小柴胡湯抗乙肝病毒作用機制的研究進(jìn)展

小柴胡湯抗乙肝病毒作用機制的研究進(jìn)展

小柴胡湯是“少陽病熱”的主要方針，也是八法中和法的代表方。因其臨床應(yīng)用廣泛,療效卓著而深受國內(nèi)外中醫(yī)藥界的重視。國外尤其是在日本漢方研究中,常以小柴胡湯與半夏厚樸湯合方(稱作柴樸湯),加以應(yīng)用和研究。本文對近五年國外小柴胡湯的研究進(jìn)展概述如下:1小柴胡湯治療慢性充精劑的作用機制近年來認(rèn)為刺激嗜酸細(xì)胞可釋放白三烯C4、血小板活化因子(PAF)而引起氣管痙攣。日本Tohda氏在柴樸湯對IL-3、IL-5、GM-CSF等酸性細(xì)胞活化因子刺激嗜酸細(xì)胞生存時間延長作用的研究中,發(fā)現(xiàn)柴樸湯可縮短嗜酸細(xì)胞生存期,因此認(rèn)為柴樸湯直接作用于與變應(yīng)性炎癥有關(guān)的嗜酸細(xì)胞而抑制變態(tài)反應(yīng)。英國HommaH氏在實驗研究中發(fā)現(xiàn),柴樸湯中的8種酚類化合物是抑制PMLs(人多核白細(xì)胞)釋放LT、抗變態(tài)反應(yīng)的活性成分。日本松本達(dá)始氏研究后發(fā)現(xiàn),小柴胡湯對實驗大鼠肥大細(xì)胞中組胺游離有明顯抑制作用,而肥大細(xì)胞在I型變態(tài)反應(yīng)的表達(dá)中起重要作用,其釋放的組胺可引起炎癥。小柴胡湯抑制組胺的作用機制可能與抗原抗體反應(yīng)相關(guān)蛋白質(zhì)的磷酸化有關(guān)。研究還發(fā)現(xiàn)柴樸湯抗變態(tài)反應(yīng)作用機制是:①抑制β受體激動藥導(dǎo)致的豚鼠氣管中受體的減量調(diào)節(jié);②引起狗支氣管平滑肌β受體的增量調(diào)節(jié);③抑制變態(tài)反應(yīng)炎癥細(xì)胞產(chǎn)生LTB4、C4;④抑制螨抗原陽性哮喘患者培養(yǎng)淋巴細(xì)胞中IgE-FecRⅡ的表達(dá);⑤抑制螨抗原陽性哮喘患者嗜酸性粒細(xì)胞的LFA-1α.β及CR3、ICAM-l等粘附分子的表達(dá);⑥使螨抗原陽性哮喘患者培養(yǎng)嗜酸性粒細(xì)胞的生存時間明顯縮短;⑦抑制螨刺激所導(dǎo)致的螨抗原陽性哮喘患者外周血單核細(xì)胞中IL-3、IL-4、IL-5、IL-6的產(chǎn)生,并促進(jìn)IFN-α的產(chǎn)生。日本谷口千津氏觀察到柴樸湯中的成分MA(厚樸酚)、BL(黃芩苷元)、二羥苯基羥基丙酮(DG)具有組胺游離抑制作用,而且以上成分也是柴樸湯參與抗變態(tài)反應(yīng)作用的成分。日本愛媛大學(xué)醫(yī)學(xué)院以HBV轉(zhuǎn)基因小鼠作乙肝動物模型,給予小柴胡湯和注射疫苗結(jié)合方式處理,結(jié)果小鼠對治療有反應(yīng)且乙肝表面抗原完全轉(zhuǎn)陰,顯示了小柴胡湯有抑制乙肝病毒復(fù)制的作用。岡博子氏通過動物實驗證明了小柴胡湯能夠抑制肝硬化向癌變轉(zhuǎn)化。英國Ohtay氏給大鼠口服和腹腔注射(非腸道給藥)小柴胡湯提取劑,發(fā)現(xiàn)對防止D-半乳糖胺引起的肝損害有等同保護(hù)和預(yù)防作用,其機制可能是改善了肝臟蛋白的合成以及減少了對肝血漿和微粒體膜的損害。松田宗人氏認(rèn)為小柴胡湯抑制肝纖維化作用與肝細(xì)胞損害抑制作用及伊東細(xì)胞生成膠原抑制作用的參與有關(guān)。小島啟介氏在探討小柴胡湯治療慢肝的分子藥理學(xué)機制中,檢測到了小柴胡湯調(diào)控表達(dá)的R條帶,確定了堿基系列,并用以DIG標(biāo)記的探針的RNA雜交,確定了其表達(dá)水平的變化。日本名古屋大學(xué)Kojimak氏的研究表明,小柴胡湯能增加小鼠肝臟基因cDNA片段,該片段是小鼠細(xì)胞色素P450.16αcDNA類似的重要系列,從分子水平提示了小柴胡湯對肝損害的預(yù)防作用機制。沖田極氏給大鼠投予化學(xué)致癌劑后發(fā)現(xiàn),小柴胡湯治療組大鼠肝細(xì)胞未發(fā)現(xiàn)癌變,癌前病變增生性結(jié)節(jié)的形成也受到抑制。Okitak氏等研究表明,黃芩主要成分黃芩苷與黃芩苷元、柴胡主要成分柴胡皂苷-α具有抗腫瘤作用。YanoH氏等發(fā)現(xiàn)小柴胡湯抗腫瘤作用比其各種有效成分單獨應(yīng)用的作用更強。小鋪昌氏等證實了小柴胡湯對肝硬變患者IL-12(白細(xì)胞介素-12)的降低具有抑制作用,通過免疫調(diào)節(jié)作用來抑制肝癌的發(fā)生。名古屋大學(xué)中島泉氏應(yīng)用基因探入法制作自發(fā)性黑素瘤動物模型,探討小柴胡湯作用機制,結(jié)果表明小柴胡湯對腫瘤的增長有明顯的抑制作用,還具有抑制黑素瘤轉(zhuǎn)移和延長生存時間的作用;其機制是:①使細(xì)胞周期停滯于G0/G1期,抑制細(xì)胞的增殖;②促進(jìn)黑素瘤細(xì)胞的凋亡;③對促進(jìn)黑素瘤浸潤、轉(zhuǎn)移的MMP(金屬蛋白酶)有抑制作用,對抑制MMP活性的TIMP(金屬蛋白酶的抑制因子)有促進(jìn)作用。間宮敬子氏以SD雄性大鼠為對象進(jìn)行實驗研究,結(jié)果小柴胡湯、柴樸湯對應(yīng)激性胃潰瘍的發(fā)生有預(yù)防作用。日本YuzuriharaM氏等也發(fā)現(xiàn)柴樸湯對胃糜爛有預(yù)防作用,其抗糜爛作用包括抑制胃酸分泌等攻擊因子的作用和增強胃粘液細(xì)胞等防御因子的作用兩大方面。英國NishimutaN氏研究顯示了小柴胡湯對大鼠胃排空功能有抑制作用;胃排空遲緩影響胃腸吸收,導(dǎo)致治療糖尿病的甲苯磺丁脲口服后血濃度降低。石原健至氏測定患者服柴樸湯后血液和尿液中該湯的各種成分及代謝物,搞清了它們的化學(xué)結(jié)構(gòu)。武藤理英氏在服小柴胡湯后人血漿中發(fā)現(xiàn)了新的黃芩苷(BG)代謝物——被鑒定為6位有硫酸基的黃芩苷元6-0-硫酸(BS)。OhtakeN氏以小鼠為對象的研究顯示,小柴胡湯很多成分都與IL-6誘導(dǎo)活性有關(guān),體外研究表明小柴胡湯對LPS誘導(dǎo)的肺損害的遲發(fā)型變態(tài)反應(yīng)有抑制作用,以上結(jié)果表明小柴胡湯對局部免疫反應(yīng)引起的肺炎有調(diào)節(jié)作用。MaruyamaY氏對柴樸湯具有抗焦慮作用成分進(jìn)行鑒定,顯示其主要成分是厚樸酚(5,5’-二-2-丙烯基-1,1’-二苯-2,2’-二酚)與和厚樸酚(3’,5-二-2-丙烯基-1,1’-二苯-2,4’-二酚),其中尤以和厚樸酚的抗焦慮作用明顯。2臨床研究2.1小柴胡湯治療慢性肝炎的療效日本曾根美好氏將接受干擾素治療的100例丙型肝炎患者用雙盲法分組,一組給予小柴胡湯,另一組給予保肝藥。服藥5個月后,小柴胡湯組AST值、ALT值明顯下降,HCV-RNA明顯降低(P<0.05),慢性丙型肝炎是國際公認(rèn)的疑難病證之一,目前采用的干擾素治療副作用多且有效率低,臨床研究證實,小柴胡湯可有效治療慢性丙型肝炎,抑制或延緩肝硬變、肝癌的發(fā)生,且對肝臟無任何副作用。岡博子氏從五年累積肝癌發(fā)生率、累積生存率、血清轉(zhuǎn)氨酶變化、AFP濃度四方面,對小柴胡湯預(yù)防肝硬化發(fā)展為肝癌所起的作用,進(jìn)行了長達(dá)五年的前瞻性研究,結(jié)果表明小柴胡湯可防止肝硬化向肝癌轉(zhuǎn)變,特別是對非乙型肝炎肝硬化的肝癌發(fā)生率有明確影響,其療效確切,副作用小,費用低廉。2.2柴辛湯有重組菌的活性川野昌子治療16例接受了抗癌藥治療及頭頸部放療的癌癥患者,小柴胡湯對抗癌藥、放療所導(dǎo)致的口腔粘膜糜爛疼痛有臨床治療作用,其療效與抑制活性氧產(chǎn)生作用有關(guān)。日本金醫(yī)科大學(xué)山田剛也氏對104例主訴為舌疼痛但無舌器質(zhì)性病變患者,隨機分為柴樸湯組、安定組與復(fù)合VitB組治療三個月,柴樸湯組癥狀改善率為87.1%。療效最顯著。山際干和氏經(jīng)臨床研究證實,柴樸湯對有抑郁傾向的咽異感癥療效可與抗抑郁作用的西藥相匹敵,其療效特點是見效慢,但療效持續(xù)。清水正彥氏研究顯示,小柴胡湯加桔梗、石膏對外陰陰道念珠菌癥高危中老年婦女的急性咽扁桃體炎有效。2.3治療過敏性鼻炎的作用日本對變態(tài)反應(yīng)性鼻炎呈慢性化者,使用具有類固醇作用的柴胡劑治療有效,如柴樸湯、小柴胡湯等。2.4患者肺功能檢查沖本二郎氏用柴樸湯治療主訴呼吸困難,胸痛患者16例,經(jīng)胸X線、心電圖、肺功能檢查無異常。小柴胡湯能有效治療膈肌異常引起的炎癥,二方合用的柴樸湯對胸部不定愁訴有效。3小柴胡湯與間質(zhì)性肺炎日本報道在1998～1999二年中,有50例肝癌肝硬變患者因服用小柴胡湯引起間質(zhì)性肺炎,其中體力下降8例患者死亡。1998年第49次日本東洋醫(yī)學(xué)會對小柴胡湯引起間質(zhì)性肺炎問題進(jìn)行了探討。在病例研究方面,左藤篤彥氏認(rèn)為小柴胡湯進(jìn)一步促進(jìn)了IL-8產(chǎn)生,分解細(xì)胞外基質(zhì),使肺纖維化發(fā)展而導(dǎo)致間質(zhì)性肺炎;在已病情況下仍長期服用小柴胡湯,會導(dǎo)致肺纖維化的細(xì)胞因子重新表達(dá)調(diào)控,使炎癥急性惡化,肺組織迅速纖維化而致死亡。因此,早期發(fā)現(xiàn)并停用小柴胡湯,同時給予類固醇就能使間質(zhì)性肺炎得到控制和治愈。在藥理學(xué)研究方面,介紹了小柴胡湯引起間質(zhì)性肺炎的三種不同觀點:①是小柴胡湯毒性副作用和誤治的結(jié)果;②是一種變態(tài)反應(yīng);③小柴胡湯與間質(zhì)性肺炎無因果關(guān)系。田代具一氏認(rèn)為盡管還沒有證據(jù)能證明小柴胡湯的副作用或毒性導(dǎo)致間質(zhì)性肺炎,但高齡者和肝功能障礙者發(fā)病較多,提示可能由于患者的藥物代謝或解毒功能降低,使藥物在體內(nèi)蓄積而致發(fā)病;另外也應(yīng)考慮到誤治、半夏的炮制及黃芩成分代謝問題。在流行病學(xué)方面,統(tǒng)計表明服小柴胡湯者引起間質(zhì)性肺炎發(fā)病率為十萬分之一,死亡率為百萬分之一;證實小柴胡湯的安全性高是西藥達(dá)不到的,而且還不能完全確定小柴胡湯與特發(fā)性肺炎發(fā)生的關(guān)系。與此相反,在此次會議上,本間行彥氏則報道應(yīng)用小柴胡湯治療3例間質(zhì)性肺炎獲效,表明小柴胡湯對間質(zhì)性肺炎有治療作用。4小柴胡湯的研究應(yīng)注意的幾個問題第一,小柴胡湯臨床應(yīng)用較為廣泛,可用于不同的多系統(tǒng)的器質(zhì)性和功能性疾病,顯示了小柴胡湯和解功效多面的特點及療效機制豐厚的內(nèi)涵。特別是在現(xiàn)代醫(yī)學(xué)發(fā)達(dá)的西方社會,小柴胡湯用來治療難治性疾病如肝癌、慢性丙型活動性肝炎、肝硬化、變態(tài)反應(yīng)性疾病、免疫性疾病等取得滿意的臨床療效,凸顯了中醫(yī)藥臨床治病的優(yōu)勢。第二,國外對小柴胡湯的研究以實驗研究為重點,應(yīng)用現(xiàn)代醫(yī)藥多種新技術(shù),從分子水平、藥理學(xué)、免疫學(xué)、毒理學(xué)、成分分析等多領(lǐng)域?qū)π〔窈鷾右匝芯?。所取得的結(jié)果從微觀和現(xiàn)代科學(xué)的角度闡述了中醫(yī)藥的科學(xué)性,這方面值得國內(nèi)中醫(yī)藥界借鑒和學(xué)習(xí)。第三,國外尤其是日本對小柴胡湯的研究仍是重藥輕醫(yī),缺乏中醫(yī)辨證論治理論的指導(dǎo),這樣的研究從總體上來說是不全面的,也限制了中醫(yī)藥在臨床的擴大運用。只有堅持在中醫(yī)辨證論治理論指導(dǎo)下,從整體上運用現(xiàn)代科學(xué)技術(shù)去研究中醫(yī)藥,才