃縮,得浸膏,真空干燥,研碎后加入20ml,95%乙醇,超聲充分溶解,過濾,濾液作供試品溶液。2.3重量測定2.3.1對照品液的制備精密稱取120℃減壓干燥至恒重的蘆丁對照品11.3mg,2.0ml無水乙醇溶解,轉(zhuǎn)入50ml量瓶中,用95%乙醇稀釋至刻度搖勻,即得對照品液(0.226mg/ml)。精密吸取該液0,0.5,1.0,2.0,3.0,4.0,5.0,6.0ml,分別置25ml容量瓶中,加水至6ml,加5%(2.3.2測定總黃酮含量準確吸取供試品溶液2.0ml,置25ml容量瓶中,按“2.3.1”項的方法,自“加水至6ml”起依法測定其吸光度,與標準曲線對照得黃酮質(zhì)量,提取率按下式計算:%=%——提取率;——經(jīng)換算后提取液中黃酮質(zhì)量(——樣品質(zhì)量(mg)。2.3.3精密度實驗精確量取供試品溶液5份,按“2.3.2”項方法分別測定總黃酮含量,2.3.4總黃酮含量測定精確量取已知含量的供試品溶液5份各1ml,分別加入1ml對照品溶液,按“2.3.2”項方法分別測定總黃酮含量,回收率均在92.7%～102.0%之間,平均回收率96.1%,2.4統(tǒng)計方法實驗數(shù)據(jù)采用33.1不同的預(yù)處理方法對全球黃酮提取率的影響。結(jié)果如表2所示刺五加與3.2單因素實驗3.2.1參考圖。2.添加劑用量對提取率的影響助劑的最小用量主要取決于機械化學過程的傳質(zhì)速率及目標提取物的性質(zhì),如提取松針三萜酸時,為使三萜酸與堿充分作用,3.2.2圖3顯示了材料粒度對提取率的影響隨研磨時間延長,物料粒度減小,助劑與目標提取物接觸、作用時間越長。粒度由3.2.3乙醇濃度對提取率的影響機械化學法處理后,刺五加總黃酮在水和稀醇溶液(20%,40%乙醇)中的提取率最高(平均為1.68%),隨乙醇濃度增加,提取率逐漸降低(P<0.05)。這表明機械化學法可提高刺五加總黃酮在極性溶劑中的溶解性,進而可用水或稀醇提取。3.2.4參考圖。5.料溶液比對提取率的影響隨溶劑用量增大,總黃酮提取率增加,當料液比小于1∶50(3.2.5表4顯示了提取時間對提取率的影響機械化學處理后,刺五加總黃酮可快速溶出。在3～303.3最佳工藝的確定根據(jù)以上單因素實驗的結(jié)果,選擇由級差分析可知,機械化學法輔助提取刺五加總黃酮的最佳工藝為在優(yōu)化的工藝條件下進行了3批原料的平行提取,提取率分別為1.74%,1.72%,1.69%,平均提取率為1.72%。3.4總黃酮與熱回流提取對比按正交實驗確定的最佳工藝條件提取刺五