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專題2微生物的培養(yǎng)與應(yīng)用課題3分解纖維素的微生物的分離
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棉花是自然界中纖維素含量最高的天然產(chǎn)物,其纖維素的質(zhì)量分?jǐn)?shù)可達(dá)92%~95%,亞麻、木材、作物秸稈等也富含纖維素。許多商品纖維素都是由天然纖維素制得的。用分解纖維素的微生物處理后,纖維素可分解成糖。它不僅可以供給人們能量,還可以用于釀酒、釀醋等食品加工業(yè),成為葡萄糖的替代品。
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請(qǐng)思考:
1.如何將纖維素分解成人類可以利用的單糖?
2.從何處可得到分解纖維素的微生物,又如何分離?
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欄目鏈接1.纖維素的化學(xué)組成含________三種元素,是一種多糖。纖維素的基本組成單位是________,人體內(nèi)沒有________,所以人體不能直接以纖維素為能源物質(zhì),但土壤中有分解纖維素的微生物,最終把纖維素分解成________釋放到無機(jī)環(huán)境。一、纖維素與纖維素酶
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欄目鏈接C、H、O
葡萄糖
纖維素酶
葡萄糖2.纖維素的分布________是自然界中纖維素含量最高的天然產(chǎn)物,此外,木材、作物秸稈等也富含纖維素。纖維素產(chǎn)生于植物的________作用,地球上的植物每年產(chǎn)生的纖維素超過________億噸。研究土壤中分解纖維素的微生物將給我們的生活帶來很大變化。
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棉花
光合703.纖維素的組分纖維素酶是一種復(fù)合酶,一般認(rèn)為它至少包括________、________和______________三種組分。前兩種酶使纖維素分解成__________,第三種酶將__________分解成葡萄糖。
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欄目鏈接C1酶Cx酶
葡萄糖苷酶
纖維二糖
纖維二糖二、纖維素分解菌的篩選1.方法________染色法,常用的有兩種,一種是先培養(yǎng)________,再加入剛果紅進(jìn)行________,另一種是在________時(shí)就加入剛果紅。2.原理(1)含纖維素的培養(yǎng)基中加入的________,可與纖維素形成______________。
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剛果紅
微生物
顏色反應(yīng)
倒平板
剛果紅
紅色復(fù)合物(2)當(dāng)纖維素被________分解后,形成的____________、________不和剛果紅發(fā)生這種反應(yīng),紅色復(fù)合物就無法形成,培養(yǎng)基中出現(xiàn)以______________為中心的透明圈,可通過是否產(chǎn)生________來篩選纖維素分解菌。
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纖維素酶
纖維二糖葡萄糖
纖維素分解菌
透明圈三、實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)
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欄目鏈接1.實(shí)驗(yàn)流程土壤取樣→__________(此步可省略)→梯度稀釋→將樣品涂布到鑒別______________的培養(yǎng)基上→挑選產(chǎn)生________的菌落。2.土壤取樣采取土樣時(shí),可以選擇______________的環(huán)境。
選擇培養(yǎng)
纖維素分解菌
透明圈
富含纖維素3.選擇培養(yǎng)(1)目的:增加纖維素分解菌的______,確保能夠從樣品中分離得到所需要的________。(2)操作方法:將土樣加入裝有30mL___________的錐形瓶中,將錐形瓶固定在________上,在一定溫度下振蕩培養(yǎng)________,直至培養(yǎng)液變________,也可重復(fù)選擇培養(yǎng)。4.涉及的生物技術(shù)主要有:________的制作、________操作技術(shù)、稀釋涂布平板法、__________________、土壤取樣等。
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欄目鏈接濃度
微生物
選擇培養(yǎng)基
搖床1~2d
混濁
培養(yǎng)基
無菌
選擇培養(yǎng)基的作用
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欄目鏈接一、纖維素與纖維素酶的比較
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欄目鏈接纖維素纖維素酶組成由葡萄糖組成的多聚體由C1酶、Cx酶和葡萄糖苷酶組成分布棉花、木材、作物秸稈等微生物細(xì)胞內(nèi)
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欄目鏈接作用與果膠構(gòu)成植物的細(xì)胞壁水解纖維素實(shí)驗(yàn)驗(yàn)證纖維素酶的作用實(shí)驗(yàn)組對(duì)照組結(jié)論纖維素酶能分解纖維素
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欄目鏈接①酶具有專一性,纖維素酶只能分解含纖維素的物質(zhì)。②酶發(fā)生作用需要一定的條件,不僅僅是溫度、pH等,其他物質(zhì)的存在也會(huì)降低酶的活性,如木質(zhì)素(木材中的有機(jī)物)就會(huì)降低纖維素酶的活性。特別提醒例1下列關(guān)于纖維素的敘述中,不正確的是(
)A.纖維素是由葡萄糖首尾相連而成的高分子化合物B.纖維素能被土壤中某些微生物分解利用,是因?yàn)檫@些微生物能產(chǎn)生纖維素酶C.植物的根、莖、葉等器官都含有大量的纖維素D.自然界中的各種生物均能把纖維素分解成葡萄糖,從而作為生物體的能量來源
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欄目鏈接解析:自然界中部分能夠合成纖維素酶的生物才能分解纖維素。答案:D
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欄目鏈接變式訓(xùn)練1.下列敘述中,正確的是(
)A.纖維素、纖維素酶基本組成單位相同B.膳食纖維對(duì)人體健康極為有利,是因?yàn)槿梭w可分泌纖維素酶而直接利用它C.纖維素酶是一種復(fù)合酶,由C1酶、Cx酶和葡萄糖苷酶組成D.只有纖維素分解菌才可產(chǎn)生纖維素酶
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欄目鏈接解析:纖維素、纖維素酶的基本組成單位分別為葡萄糖、氨基酸;人不可分泌纖維素酶,不可直接利用纖維素;除纖維素分解菌可分泌纖維素酶外,其他某些生物亦可產(chǎn)生。答案:C
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欄目鏈接變式訓(xùn)練
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二、兩種剛果紅染色法的區(qū)別特別提醒①由于土壤中細(xì)菌數(shù)量遠(yuǎn)遠(yuǎn)高于真菌和放線菌數(shù)量,因此最容易分離得到的是細(xì)菌。,②當(dāng)纖維素被纖維素酶分解后,剛果紅—纖維素的復(fù)合物就無法形成,培養(yǎng)基中會(huì)出現(xiàn)以纖維素分解菌為中心的透明圈。可據(jù)此,通過是否產(chǎn)生透明圈來篩選纖維素分解菌。例2在加入剛果紅的培養(yǎng)基中出現(xiàn)透明圈的菌落是(
)A.分解尿素的細(xì)菌B.硝化細(xì)菌C.分解纖維素的細(xì)菌D.乳酸菌解析:分解纖維素的細(xì)菌能將纖維素分解,剛果紅—纖維素的復(fù)合物就無法形成,培養(yǎng)基中會(huì)出現(xiàn)以纖維素分解菌為中心的透明圈。答案:C2.兩種剛果紅染色法的結(jié)果是(
)A.均會(huì)出現(xiàn)透明圈B.均不會(huì)出現(xiàn)透明圈C.方法一出現(xiàn),方法二不出現(xiàn)D.方法一不出現(xiàn),方法二出現(xiàn)變式訓(xùn)練變式訓(xùn)練解析:兩種剛果紅染色法雖然程序不同,但最終都會(huì)使培養(yǎng)基中出現(xiàn)以纖維素分解菌為中心的透明圈。答案:A(1)鑒定原因:由于形成透明圈的菌落與其他微生物菌落出現(xiàn)混雜現(xiàn)象,產(chǎn)生透明圈的菌落可能是產(chǎn)生淀粉酶的微生物,也可能是降解剛果紅的菌種。(2)原理:為確定得到的是纖維素分解菌,還需要進(jìn)行發(fā)酵產(chǎn)纖維素酶的實(shí)驗(yàn),纖維素酶的發(fā)酵方法有液體發(fā)酵和固體發(fā)酵兩種。(3)纖維素酶的測(cè)定方法:一般是對(duì)纖維素酶分解濾紙等纖維素后所產(chǎn)生的葡萄糖進(jìn)行定量的測(cè)定。
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欄目鏈接三、分離得到的纖維素分解菌的鑒定特別提醒①纖維素分解菌的選擇培養(yǎng)基屬于液體培養(yǎng)基,以纖維素為唯一碳源和能源。只有能利用纖維素的微生物,才能在此培養(yǎng)基中繁殖生長(zhǎng)。②纖維素分解菌的鑒別培養(yǎng)基屬于固體培養(yǎng)基,培養(yǎng)基中加入剛果紅染料。只有能產(chǎn)生纖維素酶的微生物,才能使培養(yǎng)基中的剛果紅—纖維素復(fù)合物無法形成,從而出現(xiàn)透明圈。例3關(guān)于選擇培養(yǎng)正確的敘述是(
)A.可以增加纖維素分解菌的濃度B.可以減少纖維素分解菌的濃度C.所用培養(yǎng)基是固體培養(yǎng)基D.所用培養(yǎng)基是平板培養(yǎng)基
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欄目鏈接解析:選擇培養(yǎng)是增加纖維素分解菌的濃度,所用培養(yǎng)基是液體培養(yǎng)基,以便于下一步的稀釋涂布操作。答案:A
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欄目鏈接3.分離纖維素分解菌的實(shí)驗(yàn)過程中操作有誤的是(
)A.經(jīng)選擇培養(yǎng)后將樣品涂布到鑒別纖維素分解菌的培養(yǎng)基上B.富集培養(yǎng)這一步可省略,但培養(yǎng)纖維素分解菌少C.經(jīng)稀釋
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