2011高考生物一輪復(fù)習(xí)課件選修1專題56 DNA蛋白質(zhì)技術(shù)

2011高考生物一輪復(fù)習(xí)ppt課件選修1專題56DNA蛋白質(zhì)技術(shù)最新考綱高頻考點(diǎn)1.PCR技術(shù)的基本操作和應(yīng)用2．蛋白質(zhì)的提取和分離3．從生物材料中提取某些特定的成分1.DNA粗提取的原理、方法和注意事項(xiàng)2．PCR技術(shù)操作及原理3．蛋白質(zhì)提取的原理和方法4．提取芳香油的三種常用方法及適用范圍5．層析法鑒定胡蘿卜素時(shí)點(diǎn)樣的關(guān)鍵最新考綱高頻考點(diǎn)1.PCR技術(shù)的基本操作和應(yīng)用1.DNA粗提一、多聚酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)擴(kuò)增DNA片段1．細(xì)胞內(nèi)DNA復(fù)制與PCR技術(shù)的比較2011高考生物一輪復(fù)習(xí)ppt課件選修1專題56DNA蛋白質(zhì)技術(shù)細(xì)胞內(nèi)DNA復(fù)制PCR不同點(diǎn)解旋在解旋酶作用下邊解旋邊復(fù)制80～100℃高溫解旋，雙鏈分開酶DNA解旋酶、DNA聚合酶TaqDNA聚合酶引物RNADNA或RNA溫度體內(nèi)溫和條件高溫相同點(diǎn)①需提供DNA復(fù)制的模板②四種脫氧核苷酸作原料③子鏈延伸的方向都是從5′端到3′端④都需要酶的催化細(xì)胞內(nèi)DNA復(fù)制PCR不解旋在解旋酶作用下邊解旋邊復(fù)制80～2.PCR的反應(yīng)過(guò)程一般要經(jīng)歷三十多次循環(huán)，每次循環(huán)可分為變性→復(fù)性→延伸三步。3．PCR技術(shù)反應(yīng)過(guò)程中控制不同溫度的意義(1)90℃以上時(shí)變性，雙鏈DNA解聚為單鏈；(2)50℃左右時(shí)復(fù)性，兩種引物與兩條單鏈DNA結(jié)合；(3)72℃左右時(shí)延伸，TaqDNA聚合酶促使DNA新鏈的合成。2.PCR的反應(yīng)過(guò)程1．多聚酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)(PCR)是一種體外迅速擴(kuò)增DNA片段的技術(shù)。PCR過(guò)程一般要經(jīng)歷30多次下述循環(huán)：95℃條件下使模板DNA變性、解鏈→55℃條件下復(fù)性(引物與DNA模板鏈結(jié)合)→72℃條件下引物鏈延伸(形成新的脫氧核苷酸鏈)。下列有關(guān)PCR過(guò)程的敘述，不正確的是(

)A．變性過(guò)程中破壞的是DNA分子內(nèi)堿基對(duì)之間的氫鍵，也可利用解旋酶實(shí)現(xiàn)B．復(fù)性過(guò)程中引物與DNA模板鏈的結(jié)合是依靠堿基互補(bǔ)配對(duì)原則完成的2011高考生物一輪復(fù)習(xí)ppt課件選修1專題56DNA蛋白質(zhì)技術(shù)C．延伸過(guò)程中需要DNA聚合酶、ATP、4種核糖核苷酸D．PCR與細(xì)胞內(nèi)DNA復(fù)制相比，其所需要酶的最適溫度較高C．延伸過(guò)程中需要DNA聚合酶、ATP、4種核糖核苷酸【解析】

PCR一般要經(jīng)歷30多次循環(huán)，每次循環(huán)可以分為變性、復(fù)性和延伸三步。從第二輪循環(huán)開始，上一次循環(huán)的產(chǎn)物也作為模板參與反應(yīng)，并且由引物Ⅰ延伸而成的DNA單鏈會(huì)與引物Ⅱ結(jié)合，進(jìn)行DNA的延伸。DNA變性(90～96℃)：雙鏈DNA模板在熱作用下，氫鍵斷裂，形成單鏈DNA。復(fù)性(25～65℃)：系統(tǒng)溫度降低，引物與DNA模板結(jié)合，形成局部雙鏈。延伸(70～75℃)：在Taq酶(在72℃左右活性最高)的作用下，以dNTP為原料，從引物的5′端向3′端延伸，合成與模板鏈互補(bǔ)的DNA鏈?！敬鸢浮?/p>

C【解析】PCR一般要經(jīng)歷30多次循環(huán)，每次循環(huán)可以分為變性二、DNA的粗提取與鑒定1．基本原理(1)DNA在不同濃度的NaCl溶液中的溶解度不同，在0.14mol/L的NaCl溶液中的溶解度最低；(2)DNA不溶于酒精溶液；(3)DNA不被蛋白酶所水解；(4)DNA可被二苯胺染成藍(lán)色。二、DNA的粗提取與鑒定2．方法目的方法目的溶于NaCl溶液中并稀釋①NaCl濃度為2mol/L時(shí)，DNA溶解，而部分蛋白質(zhì)發(fā)生鹽析而生成沉淀，通過(guò)過(guò)濾可除去部分蛋白質(zhì)及不溶于NaCl溶液的雜質(zhì)②當(dāng)NaCl溶液稀釋至0.14mol/L時(shí)，DNA析出，過(guò)濾可除去溶于NaCl中的部分蛋白質(zhì)和其他雜質(zhì)加入嫩肉粉嫩肉粉中含木瓜蛋白酶，水解蛋白質(zhì)加入冷卻酒精(95%)DNA析出，除去溶于酒精的蛋白質(zhì)加入二苯胺，并沸水浴鑒定DNA2．方法目的方法目的溶于NaCl溶液中并稀釋①NaCl濃度為 (1)哺乳動(dòng)物成熟的紅細(xì)胞中不含細(xì)胞核，也沒(méi)有DNA，不適于作DNA提取的材料，但卻是提取血紅蛋白的理想材料。(2)實(shí)驗(yàn)過(guò)程中兩次用到蒸餾水，第一次目的是使成熟的雞血細(xì)胞漲破釋放出DNA，第二次目的是稀釋NaCl溶液。 (1)哺乳動(dòng)物成熟的紅細(xì)胞中不含細(xì)胞核，也沒(méi)有DNA，2．(2010年青島模擬)下列關(guān)于DNA粗提取與鑒定的說(shuō)法正確的是 (

)A．氯化鈉的濃度越低，DNA的溶解度越大B．人的血液不可代替雞血進(jìn)行該實(shí)驗(yàn)C．檸檬酸鈉的主要作用是加速血細(xì)胞破裂D．利用DNA易溶于酒精的特點(diǎn)可除去DNA中的部分雜質(zhì)2011高考生物一輪復(fù)習(xí)ppt課件選修1專題56DNA蛋白質(zhì)技術(shù)【解析】人是高等哺乳動(dòng)物，其成熟的紅細(xì)胞中沒(méi)有細(xì)胞核不能進(jìn)行該實(shí)驗(yàn)。A項(xiàng)NaCl溶液濃度在小于0.14mol/L時(shí)，溶液的濃度越低，對(duì)DNA的溶解度越大是正確的，沒(méi)有前提條件這種說(shuō)法是錯(cuò)誤的；檸檬酸鈉的作用是抗凝血；DNA不能溶于酒精中，所以B項(xiàng)是對(duì)的?！敬鸢浮?/p>

B【解析】人是高等哺乳動(dòng)物，其成熟的紅細(xì)胞中沒(méi)有細(xì)胞核不能進(jìn)3．向溶有DNA的2mol/L的NaCl溶液中不斷加入蒸餾水，在這個(gè)過(guò)程中DNA和雜質(zhì)蛋白質(zhì)的溶解度變化情況分別是 (

)A．減小；減小 B．增大；增大C．先減小后增大；增大 D．減??；增大3．向溶有DNA的2mol/L的NaCl溶液中不斷加入蒸餾【解析】

DNA在NaCl溶液中的溶解情況如右圖所示：在向溶有DNA的2mol/L的NaCl溶液中不斷加入蒸餾水時(shí)，DNA的溶解度先減少后增大，而蛋白質(zhì)在高濃度鹽溶液中會(huì)沉淀，隨鹽濃度的降低，蛋白質(zhì)的溶解度升高?！敬鸢浮?/p>

C【解析】DNA在NaCl溶液中的溶解情況如右圖所示：在向溶三、血紅蛋白的提取和分離1．方法及原理方法原理凝膠色譜法根據(jù)相對(duì)分子質(zhì)量的大小分離蛋白質(zhì)電泳法各種分子帶電性質(zhì)的差異以及分子本身大小、形狀的不同來(lái)分離蛋白質(zhì)三、血紅蛋白的提取和分離方法原理凝膠色譜法根據(jù)相對(duì)分子質(zhì)量的2.實(shí)驗(yàn)操作程序(1)樣品處理①紅細(xì)胞的洗滌：除去血漿蛋白等雜質(zhì)，以利于后續(xù)步驟的分離純化；②血紅蛋白的釋放：使紅細(xì)胞漲破，血紅蛋白釋放出來(lái)；③分離血紅蛋白溶液：經(jīng)過(guò)離心使血紅蛋白和其他雜質(zhì)分離開來(lái)，便于下一步對(duì)血紅蛋白的純化。2.實(shí)驗(yàn)操作程序(2)粗分離——透析：除去樣品中相對(duì)分子量較小的雜質(zhì)。(3)純化：一般采用凝膠色譜法對(duì)血紅蛋白進(jìn)行分離和純化。(4)純度鑒定：一般用SDS—聚丙烯酰胺凝膠電泳法來(lái)測(cè)定蛋白質(zhì)的分子量，即對(duì)血紅蛋白進(jìn)行純度鑒定。(2)粗分離——透析：除去樣品中相對(duì)分子量較小的雜質(zhì)。

相對(duì)分子質(zhì)量不同的蛋白質(zhì)通過(guò)凝膠時(shí)，相對(duì)分子質(zhì)量較小的蛋白質(zhì)容易進(jìn)入凝膠內(nèi)部的通道，而相對(duì)分子質(zhì)量較大的蛋白質(zhì)只能在凝膠外部移動(dòng)，移動(dòng)速度快，因此蛋白質(zhì)分子彼此分離。 相對(duì)分子質(zhì)量不同的蛋白質(zhì)通過(guò)凝膠時(shí)，相對(duì)分子質(zhì)量較小的蛋4．(2009年南京質(zhì)檢)下列有關(guān)蛋白質(zhì)提取和分離的說(shuō)法，錯(cuò)誤的是 (

)A．透析法分離蛋白質(zhì)的原理是利用蛋白質(zhì)不能通過(guò)半透膜的特性B．采用透析法使蛋白質(zhì)與其他小分子化合物分離開來(lái)C．離心沉降法通過(guò)控制離心速率使分子大小、密度不同的蛋白質(zhì)分離D．蛋白質(zhì)在電場(chǎng)中可以向與其自身所帶電荷相同的電極方向移動(dòng)2011高考生物一輪復(fù)習(xí)ppt課件選修1專題56DNA蛋白質(zhì)技術(shù)【解析】帶電離子或分子在電場(chǎng)中向著與其所帶電荷相反的電極移動(dòng)?！敬鸢浮?/p>

D【解析】帶電離子或分子在電場(chǎng)中向著與其所帶電荷相反的電極移四、五種物質(zhì)的提取方法、原理及步驟提取物質(zhì)提取方法提取原理步驟DNA鹽析法

①在不同濃度的NaCl溶液中溶解度不同②不溶于酒精，但某些蛋白質(zhì)則溶于酒精①溶解在2mol/L的NaCl溶液中②加水稀釋至0.14mol/LNaCl溶液使DNA析出過(guò)濾③加入冷卻酒精析出四、五種物質(zhì)的提取方法、原理及步驟提取物質(zhì)提取方法提取原理步提取物質(zhì)提取方法提取原理步驟血紅蛋白凝膠色譜法、電泳法①根據(jù)相對(duì)分子質(zhì)量的大?、诟鞣N分子帶電性質(zhì)差異①樣品處理②粗提?、奂兓芗兌辱b定玫瑰精油水蒸氣蒸餾法利用水蒸氣將揮發(fā)性較強(qiáng)的植物芳香油攜帶出來(lái)

①水蒸氣蒸餾②分離油層③除水過(guò)濾橘皮精油壓榨法通過(guò)機(jī)械加壓，壓榨出果皮中的芳香油

①石灰水浸泡、漂洗②壓榨、過(guò)濾、靜置③再次過(guò)濾提取物質(zhì)提取方法提取原理步驟血紅凝膠色譜法、電泳法①根據(jù)相對(duì)提取物質(zhì)提取方法提取原理步驟胡蘿卜素萃取法使提取物溶解在有機(jī)溶劑中，蒸發(fā)后得到提取物

①粉碎、干燥②萃取、過(guò)濾③濃縮提取物質(zhì)提取方法提取原理步驟胡蘿萃取法使提取物溶解在有機(jī)溶劑

水中蒸餾、水上蒸餾、水汽蒸餾的區(qū)別：(1)這三種方法的基本原理相同，但原料放置位置不同。(2)水中蒸餾：原料放在蒸餾容器的水中，水要完全浸沒(méi)原料。(3)水上蒸餾：容器中水的上方有篩板，原料放在篩板上，水量以沸騰時(shí)不浸濕原料為宜。(4)水汽蒸餾：蒸餾容器下方有一排氣孔，連接外源水蒸氣，上方有篩板，上面放原料。各自特點(diǎn)：水中蒸餾設(shè)備簡(jiǎn)單、成本低、易操作，而水上蒸餾和水氣蒸餾時(shí)間短，出油率高。

水中蒸餾、水上蒸餾、水汽蒸餾的區(qū)別：5．玫瑰精油稱為“液體黃金”，其提取方法 (

)A．只能用水蒸氣蒸餾法B．可用蒸餾法和壓榨法C．可用蒸餾法和萃取法D．可用壓榨法和萃取法【解析】用玫瑰花提取精油，根據(jù)玫瑰花的干濕情況可采用不同的提取方法，鮮玫瑰花可采用水蒸氣蒸餾法，干玫瑰花可使用有機(jī)溶劑萃取法，一般不采用壓榨法。【答案】

C2011高考生物一輪復(fù)習(xí)ppt課件選修1專題56DNA蛋白質(zhì)技術(shù)6．作為萃取胡蘿卜素的有機(jī)溶劑，哪一項(xiàng)不符合實(shí)驗(yàn)要求 (

)A．能充分溶解色素 B．與水混溶C．對(duì)人無(wú)毒 D．易與產(chǎn)品分離【解析】作為萃取胡蘿卜素的有機(jī)溶劑應(yīng)該具有較高的溶點(diǎn)，能夠充分溶解胡蘿卜素，并且不與水混溶。此外，還需要考慮萃取效率、對(duì)人的毒性、是否易燃、有機(jī)溶劑是否能從產(chǎn)品中完全除去、會(huì)不會(huì)影響產(chǎn)品質(zhì)量等問(wèn)題?！敬鸢浮?/p>

B6．作為萃取胡蘿卜素的有機(jī)溶劑，哪一項(xiàng)不符合實(shí)驗(yàn)要求 (2009年高考江蘇卷)下列關(guān)于DNA和蛋白質(zhì)提取與分離實(shí)驗(yàn)的敘述，正確的有(多選) (

)A．提取細(xì)胞中的DNA和蛋白質(zhì)都需用蒸餾水漲破細(xì)胞B．用不同濃度NaCl溶液反復(fù)溶解與析出DNA可去除蛋白質(zhì)C．蛋白質(zhì)提取和分離過(guò)程中進(jìn)行透析可以去除溶液中的DNAD．蛋白質(zhì)和DNA都可以用電泳的方法進(jìn)行分離純化2011高考生物一輪復(fù)習(xí)ppt課件選修1專題56DNA蛋白質(zhì)技術(shù)【解析】提取DNA需用蒸餾水漲破細(xì)胞，提取蛋白質(zhì)可以直接用豆?jié){或研磨的大豆；透析法不能除去DNA；DNA在不同濃度的NaCl溶液中的溶解度不同，在0.14mol/L的NaCl溶液中DNA的溶液度最低，DNA可以析出，通過(guò)過(guò)濾可以除去蛋白質(zhì)；用電泳的方法可將蛋白質(zhì)、DNA進(jìn)行分離純化?！敬鸢浮?/p>

BD【解析】提取DNA需用蒸餾水漲破細(xì)胞，提取蛋白質(zhì)可以直接用 (2008年寧夏理綜卷)根據(jù)從胡蘿卜中提取胡蘿卜素的相關(guān)知識(shí)及胡蘿卜素的性質(zhì)，回答下列問(wèn)題：(1)胡蘿卜素是________色的結(jié)晶。從胡蘿卜中提取胡蘿卜素，常用________作為溶劑，原因是________________________________________________________________________。(2)從胡蘿卜中提取胡蘿卜素常用的方法是________法。用這種方法提取胡蘿卜素的主要步驟是：粉碎、干燥、________、________、________。2011高考生物一輪復(fù)習(xí)ppt課件選修1專題56DNA蛋白質(zhì)技術(shù)(3)在胡蘿卜顆粒的加熱干燥過(guò)程中，應(yīng)嚴(yán)格將________和________控制在一定范圍內(nèi)，原因是________________________________________________________________________。(4)提取的胡蘿卜素可通過(guò)________法進(jìn)行鑒定，在鑒定過(guò)程中需要用________對(duì)照。(5)一般情況下，提取胡蘿卜素時(shí)，提取效率與原料顆粒的含水量成________比。(3)在胡蘿卜顆粒的加熱干燥過(guò)程中，應(yīng)嚴(yán)格將________【解析】胡蘿卜素為橘(橙)黃色結(jié)晶，易溶于親脂性有機(jī)溶劑，萃取后可用層析法進(jìn)行鑒定，提取時(shí)，原料的含水量越低，提取效率越高。萃取效率與原料的含水量應(yīng)呈反比，故宜將原料進(jìn)行干燥處理。【答案】

(1)橘(橙)黃親脂性有機(jī)溶劑(或有機(jī)溶劑)胡蘿卜素是脂類物質(zhì)(2)萃取萃取過(guò)濾濃縮(3)溫度時(shí)間溫度過(guò)高和時(shí)間過(guò)長(zhǎng)會(huì)導(dǎo)致胡蘿卜素分解(4)紙層析標(biāo)準(zhǔn)樣品(5)反【解析】胡蘿卜素為橘(橙)黃色結(jié)晶，易溶于親脂性有機(jī)溶劑，

胡蘿卜素可溶于乙醇和丙酮，但它們是水溶性有機(jī)溶劑，因萃取中能與水混溶而影響萃取效果，所以不用它們作萃取劑。胡蘿卜素也可溶于石油醚、乙酸乙酯、乙醚、苯、四氯化碳，它們不能與水混溶，而在以上五種有機(jī)溶劑中，石油醚的沸點(diǎn)最高，在加熱萃取時(shí)不易揮發(fā)，所以石油醚最適宜用作萃取劑。 胡蘿卜素可溶于乙醇和丙酮，但它們是水溶性有機(jī)溶劑，因萃取1．(2008年江蘇生物)下列敘述中錯(cuò)誤的是(

)A．改變NaCl溶液的濃度只能使DNA溶解而不能使其析出B．在沸水浴中，DNA遇二苯胺試劑會(huì)呈現(xiàn)藍(lán)色C．用電泳法可分離帶電性質(zhì)、分子大小和形狀不同的蛋白質(zhì)D．用透析法可去除蛋白質(zhì)樣品中的小分子物質(zhì)2011高考生物一輪復(fù)習(xí)ppt課件選修1專題56DNA蛋白質(zhì)技術(shù)【解析】

DNA在NaCl溶液中的溶解度是隨著NaCl濃度的變化而變化。在0.14mol/LNaCl溶液中DNA的溶解度最小，低于或高于0.14mol/L，DNA的溶解度都會(huì)增大。在DNA粗提取實(shí)驗(yàn)中就是先把該物質(zhì)溶解在2m