鄰二氮雜菲分光光度法測定鐵-實驗報告(精)

..分析化學(xué)實驗報告實驗題目：鄰二氮雜菲分光光度法測定鐵學(xué)院：專業(yè)：食品科學(xué)與工程班級：姓名：學(xué)號：同組者：實驗?zāi)康牧私夥止夤舛确y定物質(zhì)含量的一般條件及其選定方法掌握鄰二氮雜菲分光光度法測定鐵的方法了解722型分光光度計的構(gòu)造和使用方法實驗原理光度法測定的條件：分光光度法測定物質(zhì)含量時應(yīng)注意的條件主要是顯色反響的條件和測量吸光度的條件。顯色反響的條件有顯色劑用量、介質(zhì)的酸度、顯色時溶液溫度、顯色時間及干擾物質(zhì)的消除方法等;測量吸光度的條件包括應(yīng)選擇的入射光波長，吸光度圍和參比溶液等。在PH=2-9的條件下，F(xiàn)e2+與鄰二氮雜菲〔o-ph〕生成極穩(wěn)定的橘紅色配合物，反響式如下：此配合物的lgK穩(wěn)=21.3摩爾吸收系數(shù)ε510=1.1×104在顯色前，首先用鹽酸羥胺把Fe2+復(fù)原成Fe3+.其反響式如下：2Fe3++2NH2OH·HC1＝2Fe2++N2↑+2H2O+4H++2C1-測定時，控制溶液酸度在PH=5左右較為適宜。酸度過高時，反響進(jìn)展較慢;酸度太低，那么Fe2+水解，影響顯色。實驗儀器分光光度計、容量瓶、移液管、洗瓶四、實驗步驟條件實驗吸收曲線的測繪準(zhǔn)確吸取20μg·mL-1鐵標(biāo)準(zhǔn)溶液5mL于50mL容量瓶中，參加5%鹽酸羥胺溶液1mL，搖勻，參加1mol·L-1NaOAc溶液5mL和0.1%鄰二氮雜菲溶液3mL。以水稀釋至刻度，搖勻。放置10min，在722型分光光度計上，用1cm比色皿，以水為參比溶液，波長從570nm到430nm為止，每隔10nm測定一次吸光度。如圖1所示，其最大吸收波長為510nm，故該實驗選擇測定波長為510nm。鄰二氮雜菲-亞鐵配合物的穩(wěn)定性用上面溶液繼續(xù)進(jìn)展測定，其方法是在最大吸收波長510nm處，每隔一定時間測定其吸光度，及再參加顯色劑后立即測定一次吸光度，經(jīng)10、20、30、120min后，再各測一次吸光度?！?〕顯色劑濃度實驗取50mL容量瓶7只，編號。每只容量瓶中準(zhǔn)確參加20ug·mL-1鐵標(biāo)準(zhǔn)溶液5mL以及1mL5%鹽酸羥胺溶液，經(jīng)2min后。再參加5mL1mol·L-1NaOAc溶液，然后分別參加0.1%鄰二氮雜菲溶液0.3mL、0.6mL、1.0mL、1.5mL、2.00mL、3.0mL和4.0mL，用水稀釋至刻度，搖勻，在分光光度計上，用最大吸收波長510nm、1cm比色皿，以水為參比，測定上述溶液的吸光度。2.鐵含量的測定〔1〕標(biāo)準(zhǔn)曲線的繪制取50mL容量瓶6只，編號。分別吸取20μg·mL-1鐵標(biāo)準(zhǔn)溶液2.0mL、4.0mL、6.0mL、8.0mL和10.0mL于5只容量瓶中，另一只容量瓶中不加標(biāo)準(zhǔn)溶液〔配制空白溶液，作參比〕。然后各加5%鹽酸羥胺溶液，搖勻，經(jīng)2min后，再各加5mL1mol·L-1NaAc溶液及3mL1g·L-1鄰二氮雜菲溶液，以水稀釋至刻度線，搖勻。放置10min，在分光光度計上，用1cm比色皿，在510nm處，測定各溶液的吸光度。以鐵含量為橫坐標(biāo)，吸光度為縱坐標(biāo)，繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線。未知液中鐵含量的測定吸取5ml未知液代替標(biāo)準(zhǔn)溶液，其他步驟均同上測定吸光度。由未知液的吸光度在標(biāo)準(zhǔn)曲線上查出5ml未知液中的鐵含量，然后以每毫升未知液中含鐵多少微克表示結(jié)果。五、記錄與計算吸收曲線的測繪波長吸光度A5705505305205105004904704504300.0670.1520.3450.4280.4540.4400.4260.4020.3430.297討論：從曲線可以看出，在一定圍，當(dāng)波長較小時，隨波長增加吸光度增加。測定的適宜波長是510nm。〔2〕鄰二氮雜菲亞鐵配合物的穩(wěn)定性放置時間05101520穩(wěn)定性0.3890.3900.3890.3890.389討論：從曲線可以看出，配合物穩(wěn)定性較好。(3)顯色劑用量的測定容量瓶號顯色劑量/mL吸光度A12345670.30.61.01.52.03.04.00.1250.2350.3860.4180.4280.4150.424討論：當(dāng)顯色劑較小時，隨顯色劑含量增加吸光度增加，當(dāng)參加顯色劑為1.5ml吸光度最大。所以顯色劑的適宜參加的量為1.5ml標(biāo)準(zhǔn)曲線的測繪與鐵含量的測定試液編號標(biāo)準(zhǔn)溶液的量V/mL總含鐵量m/ug吸光度A12345602.04.06.08.010.0040801201802000.0000.1950.3570.4790.6780.831未知液5.0122.30.498討論；由測定的未知液吸光度為0.498通過函數(shù)關(guān)系可得鐵的含量為122.3m/μg討論：1.再用分光光度計測量顯色劑量不同時的吸光度時應(yīng)注意什么？答：再用分光光度計測量顯色劑量不同時的吸光度時，應(yīng)保持用一個比色皿測量，這樣可以減小比色皿自身對實驗產(chǎn)生的影響。2.如用配置已久的鹽酸羥胺溶液，對分析結(jié)果將帶來什么影響？答：鹽酸羥胺是用來將復(fù)原成的，如果配制已久，復(fù)原能力減弱，就會使局部鐵離子得不到復(fù)原，造成分析結(jié)果偏小3.鄰二氮雜菲分光光度法測定鐵的適宜條件是什么？答：測定時，要控制PH=5左右較好，弱酸度