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組織學(xué)與胚胎學(xué)的學(xué)習(xí)同學(xué)們好!9/15/20231醫(yī)學(xué)課件歡迎同學(xué)們參加

組織學(xué)與胚胎學(xué)的學(xué)習(xí)同學(xué)們好!8/5/202

緒論histologyandembryology河北醫(yī)大組胚教研室:李陳莉9/15/20232醫(yī)學(xué)課件緒論histologyandembry一、組織學(xué)的研究?jī)?nèi)容組織學(xué)(Histology)定義:是研究正常機(jī)體的細(xì)微結(jié)構(gòu)及與其機(jī)能的關(guān)系的學(xué)科,包括細(xì)胞、組織和器官系統(tǒng)3部分。9/15/20233醫(yī)學(xué)課件一、組織學(xué)的研究?jī)?nèi)容組織學(xué)(Histology)8/5/20研究?jī)?nèi)容:包括細(xì)胞、組織、器官系統(tǒng)細(xì)胞是人體形態(tài)結(jié)構(gòu)的基本單位,是一切生物體新陳代謝、生長(zhǎng)發(fā)育、繁殖分化的形態(tài)學(xué)基礎(chǔ)。特點(diǎn):形態(tài)各異、大小不等:人體具有許多形態(tài)各異、大小不同的細(xì)胞,參與機(jī)體的各種機(jī)能活動(dòng)。各種細(xì)胞在機(jī)體內(nèi)相互調(diào)節(jié)、相互協(xié)同,以維持級(jí)機(jī)體的生命活動(dòng)。9/15/20234醫(yī)學(xué)課件研究?jī)?nèi)容:包括細(xì)胞、組織、器官系統(tǒng)細(xì)胞是人體形態(tài)結(jié)構(gòu)的基本單組織(tissue)組成:由一些形態(tài)相似、功能相近的細(xì)胞

和細(xì)胞外基質(zhì)所組成。分類(lèi):上皮組織結(jié)締組織肌組織神經(jīng)組織。9/15/20235醫(yī)學(xué)課件組織(tissue)組成:由一些形態(tài)相似、功能相近的細(xì)胞基本組織—上皮組織—結(jié)締組織—肌組織—神經(jīng)組織9/15/20236醫(yī)學(xué)課件基本組織—上皮組織—結(jié)締組織—肌組織—神經(jīng)組織8/5/202器官和系統(tǒng)(organandsystem)器官:由4大基本組織有機(jī)地組合形成器官。系統(tǒng):多個(gè)器官協(xié)調(diào)配合完成一定的生理功能形成系統(tǒng)。如:口腔、食道、胃、腸均由不同的組織發(fā)育、分化和結(jié)合而成,具有不同的形態(tài)結(jié)構(gòu)特點(diǎn),但卻執(zhí)行著共同的功能-消化食物、吸收營(yíng)養(yǎng)、排出糟粕。9/15/20237醫(yī)學(xué)課件器官和系統(tǒng)(organandsystem)器官:由4大基

胚胎學(xué)(embryology)定義:是研究人體發(fā)生和生長(zhǎng)規(guī)律的學(xué)科。研究?jī)?nèi)容:包括生殖細(xì)胞發(fā)生、受精、胚胎發(fā)育、胚胎與母體關(guān)系、先天性畸形等。9/15/20238醫(yī)學(xué)課件胚胎學(xué)(embryology)定義:是研究人體發(fā)生和生長(zhǎng)規(guī)在醫(yī)學(xué)中的地位組織學(xué)與胚胎學(xué)是一門(mén)醫(yī)學(xué)基礎(chǔ)學(xué)科,與基礎(chǔ)各個(gè)學(xué)科和臨床各科都有一定聯(lián)系。尤其與解剖學(xué)、病理學(xué)、生理學(xué)、生物化學(xué)、免疫學(xué)均有密切的聯(lián)系。胚胎學(xué)為婦產(chǎn)科學(xué)、男性學(xué)、生殖工程學(xué)、兒科學(xué)等臨床學(xué)科提供必要的基礎(chǔ)知識(shí),也是計(jì)劃生育與優(yōu)生學(xué)賴(lài)以發(fā)展的學(xué)科之一。9/15/20239醫(yī)學(xué)課件在醫(yī)學(xué)中的地位組織學(xué)與胚胎學(xué)是一門(mén)醫(yī)學(xué)基礎(chǔ)學(xué)科,與基礎(chǔ)各個(gè)學(xué)二、組織學(xué)與胚胎學(xué)的研究方法(一)常用顯微鏡光學(xué)顯微鏡(lightmicroscope,LM):光源為普通光線熒光顯微鏡(fluorescencemicroscope)光源為紫外光或藍(lán)紫光激光共聚焦掃描顯微鏡(confocalscanningmicroscope)光源為激光電子顯微鏡(electronmicroscope,EM):光源為電子束,電磁場(chǎng)作為透鏡。電子顯微鏡透射電子顯微鏡TEM掃描電子顯微鏡SEM9/15/202310醫(yī)學(xué)課件二、組織學(xué)與胚胎學(xué)的研究方法(一)常用顯微鏡8/5/2023光學(xué)顯微鏡基本結(jié)構(gòu):1.照明燈(Lamp)2.聚光器(Condenser)3.載物臺(tái)和切片夾(Mechanicalstageandspecimenretainer)4.推進(jìn)器(Mechanicalstageadjustmentknob)5.物鏡(Objectives)6.粗細(xì)螺旋(Courseandfinefocusknob)7.目鏡(Oculars)8.照相機(jī)等接口(Connectiontocamera,etc.)9/15/202311醫(yī)學(xué)課件光學(xué)顯微鏡基本結(jié)構(gòu):8/5/202311醫(yī)學(xué)課件

是一種高光敏度、高分辯率的新型生物學(xué)儀器。主要由激光光源、共聚焦成像掃描系統(tǒng)、光學(xué)系統(tǒng)和微機(jī)圖像分析系統(tǒng)四部分組成??梢詸z測(cè)、識(shí)別組織或細(xì)胞內(nèi)微細(xì)結(jié)構(gòu)及其變化,細(xì)胞的受體移動(dòng),膜電位變化,酶活性以及物質(zhì)轉(zhuǎn)運(yùn),并以激光對(duì)細(xì)胞及染色體進(jìn)行切割、分離、篩選等。(二)激光共焦掃描顯微鏡(confocallaserscanningmicroscope)9/15/202312醫(yī)學(xué)課件 是一種高光敏度、高分辯率的新型生物學(xué)儀器。主要由激光光激光共聚焦掃描顯微鏡9/15/202313醫(yī)學(xué)課件激光共聚焦掃描顯微鏡8/5/202313醫(yī)學(xué)課件透射電子顯微鏡(transmissionelectronmicroscope)

TEM9/15/202314醫(yī)學(xué)課件透射電子顯微鏡(transmissionelectron透射電鏡照片9/15/202315醫(yī)學(xué)課件透射電鏡照片8/5/202315醫(yī)學(xué)課件掃描電子顯微鏡(scanningelectronmicroscope)SEM9/15/202316醫(yī)學(xué)課件掃描電子顯微鏡(scanningelectronmicr9/15/202317醫(yī)學(xué)課件8/5/202317醫(yī)學(xué)課件9/15/202318醫(yī)學(xué)課件8/5/202318醫(yī)學(xué)課件普通組織標(biāo)本制備技術(shù)(石蠟切片)標(biāo)本的制作組織學(xué)的標(biāo)本制作比較復(fù)雜,基本包括以下幾個(gè)步驟:取材、固定、脫水、包埋、切片、染色等。(二)常用標(biāo)本的制備技術(shù)9/15/202319醫(yī)學(xué)課件普通組織標(biāo)本制備技術(shù)(石蠟切片)(二)常用標(biāo)本的制備技術(shù)8/取材、固定:為了盡可能使所獲材料的形態(tài)結(jié)構(gòu)接近活體狀態(tài),故取材要迅速、準(zhǔn)確,得到材料后應(yīng)及時(shí)用固定液固定(fixation)。常用固定液為甲醛、乙醇等,它們可以使蛋白質(zhì)迅速凝固,防止其分解和變性。脫水、包埋、切片:為使組織與包埋劑相融合,所獲得材料需經(jīng)乙醇或丙酮脫水;為便于將材料切成薄片,需將其包埋在石蠟或火棉膠內(nèi),然后再用切片機(jī)將其切成厚約5~10μm的薄片。9/15/202320醫(yī)學(xué)課件取材、固定:8/5/202320醫(yī)學(xué)課件9/15/202321醫(yī)學(xué)課件8/5/202321醫(yī)學(xué)課件染色:切片需經(jīng)染色后方可在顯微鏡下觀察。染色與封片:染色的目的是使組織內(nèi)不同的結(jié)構(gòu)染上不同的顏色,以增加結(jié)構(gòu)間的反差。染色后在載玻片上滴加樹(shù)膠,蓋上蓋玻片,密封保存。9/15/202322醫(yī)學(xué)課件染色:8/5/202322醫(yī)學(xué)課件蘇木精、伊紅染色常規(guī)染色-蘇木精(hematoxylin)、伊紅(eosin)染色(簡(jiǎn)稱(chēng)HE染色)技術(shù)蘇木精:是藍(lán)色的堿性染料,可將細(xì)胞核和細(xì)胞內(nèi)的某些酸性物質(zhì)染成藍(lán)紫色;伊紅:是紅色的酸性染料,可將細(xì)胞質(zhì)染成粉紅色。9/15/202323醫(yī)學(xué)課件蘇木精、伊紅染色常規(guī)染色-蘇木精(hematoxylin)、嗜酸性(acidophilia):與酸性染料親和力強(qiáng)的性質(zhì);嗜堿性(basophilia):與堿性染料親和力強(qiáng)的性質(zhì);嗜中性(neutrophilia):對(duì)兩種染料親和力都不強(qiáng)。9/15/202324醫(yī)學(xué)課件嗜酸性(acidophilia):與酸性染料親和力強(qiáng)的HE染色標(biāo)本嗜堿性嗜酸性9/15/202325醫(yī)學(xué)課件HE染色標(biāo)本嗜堿性嗜酸性8/5/202325醫(yī)學(xué)課件甲苯胺藍(lán)染色技術(shù)是藍(lán)色的堿性染料。將細(xì)胞內(nèi)、外的某些物質(zhì)染成紫紅色,這種染色現(xiàn)象稱(chēng)異染性(metachromasia)。9/15/202326醫(yī)學(xué)課件甲苯胺藍(lán)染色技術(shù)8/5/202326醫(yī)學(xué)課件肥大細(xì)胞的顆粒被甲苯銨藍(lán)(一種藍(lán)色染料)染成紫紅色9/15/202327醫(yī)學(xué)課件肥大細(xì)胞的顆粒被甲苯銨藍(lán)(一種藍(lán)色染料)染成紫紅色8/5/2硝酸銀、氯化金染色技術(shù)

硝酸銀、氯化金顆??筛街诩?xì)胞結(jié)構(gòu)的表面而呈棕黑色或棕黃色,常用于顯示神經(jīng)組織。親銀性(argentaffin):銀染中,有些組織結(jié)構(gòu)可直接使硝酸銀還原而顯色。嗜銀性(argyrophilia):有些組織結(jié)構(gòu)不能直接使硝酸銀還原,必須加入還原劑方能顯色。9/15/202328醫(yī)學(xué)課件硝酸銀、氯化金染色技術(shù)硝酸銀、氯化金顆??筛街诩?xì)胞結(jié)構(gòu)銀染標(biāo)本嗜銀細(xì)胞9/15/202329醫(yī)學(xué)課件銀染標(biāo)本嗜銀細(xì)胞8/5/202329醫(yī)學(xué)課件冷凍切片技術(shù)(frozensectionmethod)目的:避免細(xì)胞、組織內(nèi)某些物質(zhì)被固定液所破壞,同時(shí)使組織變硬,快速得到切片。方法:將新鮮組織投入液氮(-196℃)或固態(tài)二氧化碳(干冰,-70℃)內(nèi)快速凍結(jié),恒冷箱切片機(jī)(cryostat)制成冷凍切片。優(yōu)點(diǎn):制片迅速,細(xì)胞內(nèi)酶活性和脂類(lèi)保存較好,常用于酶組織化學(xué)染色、免疫組織化學(xué)染色。缺點(diǎn):光鏡下質(zhì)量較差。9/15/202330醫(yī)學(xué)課件冷凍切片技術(shù)(frozensectionmethod)目冷凍切片箱9/15/202331醫(yī)學(xué)課件冷凍切片箱8/5/202331醫(yī)學(xué)課件其他技術(shù)涂片:血細(xì)胞、分離細(xì)胞或脫落細(xì)胞等可直接涂在玻片上;鋪片:疏松結(jié)締組織可撕成薄片鋪在玻片上;磨片:牙和骨等堅(jiān)硬組織可磨成薄片;以上標(biāo)本再經(jīng)固定染色后顯微鏡下觀察。9/15/202332醫(yī)學(xué)課件其他技術(shù)涂片:血細(xì)胞、分離細(xì)胞或脫落細(xì)胞等可直接涂在玻片上;(三)電子顯微鏡技術(shù)根據(jù)分辨率、放大倍數(shù)以及功能等不同可分為兩種:透射電子顯微鏡,又稱(chēng)透射電鏡或電鏡;掃描電子顯微鏡,又稱(chēng)掃描電鏡。9/15/202333醫(yī)學(xué)課件(三)電子顯微鏡技術(shù)根據(jù)分辨率、放大倍數(shù)以及功能等不同可分為透射電子顯微鏡技術(shù)

光源:電子束。透鏡:電磁透鏡(線圈)。固定液:戍二醛、鋨酸。染色:電子染色,醋酸鈾或檸檬酸鉛等重金屬鹽。切片:50-80nm的超薄切片。原理:電子束通過(guò)電磁透鏡打到樣品上,產(chǎn)生透射電子,透射電子打到熒光屏上,產(chǎn)生黑白像。9/15/202334醫(yī)學(xué)課件透射電子顯微鏡技術(shù)

光源:電子束。8/5/202334醫(yī)學(xué)課掃描電子顯微鏡技術(shù)

掃描電子顯微鏡技術(shù)要觀察的組織表面形貌,不需制成切片。固定后的標(biāo)本,在其表面噴鍍金,在熒光屏上即可顯示細(xì)胞或組織表面的立體結(jié)構(gòu),如細(xì)胞表面的突起、微絨毛、纖毛等。9/15/202335醫(yī)學(xué)課件掃描電子顯微鏡技術(shù)

掃描電子顯微鏡技術(shù)要觀察的組織表面形貌,(三)組織化學(xué)與細(xì)胞化學(xué)(histochemistrycytochemistry)是利用化學(xué)試劑與組織細(xì)胞內(nèi)的某些物質(zhì)呈現(xiàn)化學(xué)反應(yīng),反應(yīng)終產(chǎn)物在組織原位形成有色沉淀物或重金屬鹽沉淀,通過(guò)顯微鏡進(jìn)行觀察。間接觀察組織細(xì)胞內(nèi)的化學(xué)成分進(jìn)行定位、定性和定量研究。例如過(guò)碘酸希夫反應(yīng),簡(jiǎn)稱(chēng)為PAS反應(yīng)(periodacidSchiffreaction)該方法是顯示細(xì)胞內(nèi)糖原或多糖的一種方法。如用PAS反應(yīng)顯示肝細(xì)胞內(nèi)的糖原。9/15/202336醫(yī)學(xué)課件(三)組織化學(xué)與細(xì)胞化學(xué)(histochemistrycy9/15/202337醫(yī)學(xué)課件8/5/202337醫(yī)學(xué)課件(四)免疫組織化學(xué)或免疫細(xì)胞化學(xué)(immunohistochemistry/cytochemistry)利用抗原、抗體特異性結(jié)合的原理,檢測(cè)組織和細(xì)胞內(nèi)多肽和蛋白質(zhì)的分布。該方法先將蛋白質(zhì)或多肽作為抗原,注入某種動(dòng)物體內(nèi),使其體內(nèi)產(chǎn)生與所注入抗原相應(yīng)的抗體;而后自其血清中提取該抗體,并以熒光染料或鐵蛋白或辣根過(guò)氧化物酶等標(biāo)記;顯色的地方就是抗原所在。優(yōu)點(diǎn):特異性強(qiáng)、靈敏度高。9/15/202338醫(yī)學(xué)課件(四)免疫組織化學(xué)或免疫細(xì)胞化學(xué)(immunohistoch9/15/202339醫(yī)學(xué)課件8/5/202339醫(yī)學(xué)課件(五)原位雜交技術(shù)即核酸(DNA、RNA)的分子雜交組織化學(xué)技術(shù),是在轉(zhuǎn)錄水平檢測(cè)基因的活性(mRNA)和基因(DNA片斷)的有無(wú)。原理:

用帶有標(biāo)記物的已知堿基順序的核酸探針,與細(xì)胞內(nèi)待測(cè)的核酸按堿基配對(duì)的原則,進(jìn)行特異性原位結(jié)合,通過(guò)對(duì)標(biāo)記物的顯示和檢測(cè)而獲得待測(cè)核酸的有無(wú)及相對(duì)含量。9/15

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