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第十七章

真菌概述

-第十七章

真菌概述-1真菌是一大類真核細(xì)胞微生物,營(yíng)腐生或寄生生活,僅少數(shù)類群為單細(xì)胞,其余為多細(xì)胞,大多數(shù)呈分支或不分支的絲狀體,能進(jìn)行有性和無(wú)性繁殖。真菌從形態(tài)上分為酵母菌霉菌擔(dān)子菌-真菌-2第一節(jié)真菌分類及

生物學(xué)特性-第一節(jié)真菌分類及

生物學(xué)特性-3一、真菌的分類根據(jù)第8版《真菌字典》(Ainsworth等,1995),目前將真菌界分為5個(gè)門。壺菌門接合菌門真菌界子囊菌門擔(dān)子菌門半知菌門-一、真菌的分類-4二、生物學(xué)特性真菌為真核細(xì)胞微生物,具有細(xì)胞壁、細(xì)胞膜、細(xì)胞質(zhì)、細(xì)胞核及各種細(xì)胞器等結(jié)構(gòu)。真菌大小也比細(xì)菌大幾倍至幾十倍,故用顯微鏡放大100~400倍即可看清。-二、生物學(xué)特性-5根據(jù)形態(tài)結(jié)構(gòu)將真菌分為:?jiǎn)渭?xì)胞真菌菌體呈圓形或卵圓形,如酵母菌。多細(xì)胞真菌菌體大多數(shù)呈菌絲狀,稱為絲狀菌,又稱霉菌。

-根據(jù)形態(tài)結(jié)構(gòu)將真菌分為:-6真菌的雙向性有些真菌可因環(huán)境條件的改變兩種形態(tài)發(fā)生互變,稱為真菌的雙相性或雙相真菌。例如:假皮疽組織胞漿菌體內(nèi)呈酵母樣培養(yǎng)基呈菌絲狀-真菌的雙向性-7(一)酵母菌(yeasts)1、形態(tài)與結(jié)構(gòu)一般為圓形、橢圓形、臘腸形,少數(shù)為瓶形。大小1~5×5~30μm。結(jié)構(gòu):典型的細(xì)胞。酵母菌和霉菌的主要區(qū)別酵母不形成真正的菌絲,但旺盛生長(zhǎng)時(shí)可形成假菌絲。-(一)酵母菌(yeasts)-8酵母菌的細(xì)胞構(gòu)造-酵母菌的細(xì)胞構(gòu)造-9光鏡下觀察到的酵母菌-光鏡下觀察到的酵母菌-10電鏡下的酵母菌-電鏡下的酵母菌-11繁殖方式2、繁殖方式無(wú)性繁殖有性繁殖芽殖裂殖產(chǎn)生擲孢子產(chǎn)生子囊孢子-繁殖方式2、繁殖方式無(wú)性繁殖有性繁殖芽殖裂殖產(chǎn)生擲孢子產(chǎn)生子12酵母菌芽殖-酵母菌芽殖-13芽殖過程-芽殖過程-14芽殖及假菌絲-芽殖及假菌絲-15酵母菌子囊孢子形成過程-酵母菌子囊孢子形成過程-163、菌落特征酵母菌的菌落外觀上與細(xì)菌的菌落相似,呈圓形或卵圓形,邊緣整齊,表面光滑、濕潤(rùn)、粘稠,但比細(xì)菌菌落稍大而且厚。多數(shù)為乳白色或奶油色,少數(shù)為黃色或桔紅色。-3、菌落特征-17酵母菌菌落-酵母菌菌落-18酵母菌菌落-酵母菌菌落-19酵母菌菌落與細(xì)菌菌落比較-酵母菌菌落與細(xì)菌菌落比較-20(二)霉菌(Mo1ds)霉菌均為多細(xì)胞真菌,凡是在營(yíng)養(yǎng)基質(zhì)上,能形成絨毛狀、蛛網(wǎng)狀或絮狀菌絲體的真菌,均稱為霉菌。-(二)霉菌(Mo1ds)-211、形態(tài)與結(jié)構(gòu)霉菌由菌絲和孢子兩部分組成。①菌絲(hypha)霉菌的菌絲是由孢子發(fā)芽而形成,菌絲頂端延長(zhǎng),旁側(cè)分支,互相交錯(cuò)成團(tuán),形成菌絲體(mycelium),菌絲體構(gòu)成霉菌的菌落。-1、形態(tài)與結(jié)構(gòu)-22營(yíng)養(yǎng)菌絲伸入營(yíng)養(yǎng)基質(zhì)中,起吸收營(yíng)養(yǎng)的作用。氣生菌絲伸向空氣,發(fā)育到一定階段,上邊產(chǎn)生孢子,稱繁殖菌絲。-營(yíng)養(yǎng)菌絲-23無(wú)隔菌絲長(zhǎng)管狀、分支、多核、單細(xì)胞狀態(tài),如毛霉、根霉。有隔菌絲是由分支成串的多細(xì)胞組成,菌絲中有隔,如青霉、曲霉。-無(wú)隔菌絲-24菌絲的形態(tài)螺旋狀球拍狀鹿角狀梳狀結(jié)節(jié)狀菌絲的顏色不同的霉菌也有差異。菌絲形態(tài)、結(jié)構(gòu)與顏色是鑒別霉菌的重要依據(jù)。-菌絲的形態(tài)-25②孢子(spore)霉菌的孢子在氣生菌絲上形成,有多種,分無(wú)性孢子和有性孢子兩類。霉菌孢子的形態(tài)特征也是分類的重要依據(jù)。-②孢子(spore)-262、繁殖方式霉菌以產(chǎn)生各種無(wú)性和有性孢子進(jìn)行繁殖,而以無(wú)性孢子繁殖為主。-2、繁殖方式-27①無(wú)性繁殖是不經(jīng)兩性細(xì)胞結(jié)合而形成新個(gè)體的過程。大多數(shù)霉菌進(jìn)行無(wú)性繁殖,產(chǎn)生不同的無(wú)性孢子。霉菌的無(wú)性孢子有5種:芽生孢子節(jié)孢子厚垣孢子孢子囊孢子分生孢子-①無(wú)性繁殖-28霉菌的無(wú)性孢子厚垣孢子節(jié)孢子孢子囊孢子芽生孢子分生孢子-霉菌的無(wú)性孢子厚垣孢子節(jié)孢子孢子囊孢子芽生孢子分生孢子-29霉菌的無(wú)性孢子厚垣孢子節(jié)孢子孢子囊孢子芽生孢子分生孢子-霉菌的無(wú)性孢子厚垣孢子節(jié)孢子孢子囊孢子芽生孢子分生孢子-30②有性繁殖是經(jīng)兩性細(xì)胞結(jié)核,產(chǎn)生新個(gè)體的過程。真菌的有性繁殖過程:質(zhì)配即兩個(gè)性細(xì)胞細(xì)胞質(zhì)融合在同一細(xì)胞中,此時(shí)細(xì)胞核并不結(jié)合。核配即兩個(gè)細(xì)胞核融合為一個(gè)細(xì)胞核,核的染色體數(shù)目是雙倍的。減數(shù)分裂雙倍體的細(xì)胞核進(jìn)行減數(shù)分裂,子核的細(xì)胞成為單倍體核。-②有性繁殖-31霉菌的有性孢子包括卵孢子接合孢子子囊孢子-霉菌的有性孢子包括-32卵孢子-卵孢子-33接合孢子-接合孢子-34不同形態(tài)的子囊孢子-不同形態(tài)的子囊孢子-353、菌落特征霉菌的菌落由疏松的菌絲體構(gòu)成,大而蓬松,呈絨毛狀、棉絮狀或粉沫狀。由于菌落不斷向周圍擴(kuò)散生長(zhǎng),菌落也不斷擴(kuò)大,有的直徑可達(dá)10厘米以上。菌絲上生長(zhǎng)出孢子后,菌落可呈灰白、淡紅、黃、綠、青、藍(lán)等顏色,這對(duì)霉菌的鑒別有一定的意義。-3、菌落特征-36--37--38--39--40三、真菌的生長(zhǎng)要求(一)營(yíng)養(yǎng)

碳素

大多數(shù)真菌不僅能利用單糖、雙糖,而且能利用淀粉、纖維素、木質(zhì)素、甲殼質(zhì)等多糖以及多種有機(jī)酸。氮素

真菌除了可利用有機(jī)含氮物(蛋白質(zhì)、氨基酸等),也可利用尿素、銨鹽、亞硝酸鹽、硝酸鹽等。-三、真菌的生長(zhǎng)要求-41沙堡弱氏(Sabouroud)培養(yǎng)基培養(yǎng)及鑒定真菌常用沙堡弱氏培養(yǎng)基,此培養(yǎng)基為鑒定真菌的國(guó)際標(biāo)準(zhǔn)培養(yǎng)基。

-沙堡弱氏(Sabouroud)培養(yǎng)基-42(二)溫度多數(shù)真菌為嗜溫菌,生長(zhǎng)溫度范圍為10~40℃,最適溫度為25~35℃。寄生在哺乳動(dòng)物體內(nèi)的真菌在37℃時(shí)生長(zhǎng)最好。(三)氫離子濃度真菌在pHl.5~11范圍內(nèi)可生長(zhǎng)繁殖,最適pH為5.5~6。-(二)溫度-43(四)濕度真菌需在高濕度條件下才能生長(zhǎng),多數(shù)在相對(duì)濕度95%~100%條件下生長(zhǎng)良好,在80%~85%相對(duì)濕度中生長(zhǎng)不良或停滯。(五)氣體多數(shù)真菌為需氧菌,少數(shù)為兼性厭氧菌,個(gè)別為嚴(yán)格厭氧菌。-(四)濕度-44第二節(jié)真菌的致病性

與免疫-第二節(jié)真菌的致病性

與免疫-45一、真菌的致病性少數(shù)真菌(約百余種)對(duì)人和動(dòng)物有致病性,稱病原真菌。病原真菌通過不同的形式引起動(dòng)物的不同疾病。有些真菌呈寄生性致病作用,有些真菌呈條件性致病作用,有些則產(chǎn)生毒素使動(dòng)物中毒。-一、真菌的致病性-46真菌病的類型(一)致病性真菌感染1、皮膚癬菌引起皮膚真菌病,又稱皮膚癬。2、皮下感染真菌經(jīng)外傷侵入皮下,引起相應(yīng)炎癥。如著色真菌與孢子絲菌3、深部感染真菌主要侵害動(dòng)物的內(nèi)部器官,引起組織慢性肉芽腫和組織潰瘍及壞死。如假皮疽組織胞漿菌、厭酷球孢子菌。-真菌病的類型-47(二)條件致病性真菌感染一些內(nèi)源性真菌如念珠菌、曲霉菌、毛霉菌等,致病性不強(qiáng),只在機(jī)體免疫力降低或長(zhǎng)期應(yīng)用廣譜抗生素、激素或放射治療后,發(fā)生機(jī)會(huì)感染。-(二)條件致病性真菌感染-48

(三)真菌變態(tài)反應(yīng)性疾病一部分真菌能引起變態(tài)反應(yīng)陽(yáng)性,但并不致病。但交鏈孢霉、曲霉、青霉、鐮刀菌等污染空氣時(shí),引起接觸性皮炎等疾病。-(三)真菌變態(tài)反應(yīng)性疾病-49(四)真菌性中毒有些真菌在飼料、食品中繁殖產(chǎn)生毒素,人和動(dòng)物食后可導(dǎo)致急性或慢性中毒。此類真菌稱真菌中毒病真菌。引起中毒的物質(zhì)是真菌產(chǎn)生的毒素。如鐮刀菌毒素、黃曲霉毒素等。此類菌約有150余種。-(四)真菌性中毒-50(五)致腫瘤某些真菌產(chǎn)物具有致癌作用。如黃曲霉毒素,小劑量即有致癌作用。除黃曲霉毒素外,其他如黑曲霉、赤曲霉、寄生曲霉等產(chǎn)生的毒素,鐮刀菌的T-2毒素、青霉菌產(chǎn)生的灰黃霉素等也具有致癌作用。-(五)致腫瘤-51二、真菌的免疫原性大部分動(dòng)物對(duì)真菌感染有一定的抵抗力。一般認(rèn)為真菌感染的康復(fù)主要靠細(xì)胞免疫,血清中抗真菌抗體滴度雖然很高,可用于血清學(xué)診斷,但不能抑制真菌的生長(zhǎng)。在真菌的細(xì)胞免疫中,T細(xì)胞起主導(dǎo)作用,如T細(xì)胞受損,機(jī)體易發(fā)生念珠菌病、曲霉菌病。-二、真菌的免疫原性-52第三節(jié)真菌病的診斷與防治-第三節(jié)真菌病的診斷與防治-53一、真菌病的診斷(一)標(biāo)本采集淺部感染取皮屑、毛發(fā)、羽毛、指甲屑等。深部感染根據(jù)病情取病變組織、滲出物、分泌物等。-一、真菌病的診斷-54(二)顯微鏡檢查1、抹片檢查組織、體液、膿汁、離心沉淀材料等,可做成抹片,以姬姆薩染色法或其他適宜方法染色后,檢查真菌細(xì)胞、菌絲、孢子等結(jié)構(gòu)。2、壓片檢查將病料置載波片上,滴加少量10%~20%氫氧化鉀溶液或乳酸石炭酸棉藍(lán)液或印度墨汁,加蓋玻片后檢查。-(二)顯微鏡檢查-55(三)分離培養(yǎng)將病料接種沙堡弱氏瓊脂,某些深部感染的病料,還需接種血液瓊脂,分別培養(yǎng)于室溫及37℃,培養(yǎng)后逐日觀察。真菌一般生長(zhǎng)較慢,往往需培養(yǎng)數(shù)日甚至數(shù)周。-(三)分離培養(yǎng)-56真菌的載片培養(yǎng)以無(wú)菌技術(shù)切取一小塊沙堡弱氏培養(yǎng)基置于滅菌載玻片中央,挑取小片真菌的菌落接種在培養(yǎng)基的邊緣,蓋上滅菌蓋玻片,置濕盒中培養(yǎng)1周,取出用乳酸石炭酸棉藍(lán)染色,在鏡下觀察菌絲與孢子的形態(tài)結(jié)構(gòu)。-真菌的載片培養(yǎng)-57(四)變態(tài)反應(yīng)診斷有些真菌病,例如假皮疽組織胞漿菌引致的馬流行性淋巴管炎,可用變態(tài)反應(yīng)進(jìn)行診斷。-(四)變態(tài)反應(yīng)診斷-58(五)血清學(xué)試驗(yàn)大部分真菌引起的抗體效價(jià)很低,而且真菌之間有共同抗原,這就限制了血清學(xué)試驗(yàn)在真菌病診斷過程中的應(yīng)用。但某些真菌病,如隱球菌感染,可利用反向間接凝集試驗(yàn)進(jìn)行診斷;牛羊的癬病等可用熒光抗體法診斷。-(五)血清學(xué)試驗(yàn)-59(六)真菌毒素檢測(cè)在真菌毒素中毒性疾病,一般應(yīng)對(duì)可疑的飼草、飼料進(jìn)行真菌毒素檢查和產(chǎn)毒真菌的檢查。真菌毒素檢測(cè)可用免疫學(xué)檢測(cè)或提取后用薄層層析、氣相液相色譜分析手段,或接種動(dòng)物進(jìn)行生物試驗(yàn)。-(六)真菌毒素檢測(cè)-60(七)分子生物學(xué)檢查此法耗時(shí)短,敏感性高。常用以18srRNA基因?yàn)榛A(chǔ)的PCR和核酸探針技術(shù)檢測(cè)。可鑒定到種和屬。-

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