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文檔簡介

第10講

│動物細胞工程第10講動物細胞工程第1頁考點整合

考點一動物細胞培養(yǎng)

1.培養(yǎng)基:選取

_______培養(yǎng)基,通常含葡萄糖、氨基酸、無機鹽、維生素和__________等。

2.取材:大都取自_________或__________________器官或組織。

第10講

│考點整合液體

動物血清

動物胚胎

出生很快幼齡動物第2頁3.過程:第10講

│考點整合

4.應用:________________生產(chǎn);移植皮膚細胞培養(yǎng);檢測__________;醫(yī)學研究。

考點二動物細胞培養(yǎng)1.促融劑:除物理法和化學法外,還慣用________。

蛋白質(zhì)生物制品

有毒物質(zhì)

滅活病毒

第3頁

第10講

│考點整合2.過程:兩種動物細胞雜種細胞。

3.主要用途:制備____________。

考點三單克隆抗體

1.制備:

單克隆抗體

第4頁

2.單克隆抗體(1)特點:化學性質(zhì)______,_______強,_______高。

(2)應用:單抗診療盒;__________。第10講

│考點整合單一

特異性

靈敏度

生物導彈

關鍵點探究?探究點一動物細胞培養(yǎng)、植物組織培養(yǎng)培養(yǎng)、無土栽培第5頁第10講

│關鍵點探究項目植物組織培養(yǎng)動物細胞培養(yǎng)無土栽培培養(yǎng)時處理無菌、離體無菌、用胰蛋白酶處理使組織細胞相互分散開

無需滅菌,植物幼苗培養(yǎng)基成份普通固體培養(yǎng)基:礦質(zhì)元素、蔗糖、維生素、植物激素和水液體培養(yǎng)基:葡萄糖、氨基酸、無機鹽、維生素、動物血清

礦質(zhì)元素、水第6頁第10講

│關鍵點探究項目植物組織培養(yǎng)動物細胞培養(yǎng)無土栽培培養(yǎng)條件適宜溫度、pH、氧、光等適宜溫度、pH、氧等

適宜溫度、pH、氧、光等過程離體細胞、組織和器官幼年胚胎或出生很快幼齡動物器官或者組織→原代培養(yǎng)→傳代培養(yǎng)→細胞群→細胞株→細胞系植株生長發(fā)育續(xù)表

第7頁第10講

│關鍵點探究續(xù)表

項目植物組織培養(yǎng)動物細胞培養(yǎng)無土栽培能否培養(yǎng)成個體能不能能應用舉例快速繁殖培育無病毒植株、生產(chǎn)藥品、制造人工種子、培育轉(zhuǎn)基因作物等大規(guī)模生產(chǎn)蛋白質(zhì)類產(chǎn)品,如病毒疫苗、干擾素、單克隆抗體等;皮膚移植;檢測有毒性物質(zhì)溫室栽培無公害蔬菜第8頁

[易錯易混點](1)植物組織培養(yǎng)與動物細胞培養(yǎng)過程中都進行有絲分裂,都是無性繁殖,都可稱克隆,都不包括減數(shù)分裂,其中要注意是:培養(yǎng)花粉是有性生殖。(2)植物組織培養(yǎng)可產(chǎn)生新個體,表達全能性;動物細胞培養(yǎng)產(chǎn)生大量細胞,不形成新個體,故不能表達全能性。(3)動物細胞培養(yǎng)在檢測有毒物質(zhì)毒性時檢測指標是觀察標本中發(fā)生染色體變異細胞占所培養(yǎng)細胞百分比。(4)胰蛋白酶含有分解組織細胞間質(zhì)中膠原蛋白,使組織分散成單個細胞,方便與培養(yǎng)液充分混合作用,還含有定時使細胞從瓶壁上脫離作用,目標是防止“接觸抑制”,方便傳代培養(yǎng)。第10講

│關鍵點探究第9頁

(5)植物組織培養(yǎng)和動物細胞培養(yǎng)都需人工條件下無菌操作,都是合成培養(yǎng)基,都需適宜溫度、pH等條件。例1

[·浙江卷]以下關于動物細胞培養(yǎng)敘述,正確是(

)A.培養(yǎng)保留接觸抑制細胞在培養(yǎng)瓶壁上可形成多層細胞B.克隆培養(yǎng)法培養(yǎng)過程中多數(shù)細胞基因型會發(fā)生改變C.二倍體細胞傳代培養(yǎng)次數(shù)通常是無限D(zhuǎn).惡性細胞系細胞可進行傳代培養(yǎng)例1

D

[解析]本題考查動物細胞培養(yǎng)和克隆相關知識,意在考查考生對動物細胞培養(yǎng)了解。因為接觸抑制,培養(yǎng)動物細胞在培養(yǎng)瓶壁上只能形成單層細胞,故A錯誤;第10講

│關鍵點探究第10頁克隆形成細胞群,因為起源于一個共同細胞,故基因型相同,故B錯誤;二倍體細胞通常為有限細胞系,傳代培養(yǎng)次數(shù)通常是有限,故C錯誤;惡性細胞系屬于連續(xù)細胞系,可進行傳代培養(yǎng),故D正確。

[點評]處理此題關鍵要把正常細胞與癌細胞相關特征區(qū)分開。

第10講

│關鍵點探究[·湖北八校聯(lián)考]利用以下各種細胞工程技術培育生物新品種,操作過程中能形成愈傷組織是(

)①植物組織培養(yǎng)②植物體細胞雜交③動物細胞培養(yǎng)④轉(zhuǎn)基因植物培養(yǎng)⑤克隆技術A.①②③④

B.①②④C.①③④⑤D.①②④⑤變式題第11頁B

[解析]動物細胞培養(yǎng)不能取得愈傷組織產(chǎn)生新品種;克隆技術包含各種無性生殖伎倆,如扦插等過程,不能形成愈傷組織。

第10講

│關鍵點探究?探究點二植物體細胞雜交與單克隆抗體制備項目植物體細胞雜交

單克隆抗體制備理論基礎(原理)細胞膜流動性、雜種細胞含有雙親細胞遺傳物質(zhì)、細胞全能性細胞膜流動性、雜種細胞含有雙親細胞遺傳物質(zhì),細胞增殖第12頁第10講

│關鍵點探究項目植物體細胞雜交

單克隆抗體制備融合前處理酶解法去除細胞壁(纖維素酶、果膠酶)

注射特定抗原,處理正常小鼠細胞,獲取效應B細胞促融①物理法:離心、振動、電刺激等②化學法:聚乙二醇(PEG)①物化法:與植物細胞融合相同②生物法:滅活仙臺病毒續(xù)表

第13頁第10講

│關鍵點探究續(xù)表

項目植物體細胞雜交

單克隆抗體制備過程第一步:原生質(zhì)體制備第二步:原生質(zhì)體融合,再生出細胞壁第三步:雜種細胞篩選與培養(yǎng)第四步:雜種植株誘導與判定第一步:正常小鼠免疫處理第二步:動物細胞融合(物、化、生法)第三步:雜交瘤細胞篩選與培養(yǎng)第14頁第10講

│關鍵點探究續(xù)表

項目植物體細胞雜交

單克隆抗體制備意義和用途①克服遠緣雜交不親和障礙,大大擴展雜交親本組合范圍②克服有性雜交母系遺傳,取得細胞質(zhì)基因雜合子,研究細胞質(zhì)遺傳①制備單克隆抗體②診療、預防疾病:如:生物導彈治療[易錯易混點](1)制備單克隆抗體需要三次篩選。第一次是篩選出效應B第15頁細胞。第二次是篩選出雜種細胞,將效應B淋巴細胞與骨髓瘤細胞融合雜種細胞選擇出來,在效應B淋巴細胞與骨髓瘤細胞融合之后,有三種情況:效應B淋巴細胞與效應B淋巴細胞融合、骨髓瘤細胞與骨髓瘤細胞融合、效應B淋巴細胞與骨髓瘤細胞融合。第三次是篩選出能產(chǎn)生特定抗體雜種細胞。

(2)利用抗體能與抗原特異性結(jié)合特點,可將抗癌藥品與抗體結(jié)合在一起,使藥品能夠直達癌細胞,增強用藥針對性,降低用藥量,減輕副作用。(3)原生質(zhì)體融合結(jié)束標志是再生出新細胞壁,動物細胞融合結(jié)束標志是核融合。(4)若植物細胞A、B體細胞都是二倍體,體細胞中染色第10講

│關鍵點探究第16頁體數(shù)分別為2m和2n,則雜種細胞中染色體數(shù)為2m+2n,稱為異源四倍體,該生物體與植物A、B不是同一物種。(5)利用植物體細胞雜交方法培育作物新品種過程中,其遺傳物質(zhì)傳遞不遵照孟德爾遺傳規(guī)律,因為生物在進行有性生殖時才遵照孟德爾遺傳規(guī)律,而植物體細胞雜交過程不屬于有性生殖。第10講

│關鍵點探究例2

[·贛榆模擬]傳統(tǒng)遺傳學認為,不一樣物種之間存在生殖隔離屏障,不能雜交產(chǎn)生新物種,而且認為兩個體細胞之間不能雜交融合為一個細胞。伴隨當代生物科技發(fā)展,細胞工程細胞融合技術處理了這個難題,而且得到了廣泛應用。以下是兩個經(jīng)典實例,依據(jù)材料分析回答:第17頁第10講

│關鍵點探究圖10-1Ⅰ.單克隆抗體在醫(yī)療、診療等方面發(fā)揮著越來越主要作用。科學家設計了一個用被免疫B淋巴細胞制備單克隆抗體試驗,圖示是其試驗流程,請回答:(1)制備單克隆抗體時,選擇免疫B淋巴細胞原因是______________________________________________________________。

(2)怎樣判斷經(jīng)過①后細胞就是雜交瘤細胞?_______________________________________________________________________。第18頁第10講

│關鍵點探究(3)②過程如在體外培養(yǎng),則需要環(huán)境條件是(要求答5項)__________________________________________________。(4)單克隆抗體優(yōu)點是______________________________。

Ⅱ.如圖10-2所表示為科學家利用細胞工程培育“白菜—甘藍”雜種植株過程,據(jù)圖回答:圖10-2第19頁第10講

│關鍵點探究(1)C表示______________;雜種細胞D生成標志是形成________;由D形成E過程稱為________。(2)圖中A、B制備,需要除去細胞壁,此時要用到________酶;誘導動植物細胞融合慣用一個化學誘導劑是________。(3)與動物細胞培養(yǎng)基相比較,植物細胞培養(yǎng)基要添加植物激素,目標是_______________________________________。

例2

Ⅰ.(1)每一個(效應)B淋巴細胞只能分泌一個特異性抗體(2)在特定選擇性培養(yǎng)基上只有雜交瘤細胞才能存活(3)無菌、無毒,營養(yǎng)充分,溫度適宜,pH適宜,氧氣充分(4)特異性強,靈敏度高,并可大量制備Ⅱ.(1)融合原生質(zhì)體細胞壁脫分化(去分化)第20頁第10講

│關鍵點探究(2)纖維素酶和果膠聚乙二醇(PEG)(3)誘導細胞分裂和細胞分化[解析]制備單克隆抗體是動物細胞融合一個應用實例,制備原理是利用骨髓瘤細胞無限增殖能力和B淋巴細胞受到抗原刺激后只能分泌一個特異性抗體特征。單克隆抗體最主要優(yōu)點是特異性強,靈敏度高,并可大量制備。植物體細胞雜交是將不一樣植物體細胞,在一定條件下融合形成雜種細胞,并培育成新植物體。在雜交之前,要取得含有活力原生質(zhì)體,所以要用纖維素酶和果膠酶除去細胞壁。植物細胞培養(yǎng)基要添加植物激素,誘導細胞分裂和細胞分化。

[點評]本題以圖形式展示了單克隆抗體和體細胞雜交制備過程,考查了這兩項工程基本知識。處理此題關鍵是熟練掌握相關基礎知識。

第21頁第10講

│關鍵點探究A.不一樣植物精子與卵細胞融合B.不一樣植物原生質(zhì)體融合C.完整兩個體細胞融合D.植物花粉細胞兩兩融合變式題植物體細胞雜交是利用不一樣物種兩個體細胞融合成為一個雜種細胞過程。該過程是指(

)B

[解析]植物體細胞雜交對象是體細胞,雜交時,因為細胞壁會妨礙體細胞雜交,應首先去除細胞壁。去除細胞壁后部分就是原生質(zhì)體,因而也稱為植物原生質(zhì)體融合。

第22頁?探究點三胚胎工程第10講

│關鍵點探究項目原理過程用途核移植細胞核全能性(屬于無性生殖)克隆哺乳動物以快速繁殖良種、特異、瀕危動物第23頁第10講

│關鍵點探究續(xù)表

項目原理過程用途胚胎分割移值細胞全能性(屬于有性生殖)處理動物和人不育問題;提升良種家畜繁殖能力[易錯易混點]

(1)胚胎分割技術是把一個胚胎細胞分成2組或多組,經(jīng)過第24頁第10講

│關鍵點探究短暫培養(yǎng)使其修復、發(fā)育后,再一同或分別移植到不一樣代孕母體中妊娠并產(chǎn)生多胎技術,這種技術又稱作人工同卵多胎技術。胚胎分割可成倍增加胚胎數(shù)量,是一個快速繁殖種畜方法,屬于動物無性繁殖或克隆方法之一。

(2)胚胎分割技術材料選擇:發(fā)育良好、形態(tài)正常桑椹胚或囊胚。囊胚期分割要求:內(nèi)細胞團均等分割,以免影響分割后胚胎恢復和深入發(fā)育。

例3

圖10-3所表示為用兩棲動物卵所做試驗圖解,據(jù)圖回答以下問題:

第25頁第10講

│關鍵點探究圖10-3第26頁第10講

│關鍵點探究

(1)蝌蚪腸上皮細胞核中含有青蛙發(fā)育所需________,重新組合細胞相當于蛙________,經(jīng)過________和________形成組織和器官。本試驗結(jié)果說明____________含有全能性。

(2)圖中A過程采取技術伎倆稱作________技術。假如用生物技術使番茄和馬鈴薯體細胞融合,首先要取得________,其方法是________,然后誘導____________。要將其融合形成細胞培養(yǎng)成植株,要用______________技術。從理論上講用融合后細胞培育出“番茄—馬鈴薯”植株是________(填“可育”或“不可育”)。第27頁第10講

│關鍵點探究(3)若圖10-4所表示過程用于制備干擾素,A為小鼠________細胞,在取得此細胞之前,應給小鼠注射對應抗原,此時B為________細胞。從A、B到C過程中,可形成3種類型C細胞(假設僅考慮兩個細胞融合)。若該過程用于制備單克隆抗體,應篩選出符合要求D細胞,方法是用________培養(yǎng)基培養(yǎng),篩選出D細胞稱為________,慣用細胞培養(yǎng)方法有體外培養(yǎng)和體內(nèi)培養(yǎng)兩種:前者是在________培養(yǎng)基中培養(yǎng)。

圖10-4第28頁第10講

│關鍵點探究

例3

(1)全部基因(全部遺傳物質(zhì))受精卵細胞分裂分化動物細胞核(2)核移植原生質(zhì)體酶解法原生質(zhì)體融合植物組織培養(yǎng)可育(3)效應T淋巴骨髓瘤選擇(或有對應抗原)雜交瘤細胞(或雜種細胞)液體[解析](1)蝌蚪腸上皮細胞由受精卵發(fā)育而來,含有青蛙發(fā)育全部基因(遺傳物質(zhì)),重組細胞相當于一個受精卵,受精卵要經(jīng)過分裂和分化才能形成組織和器官,本試驗說明了動物細胞細胞核含有全能性。(2)圖中A表示核移植技術;假如要使番茄和馬鈴薯細胞融合,首先要用纖維素酶和果膠酶去除細胞壁取得原生質(zhì)體,然后用聚乙二醇誘導原生質(zhì)體融合,融合后雜交細胞要經(jīng)過植物第29頁第10講

│關鍵點探究[點評]胚胎工程許多技術都是在了解哺乳動物自然條件下受精和早期胚胎發(fā)育基礎上實現(xiàn)。比如:哺乳動物體內(nèi)受精和胚胎發(fā)育都是在自然條件下特點和規(guī)律,人們正是在認識了這些自然規(guī)律基礎上,在體

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