桑樹(shù)葉斑病防治PPT

匯報(bào)提綱研究背景結(jié)論與討論研究目的研究?jī)?nèi)容結(jié)果與分析第二頁(yè)，共二十四頁(yè)。研究背景：在很多蠶區(qū)，桑樹(shù)容易發(fā)生桑樹(shù)葉斑病，影響桑樹(shù)的生長(zhǎng)發(fā)育，桑葉老化脫落，造成桑葉減產(chǎn)，葉質(zhì)下降，蠶兒食下病葉后，吸收不到有利于蠶兒生長(zhǎng)發(fā)育所需的營(yíng)養(yǎng)，會(huì)降低蠶兒抗病的能力，影響蠶繭(cánjiǎn)的產(chǎn)量和質(zhì)量。第三頁(yè)，共二十四頁(yè)。研究目的：采用咪酰胺不同(bùtónɡ)濃度對(duì)桑樹(shù)病菌的抑制率和EC50研究，為提高桑樹(shù)的產(chǎn)量和質(zhì)量提供理論依據(jù)。

第四頁(yè)，共二十四頁(yè)。研究?jī)?nèi)容：以云南保山、曲靖兩地區(qū)帶有葉斑病的桑葉為材料，采用菌落直徑(zhíjìng)法，對(duì)殺菌劑咪酰胺的EC50進(jìn)行測(cè)定。算出咪酰胺對(duì)病原菌的敏感性。帶病桑葉(sānɡyè)第五頁(yè)，共二十四頁(yè)。試驗(yàn)(shìyàn)技術(shù)路線(xiàn)圖植物保護(hù)學(xué)院何永紅老師提供編號(hào)為SHB的病原菌病原菌分離病原菌活化

病原菌純化

單孢分離

鑒定形態(tài)鑒定分子鑒定

農(nóng)藥測(cè)定曲靖、保山、采集新鮮帶病桑葉5%NaClo處理常溫培養(yǎng)3～5天顯微鏡下常溫培養(yǎng)3～5天第六頁(yè)，共二十四頁(yè)。菌株編號(hào)名稱(chēng)采集地點(diǎn)分離部位病斑形狀病斑顏色1保2-2保山葉片斑點(diǎn)狀黑褐色2曲4-1-1曲靖枝條斑點(diǎn)狀黑褐色3曲6-2-1曲靖葉片條狀黑褐色4曲5-1-1曲靖葉片斑點(diǎn)狀黑褐色5曲5-1-2曲靖葉片斑點(diǎn)狀黑褐色6曲2-2-2曲靖葉片斑點(diǎn)狀黑褐色7曲2-1-2曲靖枝條斑點(diǎn)狀黑褐色8曲5-2-1曲靖葉片條狀黑褐色9曲3-1-1曲靖葉片斑點(diǎn)狀黑褐色供試菌株分別(fēnbié)從保山、曲靖采樣得到。從桑樹(shù)的葉片和枝條部位分離可得病原菌，病斑部有條狀和斑點(diǎn)狀，病斑顏色都為黑褐色。表1桑樹(shù)病菌采集地點(diǎn)(dìdiǎn)、分離部位和病癥第七頁(yè)，共二十四頁(yè)。編號(hào)名稱(chēng)正面形態(tài)背面形態(tài)孢子堆1保2-2粉紅色絲狀粉紅色黑色較少2曲4-1-1白色絲狀白色黑色豐富3曲6-2-1米白色有輪紋絮狀桔黃色有輪紋黑色豐富4曲5-1-1米白色有輪紋絲狀白色黑色豐富5曲5-1-2白色絲狀桔黃色有輪紋黑色較少6曲2-2-2白色有輪紋絲狀黑黃相間有輪紋黑色豐富7曲2-1-2黑白相間有輪紋絮狀黑黃相間有輪紋黑色豐富8曲5-2-1黑白相間有輪紋絲狀黑黃相間黑色豐富9曲3-1-1黑白相間有輪紋絲狀黑黃相間有輪紋黑色豐富表29種菌株在PDA平板上的形態(tài)(xíngtài)特征第八頁(yè)，共二十四頁(yè)。A、菌株在PDA平板(píngbǎn)上的正面形態(tài)B、菌株在PDA平板(píngbǎn)上的背面形態(tài)圖1菌株在PDA平板(píngbǎn)上的形態(tài)第九頁(yè)，共二十四頁(yè)。序號(hào)采樣地點(diǎn)孢子形狀孢子顏色孢子長(zhǎng)（um）孢子寬（um）1保山孢子很小橢圓形近無(wú)色，成堆時(shí)綠色1.64～2.300.84～1.382曲靖紡錘形、長(zhǎng)橢圓形或卵形無(wú)色長(zhǎng)：9～142.5～43、8、9曲靖棒狀中間4色胞同色，有尾和須。黑褐色本長(zhǎng)：11.83～15.11須長(zhǎng)：5.43～9.84尾長(zhǎng)：2.02～4.932.30～3.634曲靖長(zhǎng)卵形或倒棍棒形欖褐色孢子痕長(zhǎng)：14～48孢子長(zhǎng)：33～147孢子痕寬：6～13；孢子寬：9～335曲靖鐮刀形或梭性無(wú)色9.55～15.191.89～2.696曲靖長(zhǎng)卵形、橢圓形或紡錘形深藍(lán)色或深紫色16～254.5～67曲靖小型孢子橢圓形或卵形，大孢子橢圓形至長(zhǎng)卵形無(wú)色小孢型子5.3～10.5大型孢子7.5～17小型孢子2.8～5大型孢子2.5～5.5表3桑樹(shù)病害孢子(bāozǐ)形態(tài)第十頁(yè)，共二十四頁(yè)。

觀察(guānchá)結(jié)果表明（表3和圖2）1號(hào)菌株初步鑒定為亞木霉（Trichodermakoningii），2號(hào)菌株初步鑒定為桑幹枯?。≒homopsissp）,3、8、9號(hào)菌株初步鑒定為擬盤(pán)多毛孢（Pestalotiopsis），5號(hào)菌株初步鑒定為禾赤霉菌（Gibberellazeae），4號(hào)菌株初步鑒定為甘藍(lán)長(zhǎng)尾交鏈孢霉（Alternariabrassicae），5號(hào)菌株初步鑒定為禾赤霉菌（Gibberellazeae），6號(hào)菌株初步鑒定為桑牙枯?。‵usariumcerealis），7號(hào)菌株初步鑒定為蔓枯病菌（Didymellabryoniae）。

A、3號(hào)菌株孢子(bāozǐ)形態(tài)B、1號(hào)菌株孢子(bāozǐ)形態(tài)C、5號(hào)菌株孢子(bāozǐ)形態(tài)形態(tài)學(xué)鑒定(jiàndìng)結(jié)果圖2桑樹(shù)病害孢子形態(tài)第十一頁(yè)，共二十四頁(yè)。分子鑒定結(jié)果：

本試驗(yàn)中分離的9個(gè)菌株與從GeneBank比對(duì)結(jié)果表明，保2-2、曲4-1-1、曲6-2-1、曲5-1-1、曲5-1-2、曲2-2-2、曲2-1-2、曲5-2-1、曲3-1-1號(hào)菌株是亞木霉、桑干枯菌、細(xì)極鏈格孢、甘藍(lán)(gānlán)長(zhǎng)尾交鏈孢霉、禾赤霉菌、桑牙枯菌、蔓枯病菌、細(xì)極鏈格孢、天竺葵鏈格孢。第十二頁(yè)，共二十四頁(yè)。菌種AccessionMaxidentDescriptionGenebank比對(duì)結(jié)果保2-2AF218790.199%Trichodermakoningii亞木霉曲4-1-1AB302247.199%Phomopsissp桑干枯菌曲6-2-1HM467832.199%Alternariatenuissima細(xì)極鏈格孢曲5-1-1JF439449.199%Alternariabrassicae甘藍(lán)長(zhǎng)尾交鏈孢霉曲5-1-2HQ671191.199%Gibberellazeae禾赤霉菌曲2-2-2GU584950.199%Fusariumcerealis桑牙枯菌曲2-1-2EU167573.199%Didymellabryoniae蔓枯病菌曲5-2-1JQ417902.1100%Alternariatenuissima細(xì)極鏈格孢曲3-1-1JF422727.199%Alternariaporri天竺葵鏈格孢表4分離(fēnlí)菌株在Genebank比對(duì)結(jié)果第十三頁(yè)，共二十四頁(yè)。菌株抑制率濃度10ug/ml濃度30ug/ml濃度50ug/ml濃度100ug/ml濃度150ug/ml保2-20.50710.66140.70390.66930.622曲4-1-10.30940.25880.22710.30350.5024曲6-2-10.55660.72110.70390.29610.8013曲5-1-10.52030.66440.77560.84240.8525曲5-1-20.4950.63830.71670.79670.8083曲2-2-20.50.55560.59520.73810.881曲2-1-2-0.3650.19570.47830.44780.6609曲5-2-10.19650.05880.28590.44710.5141曲3-1-10.27650.25880.30240.30590.4471表5桑樹(shù)病菌(bìngjūn)對(duì)咪酰胺的抑制率

第十四頁(yè)，共二十四頁(yè)。實(shí)驗(yàn)表明咪酰胺對(duì)桑樹(shù)病菌的抑制率較強(qiáng)，在咪酰胺濃度(nóngdù)為10ug/ml，30ug/ml，50ug/ml，100ug/ml，150ug/ml的PDA平板上培養(yǎng)的桑樹(shù)病菌抑制都較明顯。圖3咪酰胺對(duì)桑樹(shù)病菌(bìngjūn)的抑制效果圖

咪酰胺對(duì)桑樹(shù)病菌的抑制效果圖0.000000.200000.400000.600000.800001.00000147101316192225283134374043菌株抑制率第十五頁(yè)，共二十四頁(yè)。農(nóng)藥測(cè)定結(jié)果

本實(shí)驗(yàn)(shíyàn)為桑樹(shù)病菌在加入濃度10ug/ml和30ug/ml的咪酰胺在PDA平板上的生長(zhǎng)狀況。實(shí)驗(yàn)(shíyàn)表明桑樹(shù)病菌對(duì)咪酰胺較敏感，不同的桑樹(shù)病菌對(duì)咪酰胺的敏感度不同。圖4不同濃度的咪酰胺對(duì)桑樹(shù)病菌(bìngjūn)的抑制效果圖第十六頁(yè)，共二十四頁(yè)。本實(shí)驗(yàn)為桑樹(shù)病菌(bìngjūn)在加入濃度為50ug/ml、100ug/ml和150ug/ml的咪酰胺在PDA平板上的生長(zhǎng)狀況。實(shí)驗(yàn)表明咪酰胺的濃度越高桑樹(shù)病菌(bìngjūn)越敏感，對(duì)桑樹(shù)病菌(bìngjūn)的抑制率越強(qiáng)。圖5不同(bùtónɡ)濃度的咪酰胺對(duì)桑樹(shù)病菌的抑制效果圖第十七頁(yè)，共二十四頁(yè)。本實(shí)驗(yàn)為不同的桑樹(shù)病菌在PDA平板上的正常(zhèngcháng)生長(zhǎng)狀況。本實(shí)驗(yàn)表明不同地區(qū)的桑樹(shù)病菌并不完全相同，病菌的菌落大小，顏色，菌絲的長(zhǎng)短，有無(wú)菌絲，生長(zhǎng)快慢都不相同。在不同地區(qū)不同氣候條件下影響桑樹(shù)減產(chǎn)的主要病害不同。圖6桑樹(shù)病菌的正常生長(zhǎng)(shēngzhǎng)狀況圖第十八頁(yè)，共二十四頁(yè)。咪酰胺對(duì)桑樹(shù)病菌的抑制效果：咪酰胺的EC50從0.012774ug/ml-17.815ug/ml。EC50＜0.1的菌株有3個(gè)分別是細(xì)極鏈格孢（3號(hào)）、甘藍(lán)長(zhǎng)尾交鏈孢霉（4號(hào)）和禾赤霉菌（5號(hào)）這4個(gè)菌株對(duì)咪酰胺的敏感性最強(qiáng)。證明(zhèngmíng)咪酰胺能有效防治亞木霉、細(xì)極鏈格孢、甘藍(lán)長(zhǎng)尾交鏈孢霉和禾赤霉菌所引起的桑樹(shù)病害。序號(hào)菌株EC50ug/ml1保2-20.0431672曲4-1-117.8153曲6-2-10.0127744曲5-1-10.0808465曲5-1-20.0990046曲2-2-20.1375857曲2-1-20.9441328曲5-2-11.6770019曲3-1-117.02504表6咪酰胺對(duì)桑樹(shù)病菌(bìngjūn)的EC50第十九頁(yè)，共二十四頁(yè)。

8個(gè)菌株對(duì)咪酰胺的EC50分布(fēnbù)有一個(gè)單峰，其中6號(hào)（桑牙枯病菌）、3號(hào)（細(xì)極鏈格孢）、4號(hào)霉（甘藍(lán)長(zhǎng)尾交鏈孢）和5號(hào)（禾赤霉菌）這四個(gè)菌株的EC50<0.5，1.5＜EC50＜2的菌株是8號(hào)（細(xì)極鏈格孢）。2號(hào)（桑干枯?。┖?號(hào)（天竺葵鏈格孢）的EC50>2。即除了EC50＞2的這兩菌株外，其余6個(gè)菌株菌落對(duì)咪酰胺敏感。

圖7咪酰胺對(duì)桑樹(shù)病菌(bìngjūn)的EC50分布圖第二十頁(yè)，共二十四頁(yè)。結(jié)論(jiélùn)與討論桑樹(shù)病菌的病原：

本文鑒定表明，云南省引起桑樹(shù)真菌病害的病原有：細(xì)極鏈格孢（Alternariatenuissima）、甘藍(lán)長(zhǎng)尾交鏈孢霉（Alternariabrassicae）、禾赤霉菌（Gibberellazeae）、桑牙枯?。‵usariumcerealis）、蔓枯病菌（Didymellabryoniae）、天竺葵鏈格孢（Alternariaporri）。前人研究表明云南桑樹(shù)病害主要是侵染性病害，而引起桑樹(shù)侵染性病害的病原物主要是真菌，屬于子囊菌綱（Ascomycetes）、擔(dān)子菌綱（Basidiomycetes）和半知菌類(lèi)（Fungiimperfecti）。菌絲體發(fā)達(dá)，有隔膜和分枝，菌絲體可構(gòu)成菌核、子座、子囊果等組織體。此外，本文還分離到一株亞木霉（Trichodermakoningii），亞木霉（Trichodermakoningii）是否(shìfǒu)對(duì)桑樹(shù)的其它病原有防治效果，需進(jìn)一步研究。第二十一頁(yè)，共二十四頁(yè)。

本文中，咪酰胺可以有效防治桑樹(shù)真菌病害，在供試的8個(gè)菌株中有三個(gè)菌株：細(xì)極鏈格孢（Alternariatenuissima）、甘藍(lán)長(zhǎng)尾交鏈孢霉（Alternariabrassicae）和禾赤霉菌（Gibberellazeae）的EC50<0.1，表明咪酰胺對(duì)桑樹(shù)上的這些病菌抑制和殺菌作用很顯著。2007年仇鐵燁用咪酰胺防治水稻惡苗病的效果顯著，每hm2用咪酰胺60ml，對(duì)秧苗期和