免疫組化原理及流程介紹

免疫組化的原理及流程介紹主要內(nèi)容免疫組化原理及流程介紹一.免疫組化的發(fā)展簡(jiǎn)史二.免疫組化的原理三.免疫組化的基本流程四.免疫組化的結(jié)果分析免疫組化原理及流程介紹一.發(fā)展簡(jiǎn)史1941年Coons首先用熒光素標(biāo)記抗體—檢測(cè)肺組織內(nèi)的肺炎雙球菌獲得成功。60年代Akanke建立酶標(biāo)抗體技術(shù)——鐵蛋白標(biāo)記Ab技術(shù)。70年代Stemberger改良上述技術(shù)，建立辣根過氧化物酶——抗體過氧化物酶（PAP）技術(shù)，使免疫細(xì)胞化學(xué)得到廣泛應(yīng)用。80年代Hsu等建立了抗生物素—生素（ABC）法之后，免疫金—銀染色法、半抗原標(biāo)記法、免疫電鏡技術(shù)相繼問世。90年代分子雜交技術(shù)、原位雜交技術(shù)、免疫細(xì)胞化學(xué)分類方法迅速發(fā)展。2000年各種免疫組化技術(shù)更加成熟，使免疫組化技術(shù)成為當(dāng)今生物醫(yī)學(xué)中形態(tài)、功能代謝綜合研究的一項(xiàng)有力工具。其應(yīng)用范圍深達(dá)醫(yī)學(xué)各個(gè)學(xué)科，是目前生命科學(xué)工作者應(yīng)該掌握的基本技術(shù)之一。免疫組化原理及流程介紹二免疫組化的原理

免疫組織化學(xué)又稱免疫細(xì)胞化學(xué)，是指帶顯色劑標(biāo)記的特異性抗體在組織細(xì)胞原位通過抗原抗體反應(yīng)和組織化學(xué)的呈色反應(yīng)，對(duì)相應(yīng)抗原進(jìn)行定性、定位、定量測(cè)定的一項(xiàng)新技術(shù)。免疫組化原理及流程介紹

它把免疫反應(yīng)的特異性、組織化學(xué)的可見性巧妙地結(jié)合起來，借助顯微鏡(包括熒光顯微鏡、電子顯微鏡)的顯像和放大作用，在細(xì)胞、亞細(xì)胞水平檢測(cè)各種抗原物質(zhì)(如蛋白質(zhì)、多肽、酶、激素、病原體以及受體等)。

三免疫組化的基本流程免疫組化原理及流程介紹1.脫蠟與水化2.細(xì)胞通透、封閉內(nèi)源性過氧化物酶3.抗原修復(fù)、暴露抗原決定簇4.封閉非特異性蛋白5.一抗孵育

6.二抗孵育

7.SP反應(yīng)

8.顯色9.復(fù)染、脫水、透明、封片

2.細(xì)胞通透、封閉內(nèi)源性過氧化物酶免疫組化原理及流程介紹1.脫蠟與水化脫蠟與水化的目的是確?？贵w等其他試劑能夠充分與組織中抗原等結(jié)合發(fā)生反應(yīng)。若脫蠟和水化不全易出現(xiàn)局灶性反應(yīng)和浸洗不全，而產(chǎn)生非特異性背景著色。

60℃×20min→Xylene：2×10minutes；100%absoluteethanol：2×5minutes；95%ethanol2minutes；80%ethanol2minutes；70%ethanol2minutes；distilledwater:5min；PBS洗3×3min。具體操作免疫組化原理及流程介紹2.細(xì)胞通透與封閉內(nèi)源性過氧化酶目的是使抗體能夠充分地進(jìn)入胞內(nèi)進(jìn)行結(jié)合反應(yīng)。一般用TritonX-100、蛋白酶k等通透液。(1)細(xì)胞通透免疫組化原理及流程介紹(2)封閉內(nèi)源性過氧化酶其主要目的是降低內(nèi)源性過氧化物酶的活性。在傳統(tǒng)的ABC法和SP法中，免疫組化反應(yīng)結(jié)果容易受到內(nèi)源性過氧化物酶的干擾，必須用過氧化氫等進(jìn)行滅活。1)用封閉通透液浸潤(rùn)切片30min（RT避光）。其配法是用預(yù)熱40mlPBS加120ulTritonX-100加熱幾分鐘，在臨用前加400ul的30％H2O2。2)PBS溶液洗3次×3min。免疫組化原理及流程介紹具體操作:免疫組化原理及流程介紹3.抗原修復(fù)暴露抗原決定簇

由于組織中部分抗原在甲醛或多聚甲醛固定過程中，發(fā)生了蛋白之間交聯(lián)及醛基的封閉作用，從而失去抗原性；通過抗原修復(fù)，使得細(xì)胞內(nèi)抗原決定簇重新暴露，提高抗原檢測(cè)率。免疫組化原理及流程介紹常用的修復(fù)方法從強(qiáng)到弱一般分為三種，高壓修復(fù)、微波修復(fù)、胰酶修復(fù)。

抗原修復(fù)的主要方法:酶消化方法一般用于細(xì)胞內(nèi)抗原應(yīng)用高頻電磁波打開蛋白質(zhì)間的交聯(lián)鍵免疫組化原理及流程介紹將切片放入0.01M檸檬酸鈉緩沖溶液（pH6.0）后，在微波爐里高火4min至沸騰后，取出，冷卻至室溫，再加熱，約4次，每次間隔補(bǔ)足液體，防止干片。2)PBS溶液洗3次×3min。具體操作（微波修復(fù)）：1)免疫組化原理及流程介紹4.封閉特異性蛋白組織切片上有些剩余的位點(diǎn)可以與一抗非特異性結(jié)合，造成后續(xù)結(jié)果的假陽性。封閉血清一般是和二抗同一來源的，血清中有一些動(dòng)物自身的抗體，預(yù)先能和組織中有交叉反應(yīng)的位點(diǎn)發(fā)生結(jié)合。

免疫組化原理及流程介紹將切片取出,周圍水分用濾紙吸干,用組化筆在組織周圍畫上圈,在圓圈內(nèi)組織滴入5%羊血清（與二抗來源一致）后放入濕盒中,室溫(約30℃)下10～30min。具體操作：大一點(diǎn)免疫組化原理及流程介紹5.一抗孵育一抗:可以特異結(jié)合底物，就是識(shí)別出我們想要檢測(cè)的東西。一抗和底物結(jié)合與否用肉眼是看不出來的。一抗孵育條件在免疫組化反應(yīng)中最重要，包括孵育時(shí)間和抗體濃度。一抗孵育溫度有幾種：4度、室溫、37度，其中4度效果最佳；孵育時(shí)間：這與溫度、抗體濃度有關(guān)，一般37度1-2h，然后4度過夜和從冰箱拿出后37度復(fù)溫45min。具體條件還要摸索。免疫組化原理及流程介紹1.防止脫片；2.使抗原抗體結(jié)合更穩(wěn)定。甩去切片上的羊血清,用濾紙擦干組織周圍殘留血清，直接加入已稀釋的一抗（1：250、500、1000）后，放入濕盒中室溫1小時(shí)，然后4度過夜，冰箱中取出后需37℃復(fù)溫45min。

免疫組化原理及流程介紹具體做法：免疫組化原理及流程介紹6.二抗孵育二抗:可以和一抗結(jié)合，并帶有可以被檢測(cè)出的標(biāo)記(如帶熒光、放射性、化學(xué)發(fā)光或顯色基團(tuán)），作用是檢測(cè)一抗。二抗孵育條件：二抗一般室溫或37度30min-1h，具體時(shí)間需要摸索。但在免疫組化中我們一般先把二抗?jié)舛群头跤龝r(shí)間先定下，然后去摸索一抗?jié)舛群头跤龝r(shí)間。免疫組化原理及流程介紹1)將一抗倒掉并用PBS洗5min×5次；2)用濾紙將圓圈周圍的水吸去，加入已稀釋的二抗后放入37℃恒溫烤箱中30min。3)用PBS洗5次×5min免疫組化原理及流程介紹具體操作：7.SP反應(yīng)SP染色法即鏈霉素抗生物素蛋白生物素過氧化酶連接法。該法是ABC法基礎(chǔ)上的進(jìn)一步改良，使卵白素與鏈霉（而非生物素）結(jié)合，而后再結(jié)合PO基。

免疫組化原理及流程介紹1）加入SP復(fù)合液后放入37度烤箱中30min。2）用PBS洗5次×5min。具體操作：SP染色法的特點(diǎn):靈敏特異性低，成本低。免疫組化原理及流程介紹8.顯色

在免疫組化中，由于抗原抗體所形成的復(fù)合物本身沒有顏色，不能直接觀察，只能借助于其他某些化學(xué)基團(tuán)的顯色作用，是復(fù)合物顯色，有利于顯微鏡下觀察。免疫組化原理及流程介紹通常在過氧化物酶（HRP）法中，顯色劑為DAB。DAB(3,3-二氨基聯(lián)苯胺顯色液)配法:DAB50mg0.05MTB100ml30%H2O230-40ulABC法SP法PAP法免疫組化原理及流程介紹9、復(fù)染、脫水、透明、封片復(fù)染：目的是形成細(xì)胞輪廓，從而更好地對(duì)目標(biāo)蛋白進(jìn)行定位，經(jīng)常用的試劑為蘇木素。片子復(fù)染完后流水振洗，然后置于鹽酸酒精中數(shù)秒（一定動(dòng)作要快）后拿出流水振洗，在放入氨水中返藍(lán)即可。1)用PBS3次×3min后，用雙蒸水洗5min；加一大滴蘇木素染液，（胞核蛋白染幾秒，胞漿或胞膜蛋白染20s），自來水沖洗，雙蒸水洗5min，再用PBS返藍(lán)5min。2)脫水：50%ethanol(1-2)min;70%ethanol(1-2)min;95%ethanol（1-2）min；95%ethanol（1-2）min；100%absoluteethanol:(1-2)min；100%absoluteethanol:(1-2)min。3)透明：Xylene1×(1-2)min→Xylene2×(1-2)min4)封片：中性樹膠。免疫組化原理及流程介紹免疫組化原理及流程介紹四免疫組化結(jié)果分析免疫組化結(jié)果的判斷原則：1.必須設(shè)對(duì)照。2.抗原表達(dá)必須在特定部位。3.陰性結(jié)果不能視為抗原不表達(dá)。免疫組化原理及流程介紹實(shí)驗(yàn)分析的相關(guān)介紹陽性對(duì)照：用已知抗原陽性的切片與待檢標(biāo)本同時(shí)進(jìn)行免疫細(xì)胞化學(xué)染色。對(duì)照切片呈陽性結(jié)果，標(biāo)為陽性對(duì)照。用確證不含已知抗原的標(biāo)本作對(duì)照，應(yīng)呈陰性結(jié)果，稱陰性對(duì)照。其實(shí)這只是陰性對(duì)照中的一種，陰性對(duì)照還應(yīng)包括空白、替代、吸收和抑制實(shí)驗(yàn)。陰性對(duì)照：免疫組化原理及流程介紹陽性對(duì)照陰性對(duì)照替代對(duì)照實(shí)驗(yàn)組結(jié)論1－－－－操作錯(cuò)誤2＋＋＋＋非特異性反應(yīng)3＋＋－－陰性對(duì)照含定位Ag4－－－＋陰性對(duì)照不含定位Ag5＋－＋＋受檢組織非特異性染色6＋－－－受檢組織不含定位Ag7＋－－＋受檢組織含定位Ag免疫組化染色實(shí)驗(yàn)組與對(duì)照組結(jié)果分析表免疫組化原理及流程介紹

從表上可以看出，只有6，7實(shí)驗(yàn)結(jié)果有意義。1～5均因?qū)φ战M的結(jié)果已否定Ab的特異性或因IHC技術(shù)操作存在錯(cuò)誤等而使實(shí)驗(yàn)結(jié)果失去意義，必須重復(fù)實(shí)驗(yàn)或換用Ab.陽性對(duì)照陰性對(duì)照替代對(duì)照實(shí)驗(yàn)組結(jié)論6＋－－－受檢組織不含定位Ag7＋－－＋受檢組織含定位Ag免疫組化原理及流程介紹1．陽性染色特點(diǎn)①Ag定位，胞漿、胞核、胞膜、間質(zhì)具有結(jié)構(gòu)性。（非特異性染色細(xì)胞與組織無區(qū)別）②染色強(qiáng)度不同：顏色深淺不一（非特異性染色彌散性均勻）?！锍鲜鰧?duì)照結(jié)果分析之外，還必須從以下幾個(gè)方面綜合評(píng)價(jià)：2．組織切片制作過程的影響①固定不良—非特異性染色，顯示不均。②邊緣干燥—非特異性染色（常見），加抗體時(shí)勿干片。免疫組化原理及流程介紹3．人工假象與特異性結(jié)果顯示不在同一平面上。免疫組化原理及流程介紹▲染色失敗的幾種原因：(1)所染的全部切片均為陰性結(jié)果，包括陽性對(duì)照在內(nèi)。染色失敗的可能情況(2)所有切片均呈陽性反應(yīng)(3)所有切片背景過深(4)陽性對(duì)照染色良好，檢測(cè)的陽性標(biāo)本呈陰性反應(yīng)免疫組化原理及流程介紹(1)所有切片呈陰性1）染色未完全嚴(yán)格按照操作步驟進(jìn)行2）漏加一種抗體，或抗體失活3）緩沖液內(nèi)含疊氮化鈉，抑制了酶的活性4）底物中所加H2O2

量少或失活5）復(fù)染或脫水劑使用不當(dāng)免疫組化原理及流程介紹①切片在染色過程中抗體過濃，或干片了。緩沖液配置中未加氯化鈉和PH值不準(zhǔn)確，洗滌不徹底。使用已變色的呈色底物溶液，或呈色反應(yīng)時(shí)間過長(zhǎng)。④抗體溫育的時(shí)間過長(zhǎng)。⑤H2O2

濃度過高，呈色速度過快且粘附劑太厚。（2）所有切片呈陽性反應(yīng)，其原因：免疫組化原理及流程介紹（3）所有切片背景過深①內(nèi)源性過氧化酶沒有完全阻斷②切片或涂片過厚③漂洗不夠④底物呈色反應(yīng)過久⑤蛋白質(zhì)封閉不夠或所用血清溶血⑥使用全血清抗體稀釋不夠免疫組化原理及流程介紹（4）陽性對(duì)照染色良好，檢測(cè)的陽性標(biāo)本呈陰性反應(yīng)。

最常見的原因是：標(biāo)本的固定和處理不當(dāng)1.蘇木素復(fù)染時(shí)間需要摸索，尤其要考慮陽性染色的位置。2.切片脫蠟和水化要充分；加反應(yīng)液時(shí)要覆蓋組織充分；每次加液前甩干洗滌液，但又防止干片。免疫組化原理及流程介紹注意事項(xiàng)：3.以下原因可能導(dǎo)致片子著色不均勻：①脫蠟不充分?？梢?0℃烤20min，立即放入新鮮的二甲苯中；②水化不全。應(yīng)經(jīng)常配制新鮮的梯度乙醇；③抗體沒混勻。用移液器充分混勻一抗/二抗等試劑；④抗體孵育時(shí)，切片放傾斜；⑤抗體孵育后PBS沖洗不充分。⑥制片厚薄不均勻等問題。染片盒不平，切片傾斜。免疫組化原理及流程介紹4.一抗的清洗：免疫組化原理及流程介紹（1）單獨(dú)沖洗，防止交叉反應(yīng)造成污染。（2）溫柔沖洗，防止切片的脫落。推薦用浸洗方式；（3）沖洗的時(shí)間要足夠，才能徹底洗去結(jié)合的物質(zhì)。5.PBS的PH和離子強(qiáng)度的使用。免疫組化原理及流程介紹建議PH在7.4-7.6濃度是0.01M。中性及弱鹼性條件（PH7-8）有利于免疫復(fù)合物的形成，而酸性條件則有利于分解；低離子強(qiáng)度有利于免疫復(fù)合物的形成，而高離子強(qiáng)度則有利于分解。5.拍照免疫組化原理及流程介紹有條件的話最好立即拍照，若不能及時(shí)拍照，也要封好片和用指甲油封固，保持避光和濕度。免疫組化原理及流程介紹謝謝第一節(jié)活塞式空壓機(jī)的工作原理第二節(jié)活塞式空壓機(jī)的結(jié)構(gòu)和自動(dòng)控制第三節(jié)活塞式空壓機(jī)的管理復(fù)習(xí)思考題單擊此處輸入你的副標(biāo)題，文字是您思想的提煉，為了最終演示發(fā)布的良好效果，請(qǐng)盡量言簡(jiǎn)意賅的闡述觀點(diǎn)。第六章活塞式空氣壓縮機(jī)

piston-aircompressor壓縮空氣在船舶上的應(yīng)用：

1.主機(jī)的啟動(dòng)、換向；

2.輔機(jī)的啟動(dòng)；

3.為氣動(dòng)裝置提供氣源；

4.為氣動(dòng)工具提供氣源；

5.吹洗零部件和濾器。

排氣量:單位時(shí)間內(nèi)所排送的相當(dāng)?shù)谝患?jí)吸氣狀態(tài)的空氣體積。單位：m3/s、m3/min、m3/h第六章活塞式空氣壓縮機(jī)

piston-aircompressor空壓機(jī)分類：按排氣壓力分：低壓0.2～1.0MPa；中壓1～10MPa；高壓10～100MPa。按排氣量分：微型<1m3/min；小型1～10m3/min；中型10～100m3/min；大型>100m3/min。第六章活塞式空氣壓縮機(jī)

piston-aircompressor第一節(jié)活塞式空壓機(jī)的工作原理容積式壓縮機(jī)按結(jié)構(gòu)分為兩大類：往復(fù)式與旋轉(zhuǎn)式兩級(jí)活塞式壓縮機(jī)單級(jí)活塞壓縮機(jī)活塞式壓縮機(jī)膜片式壓縮機(jī)旋轉(zhuǎn)葉片式壓縮機(jī)最長(zhǎng)的使用壽命-

----低轉(zhuǎn)速（1460RPM），動(dòng)件少（軸承與滑片），潤(rùn)滑油在機(jī)件間形成保護(hù)膜，防止磨損及泄漏，使空壓機(jī)能夠安靜有效運(yùn)作；平時(shí)有按規(guī)定做例行保養(yǎng)的JAGUAR滑片式空壓機(jī)，至今使用十萬小時(shí)以上，依然完好如初，按十萬小時(shí)相當(dāng)于每日以十小時(shí)運(yùn)作計(jì)算，可長(zhǎng)達(dá)33年之久。因此，將滑片式空壓機(jī)比喻為一部終身機(jī)器實(shí)不為過。滑(葉)片式空壓機(jī)可以365天連續(xù)運(yùn)轉(zhuǎn)并保證60000小時(shí)以上安全運(yùn)轉(zhuǎn)的空氣壓縮機(jī)1.進(jìn)氣2.開始?jí)嚎s3.壓縮中4.排氣1.轉(zhuǎn)子及機(jī)殼間成為壓縮空間，當(dāng)轉(zhuǎn)子開始轉(zhuǎn)動(dòng)時(shí)，空氣由機(jī)體進(jìn)氣端進(jìn)入。2.轉(zhuǎn)子轉(zhuǎn)動(dòng)使被吸入的空氣轉(zhuǎn)至機(jī)殼與轉(zhuǎn)子間氣密范圍，同時(shí)停止進(jìn)氣。3.轉(zhuǎn)子不斷轉(zhuǎn)動(dòng)，氣密范圍變小，空氣被壓縮。4.被壓縮的空氣壓力升高達(dá)到額定的壓力后由排氣端排出進(jìn)入油氣分離器內(nèi)。4.被壓縮的空氣壓力升高達(dá)到額定的壓力后由排氣端排出進(jìn)入油氣分離器內(nèi)。1.進(jìn)氣2.開始?jí)嚎s3.壓縮中4.排氣1.凸凹轉(zhuǎn)子及機(jī)殼間成為壓縮空間，當(dāng)轉(zhuǎn)子開始轉(zhuǎn)動(dòng)時(shí)，空氣由機(jī)體進(jìn)氣端進(jìn)入。2.轉(zhuǎn)子轉(zhuǎn)動(dòng)使被吸入的空氣轉(zhuǎn)至機(jī)殼與轉(zhuǎn)子間氣密范圍，同時(shí)停止進(jìn)氣。3.轉(zhuǎn)子不斷轉(zhuǎn)動(dòng)，氣密范圍變小，空氣被壓縮。螺桿式氣體壓縮機(jī)是世界上最先進(jìn)、緊湊型、堅(jiān)實(shí)、運(yùn)行平穩(wěn)，噪音低，是值得信賴的氣體壓縮機(jī)。螺桿式壓縮機(jī)氣路系統(tǒng)：

A

進(jìn)氣過濾器

B

空氣進(jìn)氣閥

C

壓縮機(jī)主機(jī)

D

單向閥

E

空氣/油分離器

F

最小壓力閥

G

后冷卻器

H

帶自動(dòng)疏水器的水分離器油路系統(tǒng)：

J

油箱

K

恒溫旁通閥

L

油冷卻器

M

油過濾器

N

回油閥

O

斷油閥冷凍系統(tǒng)：

P

冷凍壓縮機(jī)

Q

冷凝器

R

熱交換器

S

旁通系統(tǒng)

T

空氣出口過濾器螺桿式壓縮機(jī)渦旋式壓縮機(jī)

渦旋式壓縮機(jī)是20世紀(jì)90年代末期開發(fā)并問世的高科技?jí)嚎s機(jī)，由于結(jié)構(gòu)簡(jiǎn)單、零件少、效率高、可靠性好，尤其是其低噪聲、長(zhǎng)壽命等諸方面大大優(yōu)于其它型式的壓縮機(jī)，已經(jīng)得到壓縮機(jī)行業(yè)的關(guān)注和公認(rèn)。被譽(yù)為“環(huán)保型壓縮機(jī)”。由于渦旋式壓縮機(jī)的獨(dú)特設(shè)計(jì)，使其成為當(dāng)今世界最節(jié)能壓縮機(jī)。渦旋式壓縮機(jī)主要運(yùn)動(dòng)件渦卷付，只有磨合沒有磨損，因而壽命更長(zhǎng)，被譽(yù)為免維修壓縮機(jī)。

由于渦旋式壓縮機(jī)運(yùn)行平穩(wěn)、振動(dòng)小、工作環(huán)境安靜，又被譽(yù)為“超靜壓縮機(jī)”。

渦旋式壓縮機(jī)零部件少，只有四個(gè)運(yùn)動(dòng)部件,壓縮機(jī)工作腔由相運(yùn)動(dòng)渦卷付形成多個(gè)相互封閉的鐮形工作腔，當(dāng)動(dòng)渦卷作平動(dòng)運(yùn)動(dòng)時(shí)，使鐮形工作腔由大變小而達(dá)到壓縮和排出壓縮空氣的目的。活塞式空氣壓縮機(jī)的外形第一節(jié)活塞式空壓機(jī)的工作原理一、理論工作循環(huán)（單級(jí)壓縮）工作循環(huán)：4—1—2—34—1吸氣過程

1—2壓縮過程

2—3排氣過程第一節(jié)活塞式空壓機(jī)的工作原理一、理論工作循環(huán)（單級(jí)壓縮）

壓縮分類：絕熱壓縮：1—2耗功最大等溫壓縮：1—2''耗功最小多變壓縮：1—2'耗功居中功＝P×V（PV圖上的面積）加強(qiáng)對(duì)氣缸的冷卻，省功、對(duì)氣缸潤(rùn)滑有益。二、實(shí)際工作循環(huán)（單級(jí)壓縮）1.不存在假設(shè)條件2.與理論循環(huán)不同的原因：1）余隙容積Vc的影響Vc不利的影響—?dú)埓娴臍怏w在活塞回行時(shí)，發(fā)生膨脹，使實(shí)際吸氣行程（容積）減小。Vc有利的好處—

（1）形成氣墊，利于活塞回行；（2）避免“液擊”（空氣結(jié)露）；（3）避免活塞、連桿熱膨脹，松動(dòng)發(fā)生相撞。第一節(jié)活塞式空壓機(jī)的工作原理表征Vc的參數(shù)—相對(duì)容積C、容積系數(shù)λv合適的C：低壓0.07-0.12

中壓0.09-0.14

高壓0.11-0.16

λv＝0.65—0.901）余隙容積Vc的影響C越大或壓力比越高，則λv越小。保證Vc正常的措施：余隙高度見表6-1壓鉛法—保證要求的氣缸墊厚度2.與理論循環(huán)不同的原因：二、實(shí)際工作循環(huán)（單級(jí)壓縮）第一節(jié)活塞式空壓機(jī)的工作原理2）進(jìn)排氣閥及流道阻力的影響吸氣過程壓力損失使排氣量減少程度，用壓力系數(shù)λp表示：保證措施：合適的氣閥升程及彈簧彈力、管路圓滑暢通、濾器干凈。λp

（0.90-0.98）2.與理論循環(huán)不同的原因：二、實(shí)際工作循環(huán)（單級(jí)壓縮）第一節(jié)活塞式空壓機(jī)的工作原理3）吸氣預(yù)熱的影響由于壓縮過程中機(jī)件吸熱，所以在吸氣過程中，機(jī)件放熱使吸入的氣體溫度升高，使吸氣的比容減小，造成吸氣量下降。預(yù)熱損失用溫度系數(shù)λt來衡量（0.90-0.95）。保證措施：加強(qiáng)對(duì)氣缸、氣缸蓋的冷卻，防止水垢和油污的形成。2.與理論循環(huán)不同的原因：二、實(shí)際工作循環(huán)（單級(jí)壓縮）第一節(jié)活塞式空壓機(jī)的工作原理4）漏泄的影響內(nèi)漏：排氣閥（回漏）；外漏：吸氣閥、活塞環(huán)、氣缸墊。漏泄損失用氣密系數(shù)λl來衡量（0.90-0.98）。保證措施：氣閥的嚴(yán)密閉合，氣缸與活塞、氣缸與缸蓋等部件的嚴(yán)密配合。5）氣體流動(dòng)慣性的影響當(dāng)吸氣管中的氣流慣性方向與活塞吸氣行程相反時(shí)，造成氣缸壓力較低，氣體比容增大，吸氣量下降。保證措施：合理的設(shè)計(jì)進(jìn)氣管長(zhǎng)度，不得隨意增減進(jìn)氣管的長(zhǎng)度，保證濾器的清潔。2.與理論循環(huán)不同的原因：二、實(shí)際工作循環(huán)（單級(jí)壓縮）第一節(jié)活塞式空壓機(jī)的工作原理上述五條原因使實(shí)際與理論循環(huán)不同。4）漏泄的影響5）氣體流動(dòng)慣性的影響1）余隙容積Vc的影響2）進(jìn)排氣閥及流道阻力的影響3）吸氣預(yù)熱的影響2.與理論循環(huán)不同的原因：二、實(shí)際工作循環(huán)（單級(jí)壓縮）第一節(jié)活塞式空壓機(jī)的工作原理3.排氣量和輸氣系數(shù)理論排氣量V