骨髓組織印片檢查在淋巴瘤骨髓浸潤(rùn)診斷中的應(yīng)用

骨髓組織印片檢查在淋巴瘤骨髓浸潤(rùn)診斷中的應(yīng)用

腫瘤是常見的血液系統(tǒng)腫瘤之一，其發(fā)病率往往隨年齡的增長(zhǎng)而增加，其預(yù)后與臨床前期密切相關(guān)。16%~75%淋巴瘤Ⅳ期患者有骨髓侵犯,臨床常用檢測(cè)骨髓侵犯方法是骨髓穿刺涂片,但此方法僅限于細(xì)胞學(xué)觀察,檢出率低,易漏診。由于骨髓侵犯與否影響著淋巴瘤的臨床分期、預(yù)后判斷和治療策略,為此,本研究比較骨髓涂片、骨髓組織切片及骨髓組織印片3種檢測(cè)方法,評(píng)價(jià)骨髓組織印片在淋巴瘤骨髓浸潤(rùn)中的診斷價(jià)值。1數(shù)據(jù)和方法1.1組織學(xué)檢查情況收集2009年9月~2011年10月同步骨髓涂片、印片和切片檢查的初診的淋巴瘤患者50例,其中男31例,女19例;年齡6~71歲,中位年齡43歲,所有患者均經(jīng)淋巴結(jié)活檢病理學(xué)檢查證實(shí)。50例患者中,霍奇金淋巴瘤(Hodgkinlymphom,HL)11例,非霍奇金淋巴瘤(nonHodgkinlymphom,NHL)39例。1.2方法1.2.1骨髓組織切片染色從髂前(后)上棘局麻后取材。骨髓涂片:抽吸骨髓液0.1mL直接涂片,干燥后作瑞-姬染色。骨髓組織切片:用骨髓活檢針取骨髓組織長(zhǎng)0.5~1cm,將骨髓組織置于玻片中央,輕輕滾動(dòng)骨髓組織,制片2~3張,干燥后作瑞-姬染色。骨髓組織印片:將骨髓組織用Bouin固定液固定1h,乙醇梯度脫水,浸透包埋,切片厚約4μm,用Giemsa染色后鏡檢。1.2.2骨髓組織印片和涂片的符合率觀察有核細(xì)胞量評(píng)估:將骨髓有核細(xì)胞分為五個(gè)等級(jí),骨髓增生極度活躍、骨髓增生明顯活躍、骨髓增生活躍、骨髓增生減低、骨髓增生極度減低。骨髓組織印片和涂片于鏡下多視野觀察,以切片有核細(xì)胞數(shù)量分級(jí)為標(biāo)準(zhǔn),比較印片和涂片的符合率。骨髓組織印片和骨髓涂片均全片觀察,并分類計(jì)數(shù)500有核細(xì)胞,計(jì)算淋巴瘤百分比。1.3統(tǒng)計(jì)處理應(yīng)用SPSS17.0統(tǒng)計(jì)軟件進(jìn)行處理,兩樣本率的比較采用χ2檢驗(yàn),以P<0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。2骨髓切片、印片與切片的檢查淋巴瘤骨髓涂片、骨髓組織切片及骨髓組織印片結(jié)果見圖1。以骨髓切片細(xì)胞量變化為標(biāo)準(zhǔn),NHL骨髓有核細(xì)胞量評(píng)估骨髓印片的符合率較高。見表1。50例淋巴瘤患者骨髓切片、印片與涂片檢查發(fā)現(xiàn),涂片與印片骨髓浸潤(rùn)同時(shí)陽(yáng)性有7例,其中有2例涂片陽(yáng)性而印片陰性,有9例印片陽(yáng)性而涂片陰性;涂片與切片同時(shí)陽(yáng)性的有8例,有1例涂片陽(yáng)性而切片陰性,有14例切片陽(yáng)性而涂片陰性;印片與切片同時(shí)陽(yáng)性的有18例,有5例切片陽(yáng)性而印片陰性。見表2。印片與切片,χ2=1.83;P>0.05;印片與涂片,χ2=5.80;P>0.05;涂片與切片,χ2=10.32;0.01<P<0.05。3骨髓涂片與骨髓組織切片的檢查比較淋巴瘤起源于淋巴結(jié)或淋巴組織,其發(fā)生大多與免疫應(yīng)答過(guò)程中淋巴細(xì)胞增殖分化產(chǎn)生的某種免疫細(xì)胞惡變有關(guān),是免疫系統(tǒng)的惡性腫瘤。淋巴結(jié)與淋巴組織遍布全身,淋巴液與血液在全身循環(huán),故淋巴瘤可發(fā)生在身體的任何部位,其中骨髓是最易受累及的部位。一旦骨髓被累及即已屬于淋巴瘤IV期,預(yù)后較差。因而,淋巴瘤骨髓浸潤(rùn)情況對(duì)判斷病情發(fā)展及擬訂治療方案具有重要意義。骨髓細(xì)胞學(xué)檢查是判斷淋巴瘤是否骨髓浸潤(rùn)的最基本和最重要的檢查方法之一,骨髓涂片在臨床上應(yīng)用較為廣泛,其優(yōu)點(diǎn)是操作簡(jiǎn)單,細(xì)胞分布均勻,對(duì)細(xì)胞形態(tài)的觀察較理想,診斷迅速,但在診斷淋巴瘤骨髓浸潤(rùn)方面有一定的局限性,當(dāng)瘤細(xì)胞比例較少時(shí)可出現(xiàn)陰性檢測(cè)結(jié)果;另外,涂片還容易受到操作時(shí)干抽和稀釋的影響,容易漏診及不能準(zhǔn)確判斷骨髓增生程度。在本研究中,判斷骨髓增生程度上骨髓涂片與骨髓組織切片相比較差異具有顯著性,骨髓涂片與骨髓組織印片相比較無(wú)顯著性差異,這可能與骨髓涂片受干抽和稀釋因素的影響而干擾對(duì)骨髓增生程度的判斷有關(guān),尤其在骨髓有異常細(xì)胞浸潤(rùn)時(shí),異常細(xì)胞之間黏附性以致于骨髓增生的病理細(xì)胞相互粘連而易發(fā)生干抽。骨髓組織切片能夠提供完整的骨髓組織,顯示出骨髓組織中各類細(xì)胞的密度,不受細(xì)胞塞實(shí)、骨纖維化及血液稀釋的影響;總體上雖細(xì)胞結(jié)構(gòu)的清晰性不如涂片,但能顯示組織結(jié)構(gòu)的一些特征,能很好地反應(yīng)骨髓有核細(xì)胞數(shù)量,在反映骨髓的增生程度方面骨髓組織切片及印片較涂片準(zhǔn)確可靠。骨髓穿刺涂片淋巴瘤細(xì)胞檢出率明顯低于骨髓組織切片及印片,骨髓組織印片與骨髓涂片比較差異有顯著性;骨髓組織切片與骨髓涂片比較差異有顯著性;骨髓組織切片與骨髓組織印片比較差異有顯著性,由此可表明骨髓涂片雖然細(xì)胞結(jié)構(gòu)的清晰,但受干抽和稀釋的影響較大,不能完全明確反映骨髓的真實(shí)情況。骨髓組織活檢是目前確診淋巴瘤是否浸潤(rùn)骨髓的金指標(biāo),骨髓組織切片能全面了解造血細(xì)胞、脂肪細(xì)胞、骨小梁和血管的破壞程度,正確判斷造血面積并保持原有的骨髓結(jié)構(gòu),較真實(shí)地反映骨髓造血狀況,還能發(fā)現(xiàn)穿刺涂片不能發(fā)現(xiàn)的肉芽腫、纖維化、基質(zhì)出血、水腫等病變,故可以彌補(bǔ)骨髓涂片的缺陷,提高檢出率。但骨髓活檢操作煩瑣,時(shí)間比較長(zhǎng),容易延誤病人的診斷及治療。骨髓組織印片雖然在顯示細(xì)胞結(jié)構(gòu)的清晰性不如涂片,較薄的區(qū)域可與涂片同步檢查做對(duì)照,可獲得較好的互補(bǔ)效果,與骨髓組織切片一起分析還可提供細(xì)胞形態(tài)的參考,故骨髓組織印片基本上能夠辨別出腫瘤細(xì)胞或異常原幼細(xì)胞的類別,可以彌補(bǔ)骨髓涂片及切片的不足之處。淋巴瘤患者在做骨髓檢查時(shí),骨髓涂片、骨髓組織切片及骨髓組織印片3種方法各有所長(zhǎng),3片聯(lián)檢更利于對(duì)疾病作出評(píng)估和診斷。良好的骨髓活檢組織印片還顯示組織結(jié)構(gòu)的一些特征,不但在評(píng)估有核細(xì)胞量上優(yōu)于骨髓涂片