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文檔簡介

概念題:1生物分離技術(shù):是指從動(dòng)植物與微生物的有機(jī)體或器官、生物工程產(chǎn)物(發(fā)酵液、培養(yǎng)液)及其生物化學(xué)產(chǎn)品中提取、分離、純化有用物質(zhì)的技術(shù)過程。2凝聚:在電解質(zhì)作用下,破壞細(xì)胞菌體和蛋白質(zhì)等膠體粒子的分散狀態(tài),使膠體粒子匯集的過程。3.絮凝:指在某些高分子絮凝劑存在下,在懸浮粒子之間發(fā)生架橋作用而使膠粒形成粗大的絮凝團(tuán)的過程.4.分派系數(shù):在一定溫度、壓力下,溶質(zhì)分子分布在兩個(gè)互不相溶的溶劑里,到達(dá)平衡后,它在兩相的濃度為一常數(shù)叫分派系數(shù)。5.過濾:是在某一支撐物上放過濾介質(zhì),注入含固體顆粒的溶液,使液體通過,固體顆粒留下,是固液分離的常用措施之一。6.吸附:是運(yùn)用吸附劑對(duì)液體或氣體中某一組分具有選擇性吸附的能力,使其富集在吸附劑表面的過程.7.離子互換:運(yùn)用離子互換樹脂作為吸附劑,將溶液中的待分離組分,根據(jù)其電荷差異,依托庫侖力吸附在樹脂上,然后運(yùn)用合適的洗脫劑將吸附質(zhì)從樹脂上洗脫下來,到達(dá)分離的目的。8.色譜技術(shù):是一組有關(guān)分離措施的總稱,色譜柱的一般構(gòu)造具有固定相(多孔介質(zhì))和流動(dòng)相,根據(jù)物質(zhì)在兩相間的分派行為不一樣(由于親和力差異),經(jīng)過多次分派(吸附-解吸-吸附-解吸),到達(dá)分離的目的。9.膜分離:運(yùn)用膜的選擇性(孔徑大?。?,以膜的兩側(cè)存在的能量差作為推進(jìn)力,由于溶液中各組分透過膜的遷移率不一樣而實(shí)現(xiàn)分離的一種技術(shù)。10.超臨界流體:超臨界流體是狀態(tài)超過氣液共存時(shí)的最高壓力和最高溫度下物質(zhì)特有的點(diǎn)——臨界點(diǎn)后的流體。11.萃?。寒?dāng)具有生化物質(zhì)的溶液與互不相溶的第二相接觸時(shí),生化物質(zhì)傾向于在兩相之間進(jìn)行分派,當(dāng)條件選擇得恰當(dāng)時(shí),所需提取的生化物質(zhì)就會(huì)有選擇性地發(fā)生轉(zhuǎn)移,集中到一相中,而本來溶液中所混有的其他雜質(zhì)(如中間代謝產(chǎn)物、雜蛋白等)分派在另一相中,這樣就能到達(dá)某種程度的提純和濃縮。12.AqueousTwoPhaseExtraction雙水相萃?。弘p水相現(xiàn)象是當(dāng)兩種聚合物或一種聚合物與一種鹽溶于同一溶劑時(shí),由于聚合物之間或聚合物與鹽之間的不相容性,當(dāng)聚合物或無機(jī)鹽濃度到達(dá)一定值時(shí),就會(huì)提成不互溶的兩相。因使用的溶劑是水,因此稱為雙水相,活性蛋白或細(xì)胞在這種環(huán)境中不會(huì)失活,但可以不一樣比例分派于兩相。13.(Reversedmicellarextraction)反膠團(tuán)萃?。罕砻婊钚詣┰诜菢O性的有機(jī)相中超過臨界膠團(tuán)濃度而匯集形成反膠團(tuán),在有機(jī)相內(nèi)形成分散的親水微環(huán)境。由于反膠團(tuán)內(nèi)存在微水池這一親水微環(huán)境,可溶解氨基酸、肽和蛋白質(zhì)等生物分子。因此,反膠團(tuán)萃取可用于氨基酸、肽和蛋白質(zhì)等生物分子的分離純化,尤其是蛋白質(zhì)類生物大分子。。14.SFEsupercriticalfluidextraction超臨界流體萃?。撼R界流體具有類似氣體的較強(qiáng)穿透力和類似于液體的較大密度和溶解度,具有良好的溶劑特性,可作為溶劑進(jìn)行萃取、分離單體。其最大的長處在于可以在室溫條件下進(jìn)行目的產(chǎn)物分離,并且無溶劑殘留。15.膜的濃差極化:是指但溶劑透過膜,而溶質(zhì)留在膜上,因而使膜面濃度增大,并高于主體中濃度。16.微濾:以多孔薄膜為過濾介質(zhì),壓力差為推進(jìn)力,運(yùn)用篩分原理使不溶性粒子(0.02-10um)得以分離的操作。操作壓力0.05-0.1MPa。17.超濾:是以壓力差為推進(jìn)力,運(yùn)用超濾膜不一樣孔徑對(duì)液體中溶質(zhì)進(jìn)行分離的物理篩分過程。孔徑為2-20nm,截留相對(duì)分子量在數(shù)千~數(shù)百萬Dalton膜分離過程稱為超濾,它重要是用于從溶劑或小分子溶質(zhì)中將大分子篩分出來操作壓0.1-1MPa。18.納濾:運(yùn)用超濾膜不一樣孔徑對(duì)液體中溶質(zhì)進(jìn)行分離的物理篩分過程。納濾截留物相對(duì)分子量范圍約為200~1000,能透過無機(jī)鹽和水200~1000Dalton或直徑1nm左右的溶質(zhì)粒子19.反滲透:在外加壓力驅(qū)動(dòng)下借助半透膜的選擇截留作用溶劑由高濃度溶液透過半膜向低濃度滲透稱為反滲透。20.流動(dòng)相:在層析過程中,推進(jìn)固定相上待分離的物質(zhì)朝著一種方向移動(dòng)的液體、氣體或租臨界體等,都稱為流動(dòng)相。21.NPC:normalphasechromatography,正相色譜,流動(dòng)相極性不不小于固定相的分派色譜法稱為正相色譜法。在這種層析過程中非極性分子或極性小的分子比極性大的分子移動(dòng)的速度快,先從柱中流出來。22.RPC:reversedphasechromatography,反相色譜:流動(dòng)相極性不小于固定相極性的分派色譜法稱為反相色譜法。在這種層析過程中,極性大的分子比極性小的分子移動(dòng)的速度快而先從柱中流出。23.TLC:Thin-LayerChromatography薄膜色譜法,運(yùn)用分布成薄層的介質(zhì),在合適的展開劑作用下完畢物質(zhì)的分離。24.吸附色譜法(adsorptionchromatography,AC)是靠溶質(zhì)與吸附劑之間的分子吸附力的差異而分離的措施。25.分派層析:是根據(jù)在一種有兩相似時(shí)存在的溶劑系統(tǒng)中,不一樣物質(zhì)的分派系數(shù)不一樣而到達(dá)分離目的的一種層析技術(shù)。26.凝膠色譜:以多種具有網(wǎng)狀構(gòu)造的凝膠顆粒為固定相,根據(jù)流動(dòng)相中所含各組分的分子大小不一樣而到達(dá)物質(zhì)分離目的的一種色譜技術(shù)。27.IEC:ionexchangechromatography離子互換色譜,離子互換色譜中的固定相是某些帶電荷的基團(tuán),這些帶電基團(tuán)通過靜電互相作用與帶相反電荷的離子結(jié)合,從面完畢不一樣帶電離子的分離。28.HighPerformanceLiquidChromatography,HPLC高效液相色譜:是指選用顆粒極細(xì)的高效耐壓新型固定相,借助高壓泵來輸送流動(dòng)相,并配有實(shí)時(shí)在線檢測器,實(shí)現(xiàn)色譜分離過程所有自動(dòng)化的液相色譜法。29.基線:色譜分析中無試樣通過檢測器時(shí),檢測到的信號(hào)即為基線。30.保留時(shí)間(tR):組分從進(jìn)樣到柱后出現(xiàn)濃度極大值時(shí)所需的時(shí)間。31.親和層析:根據(jù)生物高分子物質(zhì)能與對(duì)應(yīng)專一配基分子可逆結(jié)合的原理,采用一定技術(shù),把與目的產(chǎn)物具有特異親和力的生物分子固定化后作為固定相,則具有目的產(chǎn)物的混合物(流動(dòng)相)流經(jīng)此固定相后,可把目的產(chǎn)物從混合物中分離出來,這種分離技術(shù)稱為親和層析。。32.疏水層析:是運(yùn)用表面偶聯(lián)弱疏水性基團(tuán)(疏水性配基)的疏水性吸附劑為固定相,根據(jù)蛋白質(zhì)與疏水性吸附劑之間的弱疏水性互相作用的差異進(jìn)行分離純化的層析技術(shù)。33.等電點(diǎn):是兩性物質(zhì)在其質(zhì)點(diǎn)的凈電荷為零時(shí)介質(zhì)的pH值,溶質(zhì)凈電荷為零,分子間排斥電位減少,吸引力增大,能互相匯集起來,沉淀析出,此時(shí)溶質(zhì)的溶解度最低。34.分子印跡:分子印跡技術(shù)是指制備對(duì)某一特定的目的分子(模板分子、印跡分子或烙印分子)具特異選擇性的聚合物技術(shù)。35.電泳:electrophoresis,EP帶電顆粒在電場作用下,向著與其電性相反的電極移動(dòng),稱為電泳()。運(yùn)用帶電粒子在電場中移動(dòng)速度不一樣而到達(dá)分離的技術(shù)稱為電泳技術(shù)。36.等電聚焦電泳:是將兩性電解質(zhì)加入盛有pH梯度緩沖液的電泳槽中,當(dāng)其處在低于其自身等電點(diǎn)的環(huán)境中則帶正電荷,向負(fù)極移動(dòng);若其處在高于其自身等電點(diǎn)的環(huán)境中,則帶負(fù)電向正極移動(dòng)。當(dāng)泳動(dòng)到其自身特有的等電點(diǎn)時(shí),其凈電荷為零,泳動(dòng)速度下降到零,具有不一樣等電點(diǎn)的物質(zhì)最終聚焦在各自等電點(diǎn)位置,形成一種個(gè)清晰的區(qū)帶,辨別率極高。37.包涵體外源目的基因在宿主系統(tǒng)中高水平體現(xiàn)時(shí),因多種原因?qū)е禄蝮w現(xiàn)產(chǎn)物的一級(jí)構(gòu)造(即氨基酸序列)雖然對(duì)的,而其高級(jí)構(gòu)造是錯(cuò)誤的,即:沒有生物活性的包涵體。填空1、生物分離工藝規(guī)定:高純度;大規(guī)模;經(jīng)濟(jì)性;生物相容性2、雜蛋白的清除措施有:鹽析法,沉淀法,變性法,吸附法。3、常見的固液分離措施有:過濾filtration、離心Centrifugation、膜分離membraneseparation、雙水相萃取ATPS、擴(kuò)張床吸附EBA。4、細(xì)胞的機(jī)械破碎法又可分為高壓勻漿破碎法、高速珠研磨破碎法和超聲波破碎法5、雙水相萃取中常采用的雙聚合物系統(tǒng)為聚乙二醇(polyethyleneglycol,PEG)/葡聚糖(dextran,Dx,PEG/Dx),該雙水相的上相富含聚乙二醇(PEG),下相富含葡聚糖(Dx)。6、陽離子互換樹脂按照活性基團(tuán)分類,可分為(強(qiáng)酸型),(弱酸型)和(中等強(qiáng)度);其經(jīng)典的活性基團(tuán)分別有(磺酸基團(tuán)),(羧基),(磷酸基)。7、蛋白質(zhì)分離常用的色譜法有(凝膠色譜法),(多糖基離子互換色譜法),(高效液相色譜法)和(親和色譜法)。8、離子互換分離操作中,常用的洗脫措施有(pH梯度)和(離子強(qiáng)度(鹽)梯度)。9、陰離子互換樹脂按照活性基團(tuán)分類,可分為(強(qiáng)堿型),(弱堿型)和(中等強(qiáng)度);其經(jīng)典的活性基團(tuán)分別有(季氨基)、(伯、仲、叔氨)、(強(qiáng)弱基團(tuán)都具有)。10、多糖基離子互換劑包括(葡聚糖離子互換劑)和(離子互換纖維素)兩大類。11、離子互換樹脂由(載體),(活性基團(tuán))和(可互換離子)構(gòu)成。12、影響離子互換選擇性的原因有(離子化合價(jià)),(離子水化半徑),(溶液濃度),(離子強(qiáng)度),(溶液的pH值),(有機(jī)溶劑),(樹脂物理構(gòu)造)和(輔助力)。13、離心機(jī)按速度和離心力可分為:常速離心機(jī)、高速(冷凍)離心機(jī)、超速離心機(jī)等。14、工業(yè)離心設(shè)備從形式上可分為(管式),(套筒式),(碟片式)等型式。15、膜分離過程中所使用的膜,根據(jù)其膜特性(孔徑)不一樣可分為(微濾膜),(超濾膜),(納濾膜)和(反滲透膜)。16、工業(yè)上常用的超濾裝置有(板式),(管式),(螺旋卷式)和(中空纖維式)。17、影響吸附的重要原因有(吸附劑的性質(zhì)),(吸附質(zhì)的性質(zhì)),(溫度),(溶液pH值),(鹽濃度)和(吸附物濃度和吸附劑用量)。18、影響鹽析的原因有(溶質(zhì)種類),(溶質(zhì)濃度),(pH值)和(溫度)。19、反相高效液相色譜的固定相是(非極性)的,而流動(dòng)相是(極性)的;常用的固定相有(C18)和(C8);常用的流動(dòng)相有(甲醇)和(乙睛)。20、超臨界流體的特點(diǎn)是與氣體有相似的(粘度(擴(kuò)散系數(shù))),與液體有相似的(密度)。21、離子互換樹脂的合成措施有(共聚(加聚))和(均聚(縮聚))兩大類;22、等電聚焦電泳法分離不一樣蛋白質(zhì)的原理是根據(jù)其(等電點(diǎn)(pI))的不一樣;23、根據(jù)分離機(jī)理的不一樣,色譜法可分為(吸附色譜),(離子互換色譜),(凝膠色譜),(分派色譜)和(親和色譜)。24、衡量色譜峰寬度的參數(shù)三種表達(dá)措施有原則偏差(s)、半峰寬(Y1/2)、峰底寬(Wb)。25、高效液相色譜儀的種類諸多,不過無論何種高效液相色譜儀,基本上由高壓輸液系統(tǒng)、進(jìn)樣系統(tǒng)、分離系統(tǒng)、檢測系統(tǒng)、記錄系統(tǒng)或色譜工作站等五大部構(gòu)成。26、氣相色譜的選擇條件有固定相的選擇、載氣流速的選擇、柱溫的選擇、進(jìn)樣量與進(jìn)樣時(shí)間的影響、色譜柱形、柱內(nèi)徑及柱長的選擇27.氣相色譜柱重要有填充柱和毛細(xì)管柱28、經(jīng)典的工業(yè)過濾設(shè)備有(板框壓濾機(jī))和(真空轉(zhuǎn)鼓過濾機(jī))。29、常用離心設(shè)備可分為(離心沉降)和(離心過濾)兩大類;30、根據(jù)物化理論,萃取到達(dá)平衡時(shí),溶質(zhì)在萃取相和萃余相中的(濃度的比值)一定;31、根據(jù)吸附劑與吸附質(zhì)之間存在的吸附力性質(zhì)的不一樣,可將吸附分為(物理)、(化學(xué))、(極性)和(互換)吸附;32、離子互換操作一般分為(動(dòng)態(tài))和(靜態(tài))兩種;33、蛋白質(zhì)等生物大分子,在溶液中呈穩(wěn)定的分散狀態(tài),其原因是由于(分子表面電荷)和(水化層);34、鹽析用鹽的選擇需考慮(鹽析作用強(qiáng))、(溶解度大)、(生物學(xué)惰性)和(來源豐富、經(jīng)濟(jì))等幾種方面的原因;35、影響有機(jī)溶劑沉淀的原因有(溫度)、(pH)、(樣品濃度)、(中性鹽濃度)和(金屬離子)。36.鹽析的影響原因有鹽離子濃度、生物分子種類、生物分子濃度、pH值、溫度。37.影響有機(jī)溶劑沉析的原因溫度、生物樣品的濃度、pH、離子強(qiáng)度、金屬離子。38.等電點(diǎn)沉析注意事項(xiàng)有等電點(diǎn)的變化、目的物的穩(wěn)定性、鹽溶作用、pH的調(diào)整。39、液-液萃取從機(jī)理上分析可分為(物理萃取)和(化學(xué)萃?。﹥深?;40、大孔網(wǎng)狀吸附劑有(非極性)、(中等極性)和(極性)三種重要類型;41、影響離子互換速度的原因有(樹脂粒度)、(交聯(lián)度)、(溶液流速)、(溫度)、(離子的大小)、(離子的化合價(jià))和(離子濃度)。42、分派色譜的基本構(gòu)成要素有(載體)、(固定相)和(流動(dòng)相)。43、分子篩色譜也稱(凝膠色譜)的重要應(yīng)用是(脫鹽)和(分級(jí)分離)44、根據(jù)膜構(gòu)造的不一樣,常用的膜可分為(對(duì)稱性膜)、(非對(duì)稱膜)和(復(fù)合膜)三類;45、當(dāng)超聲波在介質(zhì)中傳播時(shí)包括:機(jī)械效應(yīng)、空化作用、熱效應(yīng)和化學(xué)效應(yīng)4種效應(yīng):46、微波的基本性質(zhì)一般展現(xiàn)為穿透、反射、吸取三個(gè)特性47、按分離原理不一樣,電泳可分為區(qū)帶電泳、自由界面電泳、等速電泳、等電聚焦電泳。48、根據(jù)分離時(shí)一次進(jìn)樣量的多少,色譜分離的規(guī)??煞譃榉治鲆?guī)模、半制備、制備規(guī)模和工業(yè)生產(chǎn)規(guī)模。49、吸附法的關(guān)鍵是選擇吸附劑和展開劑50、影響電泳分離的重要原因有1、大分子的性質(zhì)2、電場強(qiáng)度3、溶液的pH4、溶液的離子強(qiáng)度5、電滲6、溫度7、支持物的影響選擇題:1.HPLC是哪種色譜的簡稱(C)。A.離子互換色譜B.氣相色譜C.高效液相色譜D.凝膠色譜2.針對(duì)配基的生物學(xué)特異性的蛋白質(zhì)分離措施是(C)。A.凝膠過濾B.離子互換層析C.親和層析D.紙層析3.鹽析法沉淀蛋白質(zhì)的原理是(B)A.減少蛋白質(zhì)溶液的介電常數(shù)B.中和電荷,破壞水膜C.與蛋白質(zhì)結(jié)合成不溶性蛋白D.調(diào)整蛋白質(zhì)溶液pH到等電點(diǎn)4.從組織中提取酶時(shí),最理想的成果是(C)A.蛋白產(chǎn)量最高B.酶活力單位數(shù)值很大C.比活力最高D.Km最小5.適合于親脂性物質(zhì)的分離的吸附劑是(B)。A.活性炭B.氧化鋁C.硅膠D.磷酸鈣6.下列哪項(xiàng)酶的特性對(duì)運(yùn)用酶作為親和層析固定相的分析工具是必需的?(B)A.該酶的活力高B.對(duì)底物有高度特異親合性C.酶能被克制劑克制D.酶具有多種亞基7.用于蛋白質(zhì)分離過程中的脫鹽和更換緩沖液的色譜是(C)A.離子互換色譜B.親和色譜C.凝膠過濾色譜D.反相色譜8.適合小量細(xì)胞破碎的措施是(B)A高壓勻漿法B.超聲破碎法C.高速珠磨法D.高壓擠壓法9.鹽析法沉淀蛋白質(zhì)的原理是(B)A.減少蛋白質(zhì)溶液的介電常數(shù)B.中和電荷,破壞水膜C.與蛋白質(zhì)結(jié)合成不溶性蛋白D.調(diào)整蛋白質(zhì)溶液pH到等電點(diǎn)10.蛋白質(zhì)分子量的測定可采用(C)措施。A.離子互換層析B.親和層析C.凝膠層析D.聚酰胺層析11.基因工程藥物分離純化過程中,細(xì)胞搜集常采用的措施(C)A.鹽析B.超聲波C.膜過濾D.層析12.離子互換劑不合用于提?。―)物質(zhì)。A.抗生素B.氨基酸C.有機(jī)酸D.蛋白質(zhì)13.人血清清蛋白的等電點(diǎn)為4.64,在PH為7的溶液中將血清蛋白質(zhì)溶液通電,清蛋白質(zhì)分子向(A)A:正極移動(dòng);B:負(fù)極移動(dòng);C:不移動(dòng);D:不確定。14.蛋白質(zhì)具有兩性性質(zhì)重要原因是(B)A:蛋白質(zhì)分子有一種羧基和一種氨基;B:蛋白質(zhì)分子有多種羧基和氨基;C:蛋白質(zhì)分子有苯環(huán)和羥基;D:以上都對(duì)15.使蛋白質(zhì)鹽析可加入試劑(D)A:氯化鈉;B:硫酸;C:硝酸汞;D:硫酸銨16.凝膠色譜分離的根據(jù)是(B)。A、固定相對(duì)各物質(zhì)的吸附力不一樣B、各物質(zhì)分子大小不一樣C、各物質(zhì)在流動(dòng)相和固定相中的分派系數(shù)不一樣D、各物質(zhì)與專一分子的親和力不一樣17.非對(duì)稱膜的支撐層(C)。A、與分離層材料不一樣B、影響膜的分離性能C、只起支撐作用D、與分離層孔徑相似18.下列哪一項(xiàng)是強(qiáng)酸性陽離子互換樹脂的活性互換基團(tuán)(A)A磺酸基團(tuán)(-SO3H)B羧基-COOHC酚羥基C6H5OHD氧乙酸基-OCH2COOH19.依離子價(jià)或水化半徑不一樣,離子互換樹脂對(duì)不一樣離子親和能力不一樣。樹脂對(duì)下列離子親和力排列次序?qū)Φ牡挠校ˋ)。A、Fe3+﹥Ca2+﹥Na+B、Na+﹥Ca2+﹥Fe3+C、Na+﹥Rb+﹥Cs+D、Rb+﹥Cs+﹥Na+20.假如要將復(fù)雜原料中分子量不小于5000的物質(zhì)與5000分子量如下的物質(zhì)分開選用(D)。A、SephadexG-200B、SephadexG-150C、SephadexG-100D、SephadexG-5021.在蛋白質(zhì)初步提取的過程中,不能使用的措施(C)。A、雙水相萃取B、超臨界流體萃取C、有機(jī)溶劑萃取D、反膠團(tuán)萃取22.離子互換法是應(yīng)用離子互換劑作為吸附劑,通過(A)將溶液中帶相反電荷的物質(zhì)吸附在離子互換劑上。A、靜電作用B、疏水作用C、氫鍵作用D、范德華力23.絲狀(團(tuán)狀)真菌適合采用(A)破碎。A、珠磨法B、高壓勻漿法C、A與B聯(lián)合D、A與B均不行24.用來提取產(chǎn)物的溶劑稱(C)。A、料液B、萃取液C、萃取劑D、萃余液。25.陰離子互換劑(C)。A、可互換的為陰、陽離子B、可互換的為蛋白質(zhì)C、可互換的為陰離子D、可互換的為陽離子26.分派層析中的載體(C)。A、對(duì)分離有影響B(tài)、是固定相C、能吸附溶劑構(gòu)成固定相D、是流動(dòng)相27.凝膠色譜分離的根據(jù)是(B)。A、固定相對(duì)各物質(zhì)的吸附力不一樣B、各物質(zhì)分子大小不一樣C、各物質(zhì)在流動(dòng)相和固定相中的分派系數(shù)不一樣D、各物質(zhì)與專一分子的親和力不一樣28.洗脫體積是(C)。A、凝膠顆粒之間空隙的總體積B、溶質(zhì)進(jìn)入凝膠內(nèi)部的體積C、與該溶質(zhì)保留時(shí)間相對(duì)應(yīng)的流動(dòng)相體積D、溶質(zhì)從柱中流出時(shí)所用的流動(dòng)相體積29.工業(yè)上強(qiáng)酸型和強(qiáng)堿型離子互換樹脂在使用時(shí)為了減少酸堿用量且防止設(shè)備腐蝕,一般先將其轉(zhuǎn)變?yōu)椋˙)。A、鈉型和磺酸型B、鈉型和氯型C、銨型和磺酸型D、銨型和氯型30.吸附色譜分離的根據(jù)是(A)。A、固定相對(duì)各物質(zhì)的吸附力不一樣B、各物質(zhì)分子大小不一樣C、各物質(zhì)在流動(dòng)相和固定相的分派系數(shù)不一樣D、各物質(zhì)與專一分子的親和力不一樣31.下面哪一種是根據(jù)酶分子專一性結(jié)合的純化措施(A)。A.親和層析B.凝膠層析C.離子互換層析D.鹽析32.純化酶時(shí),酶純度的重要指標(biāo)是:(D)A.蛋白質(zhì)濃度

B.酶量C.酶的總活力

D.酶的比活力33.鹽析法純化酶類是根據(jù)(B)進(jìn)行純化。A.根據(jù)酶分子電荷性質(zhì)的純化措施B.調(diào)整酶溶解度的措施C.根據(jù)酶分子大小、形狀不一樣的純化措施D.根據(jù)酶分子專一性結(jié)合的純化措施34.分子篩層析純化酶是根據(jù)(C)進(jìn)行純化。A.根據(jù)酶分子電荷性質(zhì)的純化措施B.調(diào)整酶溶解度的措施C.根據(jù)酶分子大小、形狀不一樣的純化措施D.根據(jù)酶分子專一性結(jié)合的純化措施35.顆粒與流體的密度差越小,顆粒的沉降速度(A)A.越小B.越大C.不變D.無法確定36.工業(yè)上常用的過濾介質(zhì)不包括(D)A.織物介質(zhì)B.堆積介質(zhì)C.多孔固體介質(zhì)D.真空介質(zhì)37.下列物質(zhì)屬于絮凝劑的有(A)。A、明礬B、石灰C、聚丙烯類D、硫酸亞鐵38.下列哪項(xiàng)不是蛋白質(zhì)的濃度測定的措施(D)。A、凱氏定氮法B.雙縮脲法C.福林-酚法D.核磁共振39.供生產(chǎn)生物藥物的生物資源不包括(D)A.動(dòng)物B植物C.微生物D.礦物質(zhì)40.發(fā)酵液的預(yù)處理措施不包括(C)A.加熱B絮凝C.離心D.調(diào)pH41.其他條件均相似時(shí),優(yōu)先選用那種固液分離手段(B)A.離心分離B過濾C.沉降D.超濾42.那種細(xì)胞破碎措施合用工業(yè)生產(chǎn)(A)A.高壓勻漿B超聲波破碎C.滲透壓沖擊法D.酶解法43.高壓勻漿法破碎細(xì)胞,不合用于(D)A.酵母菌B大腸桿菌C.巨大芽孢桿菌D.青霉44.有關(guān)萃取下列說法對(duì)的的是(C)A.酸性物質(zhì)在酸性條件下萃取B堿性物質(zhì)在堿性條件下萃取C.兩性電解質(zhì)在等電點(diǎn)時(shí)進(jìn)行提取D.兩性電解質(zhì)偏離等電點(diǎn)時(shí)進(jìn)行提取45.液一液萃取時(shí)常發(fā)生乳化作用,怎樣防止(D)A.劇烈攪拌B低溫C.靜止D.加熱46.在葡聚糖與聚乙二醇形成的雙水相體系中,目的蛋白質(zhì)存在于(A)A.上相B下相C.葡聚糖相D.以上均有也許47.當(dāng)兩種高聚物水溶液互相混合時(shí),兩者之間的互相作用不也許產(chǎn)生(D)A.互不相溶,形成兩個(gè)水相B兩種高聚物都分派于一相,另一相幾乎所有為溶劑水C.完全互溶,形成均相的高聚物水溶液D.形成沉淀48.超臨界流體萃取中,怎樣減少溶質(zhì)的溶解度到達(dá)分離的目的(C)A.降溫B升高壓力C.升溫D.加入夾帶劑49.鹽析操作中,硫酸銨在什么樣的狀況下不能使用(B)A.酸性條件B堿性條件C.中性條件D.和溶液酸堿度無關(guān)50.有機(jī)溶劑為何可以沉淀蛋白質(zhì)(B)A.介電常數(shù)大B介電常數(shù)小C.中和電荷D.與蛋白質(zhì)互相反應(yīng)51.蛋白質(zhì)溶液進(jìn)行有機(jī)溶劑沉淀,蛋白質(zhì)的濃度在(A)范圍內(nèi)適合。A.0.5%-2%B1%-3%C.2%-4%D.3%-5%52.若兩性物質(zhì)結(jié)合了較多陽離子,則等電點(diǎn)pH會(huì)(A)A.升高B減少C.不變D.以上均有也許53.若兩性物質(zhì)結(jié)合了較多陰離子,則等電點(diǎn)pH會(huì)(B)A.升高B減少C.不變D.以上均有也許54.生物活性物質(zhì)與金屬離子形成難溶性的復(fù)合物沉析,然后合用(C)清除金屬離子。A.SDSBCTABC.EDTAD.CPC55.那一種膜孔徑最小(C)A.微濾B超濾C.反滲透D.納米過濾56.超濾技術(shù)常被用作(C)A.小分子物質(zhì)的脫鹽和濃縮B小分子物質(zhì)的分級(jí)分離C.小分子物質(zhì)的純化D.固液分離57.微孔膜過濾不能用來(D)A.酶活力測定BmRNA的測定及純化C.蛋白質(zhì)含量測定D.分離離子與小分子58.吸附劑和吸附質(zhì)之間作用力是通過(A)產(chǎn)生的吸附稱為物理吸附。A.范德華力B庫倫力C.靜電引力D.互相結(jié)合59.羧酸型離子互換樹脂必須在(C)的溶液中才有互換能力A.pH>5BpH﹤7C.pH>7D.pH﹤560.分子篩層析指的是(C)A.吸附層析B分派層析C.凝膠過濾D.親和層析61.常用的紫外線波長有兩種(B)A.256nm和365nmB254nm和365nmC.254nm和367nmD.256nm和367nm62.進(jìn)行梯度洗脫,若用50g吸附劑,一般每份洗脫液量常為(B)A.20mLB50mLC.90mLD.100mL63.離子互換用的層析柱直徑和柱長比一般為(B)之間A.1/10-1/20B1/10-1/50C.1/10-1/30D.1/20-1/5064.離子互換層析的上樣時(shí),上樣量一般為柱床體積的(C)為宜。A.2%-5%B1%-2%C.1%-5%D.3%-7%65.通過變化pH值從而使與離子互換劑結(jié)合的各個(gè)組分被洗脫下來,可使用(A)A.陽離子互換劑一般是pH值從低到高洗脫B陽離子互換劑一般是pH值從高到低洗脫C.陰離子互換劑一般是pH值從低到高D.以上都不對(duì)66.那一種凝膠的孔徑最?。ˋ)A.SephadexG-25BSephadexG-50C.SephadexG-100D.SephadexG-20067.那一種凝膠的吸水量最大(D)A.SephadexG-25BSephadexG-50C.SephadexG-100D.SephadexG-20068.葡聚糖凝膠可使用那種溶劑溶脹(C)A.甲醇B乙醇C.緩沖液D.乙酸乙酯69.疏水親和吸附層析一般在(D)的條件下進(jìn)行A.酸性B堿性C.中D.高濃度鹽溶液70.當(dāng)硅膠吸水量在(B)以上時(shí),就失去其吸附作用A.13%B17%C.10%D.15%71.氣相色譜的載氣不能用(C)A.氫氣B氦氣C.氧氣D.氮?dú)?2.有關(guān)電泳分離中遷移率描述對(duì)的的是(A)A.帶電分子所帶凈電荷成正比B分子的大小成正比C.緩沖液的黏度成正比D.以上都不對(duì)73.珠磨機(jī)破碎細(xì)胞,合用于(D)A.酵母菌B大腸桿菌C.巨大芽孢桿菌D.青霉74.為加緊過濾效果一般使用(C)A.電解質(zhì)B高分子聚合物C.惰性助濾劑D.活性助濾劑75.不能用于固液分離的手段為(C)A.離心B過濾C.超濾D.雙水相萃取76.下列哪個(gè)不屬于高度純化:(B)A.層析B.吸附法C.親和層析D.凝膠層析77.物理萃取即溶質(zhì)根據(jù)(B)的原理進(jìn)行分離的A.吸附B.相似相溶C分子篩D親和78.納米過濾的濾膜孔徑(D)A0.02~10μmB0.001~0.02μmC<2nmD<1nm79.人血清清蛋白的等電點(diǎn)為4.64,在PH為7的溶液中將血清蛋白質(zhì)溶液通電,清蛋白質(zhì)分子向(A)A:正極移動(dòng);B:負(fù)極移動(dòng);C:不移動(dòng);D:不確定。80.單寧沉析法制備菠蘿蛋白酶試驗(yàn)中,加入1%的單寧于鮮菠蘿汁中產(chǎn)生沉淀,屬于(D)沉析原理。A鹽析B有機(jī)溶劑沉析C等電點(diǎn)沉析D有機(jī)酸沉析81.合用于分離糖、苷等的SephadexG的分離原理是(C)A、吸附B、分派比C、分子大小D、離子互換E、水溶性大小82.下列哪項(xiàng)不屬于發(fā)酵液的預(yù)處理:(D)A.加熱

B.調(diào)pHC.絮凝和凝聚D.層析83.下列哪個(gè)不屬于初步純化:(C)A.沉淀法B.吸附法C.離子互換層析D.萃取法84.顆粒與流體的密度差越小,顆粒的沉降速度(A)A.越小B.越大C.不變D.無法確定85.鹽析法沉淀蛋白質(zhì)的原理是(B)A.減少蛋白質(zhì)溶液的介電常數(shù)B.中和電荷,破壞水膜C.與蛋白質(zhì)結(jié)合成不溶性蛋白D.調(diào)整蛋白質(zhì)溶液pH到等電點(diǎn)86.超濾膜一般不以其孔徑大小作為指標(biāo),而以截留分子量作為指標(biāo)。所謂“分子量截留值”是指阻留率達(dá)(B)的最小被截留物質(zhì)的分子量。A80%以上B90%以上C70%以上D95%以上87.在凝膠過濾(分離范圍是)中,下列哪種蛋白質(zhì)最先被洗脫下來(B)A.細(xì)胞色素C(13370)B.肌球蛋白(400000)C.過氧化氫酶(247500)D.血清清蛋白(68500)E.肌紅蛋白(16900)88.“類似物輕易吸附類似物”的原則,一般極性吸附劑合適于從何種溶劑中吸附極性物質(zhì)(B)A.極性溶劑B.非極性溶劑C.水D.溶劑89.可以除去發(fā)酵液中鈣、鎂、鐵離子的措施是(C)A.過濾B.萃取C.離子互換D.蒸餾90.從四環(huán)素發(fā)酵液中清除鐵離子,可用(B)A.草酸酸化B.加黃血鹽C.加硫酸鋅D.氨水堿化91.當(dāng)向蛋白質(zhì)純?nèi)芤褐屑尤胫行喳}時(shí),蛋白質(zhì)溶解度(C)A、增大B、減小C、先增大,后減小D、先減小,后增大92.為了深入檢查凝膠柱的質(zhì)量,一般用一種大分子的有色物質(zhì)溶液過柱,常見的檢查物質(zhì)為藍(lán)色葡聚糖,下面不屬于它的作用的是(C)A、觀測柱床有無溝流B、觀測色帶與否平整C、測量流速D、測量層析柱的外水體積93.下列細(xì)胞破碎的措施中,哪個(gè)措施屬于非機(jī)械破碎法(A)A.化學(xué)法B.高壓勻漿C.超聲波破碎D.高速珠磨94.超濾膜截留的顆粒直徑為(B)A0.02~10μmB0.001~0.02μmC<2nmD<1nm95.超臨界流體萃取法合用于提取(B)A、極性大的成分B、極性小的成分C、離子型化合物D、能氣化的成分E、親水性成分96.分離純化初期,由于提取液中成分復(fù)雜,目的物濃度稀,因而易采用(A)A、分離量大辨別率低的措施B、分離量小辨別率低的措施C、分離量小辨別率高的措施D、多種措施都試驗(yàn)一下,根據(jù)試驗(yàn)成果確定97.蛋白質(zhì)類物質(zhì)的分離純化往往是多環(huán)節(jié)的,其前期處理手段多采用下列哪類的措施。(B)A.辨別率高B.負(fù)載量大C.操作簡便D.價(jià)廉98.反滲透膜的孔徑不不小于(C)A0.02~10μmB0.001~0.02μmC<2nmD<1nm99.親和層析的洗脫過程中,在流動(dòng)相中加入配基的洗脫措施稱作(C)A、陰性洗脫B、劇烈洗脫C、競爭洗脫D、非競爭洗脫100.將配基與可溶性的載體偶聯(lián)后形成載體-配基復(fù)合物,該復(fù)合物可選擇性地與蛋白質(zhì)結(jié)合,在一定條件下沉淀出來,此措施稱為(A)A、親和沉淀B、聚合物沉淀C、金屬離子沉淀D、鹽析沉淀101.在選用凝膠層析柱時(shí),為了提高辨別率,宜選用的層析柱是(A)A、粗且長的B、粗且短的C、細(xì)且長的D、細(xì)且短的102.下列三個(gè)化合物用硅膠吸附色譜分離,以石油醚-乙酸乙酯(95:5)洗脫,判斷三者由先到后流杰出譜柱的次序?yàn)椋–)。abcA:a→b→cB:b→a→cC:c→b→aD:c→a→b103已知某組分峰的峰底寬為20s,保留時(shí)間為600s,此色譜柱的理論塔板數(shù)為。()A:14400塊B:14000塊C:12400塊D:1200塊三、判斷題植物細(xì)胞產(chǎn)物多分泌到細(xì)胞外培養(yǎng)液,動(dòng)物細(xì)胞多為胞內(nèi)產(chǎn)物。(×)通過加入某些反應(yīng)劑是發(fā)酵液進(jìn)行預(yù)處理的措施之一。(√)極性溶劑與非極性溶劑互溶。(×)溶劑萃取中的乳化現(xiàn)象一定存在。(×)臨界壓力是液化氣體所需的壓力。(×)進(jìn)料的溫度和pH會(huì)影響膜的壽命。(√)流動(dòng)相為氣體則稱為氣相色譜。(√)生物物質(zhì)中最常用的干燥措施是減壓干燥。(√)冷凍干燥合用于高度熱敏的生物物質(zhì)。(√)溶劑的極性從小到大為丙醇>乙醇>水>乙酸。(√)蛋白質(zhì)變性,一級(jí)、二級(jí)、三級(jí)構(gòu)造都被破壞。(×)離子互換劑是一種不溶于酸、堿及有機(jī)溶劑的固態(tài)學(xué)分子化合物。(√)當(dāng)某一蛋白質(zhì)分子的酸性氨基酸殘基數(shù)目等于其堿性氨基酸殘基數(shù)目時(shí),此蛋白質(zhì)的等電點(diǎn)為7.0。(√)高壓勻漿法可破碎高度分枝的微生物。(×)超聲波破碎法的有效能量運(yùn)用率極低,操作過程產(chǎn)生大量的熱,因此操作需在冰水或有外部冷卻的容器中進(jìn)行。(√)蛋白質(zhì)為兩性電解質(zhì),變化pH可變化其荷電性質(zhì),pH﹥pI蛋白質(zhì)帶正電。(×)蛋白質(zhì)為兩性電解質(zhì),變化pH可變化其荷電性質(zhì),pH﹥pI蛋白質(zhì)帶負(fù)電。(√)離心是基于固體顆粒和周圍液體密度存在差異而實(shí)現(xiàn)分離的。(√).不一樣高分子化合物的溶液互相混合可形成兩相或多相系統(tǒng),如葡聚糖與聚乙二醇(PEG)按一定比例與水混合后,溶液先呈渾濁狀態(tài),待靜置平衡后,逐漸提成互不相溶的兩相,上相富含PEG,下相富含葡聚糖。(√)超臨界流體溫度不變條件下,溶解度隨密度(或壓力)的增長而增長,而在壓力不變時(shí),溫度增長狀況下,溶解度有也許增長或下降。(√)鹽析是運(yùn)用不一樣物質(zhì)在高濃度的鹽溶液中溶解度的差異,向溶液中加入一定量的中性鹽,使原溶解的物質(zhì)沉淀析出的分離技術(shù)。(√)在低鹽濃度時(shí),鹽離子能增長生物分子表面電荷,使生物分子水合作用增強(qiáng),具有增進(jìn)溶解的作用。(√)向具有生化物質(zhì)的水溶液中加入一定量親水性的有機(jī)溶劑,能使生化物質(zhì)沉淀析出。(√)有機(jī)溶劑與水混合要在低溫下進(jìn)行。(√)有機(jī)溶劑沉析辨別能力比鹽析高。(√)若兩性物質(zhì)結(jié)合了較多陽離子,則等電點(diǎn)pH減少。(×)等電點(diǎn)沉淀在實(shí)際操作中應(yīng)防止溶液pH上升至5以上。(√)納米過濾膜孔徑最小。(×)分離純化極性大的分子(帶電離子等)采用反相色譜(或正相柱),(×)吸附力較弱的組分,有較低的Rf值。(×)凝膠柱層析可進(jìn)行生物大分子分子量的測定。(√)在高濃度鹽溶液中疏水性互相作用減小。(×)色譜分離技術(shù)中固定相都是固體。(×)色譜分離技術(shù)中被檢測物質(zhì)的峰越寬越好。(×)制備型HPLC對(duì)儀器的規(guī)定不像分析型HPLC那樣苛刻。(√)在聚丙烯酰胺凝膠中加入陰離子去污劑十二烷基硫酸鈉(SDS),影響凝膠的形成。(×)等電聚焦電泳會(huì)形成的一種由陽極到陰極逐漸遞減的pH梯度。(×)等密度梯度離心中,梯度液的密度要包括所有被分離物質(zhì)的密度。(√)可以用紙色譜的措施來選擇、設(shè)計(jì)液-液萃取分離物質(zhì)的最佳方案。(√)SephadexLH-20的分離原理重要是分子篩和正相分派色譜。(√)等密度梯度離心適于分離大小相似密度不一樣的物質(zhì)。(√)當(dāng)氣體的溫度超過其臨界溫度,壓力超過臨界壓力之后,物質(zhì)的匯集狀態(tài)就介于氣態(tài)和液態(tài)之間,成為超臨界流體。(√)鹽析反應(yīng)完全需要一定期間,一般硫酸銨所有加完后,應(yīng)放置30min以上才可進(jìn)行固-液分離。(√)層析點(diǎn)樣時(shí)用一根毛細(xì)管,吸取樣品溶液,在距薄層一端1.5-2cm的起始線上點(diǎn)樣,樣品點(diǎn)直徑不不小于5mm。(√)水提醇沉法時(shí)根據(jù)物質(zhì)溶解度差異進(jìn)行分離的措施。(√)采用溶劑提取法提取中草藥有效成分時(shí),選擇溶劑的原則是“相似相溶原則”。(√)凝聚與絮凝作用的原理是相似的,只是沉淀的狀態(tài)不一樣。(×)凍結(jié)-融化法凍結(jié)的作用是破壞細(xì)胞膜的疏水鍵構(gòu)造,增長其親水性和通透性來破壞細(xì)胞的。(√)由于pH值也許對(duì)蛋白的穩(wěn)定性有較大的影響,故一般一般采用變化離子強(qiáng)度的梯度洗脫(√)鹽析作用也能減少有機(jī)溶劑在水中的溶解度,使提取液中的水分含量減少??梢源偈股镔|(zhì)轉(zhuǎn)入有機(jī)相從而提高萃取率。(√)凝膠層析會(huì)使得大分子物質(zhì)后流出,小分子物質(zhì)先流出。(×)有機(jī)溶劑(如胍、乙醇、尿素和異丙醇等)可以減弱疏水分子間的互相作用??梢杂糜谌魏我?guī)模的細(xì)胞破碎。(√)細(xì)胞破碎技術(shù)是生物分離操作中必需的環(huán)節(jié)。(×)離心操作時(shí),對(duì)稱放置的離心管要到達(dá)體積相似才能進(jìn)行離心操作。(×)分派系數(shù)K與溶質(zhì)的濃度和相體積比無關(guān),它重要取決于相系統(tǒng)的性質(zhì)、被萃取物質(zhì)的表面性質(zhì)和溫度。(√)氨基酸、蛋白質(zhì)、多肽、酶、核酸等兩性物質(zhì)可用等電點(diǎn)沉析。(√)同步具有酸、堿兩種基團(tuán)的樹脂叫兩性樹脂(√)鹽析一般可在室溫下進(jìn)行,當(dāng)處理對(duì)溫度敏感的蛋白質(zhì)或酶時(shí),鹽析操作要在低溫下(如0℃-4℃)進(jìn)行。(√)蛋白質(zhì)類的生物大分子在鹽析過程中,最佳在高溫下進(jìn)行,由于溫度高會(huì)增長其溶解度。(×)五、簡答1.溶劑萃取過程的機(jī)理是什么?答:1)、簡樸分子萃?。汉啒愕奈锢矸峙蛇^程,被萃取組分以一種簡樸分子的形式在兩相間屋里分派。以中型分子存在,不發(fā)生化學(xué)反應(yīng)。2)、中型溶劑絡(luò)合萃?。罕惠腿∥锸侵行头肿?,萃取劑也是中型分子,萃取劑與被萃取物結(jié)合成為絡(luò)合物進(jìn)入有機(jī)相。3)、酸性陽離子互換萃?。狠腿槿跛嵝杂袡C(jī)酸或酸性鰲合劑。金屬離子在水相中以陽離子或能解離為陽離子的絡(luò)離子的形式存在,金屬離子與萃取劑反應(yīng)生成中性鰲合物。4)、離子絡(luò)合萃?。孩俳饘匐x子在水相中形成絡(luò)合陰離子,萃取劑與氫離子結(jié)合形成陽離子,兩者構(gòu)成離子締合體系進(jìn)入有機(jī)相;②金屬陽離子與中性鰲合劑結(jié)合成鰲合陽離子,再與水相中的陰離子構(gòu)成離子締合體系而進(jìn)入有機(jī)相。2.試述凝膠色譜的原理?答:將混合原料加在柱上并用流動(dòng)相洗脫,則無法進(jìn)入孔隙內(nèi)部的大分子直接被洗脫下來,小分子由于可以進(jìn)入孔隙內(nèi)部而受到很大的阻滯,最晚被洗脫下來,而中等大小的分子,雖然可以進(jìn)入孔隙內(nèi)部但并不深入,受到的阻滯作用不強(qiáng),因而在兩者之間被洗脫下來。3.在色譜操作過程中為何要進(jìn)行平衡?答:1)、流速平衡:流速是柱層析操作當(dāng)中的重要影響原因,流速的快慢直接影響著分離的效果,流速過快,混合物得不到完全的分離,流速過慢,整體分離的時(shí)間要延長,因此在分離前首先要確定留宿。2)、液體環(huán)境:為了保持被分離物質(zhì)運(yùn)動(dòng)的均一性,以及好的吸附和解析效果,因此要保持孔隙內(nèi)部和外部液體環(huán)境的一致,因此進(jìn)行液體環(huán)境的平衡。4.在離子互換色譜操作中,怎樣選擇離子互換樹脂?答:1)、對(duì)陰陽離子互換樹脂的選擇:正電荷選擇陽離子互換樹脂,負(fù)電荷選擇陰離子互換樹脂。2)、對(duì)離子互換樹脂強(qiáng)弱的選擇:較強(qiáng)的酸性或堿性,選擇選用弱酸性或弱堿性樹脂。3)、對(duì)離子互換樹脂離子型的選擇:根據(jù)分離的目的,弱酸或弱堿性樹脂不使用H或OH型。5.簡述鹽析的原理及產(chǎn)生的現(xiàn)象?答:當(dāng)中性鹽加入蛋白質(zhì)分散體系時(shí)也許出現(xiàn)如下兩種狀況:(1)“鹽溶”現(xiàn)象—低鹽濃度下,蛋白質(zhì)溶解度增大(2)“鹽析”現(xiàn)象—高鹽濃度下,蛋白質(zhì)溶解度隨之下降,原因如下:(a)無機(jī)離子與蛋白質(zhì)表面電荷中和,形成離子對(duì),部分中和了蛋白質(zhì)的電性,使蛋白質(zhì)分子之間的排斥力減弱,從而可以互相靠攏;(b)中性鹽的親水性大,使蛋白質(zhì)脫去水化膜,疏水區(qū)暴露,由于疏水區(qū)的互相作用導(dǎo)致沉淀;6.簡述吸附色譜分離技術(shù)的原理?簡述硅膠、氧化鋁、聚酰胺、活性炭這四種吸附劑的重要用途和特點(diǎn)?答:運(yùn)用混合物中各成分在兩相中吸附力(范德華力,包括色散力、誘導(dǎo)力、定向力以及氫鍵)的差異而實(shí)現(xiàn)分離.硅膠可分離各類成分。氧化鋁分離堿性或親脂性成分?;钚蕴糠蛛x水溶性成分。聚酰胺是氫鍵吸附,適合分離黃酮成分。7.在運(yùn)用離子互換技術(shù)提取蛋白質(zhì)時(shí),為何要使用多糖基離子互換劑?答:由于離子互換樹脂孔徑小,大分子蛋白質(zhì)難以進(jìn)入。同步,樹脂內(nèi)部重要為疏水性,對(duì)親水性的蛋白質(zhì)會(huì)產(chǎn)生影響。而多糖基離子互換劑沒有上述問題。8.辨別滲透與反滲透?答:滲透是由于存在化學(xué)勢存在梯度而引起的自發(fā)擴(kuò)散現(xiàn)象。因此,一般狀況下,其成果是水從純水一側(cè)透過半透膜向溶液側(cè)滲透,使后者的液位抬高。假如在溶液一側(cè)施加壓力,外界力做功使溶液中水的化學(xué)勢升高,則純水通過膜的滲透就會(huì)逐漸減小,并最終停止,此時(shí)的壓力差就是溶液的滲透壓。當(dāng)時(shí),水將從溶液一側(cè)向純水一側(cè)移動(dòng),此種滲透稱之為反滲透。9.何謂等電點(diǎn)沉析法?答:蛋白質(zhì)在等電點(diǎn)下的溶解度最低,根據(jù)這一性質(zhì),再溶液中加入一定比例的有機(jī)溶劑,破壞蛋白質(zhì)表面的水化層和雙電層,減少分子間斥力,加強(qiáng)了蛋白質(zhì)分子間的疏水互相作用,使得蛋白質(zhì)分子得以匯集成團(tuán)沉淀下來。10.何謂超臨界流體萃取,并簡述其分離原理?答:超臨界流體萃取是運(yùn)用超臨界流體具有的類似氣體的擴(kuò)散系數(shù),以及類似液體的密度(溶解能力強(qiáng))的特點(diǎn),運(yùn)用超臨界流體為萃取劑進(jìn)行的萃取單元操作。其特點(diǎn)是安全、無毒、產(chǎn)品分離簡樸,但設(shè)備投資較大。11.簡述凝膠色譜的分離原理?答:凝膠排阻色譜的分離介質(zhì)(填料)具有均勻的網(wǎng)格構(gòu)造,其分離原理是具有不一樣分子量的溶質(zhì)分子,在流經(jīng)柱床是,由于大分子難以進(jìn)入凝膠內(nèi)部,而從凝膠顆粒之間流出,保留時(shí)間短;而小分子溶質(zhì)可以進(jìn)入凝膠內(nèi)部,由于凝膠多孔構(gòu)造的阻滯作用,流經(jīng)體積變大,保留時(shí)間延長。這樣,分子量不一樣的溶質(zhì)分子得以分離。12.膜分離過程中,有那些原因會(huì)導(dǎo)致膜污染,怎樣處理?答:(1)膜污染重要有兩種狀況:一是附著層被濾餅、有機(jī)物凝膠、無機(jī)物水垢膠體物質(zhì)或微生物等吸附于表面;另一種是料液中溶質(zhì)結(jié)晶或沉淀導(dǎo)致堵塞。(3分)(2)膜污染是可以防止或減輕的,措施包括料液預(yù)處理、膜性質(zhì)的改善、操作條件變化等方式。(2分)(3)膜污染所引起的通量衰減往往是不可逆的,只能通過清洗的處理方式消除,包括物理措施沖洗和化學(xué)藥物溶液清洗等。(2分)13.超臨界萃取的原理及SC-CO2萃取的長處?答:原理:溶質(zhì)在超臨界流體中的溶解度,與其密度有關(guān),密度越大,溶解度越大。在臨界點(diǎn)附近,微小的壓力增長或溫度下降,則溶劑的密度大幅度增長,對(duì)溶質(zhì)的溶解度將大幅度增長,有助于溶質(zhì)的萃取。而在臨界點(diǎn)附近,微小的壓力下降或溫度上升,則溶劑的密度大幅度減少,對(duì)溶質(zhì)的溶解度將大幅減少,有助于溶質(zhì)的分離和溶劑的回收。長處:無毒無腐蝕性,不可燃燒,價(jià)格低廉,傳質(zhì)好萃取快,臨界溫度和臨界壓力較低適合于熱敏生物制品,可獲萃取物或萃余物14.何謂免疫親和層析,簡述親和免疫層析介質(zhì)的制備過程?答、免疫親和層析是運(yùn)用親和技術(shù)和色譜分離集成產(chǎn)生的一種高效色譜分離技術(shù),其分離原理是通過抗原-抗體之間特異性的互相作用,從而實(shí)現(xiàn)高效的分離。層析介質(zhì)的制備過程包括:抗體的制備、抗體提取、載體活化,手臂鏈的連接、抗體的連接等環(huán)節(jié)。15.何謂親和吸附,有何特點(diǎn)?答:親和吸附是吸附單元操作的一種,它是運(yùn)用親和吸附劑與目的物之間的特殊的化學(xué)作用實(shí)現(xiàn)的高效分離手段。親和吸附劑的構(gòu)成包括:惰性載體、手臂鏈、特異性親和配基。親和吸附的特點(diǎn)是高效、簡便、合用范圍廣、分離速度快、條件溫和,但載體制備難度大,通用性差,成本較高。16.簡述生物分離過程的特點(diǎn)?答:1、產(chǎn)品豐富:產(chǎn)品的多樣性導(dǎo)致分離措施的多樣性2、絕大多數(shù)生物分離措施來源于化學(xué)分離3、生物分離一般比化工分離難度大(1)成分復(fù)雜(2)懸液中的目的產(chǎn)物濃度低(3)生物活性,條件相對(duì)溫和(4)生物產(chǎn)品規(guī)定高質(zhì)量(5)獲得高純度的干燥產(chǎn)品(6)衛(wèi)生17.試比較凝聚和絮凝兩過程的異同?答:凝聚與絮凝處理過程就是將化學(xué)藥劑預(yù)先投加到懸浮液中,變化細(xì)胞、菌體和蛋白質(zhì)等膠體粒子的分散狀態(tài),破壞其穩(wěn)定性,使其匯集起來,增大體積以便固液分離。凝聚和絮凝技術(shù)常用于菌體細(xì)小并且黏度大的發(fā)酵液的預(yù)處理中。凝聚和絮凝是兩種措施,兩個(gè)概念。凝聚:指在投加的化學(xué)物質(zhì)(鋁、鐵的鹽類)作用下,膠體脫穩(wěn)并使粒子互相匯集成1mm大小塊狀凝聚體的過程。絮凝:指使用絮凝劑(天然的和合成的大分子量聚電解質(zhì))將膠體粒子交聯(lián)成網(wǎng),形成10mm大小絮凝團(tuán)的過程。其中絮凝劑重要起架橋作用。18.簡述有機(jī)溶劑沉析的原理?答:1)、概念:在具有溶質(zhì)的水溶液中加入一定量親水的有機(jī)溶劑,減少溶質(zhì)的溶解度,使其沉淀析出。2)、原理:(1)減少了溶質(zhì)的介電常數(shù),使溶質(zhì)之間的靜電引力增長,從而出現(xiàn)匯集現(xiàn)象,導(dǎo)致沉淀。(2)由于有機(jī)溶劑的水合作用,減少了自由水的濃度,減少了親水溶質(zhì)表面水化層的厚度,減少了親水性,導(dǎo)致脫水凝聚。19.膜分離技術(shù)的類型和定義?答:膜分離過程的實(shí)質(zhì)是物質(zhì)透過或被截留于膜的過程,近似于篩分過程,根據(jù)濾膜孔徑大小而到達(dá)物質(zhì)分離的目的,故而可以按分離粒子大小進(jìn)行分類:(1)微濾:以多孔細(xì)小薄膜為過濾介質(zhì),壓力為推進(jìn)力,使不溶性物質(zhì)得以分離的操作,孔徑分布范圍在0.025-14μm之間;(2)超濾:分離介質(zhì)同上,但孔徑更小,為0.001~0.02μm,分離推進(jìn)力仍為壓力差,適合于分離酶、蛋白質(zhì)等生物大分子物質(zhì);(3)反滲透:是一種以壓力差為推進(jìn)力,從溶液中分離出溶劑的膜分離操作,孔徑范圍在0.0001~0.001μm之間;(由于分離的溶劑分子往往很小,不能忽視滲透壓的作用,故而成為反滲透);(4)納濾:以壓力差為推進(jìn)力,從溶液中分離300~1000小分子量的膜分離過程,孔徑分布在平均2nm;(5)電滲析:以電位差為推進(jìn)力,運(yùn)用離子互換膜的選擇透過性,從溶液中脫除或富集電解質(zhì)的膜分離操作;20.影響液一固分離的原因?1)微生物種類的影響一般真菌的菌絲比較粗大,液一固分離輕易,含真菌菌體及絮凝蛋白質(zhì)的發(fā)酵液,可采用鼓式真空過濾或板框過濾。對(duì)于酵母菌體,離心分離的措施具有很好的效果。不過細(xì)菌或細(xì)胞碎片相稱細(xì)小,液一固分離十分困難,用一般的離心分離或過濾措施效果很差,因此應(yīng)先用預(yù)處理的多種手段來增大粒子,才能獲得澄清的濾液。2)發(fā)酵液的黏度液一固分離的速度一般與黏度成反比。影響發(fā)酵液黏度的原因諸多:(1)菌體種類和濃度不一樣,其黏度有很大差異。(2)不一樣的培養(yǎng)基組分和用量也會(huì)影響?zhàn)ざ?,如用黃豆餅粉、花生餅粉作氮源,用淀粉作碳源會(huì)使黏度增大。發(fā)酵液中未用完的培養(yǎng)基較多或發(fā)酵后期用油作消沫劑也會(huì)使過濾困難。21.影響有機(jī)溶劑萃取分離的原因?影響液一液萃取的原因重要有目的物在兩相的分派比(分派系數(shù)K)和有機(jī)溶劑的用量等。分派系數(shù)K值增大,提取效率也增大,萃取就易于進(jìn)行完全。當(dāng)K值較小時(shí),可以合適增長有機(jī)溶劑用量來提高萃取率,但有機(jī)溶劑用量增長會(huì)增長后處理的工作量,因此在實(shí)際工作中,常常采用分次加入溶劑,持續(xù)多次提取來提高萃取率。22.互換容量及其影響原因?互換容量是指離子互換劑能提供互換離子的量,它反應(yīng)離子互換劑與溶液中離子進(jìn)行互換的能力。一般所說的離子互換劑的互換容量是指離子互換劑所能提供互換離子的總量,又稱為總互換容量,它只和離子互換劑自身的性質(zhì)有關(guān)。影響互換容量的原因諸多,重要可以分為兩個(gè)方面,首先是離子互換劑顆粒大小、顆粒內(nèi)孔隙大小以及所分離的樣品組分的大小等影響。另某些影響原因如試驗(yàn)中的離子強(qiáng)度、pH值等重要影響樣品中組分和離子互換劑的帶電性質(zhì)。23.疏水柱層析分離原理?親水性蛋白質(zhì)(酶)表面均具有一定量的疏水性基團(tuán)。盡管在水溶液中蛋白質(zhì)(酶)具有將疏水性基團(tuán)折疊在分子內(nèi)部而表面顯露極性和荷電基團(tuán)的趨勢,但總會(huì)有某些疏水性基團(tuán)或極性基團(tuán)的疏水部位暴露在蛋白質(zhì)(酶)表面。這部分疏水基團(tuán)可與親水性固定相表面偶聯(lián)的短鏈烷基、苯基等弱疏水基會(huì)發(fā)生疏水性互相作用,被固定相(疏水性吸附劑)所吸附。24.生物分離的基本原理?重要是根據(jù)離心力、分子大?。êY分)、濃度差、壓力差、電荷效應(yīng)、吸附作用、靜電作用、親和作用、疏水作用、溶解度、平衡分離等原理對(duì)原料或產(chǎn)物進(jìn)行分離、純化。不一樣的分離對(duì)象需要采用不一樣的分離措施才能有效地被分離。25.離心

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